MMP-7在骨关节炎中的表达

目的：检测骨关节炎（OA）患者退变关节软骨中基质金属蛋白酶－7（MMP－7）的表达，以便进一步了解骨关节炎的发病机制。方法：运用免疫组织化学抗生物蛋白－生物素－过氧化物酶复合体法，通过抗MMP－7的单克隆抗体对40例骨关节炎患者和15例正常者关节软骨标本进行染色。结果：骨关节炎软骨中的MMP－7的表达比正常者增多，其差异有极显著意义。结论：MMP－7与骨关节炎关节骨退变有关。姑骨关节炎关节骨退变的病理过程中发挥关键作用。     

骨关节炎患者关节软骨TIMP-3启动子区甲基化水平的初步研究

目的探讨关节软骨中组织金属蛋白酶抑制因子-3（TIMP～3）基因启动子区甲基化与其蛋白表达的相关性,并分析TIMP一3基因CpG岛异常甲基化与骨关节炎（OA）的关联性。方法应用甲基化特异性的聚合酶链反应（MSP）技术和免疫组织化学SP法分别检测14例健康人的正常关节软骨细胞和35例骨关节炎（OA）患者软骨细胞TIMP-3基因启动子区甲基化和蛋白表达情况。结果OA患者和健康人关节软骨中TIMP-3基因启动子区均有甲基化修饰,其阳性率分别为74.3％（26／35）和35．7％（5／14）,0A组TIMP-3基因启动子区甲基化率明显高于健康组（P〈0．05）。14例健康人中,软骨细胞TIMP-3蛋白表达阳性10例（71．4％）,而35例OA患者中,软骨细胞TIMP-3蛋白表达阳性11例（31．4％）。24例OA患者软骨细胞蛋白表达阴性的标本中．TIMP-3启动子区甲基化阳性21例（87．5％）;26例TIMP-3启动子区甲基化阳性的标本中,蛋白表达阴性21例（80．8％）,TIMP-3启动子区甲基化与蛋白表达呈显著负相关（P〈0．05）。结论启动子区CpG岛高甲基化是OA患者关节软骨细胞TIMP-3表达失活的主要机制之一,其可能参与了OA的发生和发展。     

骨性关节炎患者血清及组织中白细胞介素-10测定

目的探讨白细胞介素-10（IL-10）在骨性关节炎发病机制中的作用。方法采用ELISA法对16例膝关节骨性关节炎（OA）患者的血清、关节液、关节软骨、滑膜及5例类风湿性关节炎（RA）患者的血清、关节液进行了IL-10测定。结果OA患者关节软骨及滑膜中的IL-10含量明显高于血清及关节液,RA患者关节液中IL-10含量明显高于血清中。结论软骨及滑膜中IL-10的高表达说明其在OA的关节损伤中可能起双向调节作用。     

白细胞介素-1、基质金属蛋白酶-1在膝关节骨性关节炎发病中的作用探讨

目的探讨白细胞介素-1（IL-1）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）在膝关节骨性关节炎（OA）发病中的作用。方法提取23例OA病变轻微患者（OA第一组）、28例OA病变严重患者（OA第二组）、6例对照者（盘状半月板组）的滑膜组织及关节液，采用免疫组织化学方法检测膝关节滑膜组织中IL-1、MMP-1的阳性细胞率及通过夹心ELISA法测定膝关节滑液中IL-1、MMP-1含量。结果本组57份膝关节滑膜组织及关节滑液标本中，无论是对照组还是OA组中，均能测出IL-1、MMP-1。OA病变轻微组膝关节滑膜组织及关节滑液标本中IL-1、MMP-1含量与对照组比较无显著性差异（P〉0．05），OA病变严重组膝关节滑膜组织及关节滑液标本中IL-1、MMP-1含量显著高于病变轻微组和对照组（P〈0．05）。结论IL-1和MMP-1在骨性关节炎的发病中起重要作用。OA患者滑膜细胞高水平自分泌性分泌IL-1和MMP-1可能与其炎性发生与发展密切相关，可能是关节滑液中IL-1和MMP-1的主要来源。     

骨关节炎患者骨桥蛋白、IL-1β表达水平及意义

目的检测骨原发性关节炎（OA）患者骨桥蛋白（OPN）、IL-1β表达水平的变化及意义,并探讨其与骨关节炎的相关性。方法选取2012年1月-2014年1月确诊为原发性OA患者的软骨标本20例作为OA组,以同期因意外受伤截肢的20例正常软骨标本为对照组。采用HE染色法观察组织学变化,免疫组化法检测关节软骨中OPN、IL-1β表达水平,并采用SamplePCI图象分析系统进行半定量分析。结果正常软骨细胞外基质染色均匀,分散于软骨基质之中,细胞核着色清晰均匀,胞核、胞质清晰可辨。随着OA病变程度的加重软骨细胞基质染色不均,甚至出现纤维化,细胞数目逐渐减少。经免疫染色后,OPN、IL-1β吸光值表示OPN、IL-1β表达水平均升高（P〈0.05）。相关分析得出,OPN与IL-1β呈正相关（r=O.899,P〈0.01）。软骨病变程度分级与OPN、IL-1β呈正相关（r=0.909,0.904,P均〈0.01）。结论原发性OA患者软骨组织中OPN、IL-1β表达水平升高,且与病变程度具有密切联系,为OA治疗的靶点提供了依据。     

病损关节软骨的磁共振成像与软骨内蛋白多糖和Ⅱ型胶原纤维变化的关系研究

目的探讨MR对关节软骨各期病变的敏感成像序列以及软骨蛋白多糖（proteoglycan,PG）和Ⅱ型胶原纤维（collagen fibers,CF）改变与MR信号变化的关系。方法通过1例新鲜截肢患者和4例正常猪膝关节的T2WI、PDWI、GE、STIR、3D FS-FSPGR等序列的成像研究,选定最佳的序列用于6例猪骨性关节炎（Osteoarthritis,OA）模型膝关节扫描,以MR图像为标准切取标本染色,图像与染色图片对照以判断PG和CF改变与MR信号变化的关系。结果5种序列的组织分辨力、病变检出率以3DFS-FSPGR序列最高分别达67．9％和93．7％;PG和CF主要分布在关节软骨的深层组织。以MR图像为标准切取的各级软骨标本之间染色浓度,PG逐渐减少,CF早中期增加,晚期又出现下降。结论在5种序列中,3DFS-FSPGR是理想的关节软骨成像序列;由于软骨内的PG含量下降和CF的先升后降共同导致了MR信号在不同病变期的改变。     

基质金属蛋白酶-2和金属蛋白酶抑制剂-1在类风湿关节炎发病机制中的作用

目的观察基质金属蛋白酶(MMP)-2和金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1在类风湿关节炎(RA)滑膜组织及滑膜下组织的阳性表达,探讨其在RA发病中的作用。方法应用免疫组织化学ABC法检测65例RA组织MMP-2和TIMP-1表达情况,比较其在滑膜和滑膜下组织中的分布特点。另选取10例骨关节炎(OA)和7例半月板损伤的正常滑膜(NS)作对照。结果①MMP-2阳性表达率:RA 66%,OA 20%,NS 14%;TIMP-1阳性表达率:RA 63%,OA 30%,NS 0。②MMP-2在RA滑膜组织阳性表达率为40%,在滑膜下组织阳性表达率为61%;TIMP-1在RA滑膜组织的阳性表达率为60%,在滑膜下组织中的阳性表达率为35%。③MMP-2与TIMP-1之间,无明显的相关性表达。结论①MMP-2和TIMP-1在RA的发病机制中发挥作用;②RA滑膜的不同组织部位MMP和TIMP的表达存在差异。     

消骨痛汤对骨关节炎大鼠TGFβ1和BMP2表达观察

目的：观察中药方剂消骨痛汤对骨关节炎（OA）大鼠模型中软骨和滑膜中转化生长因子β1（TGFβ1）和骨形成蛋白2（BMP2）的表达。方法将40只Wistar大鼠随机分为4组,每组10只。正常对照组不予干预,其余3组采用膝关节腔内注射木瓜蛋白酶的方法建立骨关节炎大鼠模型,造模2周后开始给药,分别给予生理盐水（模型组）、双氯芬酸钠（西药组）和中药消骨痛汤（中药组）,灌胃8周后取软骨及滑膜标本。用免疫组化方法检测TGFβ1和BMP2在软骨和滑膜中的蛋白表达。结果模型组和西药组软骨、滑膜中TGFβ1、BMP2水平低于中药组和正常组,差异均有统计学意义（P＜0．05）。中药组和正常组TGFβ1和BMP2水平差异无统计学意义（P＞0．05）。结论消骨痛汤能上调OA大鼠软骨和滑膜中TGFβ1和BMP2的蛋白表达。     

VEGF和TIMP—1表达与乳腺癌浸润、淋巴结转移关系的探讨

目的 研究乳腺癌组织中血管内皮生长因子（VEGF）和金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP－1）的表达变化与乳腺癌生物学行为及淋巴结转移的关系。方法 应用S－P免疫组化方法检测85例乳腺癌组织VEGF、TIMP－1及细胞增值核抗原Ki－67的表达情况。结果 VEGF阳性染色率为88％，VEGF阳性表达与肿瘤浸润、淋巴结转移、TNM分期及Ki－67指数呈正相关（x^＝7．31，P＜0．05，x^＝4．59，P＜0．05，x^＝10．71，P＜0．01，x^＝7．04，P＜0．05）。TIMP－1阳性染色率为79％，TIMP－1阳性表达与肿瘤浸润、淋巴结转移及TNM分期呈负相关（x^＝12．81，P＜0．01，x^＝4．94，P＜0．05，x^＝9．9，P＜0．05）。VEGF和TIMP－1联合表达与乳腺癌浸润转移及Ki－67指数显著相关（x^＝13．09，P＜0．01，x^＝16．64，P＜0．001，x^＝8．63，P＜0．05）。结论 VEGF高表达和TIMP－1低表达在乳腺癌浸润、淋巴结转移及细胞增殖中起重要作用。     

rh-aFGF对创伤性关节炎早期大鼠软骨与滑膜中MMP1表达的影响

［摘要］目的观察实验性创伤性关节炎早期大鼠软骨和滑膜组织中基质金属蛋白酶1（MMP1）的表达,以及关节腔注射重组人酸性成纤维细胞生长因子（rh-aFGF）对其表达的影响。方法雄性SD 大鼠24只,随机分为空白组、对照组和实验组,每组8只 。对照组和实验组大鼠采用切断右侧膝关节内侧副韧带和切除部分内侧半月板的方式建立大鼠创伤性关节炎模型。实验组大鼠在造模术中及术后1周分别在手术侧关节腔注入rh aFGF 1 μg。2周后处死大鼠,采用苏木精 伊红（HE）染色观察各组大鼠关节软骨和滑膜组织结构变化,采用免疫组织化学染色法检测各组大鼠的关节软骨和滑膜内MMP1 表达。结果与空白组比较,对照组大鼠关节软骨和滑膜中的MMP1表达明显增高,而实验组大鼠关节软骨和滑膜中的MMP1表达则较对照组减少。结论rh aFGF关节腔注射可以减少创伤性关节炎早期大鼠关节软骨和滑膜组织中MMP1的表达,从而在创伤性关节炎的发生过程中对关节软骨的退变和滑膜组织的炎症发挥一定的抑制作用。     

机械加载减轻骨关节炎小鼠的病理进展

摘要：目的 探讨机械加载对骨关节炎（OA）模型小鼠早、晚期OA的治疗作用。方法 选用8周龄的C57BL/6 雌性小鼠36只，按随机数字表法分为正常对照组（Control组）、OA组和OA机械加载治疗组（OAL组），每组又分为2 周和8周亚组（n=6）。使用HE和番红O/快绿染色观察机械加载治疗对早、晚期OA小鼠软骨、滑膜和骨赘的治疗作 用。结果 与Control组相比，OA小鼠透明软骨（HC）厚度、全部关节软骨（TAC）厚度均变薄，国际骨关节炎研究学会 （OARSI）评分、滑膜评分、骨赘评分均升高（均P＜0.05）。机械加载治疗后，OAL组HC、TAC厚度均增加，OARSI评 分、滑膜评分、骨赘评分均下降（均P＜0.05）。相对数据表明，与早期OA小鼠相比，晚期小鼠的病理变化更严重，并 且机械加载对晚期OA的治疗效果更好。相关性分析表明，OA早期软骨的退化可能与滑膜炎症有关，而晚期可能与 骨赘形成有关。结论 机械加载可以改善OA小鼠的病理改变，可以作为一种新型的临床治疗手段。     

Effects of SL-1010 (sodium hyaluronate with high molecular weight) on experimental osteoarthritis induced by intra-articularly applied papain in guinea pigs]

Effects of SL-1010 on the experimental osteoarthritis (OA) produced by intra-articular injection of papain, proteolytic enzyme, in the knee joint of the guinea pigs were histologically and biochemically investigated. In addition, experimental conditions to produce OA in guinea pig knee joint were also examined, since papain-induced OA has been mainly studied in rabbits. Six weeks after intra-articular injection of papain (1%, 0.1 ml), there were inflammatory reactions of the synovial membrane, degenerative changes in chondrocytes and the matrix of the articular cartilage, a decrease in the Safranin-O staining intensity and lowering of sulfated glycosaminoglycan. Electronmicroscopic observations revealed that the amorphous layer had disappeared and large bundles of unit collagen fibers and larger collagen fibers had appeared in the cartilage matrix. In the OA model, SL-1010 reduced the inflammatory reactions of the synovial membrane, inhibited development of degenerative changes in chondrocytes and the matrix of the articular cartilage and recovered the Safranin-O staining intensity. The sulfated glycosaminoglycan contents in the cartilage was significantly increased in the SL-1010-treated group, compared with the control group. The electromicroscopically observed charges in the papain-injected knee joint of the control group were rarely detected in the SL-1010-treated group. These results suggest that SL-1010 inhibits degenerative changes in the chondrocytes and the matrix probably by reducing synovial inflammation and protection of the cartilage in the OA model of guinea pigs.     

豆腐果苷对骨关节炎大鼠软骨和滑膜组织影响

目的研究豆腐果苷对骨关节炎大鼠软骨结构和滑膜组织的影响。方法碘乙酸钠注射 SD雄性大鼠膝关节造模成功后,随机区组分组法分为三组,即假手术组、模型组、豆腐果苷 50 mg·kg.1·d.1组。豆腐果苷灌胃 21 d后,取大鼠膝关节制成组织切片, HE染色观察膝关节软骨和滑膜病理变化,并进行评分;番红固绿染色观察大鼠膝关节软骨病理变化,并进行 Mankin评分。研究起止时间为 2019年 12月至 2020年 7月。结果相对于假手术组,模型组大鼠膝关节软骨和滑膜均受到不同程度损伤,滑膜病理评分显著升高［( 6.88±0.83)分比( 0.50±0.53)分］(P<0.01)且软骨结构、软骨细胞和番红固绿染色的 Mankin评分也显著升高［分别是( 3.88±0.83)分比( 0.50±0.53)分,(1.75±0.46)分比(0,.25±0.46)分,(2.38±0.74)分比( 0.38±0.52)分］(P<0.01)。然而,连续给予豆腐果苷灌胃 21 d后,相对于模型组,大鼠的关节软骨结构和滑膜组织损伤程度均有显著改善,膝关滑膜病理评分显著降低［(3.50±0.53)分比(6.88±0.83)分］(P<0.01)且软骨结构、软骨细胞和番红固绿染色的 Mankin评分也显著降低［分别为( 1.63±0.52)分,(1.13±0.64)分,(0.88±0.64)分］(P<0.0,5)。结论豆腐果苷可减轻骨关节炎大鼠膝关节软     

Production of matrix metalloproteinases and their inhibitors in osteoarthritic patients undergoing mud bath therapy

Several studies have demonstrated that matrix metalloproteinases (MMPs) are frequently implicated in the destruction of articular cartilage in arthritis. The control of MMP activity is dependent on the local concentration of tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMPs), and the imbalance of the enzyme-to-inhibitor ratios plays an important role in the remodeling of articular tissues. Some cytokines such as interleukin (IL)-1 and tumor necrosis factor (TNF)-alpha which regulate leukocyte activities, promote MMP secretion and, as a consequence, cartilage degradation. The aim of the present study was to investigate whether a natural treatment is effective in reducing cartilage inflammation and degradation by influencing MMP and TIMP serum levels. Eighty patients with osteoarthritis (OA) were enrolled in the trial and were divided into group A (30 patients who did not undergo mud bath therapy), group B (28 patients repeating mud bath therapy more than 5 times and less than 10) and group C (22 patients repeating mud bath therapy more than 10 times). Blood samples were obtained from all the patients for assay of MMP-1, -2, -3, -8 and -9 and TIMP-1 and -2. The parameters were determined by an ELISA technique. Statistical indexes were calculated for each parameter and mean values were compared. The differences between mean values of MMP-3, -8 and -9 were statistically significant between group A and the treated groups (B and C). Analysis of variance established a significant difference (p < 0.05) between groups A and C in mean serum levels of MMP-8, MMP-9 showed a statistically significant difference (p < 0.05) in mean serum concentration between groups A and B. Regression analysis showed a very high R2 between MMP-2 and TIMP-2. One of the most interesting findings in this study was that MMP-3 serum levels were significantly lower in the treated groups, since this enzyme plays an important role in cartilage degradation, suggesting that mud bath therapy contributes to matrix integrity in OA cartilage. In contrast, MMP-8 and -9 were higher in the treated subjects and no correlation with TIMPs was evident. One possible explanation is that these enzymes are required for the efficient degradation and removal of already compromised cartilage matrix and that they operate as part of a matrix turnover and repair process. In conclusion, our data suggest that mud bath therapy alone is not able to influence chondrocyte metabolic activity in the advanced phases of OA. There could be a synergic and sequential association with pharmacologic therapy and/or interventions.     

膝关节液透明质酸含量与滑膜炎程度的关系

目的探讨膝关节液透明质酸含量与滑膜炎程度之间的关系。方法酶联免疫吸附试验(ELISA)检测膝关节疾病(OA)患者102例共104膝的关节液透明质酸含量,并在关节镜下应用Ayral滑膜炎评分法和Outerbridge关节软骨损伤评分法评价膝滑膜炎和关节软骨损伤程度。采用t'检验、Spearman相关分析和多元线性回归分析进行统计分析。结果Ayral滑膜炎评分≥60分组的关节液透明质酸含量比Ayral滑膜炎评分<60分组高(P<0.001)。104膝关节液透明质酸含量与Ayral滑膜炎评分呈正相关(茁'A=0.497,P<0.001),与Outerbridge软骨损伤累计评分呈负相关(茁'o=-0.364,P<0.001),且Ayral滑膜炎评分的影响较大。关节液透明质酸含量与Ayral滑膜炎评分在Ayral滑膜炎评分≥60分组呈正相关(r=0.306,P<0.05),在Ayral滑膜炎评分<60分组无相关性(r=-0.144,P>0.05)。与非OA组相比,OA组的关节液透明质酸含量较低(P<0.05),而Ayral滑膜炎评分较高(P<0.01)。结论膝关节液透明质酸可作为生物标记物反映滑膜炎的程度,关节液透明质酸含量的增高提示滑膜炎较重。     

Tenoxicam concentrations in synovium and joint cartilage in humans

Tenoxicam is an NSAID of the oxicam group. Its distribution in articular tissues was investigated in 12 patients who required total arthroplasty of the hip. They were given tenoxicam 20 mg once daily for 8 to 30 days before surgery. Blood, synovium and cartilage samples were taken concurrently during surgery, about 14 hours after the last tenoxicam dose. The tissues were ground using a freeze grinder. Tenoxicam was assayed by HPLC. Tenoxicam concentrations averaged 6.21 +/- 3.81 micrograms/ml in plasma, 7.56 +/- 4.67 micrograms/g in synovium and 2.05 +/- 1.43 micrograms/g in cartilage. The individual synovium/cartilage ratios ranged from 1.9 to 9.7. Finally tenoxicam exhibited more affinity for its target organ (synovial tissue) than for joint cartilage.     

鹿瓜多肽对膝骨关节炎保护作用的动物实验研究

目的通过观察鹿瓜多肽对动物膝骨关节炎（OA）软骨的影响,探讨鹿瓜多肽对骨关节炎的治疗作用。方法6个月龄新西兰大白兔18只,采用随机数字表法分为3组,每组各6只,正常空白对照组：非手术,正常喂养;模型对照组：行双膝关节部分软骨缺损手术;观察组：行双膝关节部分软骨缺损手术,术后第2周开始,正常空白对照组、模型对照组不予任何处理;观察组按0．6ml／kg腹腔注射鹿瓜多肽,1次／d,术后12周处死动物。切取胫骨平台关节软骨大体观察,苏木素-伊红及甲苯胺蓝染色,检测血清、关节液。结果正常空白对照组动物模型关节软骨正常;模型对照组动物模型关节软骨缺损部分修复;观察组动物模型关节软骨缺损完全修复。观察组关节软骨形态学上明显改善,血清及关节液中超氧化物歧化酶（superox—idedismutase,SOD）分别为（117．31±11．49）mol／L、（76．28±19．11）mol／L,明显高于模型对照组[（102．37±11．54）mol／L,（57．58±17．31）mol／L]（P〈0．01）。结论鹿瓜多肽能够降低兔膝关节骨关节炎软骨的退变,通过抑制关节软骨炎症,加强关节软骨下骨的吸收应力的能力来保护关节软骨。