前列腺癌的差异蛋白及其临床意义的研究

目的应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）和蛋白质芯片技术,探讨前列腺癌差异蛋白表达及其与病理分级和临床分期的关系。方法以病理确诊的前列腺癌和良性前列腺增生各45例为研究对象,采用SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术检测血清的蛋白表达图谱,用Biomarker Wizard软件分析差异蛋白,对所得差异蛋白进一步分析。结果在前列腺癌和良性前列腺增生患者血清中检测到9个差异蛋白（P〈0.01）,前列腺癌患者血清差异蛋白7个高表达,2个低表达。各差异蛋白在不同病理分级间表达差异有统计学意义。结论通过SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术检测前列腺癌的特异蛋白可以提高前列腺癌诊断的敏感性和特异性。差异蛋白在前列腺癌不同病理分级间表达差别可能与前列腺癌分化、肿瘤侵袭生长有关,检测差异蛋白可以明确诊断,评估预后,指导治疗。     

人前列腺癌肿瘤干细胞12-LOX表达的初步研究

目的：研究花生四烯酸12-脂氧化酶（12-LOX）在人前列腺癌肿瘤干细胞中的表达情况,并探讨其意义。方法：采用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术和蛋白质印迹法,检测12-LOX在人前列腺癌细胞系DU145细胞和从其中分离出来的Du145侧群细胞中的表达情况;采用免疫荧光4通道激光扫描共聚焦显微镜技术,检测12-LOX在7例前列腺癌组织肿瘤干细胞和10例正常前列腺组织干细胞中的表达情况。结果：在细胞水平,应用RT—PCR技术和蛋白质印迹法分别证实,12-LOX mRNA和12-L0x蛋白在具有肿瘤干细胞特性DU145侧群细胞中的表达水平明显高于对应的母系DU145细胞;在组织水平,应用免疫荧光4通道激光扫描共焦显微镜检测证实,12-LOX蛋白在所有7例前列腺癌组织的肿瘤干细胞中均为阳性表达,而在所有10例正常前列腺组织的前列腺干细胞中均无表达。结论：12-LOX在人前列腺癌的肿瘤干细胞中有特异性的高表达,从而有望成为前列腺癌肿瘤干细胞一个新的、特异性的标志,并进一步有望成为前列腺癌肿瘤干细胞一个新的治疗靶位。     

细胞分化抑制子Id1在前列腺癌中的表达及意义

目的:细胞分化抑制子Id1(inhibitor of differentiation or inhibitor of DNA binding)蛋白与肿瘤的发生、侵袭及远处转移有关。本研究主要观测人前列腺癌组织中Id1蛋白的表达,并分析其应用价值。方法:采用免疫组化SP法检测43例前列腺癌(prostate cancer,PC)、12例前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)和2例正常前列腺组织中Id1蛋白的表达。结果:Id1蛋白在正常前列腺组织中无表达;BPH组织中无或弱表达(5/12);所有前列腺癌组织都有阳性表达(43/43),而且大多数以中、高度表达为主(与BPH相比,P<0.01);前列腺癌中Id1的表达水平与Gleason分级成正比(rs=0.63P<0.01)。结论:人前列腺癌组织中,Id1蛋白有过度表达,且与前列腺癌的Gleason分级呈正相关,表明与癌组织的恶性程度有关。Id1蛋白有可能作为判断前列腺癌发展的一种新的肿瘤标志。     

蛋白质组学法检测膀胱移行细胞癌患者尿液中特异性肿瘤标志物

 目的:检测膀胱移行细胞癌患者尿液中差异表达蛋白质,筛选新的肿瘤标志物,进而探讨其与TCC发病机制的相关性,以及蛋白质组学法在膀胱移行细胞癌早期无创诊断方面的研究应用价值。 方法:选取青岛大学医学院附属医院泌尿外科TCC住院病人尿液标本24例,另外选取12例TCC术后病人、12例健康志愿者的尿液标本作为对照。采用蛋白质芯片技术结合表面增强激光解析/离子化-飞行时间-质谱技术检测各组尿液标本的差异表达蛋白质,然后到蛋白数据库中鉴定筛选肿瘤标志物。 结果:TCC组与对照组尿液标本的蛋白质存在差异表达,IMAC-Cu-3蛋白质芯片共发现6个蛋白及2个蛋白簇表达水平发生变化。联合检测3438Da及8002Da蛋白可使诊断TCC的敏感度达83.3%,特异性达75.0%。3438Da蛋白已被鉴定为α-defensin蛋白;搜索SWISS-PRO蛋白数据库,4310Da~5150Da蛋白簇为gp40蛋白。 结论:SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术是一种快速、简便易行、用量少和高通量分析方法,能直接筛选出膀胱移行细胞癌患者尿液中特异的肿瘤标志物,为蛋白组学方法在膀胱移行细胞癌早期无创诊断、判断预后及探讨发病机制方面的研究应用开拓了广阔前景。     

进展性前列腺癌中Fas和Survivin的表达及其相关性研究

目的:通过检测凋亡相关蛋白Fas、Survivin在进展性前列腺癌(PCa)中的表达及两者的相关性,探讨前列腺癌的发生、发展机制,指导进展性前列腺癌的治疗.方法:应用免疫组化染色(SP)法,检测Fas、Sur-vivin在59例前列腺癌及35例良性前列腺增生(BPH)组织中的表达情况.结果:59例前列腺癌标本中,Fas、Survivin阳性表达率分别是45.8%(27/59)、44.1%(26/59);35例BPH标本中,Fas、Survivin阳性表达率分别是68.6%(24/35)、22.9%(8/35),前列腺癌与BPH组间差异均有显著性意义(P<0.05).前列腺癌中Sur-vivin表达与病理分级密切相关(P<0.05).前列腺癌中Fas与Survivin表达呈正相关(r=0.302,P<0.05).结论:Fas和Survivin在进展性前列腺癌中发生异常表达;联合检测Fas和Survivin蛋白,有助于对进展性前列腺癌细胞的侵袭力作出正确评价,以指导临床治疗.     

前列腺癌组织Clusterin与Survivin表达与PSA的相关性分析

目的:分析蛋白Clusterin和Survivin在前列腺癌(PCa)组织中的表达与前列腺特异性抗原(PSA)的相关性及在前列腺癌诊断中的应用价值。方法:应用免疫组织化学方法检测80例前列腺癌和50例前列腺增生组织凋亡蛋白Clusterin、Survivin的表达和相应患者血浆中PSA值。结果:前列腺癌组织中Clusterin、Survivin蛋白的阳性表达率分别为57.5%(46/80)、48.8%(39/80),Clusterin和Survivin蛋白在前列腺增生组织中的阳性表达率分别为0(0/50)、0(0/50),差异具有统计学意义(P<0.05)。Clusterin和Survivin蛋白表达与前列腺癌病理分级、临床分期、转移情况和PSA具有相关性(P<0.05),前列腺癌组织中Survivin与Clusterin的表达无相关性(P>0.001)。结论:联合检测Clusterin及Survivin表达与前列腺特异抗原(PSA)可为前列腺癌的防治和治疗提供新的思路。     

前列腺癌组织中Kindlin-2和Clusterin蛋白表达及与PSA含量的相关性

目的:探讨前列腺特异性抗原（PSA）含量和前列腺癌（PCA）组织中Clusterin、Kindlin-2蛋白阳性表达的相关性,研究前列腺癌的治疗策略。方法:45例前列腺增生和55例前列腺癌组织应用免疫组织化学方法检测凋亡蛋白Kindlin-2、Clusterin的表达并检测对应病例的血浆PSA含量。结果:Clusterin、Kindlin-2蛋白在前列腺癌组织中的阳性表达率分别为50.9%(28/55)、63.6%(35/55),Clusterin和Kindlin-2蛋白在前列腺增生组织中的阳性表达率分别为0(0/45)、51.1%(23/45)。在前列腺癌和前列腺增生组织中Clusterin和Kindlin-2阳性表达率具有统计学差异(P<0.05);Clusterin和Kindlin-2蛋白表达与前列腺癌病理分级、临床分期、转移情况和PSA含量相关,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:联合检测Kindlin-2、Clusterin蛋白和PSA可为前列腺癌提供一种新的联合检查方法。     

表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术在前列腺癌蛋白质组研究中的应用

目的应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）和蛋白质芯片技术分析前列腺癌（PCa）差异蛋白表达及其与病理分级和临床分期的关系,初步探讨雄激素难治性前列腺癌（HRPC）的发病机制。方法以病理确诊的PCa和良性前列腺增生（BPH）各45例,另以HRPC与激素依赖性前列腺癌（ADPC）各21例患者血清为研究对象,采用SELDI—TOF-MS固相金属亲和芯片技术检测血清的蛋白表达图谱,用BiomarkerWizard软件分析差异蛋白。结果在PCa和BPH患者血清中检测到9个差异蛋白（P〈0．01）,各差异蛋白在不同病理分级间表达差异有统计学意义。HRPC与ADPC有6个血清蛋白表达,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论通过SELDI—TOF—MS蛋白质芯片技术检测PCa的标志蛋白可以提高PCa诊断的敏感度和特异度;差异蛋白在PCa不同病理分级间表达差别可能与PCa分化、肿瘤侵袭生长有关。HRPC与ADPC患者血清的差异蛋白可能在ADPC向HRPC转变过程中发挥着重要作用,检测差异蛋白可以明确诊断,评估预后,指导治疗。     

MYBL2在前列腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2)在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法 收集2018年1月至2019年12月82例前列腺癌组织和29例良性前列腺组织。采用免疫组织化学法检测前列腺组织芯片中MYBL2的蛋白表达水平,并分析其表达水平与临床病理特征的关系。采用实时荧光定量PCR(q PCR)法检测2019年20对前列腺癌组织及癌旁组织中MYBL2 m RNA的表达。采用GEPIA数据库分析MYBL2 m RNA在前列腺癌组织中的表达及与预后的关系。结果 MYBL2蛋白在前列腺癌组织中的高表达率为92.7%(76/82),显著高于良性前列腺组织的48.3%(14/29),差异有统计学意义(P<0.001); q PCR检测结果显示,在前列腺癌组织中MYBL2 m RNA的相对表达量为1.71±0.24,在癌旁组织中为1.0±0.21,差异有统计学意义(P=0.035)。GEPIA数据库分析显示,MYBL2 m RNA在492例前列腺癌组织中的表达水平显著高于152例良性前列腺组织(P<0.05)。MYBL2蛋白表达与前列腺癌临床分期、WHO/ISUP分级分组、...     

蛋白质芯片筛选香港非吸烟女性肺腺癌组织的肿瘤标志物

背景与目的:吸烟虽为肺癌的重要病因,但香港女性肺腺癌患者中逾半数是从不吸烟。本研究应用高通量蛋白质芯片技术,以冀筛选其相关特异性标志蛋白分子作为临床诊断指标。方法:采用表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱仪对29例肺癌组织及其配对的癌旁正常组织进行蛋白质指纹图谱检测。结果:针对非吸烟女性肺腺癌与其配对之癌旁正常组织进行检测分析,筛选出52个有明显表达差异的标志蛋白,其中差异性最大的10个标志蛋白之差异率为60%～213%。而非吸烟患者之肺癌亦与吸烟患者之肺癌作蛋白质指纹图谱检测,发现有84个明显表达差异的标志蛋白,其中差异性最大的10个标志蛋白之应用受试者特征曲线下面积为0.82～0.89。把女性肺癌组织与男性肺癌组织蛋白质指纹图谱作比较,则发现有69个明显表达差异的标志蛋白,其中差异性最大的10个标志蛋白之应用受试者特征曲线下面积为0.81～0.86。结论:本研究成功利用蛋白质芯片技术筛选香港非吸烟女性肺腺癌组织中的标志蛋白,更通过与吸烟及性别相关之标志分子的比较,找到非吸烟女性肺腺癌的特异性肿瘤标志物。     

散发性结直肠癌中FHIT蛋白与Msh2、bcl-2、bax蛋白表达的关系

 目的　探讨散发性结直肠癌组织中FHIT蛋白与Msh2、bcl 2、bax蛋白表达之间的关系。方法采用免疫组化S P法检测 84例散发性结直肠癌组织中FHIT、Msh2、bcl 2、bax蛋白的表达。结果　FHIT蛋白在Msh2阴性癌组织中的阴性表达率显著高于Msh2阳性者 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;bcl 2阳性表达率和bax阴性表达率在FHIT阴性癌组织中的表达和在FHIT阳性癌组织中的表达 ,差异均有显著性 ;散发性结直肠癌中FHIT与Msh2、bcl 2和bax表达具有一定的相关性 (P <0 .0 5 )。结论　散发性结直肠癌中Msh2蛋白错配修复功能的丧失是引起FHIT表达失活的原因之一 ,FHIT表达失活增大bcl 2 /bax比值 ,使细胞凋亡不能参与癌的发生     

p185、ras p21、p53、p21、Rb蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及其意义

目的研究与细胞周期G1→S调控点相关的p185、rasp21、p53、p21、Rb蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及相互间的关系,并探讨其临床应用价值.方法应用LSAB免疫组化法,检测21例正常子宫内膜、19例子宫内膜上皮内瘤样病变(EIN)及45例子宫内膜癌组织中p185、ras p21、p53、p21、Rb蛋白的表达.结果p185、ras p21、p53蛋白在正常子宫内膜、EIN至内膜癌组织中的表达率依次增高,p21、Rb蛋白表达率则依次降低;在子宫内膜癌组织中,p185蛋白表达与ras p21蛋白表达呈正相关(γ=0.363),与p53、p21表达呈负相关(γ=-0.448;γ=-0.303),ras p21,p53蛋白表达与p21蛋白表达均呈负相关(γ=-0.365;γ=-0.322),p21蛋白与Rb蛋白表达呈正相关(γ=0.441).p185蛋白的表达与子宫内膜癌病理分级有关,单因素分析其为1个预后保护性因素(P＜0.05);p53蛋白的表达与各临床病理因素均有关,其单因素及多因素分析均提示预后差(P＜0.05).结论与细胞周期G1→S调控相关的p185、ras p21、p53、p21、Rb蛋白均参与子宫内膜癌的发生、发展过程,且部分基因相互关联;p53可作为其独立的预后因素.     

MCM7、Rb、c-MYC在肝细胞癌中的表达及其在基因通路中的作用

目的 探讨MCM7、Rb、c-MYC等基因在肝细胞癌中的表达及其在基因通路中的意义.方法 选取2013年1月至2015年8月邯郸市中心医院手术切除的60例原发性肝细胞癌组织进行免疫组化染色,分析MCM7、Rb、c-MYC等基因在肝细胞癌中的表达情况.结果 MCM7蛋白仅在肝细胞癌组织(73.3%)中表达,显著高于正常肝组织和肝硬化组织(P<0.05);Rb蛋白在肝硬化组织(53.3%)和肝细胞癌组织(58.3%)中表达,两者阳性率之间无统计学差异(P>0.05);肝细胞癌组织(70.0%)中c-MYC蛋白阳性率显著高于肝硬化组织(35.0%)(P<0.05).MCM7蛋白的表达与肿瘤直径、AFP、组织分化程度和临床分期有关(P<0.05),而与病灶数、是否转移及HBsAg是否阳性无关(P>0.05);Rb蛋白的表达仅与肿瘤组织分化程度有关(P<0.05);c-MYC蛋白表达与肿瘤组织分化程度和是否转移有关(P<0.05).MCM7蛋白和Rb阳性率呈显著负相关(γ=-0.712,P=0.038;γ=-0.664,P=0.018).结论 肝细胞癌的发生是多基因多通路相互作用的结果,多种调控蛋白的异常共同导致肿瘤的发生.     

星形细胞瘤中Survivin、PTEN蛋白的表达及其相关性

目的 探讨星形细胞瘤中Survivin，PTEN蛋白的表达及它们之间的相关性。方法 应用免疫组织化学S-P法检测Survivin，PTEN蛋白的表达水平，实验数据用SPSSl2．0软件包进行统计。结果 73例星形细胞瘤Survivin蛋白总阳性表达率为64．4％（47／73），随着肿瘤恶性程度加重，其阳性表达率逐渐增高（χ^2=6．900，P=0．032）；PTEN蛋白总阳性表达率为72．6％（53／73），随着肿瘤恶性程度加重，其阳性表达率逐渐下降（χ^2=11．741，P=0．003）；Survivin和PTEN蛋白表达与星形细胞瘤的病理分级密切相关。结论 Survivin、PTEN蛋白阳性表达率与肿瘤的发展有关。随着肿瘤恶性程度的增高，Survivin蛋白阳性表达率逐渐增高，而PTEN的蛋白阳性表达率则逐渐下降。Survivin和PTEN蛋白在肿瘤中的表达可能存在负相关，在肿瘤的发展中发挥协同效应，联合检测Survivin和PTEN对于诊断星形细胞瘤，判断其恶性程度有一定价值。     

胃癌p53,c—erbB—2和nm23癌基因蛋白的免疫组织化学研究

目的利用胃癌生物学恶性信息,探讨术前检测ｐ５３、ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｎｍ２３蛋白对胃癌的诊断价值。方法收集胃癌手术标本１４１例,胃镜活检标本９３例,应用免疫组化技术检测ｐ５３、ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｎｍ２３蛋白在上述组织中的表达。结果ｐ５３阳性率为４５．８％～５６．３％,ｃ－ｅｒｂＢ－２为１８．３％～３０．２％,ｎｍ２３为７２．９％～８１．３％,在非胃癌组织中无表达;ｃ－ｅｒｂＢ－２的表达与肿瘤组织的大小、癌细胞的分化程度及Ｌａｕｒéｎ分型有关,且ｃ－ｅｒｂＢ－２表达阳性组５年生存率低于阴性组;ｎｍ２３的表达与肿瘤的生长方式、浸润深度和淋巴结转移有关。三种癌蛋白的阳性率在胃癌的胃镜活检标本和手术标本中无显著差别。结论对胃癌组织进行ｐ５３、ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｎｍ２３蛋白的检测,有助于胃癌的诊断、良恶性病变的鉴别诊断、非手术临床分期的判断和评估胃癌患者的预后。     

RhoC及其调节因子RhoGDIβ、RhoGDIγ在肺鳞癌、腺癌中的表达及临床意义

背景与目的 以往的研究表明,RhoC在许多肿瘤中过表达,RhoGDIβ、RhoGDIγ(Rho GDPdissociation inhibitors.β、γ)被认为是Rho的负性调节因子,目前在肿瘤中研究有限.本研究旨在探讨RhoC及其调节因子RhoGDI β、RhoGDI γ在肺鳞癌、腺癌中的表达、他们之间的关系及临床意义.方法 应用Western blot,RT-PCR检测40例新鲜肺癌组织中RhoC及RhoGDIβ、RboGDIγ蛋白和mRNA表达,分析其与临床病理参数间的关系.结果 RhoC、RhoGDIβ、RhoGDIγ蛋白和mRNA在肺癌组织表达均显著高于对应正常肺组织;RhoC、RhoGDIγ和临床TNM分期,淋巴结转移正相关(r=0.659,P<0.05)(r=0.597,P<0.05),RhoGDIβ和临床TNM分期,淋巴结转移呈负相关(r=-0.621,P<0.05).结论 RhoC及RhoGDIβ、RhoGDIγ表达水平与肺癌TNM分期及淋巴结转移密切相关.     

脑星形细胞瘤组织中p16 bcl-2、bax蛋白的表达及其意义

目的：探讨p16,bcl-2,bax蛋白在脑星形细胞瘤中的表达及其意义。方法：采用S－P免疫组织化学法，检测P16，bcl-2,bax蛋白在60例不同病理分级脑星形细胞瘤组织中的表达情况。结果：60例脑星形细胞瘤组织中，p16,bcl-2,bax蛋白表达阳性率分别为50．0％（30／60），58．3％（35／60），66．7％（40／60），其中P16蛋白阳性表达与病理分级有显著性相关（P＜0．05），bcl-2,bax蛋白表达与病理分级无相关性（P＞0．05），60例脑星形细胞瘤组织中，p16,bcl-2,bax蛋白共同表达率，I级为47．8％（11／23），Ⅲ-Ⅳ级为0（0／16），在bcl-2,bax蛋白表达的基础上，不同病理分组织中p16蛋白的缺失率：I级为4．3％（1／23），Ⅲ-Ⅳ级为50．0％（8／16），有非常显著性差异（P＜0．01），结论：P16蛋白表达与脑星形细胞瘤的发生发展密切相关，在脑星形细胞瘤的发展过程中，bcl-2,bax,p16蛋白可能有某种协调作用。     

细胞命运决定因子在乳腺癌中表达及其与cyclinDcyclinD1、c-jun和Her-2表达相关性研究

目的探讨乳腺癌组织中细胞命运决定因子（cell fate determination factor dachshund,DACH1）表达及其与cyclin D1、c-jun和Her-2蛋白的表达相关性。方法采用免疫组织化学方法检测60例乳腺癌中DACH1、cyclin D1、c-jun和Her-2蛋白的表达,30例乳腺纤维瘤中DACH1的表达;并分析其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果 DACH1在乳腺癌中的阳性表达率为33.3%,明显低于其在乳腺纤维腺瘤中的阳性表达率86.7%（P〈0.05）。DACH1在淋巴结阳性组中的表达低于无淋巴结转移组（P〈0.05）。乳腺癌中DACH1与Her-2蛋白的表达无明显相关性,与cyclin D1、c-jun的表达呈负相关性（r=-5.62,P〈0.05;r=-5.46,P〈0.05）。结论 DACH1表达缺失及低表达可能与乳腺癌进展有关,DACH1、cyclin D1、c-jun的异常表达预示着乳腺癌较高的侵袭性及患者预后的不良;在乳腺癌中,三者的表达具有相关性,可能和疾病的进展有一定的关系,并且可作为评估乳腺癌预后的指标。     

大肠癌中Fas、FasL、bcl-2蛋白的表达及意义

 目的　探讨Fas、FasL、bcl 2在大肠癌中表达及意义。方法　用免疫组化S P法检测 15例大肠腺瘤、4 0例大肠腺癌及 15例大肠正常组织Fas、FasL、bcl 2蛋白表达 ,以TUNEL法测定细胞凋亡。结果　腺瘤和腺癌凋亡指数高于正常组织 ,腺瘤组高于腺癌组 (P <0 .0 5 )。在大肠正常组织、腺瘤、腺癌中Fas阳性率下降 ,FasL阳性率上升 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。腺瘤组和腺癌组bcl 2表达高于正常组 (P <0 .0 5 )。bcl 2阳性组FasL阳性率高于bcl 2阴性组 (P <0 .0 5 )。结论　瘤细胞Fas FasL表达异常使肿瘤逃脱机体自身免疫攻击 ,促使肿瘤的发生、发展 ,对预测大肠癌的预后有重要参考价值。bcl 2高表达是癌变过程中的早期事件 ,有利肿瘤的早期诊断。