从RANK/RANKL/OPG信号通路探讨四仙逐痹汤减轻CIA模型大鼠骨破坏的作用机制

目的 观察四仙逐痹汤对类风湿关节炎模型大鼠骨破坏的作用，并初步探索其作用机制。方法 雄性SD大鼠40只随机分为对照组、模型组、四仙逐痹汤组、甲氨蝶呤组。除对照组外，其余3组均采用牛II型胶原与不完全弗氏佐剂构建CIA大鼠模型，间断性进行大鼠关节炎评分及左后足关节肿胀度测量，HE染色法观察大鼠踝关节组织形态学变化，免疫印迹法(WB)和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测关节核因子κB受体活化因子(RANK)、核因子-κB配体受体活化剂(RANKL)、骨保护素(OPG)蛋白及mRNA表达水平。结果 与模型组相比，四仙逐痹汤组及甲氨蝶呤组大鼠关节炎评分以及关节肿胀度明显改善，炎性细胞数量明显减少，关节破坏减轻；与模型组相比，RANK、RANKL蛋白和mRNA表达下调(P<0.05),OPG蛋白和mRNA表达水平上调(P<0.05)。结论 四仙逐痹汤可减轻CIA模型大鼠骨破坏，其机制可能与RANK/RANKL/OPG信号通路相关。     

关节炎疗效及对患者血清MMP-3及RANK/RANKL/OPG表达的影响

目的观察和痹方联合甲氨蝶呤（methotrexate,MTX）对肝脾失调型早期类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）疗效及患者血清基质金属蛋白酶3（matrix metalloproteinase 3,MMP-3）及核因子-κB受体活化因子（receptor activator of NF-κB,RANK）/核因子-κB受体活化因子受体（RANKL）/骨保护素（osteoprotegerin,OPG）表达的影响。方法采用随机数字表法将72例肝脾失调型早期RA患者分为治疗组及对照组,每组36例,对照组采用MTX治疗,治疗组在此基础上联合和痹方治疗,两组MTX从7.5 mg逐渐加至12.5 mg,每周1次,疗程24周。观察两组ACR20改善率、中医证候疗效、类风湿因子（rheumatoid factor,RF）、血沉（ESR）、C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、抗环瓜氨酸肽抗体（anti-cyclic citrullinated peptide antibody,CCP）及血清MMP-3、OPG、RANKL表达水平,并观察不良反应。结果治疗组ACR20达标率为82.86%（29/ 35）,中医证候疗效有效率为85.7% （30/ 35）,均明显高于对照组的51.52%（17/ 33）和 63.6%（21/ 33）,两组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。与本组治疗前比较,两组治疗后RF、ESR、CRP、MMP-3及RANKL水平降低,OPG水平升高（P<0.05, P<0.01）。与对照组比较,治疗组治疗后RF、ESR、CRP及RANKL均降低,差异均有统计学意义（P<0.01, P<0.05）。治疗组1例出现肝功能异常,对照组1例出现白细胞减低,2例出现肝功能异常。结论和痹方联合MTX可改善肝脾失调型早期RA患者的症状,调控RANK/RANKL/OPG系统诱导的骨质破坏。     

基于OPG/RANK/RANKL信号通路防治股骨头坏死的中医药研究进展

股骨头坏死（ONFH）是由于股骨头内的供血发生损害,细胞组织等发生变性,逐渐造成骨结构被破坏,股骨头进行性塌陷引起的疼痛及功能障碍性疾病。ONFH的主要病理机制在于微循环损害细胞组织能力下降、骨的吸收与新生骨的重建之间的平衡被破坏,其生物力学发生改变,加速股骨头坏死的病理进展。早期临床表现并不明显,主要为髋部或腹股沟区疼痛或酸痛,休息后可缓解,疾病发展后期可出现疼痛加剧,肢体短缩,下肢无力,行走困难或跛行。目前临床上西医常用促骨形成药、抗凝药和人工关节置换等治疗,但也存在假体松动、感染等诸多问题。研究表明,中医药治疗ONFH从整体出发,应用多功能、多靶点、多系统的中药治疗,保障了治疗途径的安全性和有效性。骨保护素（OPG）/核转录因子-κB受体活化因子（RANK）/核转录因子-κB受体活化因子配基（RANKL）信号通路在维持骨重建的动态平衡中具有关键地位,该通路利用中医药等治疗方式促进生物体内破骨细胞凋亡,减少骨吸收,加速骨形成,对于防治ONFH具有重要作用。该文通过查阅国内外相关文献,对OPG/RANK/RANKL信号通路影响相关细胞因子表达在ONFH中的作用,中药单体、中药复方及中药复方联合物理治疗增加成骨细胞分泌,促进OPG表达,提高细胞因子等表达水平,抑制破骨细胞活性等方式以防治ONFH的研究现状进行综述,为中医药防治ONFH提供新的思路和方向。     

治尪汤联合甲氨蝶呤调节RANKL/OPG通路改善胶原诱导关节炎大鼠骨破坏的作用机制

目的 探究治尪汤联合甲氨蝶呤改善胶原诱导关节炎模型（CIA）大鼠的骨破坏作用及机制。方法 SD雄性大鼠随机分为正常组，模型组，甲氨蝶呤组（1.5 mg·kg^-1），甲氨蝶呤+治尪汤低（40.8 g·kg^-1），高（102.0 g·kg^-1）剂量组。除正常组外，其余大鼠分别于第1，7天尾部注射浓度为2 g·L^-1的Ⅱ型胶原乳剂50 μL建立CIA模型；第8天开始连续给药21 d，每7 d检测1次体质量、足趾厚度，进行关节炎指数（AI）评分，酶联免疫吸附测定法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白细胞介素-6（IL-6），白细胞介素-1β（IL-1β）含量，抗酒石酸酸性磷酸酶染色法检测踝关节破骨细胞的数量，免疫组化（IHC），实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR），蛋白免疫印迹法（Western blot）检测踝关节核转录因子-κB受体活化因子配体（RANKL），骨保护素（OPG）的表达。结果 与正常组比较，模型组大鼠体质量显著降低（P<0.01），足趾厚度显著增加（P<0.01），踝关节AI评分显著增加（P<0.01），血清TNF-α，IL-6，IL-1β含量显著升高（P<0.01），踝关节破骨细胞数量显著增加（P<0.01），踝关节RANKL mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.01），OPG mRNA和蛋白表达明显降低（P<0.05），RANKL/OPG显著升高（P<0.01）。与模型组比较，甲氨蝶呤+治尪汤低、高剂量可改善大鼠体质量，降低足趾厚度，AI评分，RANKL mRNA和蛋白表达并增加OPG mRNA和蛋白表达，使RANKL/OPG降低（P<0.05，P<0.01），且甲氨蝶呤+治尪汤高剂量效果最好，甲氨蝶呤+治尪汤低剂量次之，甲氨蝶呤再次之。结论 治尪汤联合甲氨蝶呤能更好地改善类风湿关节炎的骨破坏，可能是通过抑制RANKL/OPG通路实现的，本研究为中西医结合方案治疗类风湿关节炎骨破坏提供了实验基础。     

补肾中药基于OPG/RANKL/RANK信号通路对原发性骨质疏松症作用机制的研究进展

原发性骨质疏松症(primary osteoporosis,POP)是老年男性及绝经后女性常见的退行性骨代谢疾病,其并发症所导致的致残率或致死率已成为全球公共难题。骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)/核因子-κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-κB,RANK)信号通路与骨代谢有着密切的联系。中药通过该信号通路治疗POP具有明显的优势,尤以补肾类中药最为突出。但是,关于补肾中药基于该信号通路治疗POP的调节机制仍然缺乏相对全面且系统的归纳总结。因此,基于OPG/RANKL/RANK信号通路在骨代谢的调节机制,从单味中药及中药复方的角度综述补肾中药防治POP的作用机制,为今后POP相关基础及临床研究提供理论依据。     

OPG/RANK/RANKL系统与骨质疏松症的相关研究进展

骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-kappa B,RANK)和核因子κB受体活化因子配体(receptoractivator of nuclear factor-kappa B ligand,RANKL)系统是近年来发现的一组调控破骨细胞分化激活的细     

湿热痹清丸治疗湿热型类风湿关节炎的临床研究

目的:观察湿热痹清丸治疗类风湿关节炎的临床疗效。方法:将120例类风湿关节炎患者随机分为治疗组和对照组各60例,对照组给予正清风痛宁片治疗,治疗组予以湿热痹清丸治疗。结果:总有效率治疗组为88.3%,对照组为73.3%,组间比较,差异有统计学意义(P0.05);2组患者HAQ评分、DAS-28评分治疗前后组内比较及治疗后组间比较(除不适指数与ESR外),差异均有统计学意义(P0.05)。结论:湿热痹清丸可有效改善湿热型类风湿关节炎患者的临床症状及实验室指标,且无明显不良反应。     

补肾法对去卵巢大鼠OPG/RANK/RANKL信号通路影响的Meta分析

目的 随着全球老龄化趋势的发展,绝经后骨质疏松症（PMOP）已成为世界性的女性健康问题。目前常用的生物制剂存在不良反应多、无法长期用药等缺陷。多项Meta分析已证明补肾法对PMOP患者的安全性和有效性,但其治疗机制尚不明确。该文Meta分析评估基于PMOP动物模型的补肾法对骨保护素（OPG）/核转录因子（NF）-κB受体激活因子（RANK）/NF-κB受体激活因子配体（RANKL）信号通路的影响,为用补肾法治疗PMOP提供实验依据。方法 计算机检索PubMed,Ovid Medline,Embase,中国知网（CNKI）,维普和万方数据库,以收集检索从建库至2020年1月的研究,并对每篇纳入文章的研究质量进行了评估。根据SYRCLE的偏倚风险工具对每一篇纳入的文章的研究质量进行评价。使用RevMan 5.3软件根据Cochrane系统评价方法进行Meta分析。结果 包括619只大鼠的32项研究,纳入研究的质量分数都在3~5分。Meta分析结果表明,补肾法在增加骨密度（BMD）值方面优势明显［标准化均数差（SMD）=2.01,95%置信区间（CI）=1.50~2.52,P<0.000 01］。同时补肾法可增加卵巢切除（OVX）大鼠骨组织中血清OPG水平（SMD=3.33,95% CI=2.59~4.07,P<0.000 01）,提高OPG mRNA表达（SMD=11.81,95% CI=7.49~16.13,P<0.000 01）和促OPG蛋白生成（SMD=4.95,95% CI=3.09~6.81,P<0.000 01）。补肾法可以降低血清RANKL水平（SMD=-4.88,95% CI=-6.01~-3.75,P<0.000 01）和RANK水平（SMD=-7.30,95% CI=-9.53~-5.07,P<0.000 01）;补肾法还可降低骨RANKL mRNA（SMD=-6.22,95% CI=-8.95~-3.49,P<0.000 01）和骨RANK mRNA（SMD=-3.18,95% CI=-6.19~-0.18,P<0.05）及RANKL蛋白在骨组织中的表达（SMD=-3.99,95% CI=-5.47~-2.50,P<0.000 01）。结论 该研究发现补肾法在调节PMOP的动物模型中OPG/RANK/RANKL信号通路平衡方面具有重要优势,但仍然需要更多的样本,合理的设计和高质量的动物实验来进行进一步的验证。     

顽痹清丸对类风湿关节炎湿热痹阻证患者血清细胞焦亡相关因子表达的影响

目的 观察顽痹清丸对类风湿关节炎（RA）湿热痹阻证患者的临床疗效，并从细胞焦亡的角度探讨其可能作用机制。方法 84例RA湿热痹阻证患者随机分为治疗组和对照组，每组42例。对照组患者口服甲氨蝶呤片每次10 mg，每周1次；塞来昔布胶囊每次0.2 g，每日1次。治疗组在对照组药物的基础上口服顽痹清丸，每次6 g，每日2次。两组均连续治疗4周。于治疗前及治疗2、4周后进行类风湿关节炎疾病活动度（DAS28）评分、疼痛视觉模拟（VAS）评分、中医症状积分评分，检测红细胞沉降率（ESR）及C反应蛋白（CRP）水平、血清中细胞焦亡相关因子[包括NOD样受体蛋白3 (NLRP3)炎性小体、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1 (Caspase-1)、白细胞介素1β (IL-1β)和白细胞介素18 (IL-18)]表达水平。治疗4周后比较两组患者的临床疗效及不良反应发生率。结果 最终完成研究81例，治疗组41例，对照组40例。治疗组总有效率为63.41%(26/41)，对照组总有效率为47.50%(19/40)，两组比较差异无统计学意义（P>0.05）。治疗2周后，对照组患者的中医症状积分和VAS评分较治疗...     

补肾通督胶囊对胶原诱导关节炎大鼠RANK/RANKL/OPG系统的影响

目的研究补肾通督胶囊对胶原诱导关节炎大鼠RANK/RANKL/OPG系统的影响,为中医药治疗类风湿关节炎(RA)提供理论依据。方法 RA动物模型选用胶原诱导关节炎模型,将大鼠分为正常对照组、模型组、补肾通督胶囊低剂量组(BSL)、中剂量组(BSM)、高剂量组(BSH)和雷公藤组6组,每组7只大鼠。造模后13天开始给药,BSL、BSM及BSH组分别给予120、240及480 mg/(kg·d)的补肾通督胶囊灌胃,雷公藤组给予雷公藤多苷片24 mg/(kg·d)灌胃。各组每天灌胃1次,每次2 m L。正常对照组和模型组给予2 m L的生理盐水灌胃。共灌胃18天。于31天取材,制作踝关节TRAP切片,采用ELISA法检测血清核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)、OPG巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)。结果与正常对照组比较,模型组大鼠踝关节病理切片的阳性反应、炎症和骨破坏程度显著提高(P<0.01),血清RANKL和M-CSF水平皆有显著上升(P<0.01),而OPG和OPG/RANKL水平皆有显著降低(P<0.01)。与模型组比较,BSH组和雷公藤组阳性反应、炎症和骨破坏评分也显著下降(P<0.01);而BS各组和雷公藤组RANKL和M-CSF均显著下调,而OPG和OPG/RANKL均显著上调,差异有统计学意义(P<0.01)。与雷公藤组比较,正常组M-CSF较低,而OPG和OPG/RANKL均较高,差异有统计学意义(P<0.01),而模型组和BS各组RANKL和M-CSF均显著上调,而OPG和OPG/RANKL均显著下调(P<0.01)。结论补肾通督胶囊对于关节炎大鼠缓解骨破坏的机制,可能是通过对破骨细胞的调控起作用。     

秦艽不同配伍对风寒湿痹类风湿关节炎大鼠类风湿因子，C-反应蛋白及核转录因子-κB的影响

目的:观察秦艽不同配伍药对对风寒湿痹型类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)模型大鼠血清类风湿因子(rheumatoid factor,RF),C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及踝关节核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)的影响。方法:选取80只SD大鼠并随机分为正常组,Ⅱ型胶原组,风寒湿病证模型组,雷公藤多苷组,单味秦艽组,秦威组(秦艽配伍威灵仙),秦桑组(秦艽配伍桑寄生),秦防组(秦艽配伍防己),每组10只。注射Ⅱ型胶原乳剂并施加风寒湿刺激制备风寒湿RA大鼠模型。模型建立完成后正常组,Ⅱ型胶原组,风寒湿病证模型组给予生理盐水灌胃,各给药组给予相应药液。实验过程中,每3 d测量一次大鼠左后足跖厚度,计算足跖肿胀度;实验第38天对各组大鼠进行关节炎指数(arthritis index,AI)评分;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清RF,CRP含量;蛋白免疫印迹技术检测踝关节NF-κB的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术检测踝关节NF-κB mRNA表达。结果:与正常组比较,Ⅱ型胶原组及风寒湿病证模型组足跖肿胀度,AI评分,血清RF,CRP水平,踝关节NF-κB蛋白表达水平及NF-κB mRNA水平显著升高(P0.01);与风寒湿病证模型组比较,各中药组足跖肿胀度,AI评分,血清RF,CRP水平,踝关节NF-κB蛋白表达水平及NF-κB mRNA水平均有所降低(P0.05,P0.01),其中秦威组降低最明显。结论:平温相配的秦威组对于风寒湿痹型类风湿关节炎的疗效优于平平相配的秦桑组、平寒相配的秦防组及单味秦艽组,实验结果与中医"疗寒以热药"的原则基本相符。     

赤雹根总皂苷对类风湿性关节炎大鼠血清OPG/RANKL水平的影响

目的:观察赤雹根总皂苷(TSTR)对佐剂性关节炎(AA)模型大鼠血清骨保护素(OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)表达水平的影响,探讨TSTR治疗类风湿性关节炎的机制.方法:SD大鼠,随机取10只作为空白对照,其余大鼠采用弗氏完全佐剂制备关节炎模型,将造模成功的关节炎大鼠随机分为模型对照组、TSTR 40,80,160 mg·kg-1·d-1剂量组、雷公藤多苷12 mg·(kg·d)-1阳性对照组.各组分别ig给予相应的药物,模型对照组ig等容积的水.连续ig给药21 d后处死.采用ELISA法检测血清OPG,RANKL水平.结果:TSTR各剂量组大鼠血清RANKL水平分别为(98.74 ±10.17),(87.81±17.78),(77.75±14.61) pmol·L-1,均显著低于模型组(120.80±12.14) pmol·L-1(P ＜0.05或P＜0.01);TSTR各剂量组血清OPG水平分别为(71.67 ±2.62),(77.50 ±0.93),(91.04±7.26) pmol·L-1,均显著高于模型组(53.64 ±3.46)pmol·L-1(P＜0.05或P＜0.0l);TSTR各剂量组OPG/RANKL比值分别为0.71 ±0.08,0.89±0.17,1.13 ±0.24,显著高于模型对照组0.43±0.06(P＜0.05或P＜0.01).结论:TSTR可能通过影响OPG/RANKL系统而对破骨细胞功能产生影响,从而防治骨破坏.     

清痹舒络汤治疗类风湿关节炎活动期湿热痹阻证20例

类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis，RA）是一种以累及周围关节为主的多系统性、炎症性的自身免疫性疾病，其基本病理改变是滑膜炎，可导致关节畸形、功能丧失。2003-03—2004-12，笔者运用清痹舒络法治疗类风湿关节炎急性活动期20例。取得满意效果。报道如下。     

六味地黄汤及其“补泻”药对对绝经后骨质疏松大鼠股骨和肾脏中OPG及RANKL蛋白表达的影响

目的:观察六味地黄汤及其3个"一补一泻"药对对绝经后骨质疏松模型大鼠股骨及肾脏中骨保护素(OPG)及核转录因子-κB受体活化因子配体(RANKL)的影响。方法:将3~4月龄SD大鼠随机分为空白组(假手术组,蒸馏水10 m L·kg-1),模型组(蒸馏水10 m L·kg-1),六味地黄汤组(6.75 g·kg-1),山茱萸-牡丹皮组(1.89 g·kg-1),熟地黄-泽泻组(2.97 g·kg-1),山药-茯苓组(1.89 g·kg-1),阿仑膦酸钠组(阳性药物组,6.3 g·kg-1)。除空白组外,其余各组大鼠均采用摘除双侧卵巢的方法制备绝经后骨质疏松症大鼠模型。造模后第16天开始,各组按相应剂量连续灌胃给药90 d,每周观察各组大鼠体重的变化,并采用免疫组化法检测股骨成骨细胞和肾脏肾小管上皮细胞中OPG,RANKL蛋白的表达。结果:与模型组比较,六味地黄汤组能上调股骨成骨细胞及肾脏肾小管上皮细胞中的OPG的蛋白表达、下调RANKL的蛋白表达;但山茱萸-牡丹皮药对仅能降低股骨成骨细胞中OPG的灰度值(P0.05),升高RANKL的灰度值(P0.01),即山茱萸-牡丹皮药对仅能上调股骨成骨细胞中OPG的蛋白表达、下调RANKL的蛋白表达(灰度值越低,OPG,RANKL的蛋白表达越强)。结论:六味地黄汤改善绝经后骨质疏松症的机制之一可能与其方中山茱萸-牡丹皮药对调节股骨中的OPG及RANKL的蛋白表达有关。     

杜仲中松脂素二葡萄糖苷和松脂素对成骨细胞中OPG和RANKL表达的影响

目的:观察杜仲中松脂素二葡萄糖苷及其苷元松脂素对体外培养的小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1的影响。方法:采用质量浓度为1×10~(-7)~1×10~3μg·L~(-1)的松脂素二葡萄糖苷与松脂素体外干预MC3T3-E1成骨细胞48,72 h,采用噻唑蓝法检测细胞增殖情况,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测细胞分化情况,酶联免疫吸附测定法(ELISA)和蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测细胞骨保护素(OPG)与核转录因子-κB受体活化因子配体(RANKL)蛋白表达的水平。结果:与空白组相比,培养48 h,1×10~(-4)~100μg·L~(-1)松脂素二葡萄糖苷及1×10~(-4)~1μg·L~(-1)松脂素均能促进成骨细胞增殖(P0.05,P0.01);培养72 h,1×10~(-3)~100μg·L~(-1)松脂素二葡萄糖苷及0.1μg·L~(-1)松脂素能促进成骨细胞增殖(P0.05,P0.01)。与空白组相比,培养48 h时,质量浓度为1×10~(-4)~1×10~3μg·L~(-1)的松脂素二葡萄糖苷、松脂素均能够显著促进成骨细胞ALP分泌(P0.01);培养72 h时,质量浓度为0.1~1×10~3μg·L~(-1)的松脂素二葡萄糖苷和1×10~(-4)~1×10~3μg·L~(-1)松脂素均能显著促进成骨细胞ALP分泌(P0.05,P0.01)。与空白组相比,培养48 h,1×10~(-5)~10μg·L~(-1)的松脂素二葡萄糖苷和松脂素均能促进细OPG蛋白分泌(P0.05,P0.01);只有松脂素在1×10~(-5),1×10~(-3)μg·L~(-1)时能明显抑制RANKL蛋白的分泌(P0.01),在1×10~(-5)~0.1μg·L~(-1)时提高OPG/RANKL(P0.01)。结论:松脂素二葡萄糖苷与松脂素均能通过促进成骨细胞的增殖和分化达到抗骨质疏松作用,但其作用机制不同,松脂素二葡萄糖苷主要通过促进OPG分泌来发挥,而松脂素则既能通过促进OPG分泌又能通过抑制RANKL表达来发挥作用。     

灯盏花对成骨细胞及破骨前体细胞OPG/RANKL/RANK表达的影响

目的 研究不同浓度和不同作用时间的灯盏花对体外培养的成骨细胞和破骨前体细胞中OPG/RANKL/RANK mRNA及蛋白表达的影响,初步探讨灯盏花对骨改建的作用及其机制。方法 体外培养人MG63细胞和小鼠RAW264.7细胞,分别取第三代细胞分为对照组和不同的实验组,分别应用不同浓度的灯盏花（0、0.001、0.01、0.1、1 mg/mL）干预48 h后提取总RNA和蛋白质,同时单独对0、1 mg组设12、24、48 h时间点提取蛋白质,采用半定量RT PCR方法检测MG63细胞OPG mRNA和RANKL mRNA的表达以及RAW264.7细胞RANK mRNA的表达,采用Western blot法检测MG63细胞OPG蛋白和RANKL蛋白的表达以及RAW264.7细胞RANK蛋白的表达。结果 灯盏花随浓度（0、0.001、0.01、0.1、1 mg/mL）增高,干预48 h后MG63细胞OPG mRNA和蛋白表达逐步降低（P〈0.05）;MG63细胞RANKL mRNA和蛋白表达逐步增加（P〈0.05）;RAW264.7细胞RANK mRNA表达增加（P〈0.05）,但0.1 mg/mL组较0.01 mg/mL组 mRNA表达稍降低,RANK蛋白表达逐步增加（P〈0.05）。1 mg/mL灯盏花干预12、24、48 h后MG63细胞OPG蛋白表达随时间逐步降低（P〈0.05）、RANKL蛋白表达随时间逐步增加（P〈0.05）;RAW264.7细胞RANK蛋白表达随时间逐步增加（P〈0.05）。结论 灯盏花大致上呈剂量和时间依赖性抑制成骨细胞OPG表达,促进成骨细胞RANKL的表达和破骨前体细胞RANK的表达,灯盏花可能有促进骨吸收的作用。     

苗族药金乌健骨汤对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞NF-κB p65,IKK-α及IKK-β表达的影响

目的:探讨苗族药金乌健骨汤对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞核转录因子-κB p65(NF-κB-p65),IκB激酶-α(IKK-α)及IκB激酶-β(IKK-β)表达水平的影响,并探讨其作用机制。方法:通过细胞培养,在体外构建类风湿关节炎滑膜成纤维细胞模型,将3~5代细胞随机分为6组,分别是空白组、苗族药金乌健骨汤含药血清冻干粉高、中、低剂量(28.8,9.6,3.2 g·kg~(-1))组、雷公藤多苷(3 mg·kg~(-1))组和泼尼松(1.5 mg·kg~(-1))组,用各药物含药血清冻干粉对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞进行干预24 h后,观察类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的形态学改变,采用流式细胞仪检测各组类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中NF-κB p65,IKK-α及IKK-β蛋白表达水平。结果:与空白组比较,类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的凋亡随着金乌健骨汤浓度的升高,凋亡率明显升高(P0.05),类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中IKK-α,IKK-β及NF-κB p65的表达水平明显下调(P0.05)。结论:苗药金乌健骨汤能够诱导类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的凋亡,下调NF-κB p65,IKK-α及IKK-β的表达水平。     

壮骨止痛方对骨质疏松大鼠Wnt/β-catenin、RANKL/RANK/OPG信号通路的影响

目的探讨壮骨止痛方对骨质疏松雌鼠Wnt/β-链蛋白(Wnt/β-catenin)、核因子κB受体活化因子配体/核因子κB受体活化因子/骨保护蛋白(RANKL/RANK/OPG)信号通路的影响。方法将大鼠分为假手术组、模型组、壮骨止痛方高剂量组、壮骨止痛方低剂量组、雌二醇组,用酶联免疫法测定大鼠血清中β-catenin、OPG、RANKL的水平。结果模型组大鼠血清β-catenin明显降低,RANKL/OPG比值升高,经壮骨止痛方药物干预后,β-catenin水平明显升高,RANKL/OPG比值明显下降。结论壮骨止痛方可能通过提升大鼠血清β-catenin的含量,降低RANKL/OPG的比值,从而激活Wnt/β-catenin、RANKL/RANK/OPG信号通路,起到防治骨质疏松的作用。     

银苓消肿丸治疗湿热痹阻型类风湿关节炎临床疗效及安全性观察

目的:观察银苓消肿丸治疗湿热痹阻型类风湿关节炎的临床疗效及安全性。方法:100例类风湿关节炎(湿热痹阻型)的患者随机分为两组,每组50例。对照组口服来氟米特加甲氨蝶呤治疗;观察组在对照组的基础上加用银苓消肿丸。观察两组在治疗前后中医证候疗效、中医临床症状积分、ACR20、ACR50、IL-1、IL-6、BAFF的变化,同时观察血常规、肝肾功能等安全性指标的变化以了解其临床应用安全性。结果:观察组能明显降低中医临床症状积分(P0.05),尤其在麻木、肿胀等症状改善来讲,表现差异尤为显著。治疗1年后观察组ACR20、ACR50分别为84%、76%显著高于对照组76%、62%(P0.05)。银苓消肿丸能够更好降低IL-1、IL-6、BAFF含量,能够显著减轻和缓解患者的临床症状。两组在肝肾功能等安全性指标的比较中无明显差异,提示安全性疗效两组相当。结论:在联合慢作用药基础治疗上加用银苓消肿丸治疗湿热痹阻型类风湿关节炎改善肿胀、麻木等中医证候有良好效果,并有较好的临床疗效及安全性。     

基于RANKL/OPG探讨桂枝芍药知母汤对骨质疏松症模型大鼠的治疗作用

目的 基于大鼠卵巢切除术（OVX）联合糖皮质激素注射致骨质疏松模型探讨桂枝芍药知母汤（GSZT）对骨质疏松症（OP）模型SD雌鼠的治疗作用。方法 OVX手术1周后,除假手术组外,大鼠分为OP模型组、骨化醇组（0.1 mg·kg^-1）,GSZT低、中、高剂量组（0.8,1.6,3.2 g·kg^-1）。除假手术组,大鼠肌肉注射地塞米松（1 mg·kg^-1,2次/周）,连续6周;给药8周后,处死动物收集股骨样本,计算机微断层扫描（Micro CT）扫描股骨远端1/3,检测骨矿物质密度（BMD）,骨体积（BV）,组织体积（TV）,结构模式指数（SMI）,骨小梁连接密度（Conn.D）,骨小梁数目（Tb.N）,骨小梁厚度（Tb.Th）,和骨小梁分离度（Tb.Sp）。采用苏木素-伊红（HE）染色和马松（Masson）染色检查股骨组织病理学改变。采用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色分析骨组织中破骨细胞。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测骨组织基质金属蛋白酶-9（MMP-9）,组织蛋白酶K（CTSK）,抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRAP5b）的含量;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测骨组织中核转录因子-κB受体活化因子配体（RANKL）,骨保护素（OPG）,碱性磷酸酶（ALP）,骨碱性磷酸酶（BALP）蛋白表达。结果 与正常组比较,OP模型大鼠骨松质部位骨小梁数量明显减少,间距增宽,厚度变薄,连续性差;与模型组比较,GZST中、高剂量组对股骨骨松质的骨小梁改变均有改善作用。Masson染色表明与正常组比较,OP模型组股骨远端骨骺生长板厚度变薄,新生骨面积变小,骨化醇及GZST高剂量组可抑制新生骨的减少。TRAP染色结果表明,与正常组比较,OP组破骨细胞数目明显增加,与模型组比较,GZST中、高剂量组可减少OP大鼠破骨细胞数量。Micro CT结果表明,与正常组比较,OP大鼠BMD,BV,Tb.N,Tb.Th和Conn.D减小,SMI和Tb.Sp显著升高（P<0.01）;与模型组比较,GZST中、高剂量可改善OP大鼠骨质疏松程度,BV,Tb.N显著升高,SMI,Tb.Sp显著降低（P<0.01）。ELISA结果表明,与正常组比较,OP模型组ALP含量显著减少（P<0.01）,MMP-9,TRAP5b和CTSK含量显著增多（P<0.01）;与模型组比较,GSZD高剂量ALP含量显著升高（P<0.01）,MMP-9,TRAP5b和CTSK显著减少（P<0.01）。Western blot结果表明,与模型组比较,骨化醇组及GSZD高剂量组均抑制RANKL蛋白的表达（P<0.05）,提高OPG表达（P<0.05）。结论 本研究表明GZST对OVX联合激素引起的大鼠骨质疏松具有治疗作用,其机制与调节RANKL,OPG相关,为其进一步的临床应用和现代制剂开发奠定了一定基础。