扶正化瘀319方对二甲基亚硝胺所致大鼠肝纤维化及其白蛋白基因表达的影响

目的:观察扶正化瘀319方(简称319方)对大鼠肝纤维化及其白蛋白基因(Alb mRNA)表达的影响。方法:采用二甲基亚硝胺腹腔注射诱发的大鼠肝纤维化模型,分模型组、319方组、秋水仙碱组,分别治疗3周。进行血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和血清白蛋白(Alb)含量、肝组织蛋白、羟脯氨酸(Hyp)含量的检测及肝组织病理学观察、Alb 表达分析。结果:较之模型组,319方组肝组织蛋白含量增高.Hyp 含量显著降低,肝纤维化程度改善明显,其结果与秋水仙碱趋势一致。此外该方可显著提高肝脏 Alb mRNA 的表达。结论:319方有显著促进胶原降解和改善肝细胞功能的作用。     

扶正化瘀方与黄芪汤合用对实验性肝硬化大鼠的治疗作用

目的:观察扶正化瘀方与黄芪汤合用对实验性肝硬化大鼠的治疗作用,探讨补虚中药对肝硬化的治疗作用特点。方法:二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射4周制备肝硬化大鼠模型。成模后模型大鼠分别给予扶正化瘀方、黄芪汤、扶正化瘀方合黄芪汤灌胃2周。观察大鼠体重、肝重、脾重;HE染色观察肝组织炎症病理;天狼星红染色观察肝组织胶原沉积;试剂盒检测大鼠血清肝功能(ALT,Alb,T.Bil)、肝组织SOD活性及MDA含量;盐酸水解法测定肝组织Hyp含量;免疫组化染色观察肝组织α-SMA表达;Western blot检测肝组织α-SMA蛋白表达。结果:与正常大鼠相比,模型大鼠血清ALT,T.Bil明显升高,Alb含量显著降低;肝组织SOD活性下降,MDA和Hyp含量显著升高;肝组织炎症病变和胶原沉积明显,α-SMA表达显著增加。黄芪汤、扶正化瘀方及两方合用均可显著改善模型大鼠血清肝功能,改善肝脏脂质过氧化,降低肝组织Hyp含量,减轻肝组织炎症和胶原沉积,抑制α-SMA表达。在改善肝脏胶原沉积与抑制α-SMA表达方面,两方合用优于单用。结论:扶正化瘀方、黄芪汤、扶正化瘀方合黄芪汤均可改善DMN模型大鼠肝纤维化,两方合用较之各单方组抑制胶原沉积明显,其部分机制在于两方合用可更好抑制肝星状细胞活化。     

二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化中医方证研究

目的：探讨二甲基亚硝胺（DMN）大鼠肝纤维化的中医方证。方法：腹腔注射法制备DMN大鼠肝纤维化模型，分别采用5首不同功效的经典方治疗两周，观察各组大鼠肝组织病理学、羟脯氨酸（Hyp）含量及肝功能变化。结果：造模4周后大鼠形成典型小结节性肝硬化，6周后模型组大鼠肝组织损伤较4周时有所缓解。与6周模型组相比，茵陈蒿汤组大鼠肝组织病理变化、Hyp含量及肝功能均显著改善（P〈0．05或P〈0．01）；黄芪汤组大鼠肝组织病理变化、Hyp古量亦显著改善（P〈0．05或P〈0．01）。结论：茵陈蒿汤、黄芪汤能够有效逆转DMN大鼠肝纤维化，成型期DMN肝纤维化大鼠的主要中医方证为湿热、瘀热内蕴兼气虚。     

扶正化瘀方对博莱霉素诱发大鼠肺间质纤维化的干预作用

目的：探讨扶正化瘀方对肺纤维化的干预作用.方法：采用博莱霉素诱导肺间质纤维化模型,分别观察各组大鼠的死亡率、肺系数、肺组织羟脯氨酸（Hyp）含量以及肺组织形态学变化.结果：与模型对照组比较,扶正化瘀方能显著降低大鼠肺系数和肺组织Hyp含量,改善肺组织纤维化程度.结论：扶正化瘀方具有明显的抗博莱霉素所致的大鼠肺纤维化的作用.     

扶正化瘀方对大鼠肾间质纤维化肾组织基质金属蛋白酶活性调节的作用

目的:探讨扶正化瘀方影响肾间质纤维化大鼠肾组织基质金属蛋白酶(MMPs)活性调节的抗肾纤维化作用机制。方法:大鼠分为正常组、模型组与扶正化瘀方组,以氯化汞灌胃诱导大鼠肾间质纤维化模型,扶正化瘀方组以4g/kg扶正化瘀方灌胃。生化检测血清肾功能、肾组织羟脯氨酸(Hyp)含量;病理染色观察肾组织病理形态改变;蛋白印迹法分析肾组织MMP-13、MMP-2、膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)及金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-1/2)蛋白表达;明胶酶谱法测定MMP-2活性;荧光底物反应法检测MMP-13活性。结果:与模型组比较,扶正化瘀方组明显改善大鼠血清肾功能指标,降低肾组织Hyp含量,减轻肾组织胶原沉积,降低大鼠肾组织的MMP-2、MT1-MMP、TIMP-1/2蛋白表达,降低MMP-2活性,但增加MMP-13活性。结论:扶正化瘀方抗肾间质纤维化的作用机制在于:抑制MMP-2活性,保护肾组织基底膜;抑制TIMP-1表达,提高MMP-13活性与促进病理沉积间质性胶原的降解。     

肝纤康对大鼠肝纤维化的抑制作用及其机制研究

目的观察肝纤康对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的影响并探讨其可能机制。方法用CCl4复制大鼠肝纤维化模型,同时予以肝纤康灌胃治疗,测定血清ALT、MDA、HA、LM及肝组织GSH、Hyp含量,并观察肝组织病理变化。结果模型组血清ALT、MDA、HA、LM及肝组织Hyp含量显著升高,肝组织GSH含量显著降低,肝纤维化病变明显;肝纤康治疗组血清ALT、MDA、HA、LM及肝组织Hyp含量明显降低,肝组织GSH含量明显升高,肝纤维化病变明显减轻。结论肝纤康对大鼠肝纤维化具有明显抑制作用,其机制可能与减轻肝细胞脂质过氧化损伤,减少细胞外基质在肝组织沉积有关。     

扶正化瘀中药治疗肝纤维化大鼠的实验研究

目的研究扶正化瘀中药治疗肝纤维化的作用。方法采用四氯化碳花生油皮下注射结合高脂饲料、酒水饮料复合因素诱导大鼠肝纤维化模型,以大黄虫丸为对照,观察扶正化瘀中药对肝纤维化大鼠的一般情况、肝脾质量、肝功能、肝组织病理形态学的影响。结果扶正化瘀中药可显著改善肝纤维化大鼠的一般情况,抑制肝脾增大,显著改善肝功能,明显减轻肝细胞损害、肝脏脂肪变性和胶原纤维增生的程度。结论扶正化瘀中药有较好的保护肝细胞,改善肝功能,阻止肝纤维化进展甚或逆转肝纤维化病理改变的作用。     

扶正活血不同组方对肝纤维化大鼠相关血清指标及肝组织羟脯氨酸的影响

目的 观察扶正活血不同组方对肝纤维化大鼠相关血清指标及肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量的影响.方法 采用CCL加橄榄油复制肝纤维化大鼠,以扶正活血不同配伍组方(活血健脾益气方、活血滋养肝肾方、活血温补脾肾方)灌胃给药,检测肝纤维化大鼠相关血清指标及肝组织Hyp)含量.结果 与模型对照组比较,各扶正活血方对血清指标层黏连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PⅢP)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)均有明显作用(P<0.01,P<0.05),其中活血健脾益气方、活血滋养肝肾方作用较强;活血健脾益气方、活血滋养肝肾方能明显降低Hyp含量(P<0.05).结论 扶正活血不同组方能改善肝纤维化大鼠相关血清指标,对肝组织Hyp含量也有不同程度的改善作用.     

扶正化瘀方对DMN肝纤维化模型鼠肝细胞凋亡的影响

探讨扶正化瘀方(主药:丹参、桃仁、蝙蝠蛾青霉菌、绞股蓝、松花粉、五味子)对DMN肝纤维化大鼠肝脏细胞凋亡的影响。Wistar雄性大鼠 60只,随机分造模组及正常对照组。其中 52只隔日腹腔注射 0 .5% DMN造模, 4周后随机分为模型对照组、扶正化瘀方组、秋水仙碱组,各组分别以自来水、3. 69g·100ml-1扶正化瘀方、0 .1%的秋水仙碱按 10ml·kg-1灌胃,每周 6次,共 4周;正常对照组 8只,前 4周腹腔注射生理盐水,后 4周用自来水灌胃。8周时处死动物取材,检测相关指标。结果:扶正化瘀方组大鼠死亡率、腹水发生率较模型组明显降低,肝功能好转;肝组织Hyp含量以及肝组织胶原分期下降,纤维化程度减轻;肝组织α- SMA表达明显降低,HSC凋亡增多,肝细胞凋亡减少,与模型组相比均有显著性差异。结论:促进活化HSC凋亡、抑制肝细胞凋亡是扶正化瘀治疗肝纤维化的机理之一。     

八宝丹对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化干预作用研究

目的观察八宝丹对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化的干预作用。方法 90只SD雄性大鼠随机分为对照组和造模组,以0.5%DMN按2μl/g体质量腹腔注射4周复制大鼠肝纤维化模型。4周末造模组大鼠随机分为模型组,八宝丹高、中、低剂量组,扶正化瘀组;用药各组灌胃相应药物,正常组和模型组灌胃等剂量的0.5%羧甲基纤维素钠(CMC),给药4周。8周末处死动物,留取标本。检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性和白蛋白(ALB)、总胆红素(TBIL)含量;测定肝组织中羟脯氨酸(Hyp)含量;HE染色和天狼猩红染色观察肝组织病理学改变。结果与正常组比较,模型组血清TBIL、ALT、AST水平明显升高(P0.05),各药物组干预后,血清学指标TBIL、ALT、AST均有所降低;HE染色显示模型组肝脏内有大量炎性细胞浸润、肿胀、变性坏死,有明显出血现象;天狼猩红染色显示模型组大鼠肝脏胶原增生明显,形成假小叶,胶原面积明显增加;模型组肝组织Hyp含量较正常组明显升高(P0.01),药物干预后肝组织炎症和纤维化程度较模型组均有所改善,肝组织羟脯氨酸含量明显降低,高、中剂量八宝丹组和扶正化瘀组较模型组肝组织胶原沉积明显减轻(P0.05),扶正化瘀组与八宝丹高剂量组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论八宝丹对DMN诱导的大鼠肝纤维化有较好的逆转作用,高剂量八宝丹的疗效相对于中低剂量的八宝丹更为突出;八宝丹高剂量组与阳性对照药物扶正化瘀胶囊组对大鼠肝纤维化的干预效果类似。     

The Protective Effect of Gan Shen Fu Fang on Liver Endothelial Cells in Common Bile Duct‑ligated Rats

Objective: To elucidate the protective effect of Gan Shen Fu Fang (GSFF) on liver endothelial cells in common bile duct?ligated (CBDL) rats. Materials and Methods: Cirrhosis was induced by common bile duct ligation. The rats were divided into three groups: sham group, CBDL group, and GSFF group. After 2 weeks of ligation, rats in the GSFF group were administered GSFF. After 4 weeks, the hydroxyproline (Hyp) content of liver tissues was spectrophotometrically determined. The histological changes were evaluated by H and E and Masson staining. Transmission electron microscopy (TEM) and scanning electron microscopy (SEM) were used to observe the ultrastructural changes in the liver, especially in the liver sinusoidal endothelial cells (LSECs). Results: Hyp synthesis was significantly inhibited by GSFF, which agreed with the results from H and E and Masson staining for liver fibrosis. The TEM observations of CBDL rats revealed reduced hepatocyte microvilli and deposited fibrous tissue underneath LSECs. SEM confirmed the TEM findings and showed that the fenestrae of LSECs decreased and even disappeared in CBDL rats. The morphological results indicated hepatic sinusoid capillarization. GSFF promoted the restoration of fenestrae and reversed hepatic sinusoid capillarization. Conclusion: GSFF can inhibit Hyp synthesis, restore the fenestrae of LSECs, and reverse hepatic sinusoid capillarization in CBDL rats. These results provide a basis for future detailed investigations of the mechanism of action of GSFF in LSECs.     

复肝宁对免疫性肝纤维化大鼠HYP SOD MDA的影响

目的:通过大鼠肝纤维化动物模型,研究中药复方复肝宁治疗肝纤维化的效果及部分作用机制。方法:采用猪血清诱导免疫性肝纤维化动物模型。70只大鼠随机分6组:正常组,模型组,秋水仙碱治疗组,复肝宁低、中、高剂量治疗组。造模6周后,各组大鼠给予相应的药物或生理盐水灌胃。实验第10周末,处死动物,并采集肝组织标本。测定肝组织羟脯氨酸(HYP)含量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,通过光镜观察肝病理组织学改变。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝组织HYP含量明显升高(P<0.01)。复肝宁高、中剂量组、秋水仙碱组与模型组比较,HYP(P<0.01);复肝宁低剂量组与模型组比较,HYP(P<0.05)。复肝宁能使肝纤维化大鼠组织SOD活性升高,MDA含量下降。病理学观察显示:与正常组比较,模型组大鼠肝脏出现典型的肝纤维化表现;各治疗组肝纤维化程度较模型组显著降低,特别是复肝宁高剂量治疗组(P<0.01)。结论:复肝宁对猪血清诱导的肝纤维化大鼠有确切治疗作用,其机制是清除氧自由基,抑制脂质过氧化,抑制胶原合成,促进胶原降解。     

肝络通对门静脉高压症大鼠肝组织纤维化的影响

目的:观察肝络通对门静脉高压症大鼠肝纤维化程度的影响,探讨肝络通治疗门静脉高压症的作用机制.方法:取体重250±10 g的清洁级SD雄性大鼠105只,根据体重随机分为假手术组、模型组、心得安组、肝络通组.采用胆总管结扎的方法制作胆汁性肝纤维化门静脉高压症模型.术后2周和4周分别测定各组大鼠肝组织羟脯氨酸的含量,采用Masson染色和透射电镜的方法观察肝组织形态学的变化.结果:肝络通在2周和4周均能显著抑制肝组织羟脯氨酸的合成,且心得安在4周可减少羟脯氨酸的含量.Masson染色显示肝络通显著抑制纤维增生,且缓解肝组织结构紊乱.透射电镜的结果显示,模型组大鼠星状细胞活化、增殖,肝窦内皮细胞窗空减少,内皮细胞下纤维组织增生,肝窦毛细血管化;Disse间隙内肝细胞微绒毛减少或消失.肝络通组Disse间隙可见大量的微绒毛,肝窦内皮细胞窗空清晰可见.结论:肝络通可显著抑制胶原的合成,改善肝窦毛细血管化,阻逆肝纤维化进程,这是肝络通降低门静脉压力的机制之一,同时为开发作用靶点清晰的降低门静脉压力的药物提供了丰富的药理学资料.     

扶正化瘀319方抗大鼠肝纤维化的研究

扶正化瘀３１９方可阻止肝纤维化的进展。对已形成的肝纤维化，３１９方能有效地促使其组织结构及功能的回复，与秋水仙碱、大黄虫丸比较，３１９方显示出较明显的优势。     

软肝宁抗四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化

目的:探讨软肝宁对四氯化碳(CCl4)诱导的实验性肝纤维化大鼠纤维化水平的影响.方法:将60只大鼠随机分为6组:正常对照组,给予生理盐水.模型组,给予20％四氯化碳花生油溶液按10 mL·kg-1 sc,首剂加倍,注射1次/5 d,首次注射后,用生理盐水按10 mL·kg-1ig,1次/d,连续6周.秋水仙碱组(ig 0.1 mg· kg -1).软肝宁高、中、低剂量组(ig0.12,0.06,0.03 g·kg-1)按损伤模型组同法给予CCl4造模,然后给予软肝宁给药,1次/d,连续给药6周后检测大鼠血清中的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)、血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和羟辅氨酸(HYP),并观察大鼠肝组织常规病理改变.结果:软肝宁能改善肝纤维化大鼠的肝功能,具有剂量依赖性地使升高的血清ALT,AST水平降低(P＜0.05或P＜0.01),使降低的ALB水平明显升高(P＜0.05或P＜0.01);软肝宁高、中剂量可显著降低血清HA,LN,PCⅢ水平和肝组织中过高的HYP(P＜0.05或P＜0.01);同时常规病理也提示,软肝宁中、高剂量组可明显减轻CCl4所致的大鼠肝细胞变性、坏死及肝组织损害程度.结论:软肝宁对CCl4诱导的大鼠肝纤维化有良好的防治作用.     

下瘀血汤对进展期大鼠肝纤维化的抑制作用及其方证探讨

目的：探讨下瘀血汤对进展期四氯化碳（CCl4）大鼠肝纤维化的干预作用。方法；采用50％CCl4 2ml／kg体重皮下注射，每周2次;第9周开始随机分为模型对照组、下瘀血汤组及小柴胡汤组（灌胃给药）；用药的同时继续CCl4造模至12周末杀鼠取材。观测肝功能、肝组织病理学、肝组织羟脯氨酸（Hyp）含量变化。结果：8周末模型大鼠肝功能显著异常，肝组织Hyp含量显著增加，肝纤维化明显；12周末模型对照组天冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、γ-L-谷氨酰转肽酶（GGT）、总胆红素（TBil）、Hyp进一步增高，且ALP、GGT、TBil显著高于8周模型对照组（P〈0．05）。与12周模型对照组比较，下瘀血汤组丙氨酸氨基转移酶（ALT）、AST、ALP、GGT、TBil、Hyp显著降低（P〈0．05或P〈0．01）。结论：下瘀血汤能显著抑制造模因素持续刺激条件下进展期肝纤维化的发展，疗效优于小柴胡汤，方证相关有其病理学基础。     

益气软肝方与肝刺激因子对大鼠免疫性肝纤维化保护作用的对照研究

目的：通过与肝刺激因子(HSS)保肝作用的比较，评估益气软肝方(PGSL)对肝纤维化的保护作用。方法：大鼠肝纤维化模型由人血清白蛋白制备。PGSL保护组予PGSL中药汤剂每日两次灌目，HSS保护组同时予HSS每周两次腹腔内注射，共8周。结果：PGSL及HSS均可以降低肝纤维化大鼠的死亡率；肝组织羟脯氨酸测定、大体标本、HE染色、嗜银及VG染色，提示二者均可以降低大鼠肝纤维化的增生程度。上述两个保护组比较均无统计学差异。结论：益气软肝方预防肝纤维化的作用与肝刺激因子相似。     

大黄素对大鼠肝纤维化形成的影响

目的；研究大黄素对肝纤维化的影响。方法：采用４０％的四氯化碳（ＣＣｌ４）给予大鼠皮下注射诱导肝纤维化，并以小，中和大剂量大黄素（２０，４０和８０ｍｇ／ｋｇ体重）干预，测定血清透明质酸，层粘连蛋白及肝组织羟脯氨酸，并通过光镜和电镜观察肝组织病理变化。结果：大黄素组较模型组；（１）血清透明质酸及层粘连蛋白显著降低；（２）肝组织胶原蛋白含量明显减少；（３）肝组织纤维化程度明显改善；（４）肝细胞损伤减轻。     

四逆散加味抗大鼠肝纤维化作用机制

目的:探讨四逆散加味对肝纤维化的防治作用机制.方法:80只Wister大鼠随机分为8组:正常对照组、病理模型组、四逆散组、四逆散加味高、中、低剂量组、四逆散预防组.除正常对照组外,其余各组均采用猪血清ip诱发肝纤维化,0.5 mL/只,2次/周,连续10周,5周后即可形成肝纤维化.预防组于造模同时给药(以四逆散加味7 g·kg-1),各治疗组于造模第6周给药,连续4周.四逆散组4 g·kg-1,四逆散加味高、中、低剂量组(14,7,3.5 g·kg-1).采用酸性水解法检测肝组织羟脯氨酸(HYP)含量;放射免疫法(RIA)检测肝组织白介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;原位杂交、免疫组化法分别检测肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA与蛋白表达.结果:与模型组比较,四逆散加味中剂量组大鼠肝组织羟脯氨酸( 478.32±42.35)vs(327.09±39.41)μg·L-1,P＜0.01;IL-1(0.58±0.89) vs(0.35±0.47) μg· L-1(P＜0.05);TNF-α (4.82±0.49) vs (4.21±0.45)μg·L-1(P＜ 0.05),含量均显著降低,TGF-β1mRNA(9.92±2.57)vs(5.27±1.39),(P＜0.01)和α-SMA mRNA(12.87±0.39)vs(6.33±0.72),(P＜0.01)及其蛋白表达显著减弱(均P＜0.01).结论:四逆散加味有明显的抗肝纤维化作用,其机制可能与抑制TGF-β11和α-SMA基因表达有关.