三七总皂甙对新生鼠窒息心肌细胞凋亡的影响

目的:建立近似人类新生儿窒息的病理过程的新生鼠窒息心肌损伤模型,观察心肌细胞凋亡及使用三七总皂甙(TPNS)后心肌细胞凋亡的变化。方法:出生7天SD大鼠88只,雌雄不拘,随机分为对照组(n=8只),窒息组(n=40只),窒息+TPNS(n=40只)。将大鼠分别放入55ml的磨口瓶中,瓶内放入0.005kg的钠石灰,待大鼠安静后,窒息组,窒息+TPNS组塞紧瓶塞0.5h,取出吸氧120min后,放回母鼠身边继续喂养,分别于窒息后6h、24h、48h、72h、7天后处死;对照组放入55ml的磨口瓶中0.5h不塞瓶塞,取出吸氧120min后放回母鼠身边继续喂养,6h后全部处死。采用TUNEL法测定心肌细胞凋亡,每组各随机抽取一个标本做电镜片HE染色的光镜病理片。结果:①窒息组、窒息+TPNS组各时段的心肌病理切片有明显的心肌细胞坏死,炎性细胞浸润和出血;电镜切片下有心肌细胞线粒体普遍肿胀,细胞核肿胀,染色质边集,肌纤维融合,Z线不清,线粒体空泡,脊模糊稀疏;对照组光镜和电镜病理切片均正常;②窒息组,窒息+TPNS组各时段心肌细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.01),有明显统计学差异;③窒息组各时段心肌细胞凋亡率明显高于窒息+TPNS组(P<0.05)。结论:窒息时心肌细胞凋亡率上升是心肌损伤的一种形式;使用三七总皂甙后能明显减轻心肌细胞凋亡率,提示三七总皂甙对窒息所致心肌损伤有明显保护作用。     

维生素C、E对病毒感染心肌细胞活性的影响

维生素Ｃ、Ｅ对病毒感染心肌细胞活性的影响张福明，张淑琴，王相峰（白求恩医科大学第一临床学院，长春１３００２１）ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＶＣａｎｄＶＥｏｎＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆＭｙｏｃａｒｄｉａｌＣｅｌｌｓＦｒｏｍＶｉｒｕｓＩｎｆｅｃｔｉｏｎ￥ＺｈａｎｇＦｕｍ...     

叶酸缺乏孕鼠子代脑组织超微结构的变化

目的:观察叶酸缺乏孕鼠子代胎鼠脑组织超微结构的改变,为叶酸缺乏造成脑发育障碍提供细胞水平的依据。方法:雌性SD大鼠实验组30只、对照组20只,分别饲以不合叶酸和含叶酸2 mg/kg的纯合饲料,2 w后与雄鼠交配,于怀孕第20 d将孕鼠剖腹取胎。用透射电镜观察胎鼠额区皮层超微结构的改变。结果:实验组胎鼠额区皮层神经元出现核切迹、局灶性核周腔扩张、异染色质减少、胞质内细胞器肿胀、核糖体减少;某些胶质细胞亦见类似改变;神经毡膜性结构不完整。结论:母体叶酸缺乏能造成其子代胎鼠皮层脑组织超微结构的变化,可能导致神经元功能的紊乱和丧失,以致防碍脑结构和功能的正常发育。     

叶酸缺乏孕鼠子代脑组织DNA甲基化变化

目的: 从分子水平探讨叶酸缺乏(FD)对胎鼠脑发育的影响。方法: 雌性SD大鼠实验组30只、对照组20只,分别饲以不含叶酸和含叶酸2 mg/kg的纯合饲料,2w后与雄鼠交配,于孕D20将孕鼠剖腹取胎,观察FD对胎鼠发育的影响,HPLC法检测孕鼠妊晚期末血清叶酸、胎鼠血清叶酸及胎鼠脑组织DNA甲基化水平。结果: (1)实验组孕鼠交配前及妊晚期末血清叶酸均明显低于对照组(P<0.01),外周血出现多分叶核粒细胞。实验组胎鼠血清叶酸也明显低于对照组(P<0.01),出现巨幼红细胞,RBC和Hb均低于对照组(P<0.01),且伴宫内生长迟缓。(2)实验组胎鼠脑组织DNA甲基化水平低于对照组(P<0.05),且与孕鼠及胎鼠的血清叶酸浓度呈正相关。结论: 母体FD时胎鼠的脑组织DNA甲基化水平降低,可能是胎鼠脑发育障碍的机制之一,受孕前后增补叶酸宜延长至妊娠结束。     

维生素E对培养心肌细胞脂质过氧化损伤的保护

应用氢过氧化枯烯引发体外培养的乳鼠心肌细胞脂质过氧化损伤过程，观察了添加维生素Ｅ（２００ｍｇ／Ｌ的α－生育酚）的影响。结果显示：维生素Ｅ能明显减轻细胞脂质过氧化物的蓄积、细胞内肌酸激酶漏出和ＤＮＡ断裂，保护细胞膜流动性、肌球蛋白轻链肌酸激酶和头部ＡＴＰ酶的活性；但对￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入的影响不显著。表明维生素Ｅ具有抵抗脂质过氧化所致心肌细胞损伤的作用。     

脂质过氧化作用对培养心肌细胞维生素E含量及膜流动性的影响

应用氢过氧化枯烯引发培养乳鼠的心肌细胞脂质过氧化损伤，观察维生素Ｅ含量及细胞膜流动性的变化。结果显示：脂质过氧化作用能引起心肌细胞维生素Ｅ含量明显下降，其中以ｒ一生育酚的消耗更为显著，细胞膜流动性也降低。提示维生素Ｅ在对抗心肌细胞脂质过氧化损伤上起重要作用。     

维生素A与维生素E增强叶酸防畸效果的研究

为观察维生素A与维生素E能否增强叶酸的防畸效果 ,采用环磷酰胺致大鼠胎鼠发育畸形作为动物模型 ,孕鼠在孕期分别补充叶酸和叶酸 +维生素A +维生素E ,观察其防畸效果。结果显示孕鼠不补充叶酸和维生素、单独补充叶酸和联合补充叶酸、维生素A和维生素E使胎鼠脑膨出率分别为 87 2 7%、42 0 3%和 30 0 8% (P <0 0 1)。联合补充组与单独补充叶酸组相比 ,脑膨出率降低更为明显 (P <0 0 5 ) ,上枕骨骨化程度明显提高 (P <0 0 1) ,胎鼠平均体重增加 (P <0 0 5 )。结果提示叶酸、维生素A、维生素E有明显促进胚胎发育及拮抗环磷酰胺的致畸作用 ,且叶酸与维生素A、维生素E联合应用的作用明显优于单独补充叶酸     

X射线对体外培养乳鼠心肌细胞损伤的实验研究

目的 研究X射线对体外培养的心肌细胞活性及凋亡的影响。方法 体外培养新生大鼠心肌细胞,分为对照组和放射组,放射组分别用X射线10Gy、20Gy、30Gy、40Gy单剂量照射心肌细胞,采用MTT法观察X射线对乳鼠心肌细胞活性的影响;血生化自动分析仪定量测定X射线作用后心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)的改变;吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)双染色法在激光扫描共聚焦显微镜下观察心肌细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪定量检测心肌细胞的凋亡率。结果 ①X射线剂量在10~40Gy均能抑制心肌细胞活性并成剂量依赖性;②细胞心肌酶谱检测到LDH释放量与X射线剂量相关;③流式细胞仪发现心肌细胞凋亡率与X射线照射剂量有相关性。结论 本研究结果显示X射线对心肌细胞有毒性作用,可致心肌细胞损伤,表现为心肌细胞坏死和凋亡发生率增加。     

乳鼠心肌细胞原代培养方法

目的:探讨新生乳鼠心肌细胞原代培养的条件和方法,培养纯度高、存活时间长的心肌细胞。方法:参照Simpson等的方法加以改进,采用含0.05%EDTA的胰蛋白酶多次消化心肌,差速贴壁1.5 h纯化心肌细胞进行培养,培养过程在37℃、5%CO2条件下进行。用台盼蓝染色法检测培养细胞的存活率,倒置显微镜下观察细胞形态变化,记录3 d、6 d、9 d、12d心肌细胞搏动频率,测定细胞活力。结果:原代培养乳鼠心肌细胞生长良好,培养3 d、6 d、9 d、12 d时,用台盼蓝染色法检测心肌细胞的存活率均大于96%,培养12 d时仍为97.02%。在倒置显微镜下观察,培养48 h左右的细胞之间相互连接的并有细胞搏动。培养6 d、9 d、12 d的细胞与培养3 d的相比,活力增强,差异显著(P<0.05),从6 d开始,细胞活力并未显著增强,两两比较均无统计学差异(P>0.05)。结论:应用此方法培养的心肌细胞纯度高,存活时间长,是一种稳定、可靠的原代心肌细胞培养方法。     

同型半胱氨酸体内外诱导鼠胚胎心肌细胞凋亡的研究

目的 探讨同型半胱氨酸(HCY)是否能诱导啮齿类动物胚胎心肌细胞凋亡及剂量与凋亡的关系。 方法 应用大鼠胚胎心肌细胞体外培养及小鼠体内致畸实验,加入4-20 mmol/L的HCY,经荧光显微镜及透射电镜观察细胞凋亡情况。 结果 体外心肌细胞培养中,心肌细胞凋亡的比例随着HCY剂量的增加而增加。培养12 h出现凋亡,14 h达到高峰。小鼠体内致畸实验,给予孕鼠HCY 0.74 mmol/kg,胚胎心肌和脑组织中凋亡细胞明显可见。 结论HCY可以诱导胚胎心肌细胞凋亡,可能是HCY导致胚胎发育异常的机制之一。     

硒和维生素E对白血病细胞凋亡及c-Myc基因表达的影响

目的 :　研究 Se和 VE对白血病细胞凋亡及 c- Myc基因表达的影响。方法 :　体外培养白血病细胞株 HL- 6 0、K5 6 2 ,培养时分别添加 Se(8μmol/L)和 VE(1 0 0 μmol/L)。利用 DNA凝胶电泳技术及 Northern杂交技术检测细胞凋亡和癌基因表达。结果 :　Se和 VE均能诱导白血病细胞 HL- 6 0和 K5 6 2细胞凋亡。VE(1 0 0 μmol/L)能够抑制 HL- 6 0细胞中 c- Myc基因的表达 ,结果有显著性 ;VE却不能抑制 K5 6 2细胞内 c- Myc基因的表达。相反 ,Se(8μmol/L)不能够抑制 HL-6 0细胞中 c- Myc基因的表达 ,却能抑制 K5 6 2细胞内 c- Myc基因的表达 ,结果有显著性。结论 :　抑制 c- Myc基因的表达 ,诱导白血病细胞凋亡是 Se、VE抑制白血病细胞增殖的重要途径之一。对于髓系和非髓系白血病细胞 ,Se与 VE对 c- Myc基因的表达的影响迥然不同 ,提示二者的作用机制是不同的。     

食物中维生素A、叶酸和维生物E的生物利用和表达方式

概括了食物中的三种重要维生素 :即维生素A、叶酸和维生素E的生物吸收、生物利用、生物转化、生物效力和表达方式。并指出了不同表达方式各自的优缺点以及它们之间的转换关系。阐明了三种维生素的生物利用和表达方式对于分析方法、食物营养标签、食物成分数据库以及DRIs制定的重要意义 ,并提出了今后研究方向     

维生素E、硒对急性肝损伤期肝细胞凋亡影响的研究

目的: 了解饲料维生素E (VE) 和硒 (Se) 对大鼠急性损伤期肝细胞凋亡的调节作用。方法: 采用腹腔内注射50%CCl4制备大鼠急性肝损伤模型,在饲料中添加适量VE(250 mg/kg)和Se(0.2 mg/kg)进行营养干预,用ALT、AST等肝功能指标及病理组织学观察的方法检测抗氧化剂对肝细胞的保护作用;用原位凋亡(TUNEL)技术结合组织学形态观察的方法检测抗氧化营养素对肝细胞凋亡的影响。结果: 注射CCl4后大鼠ALT和AST值均显著增高;肝细胞凋亡数少于正常对照组; 饲料补充VE和Se后肝损伤程度减轻;肝细胞凋亡数增高。结论: 饲料中添加适量VE和Se可减轻CCl4对大鼠肝细胞的损伤并促进其凋亡。     

维生素D摄入水平对孕鼠骨代谢的影响

目的:研究大鼠孕期维生素D摄入水平对胎鼠的影响。方法:24只怀孕大鼠随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,Ⅰ组为正常对照组(每公斤饲料含维生素D 1 500 IU),Ⅱ组为补充维生素D组(每公斤饲料含维生素D 5 000 IU),Ⅲ组为缺维生素D组(饲料中不添加维生素D)。用含有不同维生素D剂量的饲料喂养怀孕大鼠,观察孕鼠血清钙、磷水平的变化及尿钙和尿羟脯氨酸的变化,观察新生鼠的体重、身长、尾长。计算各组孕鼠平均产仔数。结果:与对照组比较,Ⅱ组孕鼠尿钙升高(P<0.05),尿羟脯氨酸无变化,Ⅲ组孕鼠尿钙和羟脯氨酸均升高(P<0.01);各组子鼠骨骼无畸形,发育指标无统计学差异;平均每只大鼠的产仔数目以补充维生素D组最多(平均每只孕鼠产仔11只),缺维生素D组最少(平均每只孕鼠产仔4只)。结论:孕期缺乏维生素D会使孕鼠骨吸收增强,产仔数减少,未发现维生素D缺乏对子代大鼠发育的影响。     

硒和维生素E缺乏诱导大鼠肝细胞凋亡

目的　研究硒 (Se)和维生素 E(VE)缺乏对大鼠肝细胞的影响。方法　以天然低Se低 VE的克山病病区粮作为饲料进行动物试验 ,与人工半合成低 Se低 VE饲料的实验互相印证 ;用光镜、电镜、流式细胞术 (FCM)、末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记 (TUNEL)、DNA琼脂糖凝胶电泳 5种方法进行肝细胞凋亡检测。结果　无论天然饲料还是人工半合成饲料实验 ,低 Se低 VE组光镜下均可见较多肝细胞胞浆着色深 ,核浓缩。主要分布在中央静脉周围。电镜检查天然低 Se低 VE组可见较多肝细胞核体积缩小 ,核染色质呈块状聚集在核膜下。用流式细胞术检测 ,天然低 Se低 VE组较对照组肝细胞凋亡百分率明显增加 ,补 Se和 /或 VE使调亡百分率有所下降 ,以联合补充 Se和 VE凋亡百分率下降最明显。人工半合成饲料低 Se低 VE组凋亡百分率较高 ,补 Se和 /或 VE使凋亡百分率有所下降 ,但均未达到显著差异。无论天然饲料还是人工半合成饲料实验 ,低 Se低 VE组均可见较多 TUNEL染色阳性细胞 ,加 Se和 /或 VE可使上述改变的细胞有不同程度减少。DNA琼脂糖凝胶电泳 ,无论天然还是人工半合成饲料实验低 Se低 VE组均可见 DNA梯状图象 ,其余各组未见梯状改变。结论　Se和 VE缺乏可诱导大鼠肝细胞凋亡     

超声对活鼠胚胎心肌细胞凋亡影响的研究

目的 观察诊断级超声波对活鼠胚胎心肌细胞Bcl-2及Bax表达及其凋亡的影响。方法 采用孕14d的Wistar大鼠36只,分为6组,分别为2.5MHz照射10 min、7MHz照射10 min、10 min对照组、2.5MHz照射40 min、7MHz照射40 min、40 min对照组(7MHz探头,Isppa=227W/cm²,Ispta=385mW/cm²;2.5MHz探头,Isppa=94.5W/cm²,Ispta=15.6mW/cm2)。采用免疫组化检测胎鼠心肌Bax及Bcl-2的表达,用TUNEL法及电镜检测胎鼠心肌细胞的凋亡情况。结果 统计显示同一样本不同胚胎间差异无显著性(P>0.05)。7MHz照射40 min组胎鼠心肌组织Bcl-2(+),Bax蛋白阳性(+),2.5MHz照射40min组胎鼠心肌组织Bcl-2阳性(+),Bax阳性(-),7MHz照射10min组胎鼠心肌组织Bcl-2(+),Bax蛋白阴性(-),2.5MHz照射10 min组胎鼠心肌组织Bcl-2阳性(+),Bax阳性(-),两组对照组两者均为(-);TUNEL试验及电镜显示7MHz照射40 min组较其他组凋亡差异有显著性(P<0.05),其余各组与对照组之间差异无显著性(P>0.05)。结论 较高强度诊断级超声波较长时间辐照可导致胎鼠心肌细胞凋亡,Bcl-2及Bax在该过程中起调节作用,小剂量的超声波可以促进Bcl-2表达来抑制细胞凋亡。     

维生素E对手机辐射致孕鼠及胎鼠脑组织损伤的干预作用

目的研究妊娠期补充维生素E对受手机辐射后产生损伤的母鼠及胎鼠脑组织的保护作用。方法 40只清洁级受孕大鼠随机分为5组(阳性对照组,阴性对照组,维生素E低、中、高剂量组)。自妊娠第1天起,维生素E低、中、高剂量组孕鼠分别按5、15和30mg/ml的剂量补充维生素E花生油溶液,阴性对照组和阳性对照组灌服脱维生素E的花生油,同时用辐射频率900MHz手机对阳性对照组和高、中、低剂量组给予1h/次,3次/d的手机辐射处理,连续辐射21d。分娩后取胎鼠右侧海马组织电镜观察胎鼠脑组织中海马区神经细胞损害程度。测定孕鼠及胎鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)的含量。结果与阴性对照组相比,阳性对照组胎鼠脑组织中可见神经元、神经胶质细胞线粒体肿胀,毛细血管周围轻微水肿,核染色质浓缩、边集,血管内皮细胞有空泡形成。中、高剂量组神经细胞和毛细血管异常现象不如阳性对照组的明显。高剂量组神经元可见核染色质均匀,胞质内富含线粒体、粗面内质网和大量的游离核糖体。全部切片未见神经细胞凋亡。在抗氧化酶活性实验中,阳性对照组与阴性对照组相比,母鼠和胎鼠脑组织中SOD、GSH-Px活性明显降低,MDA的含量显著升高,且均有统计学意义(P<0.05)。与阳性对照组相比较,维生素各剂量组的胎鼠脑组织中SOD、GSH-Px的活性均升高,且中、高剂量组MDA含量均降低。高剂量组母鼠脑组织中SOD、GSH-Px的活性明显升高,MDA含量明显降低(P<0.05)。中剂量组母鼠脑组织中SOD的含量较阳性对照组亦有明显升高(P<0.05)。并且随着剂量的增加SOD、GSH-Px的活性具有升高的趋势,MDA含量有下降的趋势。结论在一定的剂量下,维生素E对手机辐射所致胎鼠海马区神经细胞和毛细血管异常具有一定的保护作用,对孕鼠及胎鼠脑组织所产生的抗氧化系统的损害具有保护作用。     

妊娠期糖尿病孕妇妊娠晚期血清维生素A和维生素E水平

目的 分析妊娠期糖尿病(GDM)孕妇妊娠晚期血清维生素A和维生素E水平.方法 随机选取陕西中医药大学第二附属医院产孕28周以上的218例孕妇,检测孕妇妊娠晚期血清维生素A、E水平.结果 血清维生素A正常者(0.3～0.7 mg/L)172例,占78.90％,平均(0.41±0.07)mg/L,异常率为21.10％,以不...     

X射线对体外培养乳鼠心肌细胞损伤的初步实验研究

目的：初步探讨一定剂量的X射线对体外培养乳鼠心肌细胞的损伤。方法：全自动生化分析仪定量测定不同剂量X射线照射后第24小时心肌细胞培养基乳酸脱氢酶（1actate dehydrogenase,LDH）的含量;激光扫描共聚焦显微镜观察心肌细胞经40GyX射线照射后第24h的形态学改变。结果：心肌细胞有较高的辐射抗性,在0Gy～30Gy的放射剂量下心肌细胞培养基乳酸脱氢酶的含量变化不是很明显（P〉0．05）;当放射剂量≥40Gy时培养基乳酸脱氢酶的含量显著升高（P〈0．05）;激光扫描共聚焦显微镜观察到经40GyX射线照射后第24h的典型的心肌细胞形态学改变。结论：一定剂量的X射线对心肌细胞有直接损伤作用。     

硒和维生素E对大鼠糖尿病易感性的影响

目的 :　观察硒 ( Se)和维生素 E( VE)对糖尿病 ( DM)易感性的影响。方法 :　应用膳食低 Se复加注射链脲佐菌素 ( STZ)法制成大鼠 DM模型 ,补充一定剂量的 Se和 (或 ) VE,观察对大鼠 DM易感性的影响。结果 :　膳食低 Se、低 VE可明显增加大鼠 DM易感性 ,表现为血清 C肽水平和胰岛 C肽分泌贮备显著降低 ,血糖明显升高 ,并可显著增加 DM大鼠死亡率。在膳食中联合补充 0 .2 mg Se、50 0 mg VE/ kg,明显增加了 DM大鼠血清和胰岛 C肽含量、降低 DM大鼠血糖水平 ,亦使 DM大鼠死亡率显著降低。结论 :　在 DM亚临床状态下 ,联合补充适量 Se和 VE可改善胰岛内分泌细胞代谢偏移及功能紊乱 ,拮抗致病因素的胰岛损伤效应 ,降低 DM易感性。