梅毒螺旋体抗体ELISA测定方法的建立和应用

本文利用合成的梅毒螺旋体多肽作为抗原,建立了检测梅毒螺旋体抗体ELISA测定方法.对正常人(健康体检人员)85名,一期梅毒30例、二期梅毒8例、三期梅毒2例、隐性梅毒10例进行了检测. 该方法的梅毒抗体测试的敏感性为98%,特异性为100%,并具有稳定性好及操作简单等优点 .临床初步应用提示是一种很好的梅毒特异性试验方法.     

梅毒螺旋体抗体ELISA检测方法及结果的评价

梅毒是由梅毒螺旋体引起的具有较强传染性的慢性传染病,可引起全身各组织、器官的损害,并产生多种多样的症状与体征.     

梅毒抗体筛查可疑感染献血者回访结果分析

梅毒是由梅毒螺旋体引起的一类慢性全身性传染病,主要通过性接触传染,亦可通过感染者的血液传播.为防止梅毒的血源性传播,确保临床输血安全,目前血站多采用灵敏度和特异性均较高的TP-ELISA国产试剂在献血者初检和复检中进行血液筛查[1,2].TP-ELISA操作较简便,易于自动化,适合血站的大批量样本筛查,结果亦易于保存[2].     

两种方法检测献血者梅毒抗体的比较

目前 ,国内各采供血机构检测梅毒 (TP) ,多采用快速血浆反应素卡片试验 (RPR )和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)。这两种试验均为TP检测的非特异性血清学试验 ,存在生物学假阳性反应及人工假阳性反应 ,其特异性及灵敏度较差。笔者采用梅毒螺旋体酶联免疫 (双抗原夹心法 )试验 (TP ELISA)与RPR进行对照检测 ,现报告如下。材料与方法1　材料1.1　标本来源 :2 0 0 2年 5～ 6月无偿献血者标本 3980人份 ,经RPR或ELISA法检测为阳性者 17份 ;既往收集并于- 2 0℃保存经TPHA确证的梅毒阳性标本 13份 ;2NCU/ml质控血清 (批号 0 0 10 …     

对一种国产ELISA试剂检测梅毒螺旋体抗体的评价

酶联免疫吸附试验(ELISA)检测梅毒螺旋体特异性抗体(TP)具有灵敏度高,特异性强的特点[3,4].笔者用ELISA试剂盒(双抗原夹心法)在无偿献血人群中检测梅毒螺旋体特异性抗体,并以TPPA和TPHA作对照,发现ELISA的灵敏度逊色于后者,而特异性则非常接近,报道如下.     

三种梅毒螺旋体抗体检测方法比较

梅毒是由苍白螺旋体引起的性传播疾病,梅毒血清学诊断方法为非梅毒螺旋体血清试验和梅毒螺旋体血清试验,这两类血清学方法埘梅毒的诊断具有特异性强、敏感性高等特点,但对早期梅毒螺旋体感染（4周前）的硬下疳患者敏感性较差,对神经梅毒和梅毒孕妇所生新生儿是否感染梅毒的早期诊断,以及经正规抗梅治疗的判愈等尚待研究。国内广泛应用的筛查试验主要为梅毒快速血浆反应素诊断试验（RPR）,梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验TP—Ab（ELISA）的方法检测梅毒螺旋体抗体,梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（treponema pallidum particle assay,TP—PA）,此法敏感度和特异度高,操作方法简单,是TPHA的升级产品,适用于潜伏梅毒及非特异性梅毒螺旋体试验阴性而又高度怀疑为梅毒的患者。     

湖南省株洲市梅毒螺旋体抗体检测结果分析调查

目的 了解湖南省株洲市第一医院患者梅毒感染情况及其分布,为梅毒的全面预防工作提供科学依据.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对株洲市第一医院2010年1月～2011年3月门诊普通患者及术前拟输血患者共29 328例进行梅毒抗体检测,阳性标本用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)法确证.结果 29 328例标本中,男性阳性结果为426例,女性阳性结果为310例,总阳性率为2.51％.在各年龄组均发现有梅毒感染.其中20～40岁组阳性率最高,占55.43％.在感染科室当中,外科患者阳性感染率最高,其次是妇产科.结论 患者血清梅毒抗体在临床科室占一定比例的阳性率,因此对患者,尤其是术前患者进行梅毒抗体检测,可以及时阻断梅毒的传播,有效预防院内感染,并有利于医护人员的自我保护.     

梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验对梅毒筛检的可行性探讨

目的在血液筛捡中选用一种敏感性和特异性均高的检测方法对梅毒抗体进行检测,保证血液质量。方法对检测梅毒抗体的甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP—ELISA）抗原夹心法,被动颗粒凝集试验（TPPA）3种方法进行比较。结果经过统计学处理,TP—ELISA抗原夹心法与金标准法TPPA比较,差异无统计学意义（P〉0．05）,而与TRUST比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论TP—ELISA双抗原夹心法更适宜作为对血液筛检的方法。     

免疫比浊法检测梅毒螺旋体抗体的临床应用研究

目的探讨免疫比浊法在检测梅毒螺旋体抗体的临床应用。方法收集2014年1~10月东莞广济医院皮肤科血清标本480份,用免疫比浊法、梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验(TPPA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别进行检测,阳性结果与TPPA检测不符的标本采用荧光螺旋体抗体吸附试验(FTA-ABS)进行验证;另选择10份TPPA检测滴度为1∶1 280阳性标本,用生理盐水按照1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640、1∶1 280进行稀释,用免疫比浊法和ELISA分别进行检测。结果 TPPA检出阳性标本70份,免疫比浊法检出阳性标本69份,ELISA检出阳性标本73份,4份与TPPA阳性结果不相符的标本经FTA-ABS确认全部为阴性;10份滴度为1∶1 280的阳性标本稀释后用免疫比浊法和ELISA对各个滴度进行检测,其敏感性分别为78.3%和96.7%。结论免疫比浊法、ELISA与TPPA3种方法特异性差异无统计学意义,免疫比浊法可以取代TPPA作为梅毒血清学初筛阳性标本的确认试验在临床上推广应用;敏感性方面免疫比浊法比ELISA低,在检测低浓度标本时差异有统计学意义,免疫比浊法不能取代ELISA作为梅毒螺旋体抗体过筛试验。     

ELISA法检测无偿献血者梅毒特异性抗体设置灰区的意义

目的探讨ELISA法检测无偿献血者梅毒特异性抗体设置灰区的意义。方法献血者标本经ELISA试剂初复检,以Cut off值上下20%为灰区,初复检OD值落在灰区的标本经原批号试剂双孔复测并用TPPA试剂进行确认试验。结果共检测无偿献血者标本13 568份,有176份标本OD值分别落在新创和万泰两种ELISA法试剂设定的灰区内。用新创试剂对89份灰区标本双孔复测,检出36份阳性标本,经TPPA确认32例阳性,53份阴性标本经确认51例阴性。用万泰试剂对87份灰区标本双孔复测,检出38份阳性标本,经TPPA确认34例阳性,49份阴性标本经确认47例阴性。结论灰区标本双孔复检后呈一阴一阳结果时应进行确认试验。对双孔复测后OD值仍处于低值灰区的标本,应按阳性结果进行淘汰。     

患者输血前梅毒螺旋体抗体检测分析

目的分析输血前人群梅毒感染状况,探讨输血前梅毒螺旋体抗体检测阳性的意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测输血前患者血清梅毒螺旋体抗体。结果患者中检测出TP阳性399例,60岁以上阳性180例,占45.11%,比率偏高;与60岁以下的各年龄段患者之间的阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。阳性分布以妇产科、眼科、脑外科、肿瘤科居多。结论 TP-ELISA是输血前患者梅毒螺旋体抗体检测的首选方法,但要注意假阳性的发生,防止误诊导致的医疗纠纷。     

低浓度梅毒螺旋体抗体的调查与分析

目的 探讨改进梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)以检出酶联免疫吸附试验(ELⅠSA)检出的低浓度梅毒螺旋体抗体.方法 使用标准品和家兔免疫血清测试两种方法对低浓度梅毒螺旋体抗体的灵敏度,改进TPPA,从原倍稀释开始检测低浓度梅毒螺旋体抗体标本.结果 两种方法的灵敏度不一致,ELⅠSA初筛试验约可出现11%的低浓度样本,改进TPPA可检出这部分低浓度样本.结论 ELⅠSA检出的低浓度梅毒螺旋体抗体TPPA可通过改进稀释方法检出.     

梅毒螺旋体特异性抗体检测方法的实验室评价

梅毒是由梅毒螺旋体引起的性传播疾病。梅毒螺旋体血细胞凝集（TPHA）、明胶凝集（TPPA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、荧光密螺旋体抗体吸收（VIA—ABS）、蛋白印迹试验（WB）等。特异性试验本研究细胞应用检测了252份血清样本，对临床常用的前4种检测梅毒特异性抗体的方法进行比较。     

三种方法检测梅毒螺旋体抗体的结果比较

目的比较梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)与微粒子化学发光法(CMIA)检测梅毒螺旋体特异性抗体的敏感性与特异性。方法分别用TPPA、ELISA与化学发光法对1 473份患者血清标本进行梅毒螺旋体特异性抗体检测。结果检测的1473份血清标本中,TPPA确证阳性196例,阳性率13.3%。以TPPA作为参照,CMIA敏感性为100%(196/196),特异性为98.9%(1 263/1 277);ELISA的敏感性为97.4%(191/196),特异性为97.6%(1 246/1 277)。结论三种方法具有较好的可比性,CMIA法可用于梅毒抗体的临床筛查。     

ELISA和TRUST法在各期梅毒螺旋体抗体检测中的效果

梅毒具有较高的传染性,对人体有较大的危害,并且近年来梅毒的感染率呈上升趋势.早期梅毒的传染性最强,因此在加强对早期梅毒的检查诊断对梅毒患者的治疗以及预防梅毒传播有着重要意义.本实验室将酶联免疫吸附试验（ELISA）以及甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）两种方法的检测结果进行对比,现报告如下.     

梅毒螺旋体抗体检测中 CLIA 和 ELISA 方法的对比分析

目的：探究化学发光免疫分析（CLIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）等方法在梅毒螺旋体抗体检测中的应用,并进行对比分析研究。方法选取该院于2013年2～8月收治的100例梅毒确诊患者纳入研究组;同期80例体检者纳入对照组。均行 CLIA 和 ELISA 检测,比较2种检测方法的灵敏度及特异度。结果 CLIA 灵敏度为93．0％,ELISA 灵敏度则为88．0％,两者差异无统计学意义（χ2＝1．454,P＞0．05;CLIA 特异度为90．0％,ELISA 特异度为92．5％,差异无统计学意义（χ2＝0．313,P＞0．05）。结论梅毒螺旋体抗体检测方面,CLIA 与 ELISA 灵敏度和特异度无明显差异,应当根据检测目的的不同,选择最为合适的检测方法,同时当结合患者病史及临床症状及体征综合做出诊断。     

TP-ELISA二步法检测梅毒螺旋体抗体产生钩状效应分析

目的通过分析梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)双抗原夹心二步法检测梅毒螺旋体抗体中出现的钩状效应,探讨其对检测结果的影响及避免措施。方法 TP-ELISA双抗原夹心二步法检测结果为阴性,但快速血浆反应素试验(RPR)阳性的4例标本,用稀释法进一步检测。结果 4例标本TP-ELISA结果均为阳性。结论 TP-ELISA二步法在检测梅毒螺旋体抗体特异性抗体时也会出现钩状效应,用稀释法可避免。     

TP-ELISA一步法检测梅毒螺旋体抗体钩状现象研究

目的 通过探讨钩状效应对酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗原夹心一步法检测梅毒特异性抗体结果的影响,评价双抗原夹心ELISA一步法检测梅毒螺旋体特异性抗体的应用价值.方法 采用稀释法,ELISA双抗原夹心二步法和振荡法分别检测怀疑存在钩状效应的血清标本8例;采用ELISA双抗原夹心一步法和二步法分别检测40例健康体检者血清和卫生部临床检验中心提供的梅毒抗体临床科研血清盘一套.结果 8例ISA双抗原夹心一步法检测结果为阴性,怀疑存在钩状效应的患者血清标本,采用ELISA双抗原夹心二步法进行检测时,结果均转为阳性;进行1:2,1:10,1:50和1:100倍稀释后,采用ELISA双抗原夹心一步法进行检测,分别有7例,8例,8例和5例结果转为阳性;将反应板在孵育过程中同时进行振荡,有5例转为弱阳性;ELISA双抗原夹心一步法和二步法分别检测40例健康体检者血清和卫生部临床检验中心提供的梅毒抗体临床科研血清盘,除3例弱阳性结果不符外,其它结果均一致.结论 建立敏感度高的ELISA两步法或采用现有ELISA一步法试剂同时对标本进行原倍和一定倍数稀释后检测,可以既克服钩状效应,又保证检测的敏感度.     

多种梅毒抗体检测方法的比较

目的利用梅毒酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、梅毒螺旋体抗体快速血浆反应素试验(RPR)、梅毒螺旋体胶凝试验(TPPA)和梅毒螺旋体抗体胶体金试纸(金标法)4种不同的方法进行梅毒抗体检测,以探讨方法学的敏感性和特异性。方法用目前常用的TP-ELISA、RPR、TPPA和金标法对67例阳性标本及80例阴性标本分别进行检测。结果 TP-ELISA、RPR、TPPA和金标法的灵敏度分别为95.5%、80.6%、98.5%、91.0%,特异性分别为91.3%、88.8%、97.5%、100.0%,阳性预期值分别为90.1%、85.7%、97.1%、100.0%,阴性预期值分别为96.1%、84.5%、98.7%、93.0%。结论 TP-ELISA是目前筛查梅毒的理想方法。RPR检测梅毒非特异性抗体用于疗效观察及过筛试验。金标法快速方便,很适合应用于急诊标本。TPPA不适合大规模的血液筛查,适用于对筛查后的阳性标本进行梅毒抗体的确证试验。