人心房肌细胞胞嘧啶单核苷酸酶细胞化学与心钠素免疫电镜研究

本研究应用电镜酶细胞化学法和免疫电镜胶体金技术,对人心房肌细胞中的胞嘧啶单核苷酸酶(CMP酶)和心钠素进行了定位和定量研究。心钠素定位于心房特殊颗粒,数量较多,大小均一,直径0.20±0.05μm,分布于整个胞浆中,多聚集成群,尤以肌膜下和核极区较多见。而CMP酶存在于初级溶酶体中,溶酶体大小不一,直径0.30±0.19μm,显著大于心房特殊颗粒(P<0.001),一般在核极区成群分布,也单个散在于肌原纤维之间和肌膜下。常见心房特殊颗粒与初级溶酶体邻近,偶见二者相接触,少数心房特殊颗粒的单位膜上出现CMP酶反应产物。提示初级溶酶体可能参与前心房肽的转化和心钠素释放的调节。     

小鼠胸腺皮质5′-核苷酸酶的细胞化学定位

用Robinson和Kamovsky法,以腺苷-5′-单磷酸或紐?5′-单磷酸为底物,铈为捕获剂,显示BALB/c小鼠胸腺皮质的5′-核苷酸酶。同时使用左旋咪唑抑制非特异性碱性磷酸酶活性。腺苷-5-单磷酸酶和紐?5′-单磷酸酶活性反应产物的细胞化学定位基本相似。此酶活性定位于上皮性网状细胞和某些胸腺细胞的质膜外层,特别是两者的相邻面。5′-核苷酸酶活性也见于巨噬细胞溶酶体和上皮性网状细胞的囊泡、靠近质膜的小泡及一些溶酶体内。本研究就胸腺皮质内5′-核苷酸酶的生物学意义进行了讨论。     

三磷酸腺苷对人胃癌细胞系MGC—803影响的电镜观察

用透射电镜和扫描电镜方法观察了三磷酸腺苷（ＡＴＰ）对人胃癌细胞系ＭＧＣ－８０３影响，结果表明，ＡＴＰ能使ＭＧＣ－８０３细胞的核仁由网状向环状改变，微丝的组装得改善，细胞表面微绒毛减少。提示ＭＧＣ－８０３细胞的恶性表型ＡＴＰ作用下可向正常方向逆转。     

大建中汤对脾阳虚腹痛大鼠大脑皮质三磷酸腺苷含量和三磷酸腺苷酶活性的影响

目的:通过观察大建中汤对脾阳虚腹痛大鼠皮质ATP含量以及钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性的影响,探讨大建中汤对脾阳虚腹痛大鼠的镇痛机制。方法:将大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,大建中汤大、小剂量组。用饮食失调、劳倦过度加苦寒泻下的方法,建立脾阳虚腹痛大鼠模型后分别给予相应治疗。取大脑皮质处理后,采用高效液相色谱法测定各组大鼠皮质ATP含量的变化;采用无机磷法测定钠钾-三磷酸腺苷酶和钙镁-三磷酸腺苷酶活性。结果:与正常对照组相比,脾阳虚腹痛模型组大鼠大脑皮质ATP含量明显升高,钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性显著降低;与模型组相比,大建中汤能显著减少脾阳虚腹痛大鼠大脑皮质ATP含量,增加钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性。结论:脾阳虚腹痛症能使大脑皮质ATP含量升高,钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性降低,大建中汤能下调脾阳虚症动物大脑皮质ATP及上调钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性,这可能是其治疗脾阳虚腹痛的作用机制之一。     

三磷酸腺苷诱导人白血病细胞U937凋亡的电镜观察

目的 为探讨三磷酸腺苷（ＡＴＰ）对人白血病细胞Ｕ９３７的促凋亡作用。方法 应用ＡＴＰ（０．２３ｇ／Ｌ）作用于人白血病细胞Ｕ９３７（ｈｕｍａｎ ｈｉｓｔｏｃｙｔｉｃ ｌｙｍｐｈｏｍａ）,⑴用白细胞计数器每日计数器细胞和计算抑制率;⑵用流式细胞分析仪检测ＡＴＰ对Ｕ９３７细胞周期改变和凋亡的影响;⑶苏木精－伊红以和电子显微镜检测凋亡小体的形成过程;⑷用苯胺黑染色检测凋亡小体的生命本性。结果 ⑴ＡＴＰ对Ｕ     

肌球蛋白三磷酸腺苷酶的染色技术

肌球蛋白三磷酸腺苷酶(mlyosin ATPase)定位于骨骼肌,ATP酶染色是鉴别肌纤维类型及分布的最理想的应酶,对神经性肌萎缩和肌源性肌萎缩的诊断有重要的价值。目前要用钙激活法,该方法较为轻典,但其染色效果受多种因素影响;没有一定的经验,每次实验并不一定都能成功。笔者经过多年的实践与摸索,获得较为稳定且满意的结果,现介绍如下。     

氧自由基对生殖细胞三磷酸腺苷酶和生长抑素的影响

背景：有关细胞自由基的研究,主要集中在动物体内细胞自由基的产生与清除方面。 目的：观察氧自由基对体外培养的睾丸生殖细胞三磷酸腺苷酶(ATPase)和生长抑素含量的影响。 方法：体外分离、纯化小鼠睾丸生殖细胞,培养24 h后,将其分为2组,实验组添加黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶建立氧自由基损伤模型;对照添加生理盐水。继续培养24,48 h,采用酶组化及免疫组化染色观察各组ATPase和生长抑素表达变化。采用LUZEX-F图像分析仪分别测定其灰度值;用酶联免疫检测仪测定492 nm波长的吸光度值。 结果与结论：给药后24,48 h,实验组ATPase、生长抑素灰度值显著高于对照组(P < 0.01),吸光度值显著低于对照组(P  < 0.01)。提示氧自由基可降低ATPase和生长抑素含量,影响生殖细胞在体外培养过程中的生长与增殖。     

前列腺良性增生的5′-核苷酸酶和硫胺素焦磷酸酶定位及其活性的观察

用光镜和电镜研究了人类前列腺增生的上皮细胞内5′-核苷酸酶(5′-Nase)和硫胺素焦磷酸酶(TPPase)的活性。5′-Nase活性定位分布在上皮细胞的溶酶体、高尔基大泡、小泡、分泌泡以及游离面的质膜,腺腔内分泌物质也呈阳性反应。经克念菌素治疗后,酶活性无明显改变;然而用乙烯雌酚治疗后,酶活性稍弱;睾丸切除后的则完全呈阴性反应。TPPase活性定位在高尔基扁平囊泡的凹面,除睾丸切除后的酶反应完全阴性外,其他各种治疗,对酶活性没有明显改变。     

氟伐他汀调节SHR大鼠血管平滑肌细胞钙泵的表达对血管重构的影响及作用机制

目的探讨氟伐他汀（fluvastatin,Flu）对小牛血清（CS）干预的高血压大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖及血管重构的影响并初步探讨其可能的机制。方法CS、Flu和甲羟戊酸（mevalonic acid,Meva）处理血管平滑肌细胞4d,将细胞分为SHR组、SHR＋20％CS组、SHR＋20％CS＋Flu组和SHR＋20％CS＋Flu＋Meva组,采用MTT检测细胞的增殖能力,Transwell检测细胞的迁移能力,体外管样实验、天狼星红染色以及免疫荧光的方法分别检测细胞的管样结构的生成能力、胶原纤维以及F-actin的表达,Western印迹检测PMCA、SERCA和LTCC的表达。结果Flu能够抑制CS促进的VSMCs增殖效应、迁移能力,管样结构生成,胶原蛋白表达,以及骨架蛋白的聚合,并下调VSMCs中PMCA的表达,上调SERCA和LTCC的表达,而Meva则对Flu的作用进行逆转。结论氟伐他汀对CS诱导的VSMCs增殖及血管重构产生抑制,该过程可能是通过调节钙泵的表达实现的,而Meva代谢途径可能在其中发挥了重要的作用。     

胃癌间质肥大细胞及其与癌恶性程度关系的研究

取胃癌手术标本40例,经10%甲醛固定,甲苯胺蓝、Alcian蓝—藏红和GABE液染色,研究胃癌间质肥大细胞计数与癌恶性程度之间的关系。结果表明:胃癌间质肥大细胞的计数与胃癌恶性程度密切相关。恶性程度低组的肥大细胞计数显著高于恶性程度高组(P<0.005)。Alcian蓝—藏红(Csaba法)染色24h,能较好地显示胃癌间质肥大细胞。本文还就上述结果的意义进行了讨论。     

Effect of cyclopiazonic acid,an inhibitor of the sarcoplasmic reticulum Ca‐ATPase,on skeletal muscles from normal and mdx mice

Aim: In this study, we investigated Ca²⁺ loading by the sarcoplasmic reticulum in skeletal muscle from mdx mice, an animal model of human Duchenne's muscular dystrophy, at two stages of development: 4 and 11 weeks. Method: Experiments were conducted on fast‐ (extensor digitorum longus, EDL) and slow‐ (soleus) twitch muscles expressing different isoforms of Ca²⁺‐ATPase, which is responsible for the uptake of Ca²⁺ by the sarcoplasmic reticulum. Results: In sarcoplasmic reticulum vesicles, the ATP‐dependent activity and sensitivity to cyclopiazonic acid (CPA), an inhibitor of the sarcoplasmic reticulum Ca²⁺‐ATPase, were similar in mdx and normal EDL muscle. Furthermore, in chemically‐skinned fibres from both normal and mdx muscles, the presence of CPA induced a decrease in Ca²⁺ uptake by the sarcoplasmic reticulum. However, the sensitivity to CPA was lower in mdx EDL muscle than in normal muscle. In addition, in EDL muscle from 4‐week‐old mdx mice, the expression of the slow Ca²⁺‐pump isoform (SERCA2a) was significantly increased, without any accompanying change in slow myosin expression. In contrast, the expression and function of the Ca²⁺‐ATPase in mdx soleus muscles at 4‐ and 11‐weeks of development did not differ from those in age‐matched controls. Conclusion: These findings show that in dystrophic muscle, where the Ca²⁺ homeostasis was perturbed, the Ca²⁺ handling by the sarcoplasmic reticulum was altered in fast‐twitch muscle, and this was associated with the expression of the slow isoform of SERCA. In these muscles, reduced Ca²⁺ uptake could then contribute to an elevated concentration of Ca²⁺ in the cytosol, and also to Ca²⁺ depletion of the sarcoplasmic reticulum.     

良、恶性B淋巴细胞膜HLA-DR和Mg~(++)-ATP酶的电镜观察

用HLA-DR单克隆抗体和ABC免疫酶标及Mg~(++)-ATP酶组化技术,在电镜下观察B细胞性恶性淋巴瘤及非肿瘤性淋巴组织标本各4例,成功地观察到良、恶性B淋巴细胞膜上均有电子致密黑色的HLA-DR抗原和ATP酶反应物沉淀。良性B细胞膜上反应物量少,分布均匀,恶性B淋巴细胞膜上反应物量多呈不均匀的串珠状分布,这为研究肿瘤性B淋巴细胞在超微结构水平上提供了二种标记物的形态学依据。     

miR-411-5p对胃癌细胞凋亡、增殖和干样特性以及裸鼠成瘤的影响

目的 miR-411-5p对胃癌SGC-7901细胞生物学特性及裸鼠成瘤的影响.方法 荧光定量PCR(RT-qPCR)检测转染效率.5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)染色检测增殖.流式细胞术检测凋亡.干细胞成球实验检测细胞干样特性.蛋白印迹实验检测增殖细胞核抗原(PCNA)、凋亡抑制蛋白(Survivin)、半胱天冬酶-...     

107例胃癌形态测量与预后关系的探讨

采用闭路电视系统对107例胃癌标本进行了形态测量研究。测量结果经计算机做多元回归分析,表明核面积与胃癌预后的关系最大。据此,我们认为形态测量是判断胃癌预后较为重要的指标。     

联检胃癌患者血清CA19-9、可溶性Fas、sFasL的临床意义

目的：通过联检胃癌患者手术前后血清CA19—9和sFas、sFasL水平变化,探讨其在胃癌早期诊断及复发判断的临床意义。方法：采用电化学发光免疫和ELLSA检测40例胃癌患者手术前后血清CA19—9和sFas、sFasL的含量,并与40例健康体检者进行比较。结果：①胃癌患者手术前后血清CA19—9和sFas、sFasL水平比较有显著差异（P〈0．05）。②胃癌手术前血清CA19—9和sFas、sFasL水平与对照组比较有显著差异（P〈0．05）。③手术成功后CA125和sFasL水平与对照组比较无显著差异（P〉0．05）。结论：①sFas、sFasL的高表达与胃癌的发生、发展密切相关;②sFas、sFasL尤其是sFasL可作为胃癌早期诊断新的血清学诊断标志物,与CA19—9联检,对胃癌患者的疗效观察和复发判断有重要的指导意义。     

LINC00659靶向miR-149-5p调控食管鳞癌细胞Eca-109的增殖、迁移、侵袭及放射敏感性

目的 探讨长基因间非编码RNA 00659(LINC00659)是否靶向miR-149-5p调控食管鳞癌Eca-109细胞的增殖、 迁移侵袭及放射敏感性.方法 实时定量PCR(RT-qPCR)分析30对食管鳞癌组织、 对照组织中LINC00659和miR-149-5p表达量.将Eca-109细胞分为si-NC组、si-...     

胃癌和大肠癌患者血淋巴细胞酶活性的变化

目的探讨胃癌和大肠癌患者外周血淋巴细胞Mg2+-ATP酶和G-6-P酶活性变化与肿瘤生物学行为的关系。方法应用光镜酶细胞化学方法对人外周血淋巴细胞Mg2+-ATP酶与G-6-P酶定位,探讨酶活性与肿瘤生物学行为的关系。结果Mg2+-ATPase定位在淋巴细胞膜下方,G-6-Pase定位在细胞质内;两种酶平均光密度(AOD)值在胃癌和大肠癌患者组明显低于正常对照组(P<0.01),且低分化癌组低于高分化癌组(P<0.01),无淋巴结转移组高于有转移组(P<0.05)。结论外周血淋巴细胞Mg2+-ATP酶与G-6-P酶活性与胃肠肿瘤恶性度呈负相关。     

人胎结肠及直肠内SP-及5-HT免疫反应细胞的个体发生

目的　探讨人胎结肠、直肠粘膜P物质免疫反应 (SP IR)细胞的个体发生及其与 5 羟色胺免疫反应(5 HT IR)细胞的关系。方法　取 92 7周因故终止妊娠的人胎结肠、直肠组织 31例 ,用免疫组织化学SABC法及邻片单染法进行定位研究。结果　胎期直肠的SP IR细胞于 11周出现 ,14周结肠内可见。 15 2 7周 ,结肠及直肠中的SP IR细胞始终分散存在 ;与结肠相比 ,同一胎龄直肠SP IR细胞数量较多 ;邻片比较观察发现直肠内部分SP IR细胞与 5 HT IR细胞定位一致。结论　在胎儿期结肠及直肠的内分泌细胞已开始合成SP ,且SP和 5 HT在直肠部分细胞内有共存