微小RNA-130a和微小RNA-130b在肝硬化患者血清中的表达及其意义

目的研究肝硬化患者血清中微小RNA-130a(miR-130a)和miR-130b的表达及意义。方法收集15例肝硬化患者和15例健康志愿者的肘静脉血液,并分别设为试验组和对照组。用反转录聚合酶链式反应法检测血清中的miR-130a和miR-130b的表达情况。结果试验组和对照组的miR-130a相对表达量分别为(1.57±0.36)和(1.40±0.46),miR-130b相对表达量分别为(2.18±0.60)和(1.64±0.26),差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 miR-130a和miR-130b在肝硬化患者血清中的表达量显著高于健康志愿者,其很有可能作为肝硬化早期诊断指标。     

微小RNA-21对肝癌患者的HepG2细胞增殖的调控作用

目的研究微小RNA-21(miR-21)在肝癌HepG2细胞中对增殖的作用并探讨相关的机制。方法收集2012年至2015年本院收治的98例肝癌患者,分离其肝癌组织和癌旁组织,用免疫组化法检测丝裂原激活蛋白激酶激酶3(MAP2K3)的表达情况;肝癌细胞系HepG分为mimic-miR-21组与miR-21抑制药组,分别转染mimic-miR-21与miR-21抑制药。转染48 h后,以3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑法检测在24,48,72 h的HepG2细胞的增殖情况,用实时定量聚合酶链式反应(qPCR)法检测HepG2细胞中miR-21和MAP2K3 mRNA的表达水平,以免疫印迹法检测MAP2K3的表达水平。结果 MAP2K3在肝癌组织与癌旁组织中的表达强度分别为1382±105,5872±289;HepG2细胞转入mimicmiR-21与miR-21抑制药24 h后,mimic-miR-21组与miR-21抑制药组的miR-21 mRNA表达量分别为6.45±1.21,0.43±0.12。mimic-miR-21与miR-21抑制药组的增殖活性在24,48,72 h分别是(100±12)%,(60±18)%;(138±12)%,(45±8)%;(146±9)%,(38±6)%,以上指标组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。HepG2细胞转入mimic-miR-21与miR-21抑制药24h后,mimic-miR-21组与miR-21抑制药组的MAP2K3在RNA表达水平分别为0.17±0.03,0.97±0.09,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 miR-21可通过抑制MAP2K3的表达从而促进肝癌HepG2细胞增殖。     

微小RNA-4491在胃癌血清中的表达及其临床意义

目的 检测微小RNA-4491(miR-4491)在胃癌患者血清中的表达水平,分析其与胃癌临床病理特征的相关性,探讨其单独检测及其与CA72-4联合检测在胃癌诊断中的临床价值。方法 实时荧光定量聚合酶链反应检测胃癌患者和健康受试者血清中miR-4491的表达水平,通过受试者工作特征(ROC)曲线、曲线下面积(AUC)、危险分数分析法评估miR-4491对胃癌的诊断效能,计算灵敏度、特异度、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV),探讨miR-4491独立及与CA72-4联合检测在胃癌诊断中的应用价值。结果 胃癌组和健康对照组血清miR-4491的相对表达水平分别为3.65±4.04和1.29±1.21,二者比较,差异有统计学意义(P<0.01),miR-4491的表达量与胃癌临床分期、淋巴结及远处转移均不相关(P>0.05),但与其病理分化程度呈负相关(P<0.05)。miR-4491独立检测诊断胃癌的AUC为0.78,敏感度、特异度、PPV、NPV分别为84.5%,59.4%,74.0%和72.9%,而CA72-4诊断胃癌的AUC为0.71,敏感度、特异度、PPV...     

微小 RNA-520g、微小 RNA-532在 80例多发性骨髓瘤骨髓组织中的表达

目的 观察多发性骨髓瘤病人骨髓组织中微小RNA-520g(miR-520g)和微小RNA-532(miR-532)的表达,并探讨其临床意义.方法 选取2015年7月至2019年7月西安市中心医院收治的多发性骨髓瘤病人80例为观察组,同时选取同期进行骨髓穿刺并明确骨髓功能无异常的非血液病病人80例为对照组.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测两组骨髓组织中miR-520g、miR-532的表达水平;分析两者与多发性骨髓瘤临床病理特征的关系;采用Pearson法分析miR-520g、miR-532表达的相关性;通过受试者工作特征曲线(ROC)检测miR-520g、miR-532的表达对多发性骨髓瘤的诊断价值.结果 观察组病人骨髓组织中miR-520g表达水平(3.70±0.70)均显著高于对照组(2.79±0.65),观察组miR-532表达水平(0.90±0.24)显著低于对照组(1.32±0.31)(P<0.05).观察组病人骨髓组织中miR-520g、miR-532表达水平与病人临床分期、分化程度、是否发生淋巴结转移相关(P<0.05).ROC结果显示miR-520g诊断多发性骨髓瘤曲线下面积(AUC)为0.827,敏感度为73.8％,特异性为80.0％,miR-532诊断多发性骨髓瘤的AUC为0.855,敏感度为82.5％,特异性为75.0％,二者联合诊断多发性骨髓瘤的AUC为0.922,敏感度为81.3％,特异性为91.2％.结论 多发性骨髓瘤病人骨髓组织中miR-520g呈高表达,miR-532呈低表达,两者呈负相关,且与临床分期、分化程度、是否发生淋巴结转移相关,骨髓组织miR-520g、miR-532表达对多发性骨髓瘤具有一定的诊断价值.     

老年重症肺炎病人血清微小 RNA-146a、微小 RNA-223、微小 RNA-21、微小 RNA-124水平及其与预后的关系

目的探究老年重症肺炎病人血清微小 RNA(miR)-146a、miR-223、miR-21、miR-124表达水平及其与预后的关系。方法选取 2018年 2月至 2020年 3月郑州大学第二附属医院诊治的 128例老年重症肺炎病人、 130例普通肺炎病人分别为重症肺炎组、普通肺炎组,并纳入同期 128例体检健康者为健康组。比较三组血清 miR-146a、miR-223、miR-21、miR-124表达水平及肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)水平;分析老年重症肺炎病人血清 miR-146a、miR-223、miR-21、miR-124表达水平与 TNF-α的相关性;比较不同预后老年重症肺炎病人临床资料和血清 miR-146a、miR-223、miR-21、miR-124水平;分析老年重症肺炎病人死亡的影响因素;分析血清 miR-146a、miR-223、miR-21、miR-124、TNF-α对老年重症肺炎病人预后的预测价值。结果普通肺炎组病人血清 miR-146a、miR-223、miR-21表达水平及 TNF-α水平分别为 1.67±0.56、1.64±0.55、1.71±0.57、(12.78±4.30)ng/L,重症肺炎组病人血清 miR-146a、miR-223、miR-21表达水平及 TNF-α水平分别为 2.32±0.78、2.27±0.76、2.39±0.80、(23.64±7.92)ng/L,高于健康组的 1.03±0.35、1.01±0.34、0.99±0.33、(5.43±1.84)ng/L、(P<0.05)普通肺炎组、重症肺炎组血清 miR-124表达水平分别为 0.71±0.24、0.37±0.13,低于健康组的 1.07±0.37(P<0.05);重症肺炎人血清 miR-146a、miR-223、miR-21表达水平及 TNF-α水组病,平高于普通肺炎组( P<0.05)血清 miR-124表达水平低于普通肺炎组( P<0.05);老年重症肺炎病人血清 miR-146a、miR-223、 miR-21表达水平与 TNF-α呈正,相关( P<0.05)血清 miR-124表达水平与 TNF-α呈负相关( P<0.05);死亡组老年重症肺炎病人血清 miR-146a、miR-223、miR-21、TNF-α水平及有,呼吸系统疾病史、吸烟史、机械通气占比高于生存组( P<0.05),血清 miR-124表达水平、氧分压水平低于生存组( P<0.05); miR-146a、miR-223、miR-21、TNF-α、机械通气是老年重症肺炎病人死亡的危险因素( P<0.05);血清 miR-146a、miR-223、miR-21、miR-124、TNF-α预测老年重症肺炎病人预后的曲线下面积( AUC)分别为 0.84、0.88、0.82、0.66、0.68,其灵敏度分别为 72.5%、80.4%、82.4%、60.8%、60.8%,特异度分别为 85.7%、81.8%、79.2%、67.5%、72.4%。结论老年重症肺炎病人血清 miR-146a、miR-223、miR-21表达水平较高,与 TNF-α水平呈正相关; miR-124表达水平较低,与 TNF-α水平呈负相关。且测定血清 miR-146a、miR-223、miR-21表达水平有助于临床预测老年重症肺炎病人的预后情况。     

微小RNA-885-3p在早期急性肺栓塞诊断中的临床意义北大核心CSCD

目的探讨血浆微小RNA(miR)-885-3p水平在急性肺栓塞(APE)的诊断价值及可能的致病机制。方法实验一:健康成人5例为对照1组,APE患者5例为试验1组,用高通量测序技术检测比较两组血清miRNA相对表达水平,筛选出差异性表达miRNA。实验二:健康成人20例为对照2组,APE患者20例为试验2组,用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测差异表达的miRNA的表达水平,用受试者工作特征曲线(ROC)和曲线下面积(AUC)分析miRNA对APE的诊断价值,并通过生物信息学预测APE可能的发生机制。结果实验一:高通量筛选出37个差异表达的miRNA,APE患者与健康成人比较,miR-885-3p表达差异最为显著,为17.19倍。实验二:qRT-PCR结果显示,APE患者与健康成人的miR-885-3p表达水平分别为1.53±0.08和1.18±0.06,miR-1246表达水平分别为1.62±0.39和1.25±0.10,miR-134表达水平分别为1.68±0.23和1.20±0.23,差异均有统计学意义(均P<0.05)。ROC曲线结果显示,miR-885-3p、miR-1246、miR-134的AUC分别为0.955、0.820、0.894。生物信息学分析结果显示,差异miRNA的靶基因主要富集在丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、糖基化终末产物(AGE)/AGE受体(RAGE)等相关分子或通路上。结论miR-885-3p可作为APE新的诊断标志物,并可能通过促进炎症反应、细胞增殖和凋亡等机制影响APE发生发展。     

结直肠癌病人外周血微 RNA-4435、微 RNA-762的表达及其与临床特征的相关性

目的观察结直肠癌病人外周血微 RNA(miR)-4435、miR-762的表达情况,并分析其与临床特征、预后情况的相关性。方法选取 2017年 6月至 2019年 6月于郑州大学附属郑州中心医院就诊的 100例疑似结直肠癌病人,经手术治疗后按照病理学检查结果分为结直肠癌组( 64例)及非结直肠癌组( 36例)。比较两组外周血 miR-4435、miR-762表达水平;比较不同临床病理特征病人外周血 miR-4435、miR-762表达水平;随访统计结直肠癌病人预后,将生存病人设为生存组,病死病人设为死亡组。比较两组外周血 miR-4435、miR-762表达水平,采用 Cox风险比例回归模型分析结直肠癌病人外周血 miR-4435、miR-762表达水平与结直肠癌预后的相关性。结果与非结直肠癌组( 0.61±0.08、0.89±0.12)比较,结直肠癌组外周血 miR-4435、miR-762(0.96±0.12、1.35±0.24)表达水平升高( P<0.05)。与临床分期 Ⅰ~Ⅱ期( 0.84±0.11)、(0.71±0.09)、浸润深度 T1~T2无淋巴结转移(0.79±0.11)病人比较,临床分期 Ⅲ~Ⅳ期( 1.03±0.15)、浸润深度 T3~T4(1.25±0.15)、淋巴结转移( 1.26±0.21)病人外周血 miR-4435、miR-762表达水平升高(P<0.05)。随访至 2022年 6月,其中生存病人 38例,病死病人 26例,分别设置为生存组、死亡组。与生存组( 0.87±0.09、1.12±0.14)比较,死亡组外周血 miR-4435、miR-762(1.09±0.21、1.69±0.31)表达水平升高( P<0.05)。 Cox风险比例回归分析显示,临床分期、浸润深度、淋巴结转移、 miR-4435表达水平、 miR-762表达水平均是结直肠癌预后不佳的危险因素( P<0.05)。结论结直肠癌病人外周血 miR-4435、miR-762表达水平异常升高,与临床分期、浸润深度、淋巴结转移相关,且均为病人预后不佳的危险因素。     

超声造影定量参数联合血清微小 RNA-139-5p、微小 RNA-15a检测在卵巢浆液性囊腺癌病人中应用价值

目的 分析超声造影定量参数联合血清微小RNA-139-5p(miR-139-5p)、微小RNA-15a(miR-15a)检测在卵巢浆液性囊腺癌病人中应用价值及意义.方法 选取2017年6月至2019年9月重庆市北碚区中医院收治的92例卵巢浆液性囊腺癌病人为腺癌组及92例卵巢浆液性囊腺瘤病人为腺瘤组.行超声造影检查与血清miR-139-5p、miR-15a水平检测,观察超声造影定量参数(始增时间、达峰时间、增强强度)、血清miR-139-5p、miR-15a水平两组间差异,多因素logistic回归分析各指标与卵巢浆液性囊腺癌的相关性,ROC曲线评估其对卵巢浆液性囊腺癌的诊断效能,Pearson相关分析各指标与淋巴结转移的关系.结果 腺癌组超声造影始增时间、达峰时间、血清miR-15a水平分别为(14.16±2.51)s、(22.28±4.64)s、(0.04±0.02),均低于腺瘤组的(17.48±3.09)s、(29.30±4.97)s、(0.11±0.06)(P<0.05),超声造影增强强度与血清miR-139-5p水平分别为(89.24±12.83)dB、(8.76±2.90),均高于腺瘤组的(73.38±10.74)dB、(4.09±2.52)(P<0.05);logistic回归分析显示,超声造影始增时间、达峰时间、增强强度、血清miR-139-5p、miR-15a均与卵巢浆液性囊腺癌具有相关性(P<0.05);ROC曲线显示,超声造影定量参数与血清指标联合诊断卵巢浆液性囊腺癌的AUC为0.896,高于各单一指标,其诊断敏感度为90.22％,特异度为78.26％;有淋巴结转移卵巢浆液性囊腺癌病人超声造影始增时间、达峰时间、血清miR-15a水平分别为(12.53±2.92)s、(19.84±3.69)s、(0.02±0.01),均低于无淋巴结转移病人的(15.59±2.24)s、(24.42±4.87)s、(0.06±0.03),超声造影增强强度、血清miR-139-5p水平分别为(97.35±14.06)dB、(10.14±3.08),均高于无淋巴结转移病人(82.12±11.63)dB、(7.55±2.86)(P<0.05);Pearson相关性分析显示超声造影始增时间、达峰时间及血清miR-15a水平与卵巢浆液性囊腺癌病人淋巴结转移呈负相关,超声造影增强强度及血清miR-139-5p水平与卵巢浆液性囊腺癌病人淋巴结转移呈正相关(P<0.05).结论 应用超声造影定量参数联合血清miR-139-5p、miR-15a检测可显著提升卵巢浆液性囊腺癌早期诊断效能,且其水平与淋巴结转移密切相关,可为临床诊治提供可靠依据.     

微小RNA-197-3p对鼻窦黏膜上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究微小RNA-197-3p(miR-197-3p)通过靶向kruppel样因子4(KLF4)对过敏性鼻炎鼻窦黏膜上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法 选取32例过敏性鼻炎(AR)发作期患者以及30例进行鼻中隔矫正术患者的下鼻甲黏膜组织作为实验标本。用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-197-3p在两种组织中的相对表达量。从AR患者鼻甲黏膜组织中分离鼻窦黏膜上皮细胞培养，并随机分为miR-NC组(转染阴性对照)和miR-197-3p组(转染miR-197-3p模拟物)。用噻唑蓝(MTT)检测各组细胞的增殖能力；用原位末端标记法(TUNEL)检测各组细胞的凋亡率；用蛋白质印迹法检测各组细胞中KLF4蛋白的表达水平。双荧光素酶报告实验检测miR-197-3p与KLF4的靶向关系。结果 AR患者和正常鼻甲黏膜组织中miR-197-3p相对表达量分别为0.44±0.15,0.75±0.21,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-NC组和miR-197-3p组72 h的细胞增殖抑制率分别为(52.05±0.67)%和(42.60±2.30)%,细胞凋亡率分别为...     

微小RNA 761对人卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响北大核心CSCD

目的研究微小RNA 761(miR-761)对人卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法取多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢颗粒细胞培养,随机分为3组,分别为miR-761 inhibitor组(转染miR-761抑制剂),miR-761 mimic组(转染miR-761模拟物),miR-NC组(转染阴性对照寡核苷酸)。用细胞计数法-8(CCK-8)实验检测转染细胞的增殖能力;用TUNEL实验检测转染细胞的凋亡能力;用蛋白质印迹(Western blot)法检测雌激素受体2(estrogen receptor 2,ESR2)的表达。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-761与ESR2之间的结合关系。结果miR-NC组、miR-761 mimic组和miR-761 inhibitor组的细胞存活率分别为(98.33±1.53)%,(121.23±3.74)%,(79.86±3.66)%;细胞凋亡率分别为(6.51±0.26)%,(4.41±0.24)%和(10.48±0.33)%;ESR2蛋白表达水平分别为1.05±0.03,0.74±0.08和3.90±0.28。以上指标,miR-NC组和miR-761 mimic组相比,miR-NC组和miR-761 inhibitor组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-761可与ESR2靶向结合。结论miR-761通过下调ESR2促进PCOS患者卵巢颗粒细胞增殖并抑制细胞凋亡。     

吉西他滨对非小细胞肺癌患者化疗疗效与其病理组织基因表达的相关性

目的观察吉西他滨对非小细胞肺癌患者化疗疗效,分析化疗疗效与病理组织核糖核苷酸还原酶M1(RRM1)和核苷酸切除修复交叉互补基因1(ERCC1)表达的相关性。方法收集96例非小细胞肺癌患者的临床资料,所有患者均经吉西他滨+顺铂化疗,用免疫组化法检测化疗前患者病理组织RRM1、ERCC1的表达情况,化疗3周后分析病理组织RRM1、ERCC1表达情况与患者临床特征,化疗疗效相关性。结果化疗后,RRM1阳性表达率为60.42%;ERCC1阳性表达率为43.75%;非小细胞肺癌患者病理组织RRM1及ERCC1阳性表达与患者性别及吸烟情况有显著相关性(P<0.05或P<0.01),而与患者年龄、临床分期无显著相关性(均P>0.05);病理组织RRM1/ERCC1+/+,-/-,+/-或-/+非小细胞肺癌患者有效率分别为17.95%,74.29%及59.09%,病理组织RRM1/ERCC1-/-非小细胞肺癌患者有效率显著高于+/+,+/-或-/+者(P<0.05或P<0.01);且RRM1/ERCC1+/-或-/+者有效率显著高于RRM1/ERCC1+/+者(均P<0.05)。经Spearman相关性分析显示,非小细胞肺癌患者病理组织RRM1、ERCC1阴性表达均与患者化疗疗效显著正相关(r=0.248,0.306,均P<0.05)。结论吉西他滨化疗对非小细胞肺癌患者具有一定的临床疗效,其与患者病理组织RRM1、ERCC1蛋白阴性表达具有显著正相关性,两者可作为非小细胞肺癌化疗疗效的评估指标。     

芪参通络颗粒治疗Ⅲ期糖尿病肾病的临床研究

目的观察芪参通络颗粒治疗Ⅲ期糖尿病肾病(DN)的临床疗效及安全性。方法将104例Ⅲ期DN患者随机分为对照组52例和试验组52例。对照组予以氯沙坦钾片每次100 mg,睡前口服;试验组予以芪参通络颗粒每次10 g,bid,口服。2组患者均连续治疗12周。比较2组患者的临床疗效、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、尿蛋白排泄率(UAER)、血清肌酸酐(SCr),以及药物不良反应的发生情况。结果治疗后,试验组和对照组的总有效率分别为86.54%(45例/52例)和69.23%(36例/52例),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,试验组和对照组的FPG分别为(6.54±0.68)和(7.16±0.74)mmol·L^-1,Hb A1c分别为(7.18±0.72)%和(7.62±0.79)%,HOMA-IR分别为(4.71±1.06)和(5.65±1.10),UAER分别为(58.34±16.52)和(82.15±19.05)mg·24 h^-1,SCr分别为(85.60±15.69)和(94.25±16.77)μmol·L^-1,差异均有统计学意义(均P<0.01)。2组患者的药物不良反应以恶心、腹部不适、食欲缺乏和头晕为主,试验组和对照组的总药物不良反应率分别为9.62%和13.46%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论芪参通络颗粒治疗Ⅲ期DN的临床疗效显著,其可显著改善患者的肾功能,降低血糖,改善胰岛素抵抗,且不增加药物不良反应的发生率。     

非小细胞肺癌基因变异与靶向治疗药物的选择

肺癌的发病率和死亡率在全球位居榜首,靶向药物的出现显著延长了肺癌患者的生存期并提高生存质量。靶向药物的选择主要是基于肿瘤基因突变情况,由于患者肿瘤个体差异大,携带的驱动基因突变类型多种多样,不同突变类型的肿瘤对特定靶向药的敏感性不同。随着医药行业的发展,越来越多的肺癌靶向药物进入临床,如何根据肿瘤的基因突变情况选择最适宜的靶向治疗药物至关重要。本文总结了非小细胞肺癌常见驱动基因的突变情况及可选择的靶向药物,为非小细胞肺癌靶向治疗药物的选择提供了依据。     

替格瑞洛片治疗脑动脉狭窄伴小血管病患者的临床研究

目的观察替格瑞洛联合普罗布考+阿司匹林+他汀类药物(PAS)治疗脑动脉狭窄伴小血管病患者的临床疗效和安全性。方法将140例脑动脉狭窄伴小血管病患者随机分为对照组和试验组,每组70例。对照组口服阿司匹林100 mg·d^-1,每天1次,每晚睡前口服阿托伐他汀10 mg·d^-1,口服普罗布考,每次0. 5 g,于每天早、晚餐服用,均连续服用3个月。试验组在对照组的基础上加服替格瑞洛治疗,首剂服用180 mg,之后服用90 mg·d^-1,每天1次,连续服用3个月。比较2组患者的临床疗效,检测2组的总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血管内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)水平,观察2组的药物不良反应发生情况。结果治疗后,试验组和对照组的总有效率分别为98. 57%(69例/70例)和80. 00%(56例/70例),差异有统计学意义(P <0. 05)。治疗后,试验组和对照组的TC分别为(4. 19±0. 28)和(5. 24±0. 34) mmol·L^-1,TG分别为(1. 72±0. 25)和(1. 96±0. 29) mmol·L^-1,HDL-C分别为(1. 87±0. 36)和(1. 50±0. 23) mmol·L^-1,LDL-C分别为(2. 45±0. 34)和(3. 06±0. 38)mmol·L^-1,ET-1分别为(60. 46±12. 82)和(69. 33±14. 03)μg·L^-1,NO分别为(381. 71±68. 21)和(335. 95±58. 02)μmol·L^-1,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。2组的药物不良反应主要为消化道出血,颅内出血,胃肠道反应和皮疹,对照组和试验组的药物不良反应发生率分别为11. 43%(8例/70例)和14. 29%(10例/70例),差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论替格瑞洛联合PAS方案治疗脑动脉狭窄伴小血管病的临床疗效优于单用PAS方案,其能够有效调节内皮功能,且未增加药物不良反应发生率。     

HPLC-MS/MS法测定新生儿血浆中奥美拉唑的浓度

目的建立一种测定新生儿血浆中奥美拉唑浓度的HPLC-MS/MS法。方法新生儿血浆样品用乙腈沉降蛋白后,以兰索拉唑为内标,色谱柱为C18(4. 6 mm×150. 0 mm,3. 5μm),流动相为乙腈-水(0. 1%甲酸)=85∶15,流速为0. 3 m L·min^-1,柱温为35℃,进样量为10μL。用电喷雾离子化源,正离子方式,多反应监测(MRM)扫描方式进行监测。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率,以及稳定性。结果血浆中奥美拉唑的浓度在5～4000 ng·m L^-1内线性关系良好,标准曲线为y=1. 20×10^-3x+2. 06×10^-2(r=0. 998 7),定量下限为5 ng·m L^-1。批内、批间RSD均小于15%,相对偏差为-7. 36%～3. 62%,提取回收率为77. 94%～93. 12%,无明显的基质效应。结论该方法简便快速,灵敏度好,准确度高,专属性强,适用于新生儿血浆中奥美拉唑浓度的测定。     

miR-10b、miR145及miR155在乳腺癌患中的表达及临床意义

目的 探讨microRNA-10b(miR-10b)、microRNA-145(miR-145)及microRNA-155(miR-155)在乳腺癌患者病理组织及血清中的表达水平,进而评价其在乳腺癌诊断中的价值.方法 收集100例正常健康志愿者,150例乳腺癌患者血液和39例乳腺癌患者的癌组织和癌旁组织,提取血液和组织中的microRNA,采用实时荧光定量PCR检测miR-10b、miR-145及miR-155表达水平,分析其与乳腺癌患者临床病理参数之间的相关性,并绘制ROC曲线分析其在乳腺癌诊断中的价值.结果 治疗前乳腺癌患者血清中的miR-10b,miR-145和miR-155表达水平高于对照组(P＜0.05),三者表达水平均与肿瘤转移显著相关,与年龄、组织学特征、ER表达无相关性(P＞0.05)miR-10 b与临床分期显著相关(P＜0.05),miR-10b的ROC曲线下面积为0.936,miR-145的ROC曲线下面积为0.904,miR-155的ROC曲线下面积为0.91.miR-10b,miR-145,miR155在Ⅲ级乳腺癌患者肿瘤组织的表达水平明显高于Ⅰ～Ⅱ级乳腺癌患者癌组织的表达水平(P＜0.05).结论 血清中miR-10 b、miR-145及miR-155有可能作为乳腺癌早期诊断的肿瘤标志物.     

ABCC4 is regulated by microRNA-124a and microRNA-506

Multidrug resistance protein 4 (MRP4, ABCC4) is an efflux membrane transporter expressed in renal tubules, hepatocytes, brain capillaries, prostate and blood cells. MRP4 drives energy dependent efflux of important physiological and pharmacological compounds. MRP4 expression and function is highly variable but cannot be fully attributed to known mechanisms. The goal of this study was to characterize ABCC4 regulation by miRNAs and to assess the influence of ABCC4 3′-UTR polymorphisms on ABCC4 regulation by miRNAs. miR-124a and miR-506 decreased MRP4 protein levels in HEK293T/17 cells 20–30% and MRP4 function by 50%. These miRNAs did not affect ABCC4 mRNA expression. Moreover, miR-124a and miR-506 expression was negatively correlated with MRP4 protein expression in 26 human kidney samples (Spearman r = −0.62, P = 0.007 and r = −0.41, P = 0.03 for miR-124a and miR-506, respectively). To assess the effect of ABCC4 3′-UTR polymorphisms, six common 3′-UTR haplotypes were inferred in Caucasians, African Americans and Asians and tested in luciferase reporter assays. Multiple ABCC4 3′-UTR haplotypes caused significant reductions in luciferase activity; in the presence of miR-124a or miR-506 mimics the luciferase activity of all six ABCC4 3′-UTR haplotypes was further reduced. Mutation of the putative binding site for miR-124a and miR-506 in the ABCC4 3′-UTR eliminated the effect of these miRNAs. In conclusion, ABCC4 is directly regulated by miR-124a and miR-506 but polymorphisms in the ABCC4 3′-UTR have no significant effect on this miRNA regulation. Regulation of ABCC4 by miRNAs represents a novel mechanism for regulation of MRP4 function.     

川芎嗪联合顺铂对Lewis小鼠肺腺癌移植瘤与血管生成的影响

目的研究川芎嗪联合顺铂对Lewis肺腺癌小鼠移植瘤生长及抑制血管生成的作用机制。方法培养Lewis小鼠肺腺癌细胞,建立移植瘤模型。按照体重将成功制备的荷瘤小鼠模型随机分成4组,每组15只:模型组、顺铂组、川芎嗪组、联合组。模型组:0.9% NaCl,顺铂组:2 mg·kg^-1,川芎嗪组:100mg·kg^-1,联合组:两种药物相加。均每次0.2 mL,干预2周。称量瘤重,计算抑瘤率;用免疫组化方法检测每组血管内皮生长因子(VEGF)、血管抑制蛋白(VASH-1)的表达。结果给药后,联合组、顺铂组、川芎嗪组的抑瘤率分别为54.81%,32.36%,18.36%,与模型组(抑瘤率为0)比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。联合组、顺铂组、川芎嗪、模型组的VEGF表达分别为20.37±2.02,28.07±4.29,26.43±4.69,62.14±6.78;这4组的VASH-1表达分别为9.04±1.01,10.10±1.61,11.53±1.96,12.94±1.10,3个给药组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关性分析:VEGF与VASH-1成正相关(r=0.664,P<0.05)。结论川芎嗪联合顺铂协同抑制Lewis小鼠移植瘤生长,其作用机制可能为川芎嗪与顺铂可以直接作用癌细胞,同时降低VEGF与VASH-1表达,发挥抗血管生成作用。     

LC-MS/MS法同时测定厄贝沙坦和氢氯噻嗪血药浓度及厄贝沙坦氢氯噻嗪片的生物等效性研究

目的建立同时测定人血浆中厄贝沙坦和氢氯噻嗪血药浓度的液相色谱-质谱方法,并评价2种厄贝沙坦氢氯噻嗪片的生物等效性。方法以氯沙坦为内标,血浆样品经固相萃取后检测。Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×50mm,1.8μm)为分析柱,以甲醇-乙腈-0.15%甲酸水溶液(40∶25∶35)为流动相,流速:0.3 m L·min^-1,用电喷雾离子化源(ESI),以负离子多离子反应监测(MRM)扫描方式进行监测。22例健康男性受试者随机于2个周期交叉口服相同剂量的厄贝沙坦氢氯噻嗪片受试药物或参比药物,考察其生物等效性。结果血浆中厄贝沙坦和氢氯噻嗪浓度分别在20.0~4000.0 ng·m L^-1和1.0~200.0 ng·m L^-1线性关系良好,线性回归方程分别为y=9.28×10^-2x-7.50×10^-2(r=0.999 2)和y=5.27×10-2x-2.99×10-2(r=0.998 8),日内和日间RSD均小于15%。受试药物相对于参比药物的厄贝沙坦和氢氯噻嗪的生物利用度分别为(107.4±19.9)%和(105.6±16.2)%。结论本方法简便、快速、灵敏度高,适用于人血浆中厄贝沙坦、氢氯噻嗪的浓度测定,可用于厄贝沙坦氢氯噻嗪片的人体生物等效性研究;2种药物生物等效。