百草枯诱导A549细胞间质转化及四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯的干预作用

目的探讨体外培养的人肺腺癌细胞(A549)在百草枯(PQ)诱导下能否发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)的干预作用和可能机制。方法体外培养A549细胞,实验分为对照A549细胞组(Control)、PQ诱导A549细胞组(PQ)、PDTC 3个浓度干预组(PQ+PDTC1,2,3;终浓度分别为10,20,40μmol/L)。用噻唑蓝(MTT)测定细胞毒性;活性氧荧光定量法(DCFH-DA)测定细胞内活性氧(ROS)水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定转化生长因子β1(TGF-β1)表达水平;实时定量RCR(Real Time,RT-PCR)测定EMT相关标志物上皮细胞钙粘蛋白(Ecad)、紧密连接蛋白(ZO-1)、N-钙粘蛋白(N-cad)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达。结果与对照组比较,PQ(600μmol/L)作用A549细胞24h后,细胞存活率降低,细胞内ROS水平明显升高,TGF-β1表达水平明显升高,上皮细胞标志物E-cad、ZO-1基因表达下调,间质细胞标志物N-cad、α-SMA基因表达明显上调(P<0.05);PDTC干预组能够降低PQ诱导的A549细胞毒性,明显抑制上述作用,其中对TGF-β1表达、E-cad、N-cad基因表达的干预作用呈剂量依赖方式(P<0.05)。结论PQ诱导A549细胞过度表达TGF-β1,继而导致上皮细胞向间质细胞转化,这可能是PQ致肺纤维化的重要机制之一;PDTC的有效干预可能基于其抗氧化和核因子-kappaB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)抑制作用。     

A549细胞上皮-间质转分化中差异表达基因的生物信息学分析

[背景]在肺纤维化中,上皮-间质转分化(EMT)具有重要的作用.肺泡上皮细胞的EMT是肌成纤维细胞的一个重要来源.而随着高通量测序技术的发展,利用生物信息学的分析筛选EMT过程中的关键基因(Hub基因)引起了学者们的关注.[目的]分析人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549细胞)相关EMT过程中的差异表达基因,以此筛选肺纤维化相关...     

紫外线C对A549细胞HSPs表达的影响

[目的]研究紫外线C(UVC)对热休克蛋白(heat shock proteins,HSP)27、70及90的影响。[方法]用紫外线不同照射剂量(0、10、20、40、80J/m2)来照射A549细胞株,用Western-blot检测HSP27、HSP70、HSP90的表达水平。[结果]随着UVC剂量的升高,HSP70和HSP27的表达水平先升高,达到一个高峰后又降低。HSP27表达在20J/m2时达到高峰,HSP70表达在40J/m2时达到高峰,HSP90各剂量的UVC照射下,未见显著性变化。与对照组(0J/m2)相比,在10J/m2时,HSP27和HSP70表达增加(P<0.05);在20J/m2时,HSP27表达显著增加(P<0.01),HSP70表达也继续增加(P<0.05);在40J/m2时,HSP27表达开始下降,但与对照组相比差异没有显著性(P>0.05),HSP70表达仍显著增加,与对照组相比差异有显著性(P<0.01)。在80J/m2时,HSP27表达与对照组和40J/m2组相比,差异无显著性(P>0.05),HSP70表达下降,但仍高于对照组(P<0.05)。在10、20、40和80J/m2的UVC照射下,HSP90表达变化均未见显著性差异(P>0.05)。[结论]随着UVC剂量的升高,HSP70和HSP27的表达水平先升高,达到一个高峰后又降低。HSP27,HSP70能被一定剂量范围的UVC照射所诱导,高剂量UVC照射时HSP27、HSP70的表达被抑制,但HSP90表达未发现能被诱导。     

脂多糖促进肺癌A549细胞表达HMGB1

目的 探讨脂多糖（LPS）促进肺癌A549细胞表达高迁移率族蛋白B1（HMGB1）机制及意义。方法 体外培养肺癌A549细胞,分组：A组（对照组）,B组（100 ng/ml LPS）,C组（150 ng/ml LPS）,D组（200ng/ml LPS）,培养12 h、24 h、48 h、72 h后,Western blot检测肺癌A549细胞HMGB1蛋白表达,ELISA检测细胞上清液HMGB1浓度。结果 Western blot、ELISA检测示HMGBl蛋白表达及浓度在A、B、C、D四组中逐渐增强（P〈0.05）;培养12 h、24 h、48 h、72 h有显著差异（P〈0.05）。结论 LPS促进肺癌A549细胞表达HMGB1,有时间-量效关系,为临床防治肺癌提供了新思维。     

青石棉诱导A549细胞表达IL-8的研究

目的　研究青石棉纤维作用于A5 4 9细胞后IL 8蛋白和基因表达水平及酪氨酸激酶抑制剂PD980 5 9对IL 8表达的影响。方法　用定量RT PCR法测定青石棉诱导A5 4 9细胞后的IL 8mRNA水平 ;用免疫反应法测定A5 4 9细胞培养上清中IL 8蛋白水平。结果　不同浓度青石棉刺激A5 4 9细胞后 ,培养上清中IL- 8释放量明显增加 ,细胞中A5 4 9IL- 8mRNA表达显著上升 ,使用酪氨酸激酶抑制剂PD980 5 9可明显抑制IL- 8的蛋白及mRNA表达水平。结论　青石棉可诱导IL- 8的高表达 ,而这种表达可为PD980 5 9所抑制 ,提示IL -8的表达源于胞浆中MAPKs信号通路。     

大气细颗粒物对A549细胞炎性因子分泌影响

目的探讨大气沙尘与非沙尘天气细颗粒物（PM25）对人肺腺癌上皮细胞炎性因子分泌的影响。方法沙尘与非沙尘细颗粒物采自甘肃省武威市;实验细胞为人肺腺癌上皮A549细胞（A549细胞）。分别用25,50,100,200μg/ml沙尘与非沙尘细颗粒物对A549细胞进行染毒,染毒24 h后,细胞计数法测定细胞毒性。收集细胞上清,用放射免疫法测定细胞因子白介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的浓度。结果（1）沙尘细颗粒物对A549细胞作用24 h后,在细胞毒性上表现出低浓度促进细胞增殖,高浓度抑制增殖现象;非沙尘颗粒物随染毒剂量增加,细胞存活率明显降低,抑制细胞增殖。（2）沙尘、非沙尘细颗粒物对A549细胞作用24 h后,均可促进A549细胞分泌炎性因子IL-8。（3）沙尘、非沙尘颗粒物对A549细胞作用24 h后,对TNF-α分泌的影响不明显。结论沙尘与非沙尘细颗粒物均有早期炎症效应。     

丹参单体IH764-3对百草枯染毒大鼠肺组织基质金属蛋白酶表达的影响

目的 观察急性百草枯(PQ)染毒大鼠肺组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)、膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)的表达,以及丹参单体IH764-3对上述指标的影响.方法 健康成年SD大鼠90只,随机分为正常对照组(A组,6只)、百草枯染毒组(B组,42只)及丹参单体IH764-3治疗组(C组,42只).B组及C组按50 mg/kg给予PQ灌胃染毒,A组给予相应容积的生理盐水灌胃;C组每日给予40mg/kg丹参单体IH764-3腹腔注射,B组每日给予等量生理盐水腹腔注射.分别于染毒后第1、3、7、14、21、28、35天RT-PCR法检测大鼠肺组织MMP-2、MT1-MMP的表达,以及丹参单体IH764-3对上述指标的影响.结果 (1)MMP-2 mRNA:与A组(0.305±0.045)相比,B组MMP-2 mRNA表达从第1天明显增强(0.654±0.077),并达最高峰,从第3天逐渐下降(0.623±0.051),7天(0.637±0.024)、14天(0.533±0.043)和21天(0.552±0.050)一直处于较高水平,与A组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).C组大鼠MMP-2 mRNA表达仅于第1天(0.523±0.074)、第3天(0.567±0.097)和第7天(0.514±0.058)与A组比较有轻度升高,但较B组为低,差异有统计学意义(P＜0.01),第3天达最高峰后逐渐下降;第1、7、14(0.359±0.018)、21天(0.374±0.020)均较B组同时段明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)MT1-MMP mRNA:与A组(0.391±0.058)相比,B组MT1-MMP mRNA表达从第1天明显增强(0.796±0.021),第3天(0.762±0.043)、第7天(0.590±0.01 0)和第14天达高峰(0.803±0.076),第21天(0.680±0.034)与A组比较有明显上升,差异有统计学意义(P＜0.01).C组MT1-MMP mRNA表达从第1天有所增强(0.594±0.010),但较B组为低,第3天(0.653±0.044)达高峰,此后下降,第21天(0.564±0.009)仍高于A组,差异有统计学意义(P＜0.01),第7天(0.490±0.014)和第14天(0.504±0.040)与A组比较亦较之为高,差异有统计学意义(P＜0.05);第1天和第14天C组均较B组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01),第3、7、21天C组均较B组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PQ灌胃染毒后,可使大鼠肺组织MMP-2和MT1-MMP表达发生改变,使ECM的合成和降解失衡,可能是诱导肺纤维化形成的原因之一;丹参单体IH764-3在一定程度和阶段影响了MMP-2和MT1-MMP的表达,从而使肺纤维化病变减轻.     

温石棉对A549细胞细胞色素P4501A1和谷胱甘肽S转移酶活性的影响

目的：探讨温石棉对体外培养细胞中外源性化合物代谢酶活性的影响。方法：采用不同剂量的UICC温石棉（UC）和国产茫崖温石棉（MC）分别作用于A549细胞,测A549细胞中细胞色素P4501A1（CYPA1）和谷胱甘肽S转移酶（GST）活性,并用苯并（a)芘对酶活性进行诱导,再测定温石棉对2种酶诱导活性的影响。结果：UC与A549细胞作用24h,乙氧基异酚恶唑－O－去乙基酶（EROD）活性随剂量增加呈缓慢递趋势,200mg/L UC可使EROD活性升高40％,但200mg/L UC作用48h则使其活性下降32％,提示UC对A549细胞EROD活性的影响呈现低剂量短时间诱导,而高剂量长时间抑制的趋势,MC对EROD活性的影响呈现多向性,无论作用24h还是48h,25mg/L UC作用48h则使其活性下降32％,提示UC对A549细胞EROD活性的影响呈现低剂量短时间诱导,而高剂量长时间抑制的趋势,MC对EROD活性的影响呈现多向性,无论作用24h还是48h,25mg/L的MC诱导作用最强（分别为对照组的1．86和1．28倍）,但随MC剂量增大和作用时间延长,EROD活性也随之下降,最低仅为对照组的35％,UC作用对GST的影响不明显,最高仅使GST活性升高20％,MC在25mg/L时驿GST的诱导最强,为对照组的1．4倍,但随着剂量的增加,对GST活性的上诱导转为抑制,200mg/L时GST活性下降了18．7％,先用温石棉与A549细胞作用24h,再加入苯并(a)芘对酶活性进行诱导,发现无论是UC还是MC,均未对苯并(a)芘诱导的EROD活性产生明显影响。但200mg/L的UC和100mg/L的MC均可增加GST的诱导活性。结论：不同剂量温石析对EROD和GST活性表现出不同的效应,其原因可能与2种温石棉的物理化学特性及表面活性有关。     

顺铂对A549细胞DNA修复酶MGMT和DNA-PKcs表达的影响

[目的]探讨在DNA损伤剂顺铂作用下，A549细胞内DNA修复基因六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)和DNA依赖的蛋白激酶复合物催化亚单位(DNA-PKcs)的表达变化。[方法]MTT法分析顺铂对A549细胞生存力的影响；彗星实验研究顺铂对DNA损伤的程度；RT-PCR分析不同顺铂作用时问修复酶mRNA水平的变化。[结果]顺铂对A549细胞的生长有明显的抑制作用，且为剂量依赖性。低浓度(IC20剂量)顺铂作用下，DNA损伤程度的变化与作用时间成正比，且伴随MGMT和DNA-PKcs的表达上升。停止作用后，DNA损伤程度减轻，修复基因的表达也逐渐恢复至正常水平。[结论]短期顺铂染毒所导致的急性DNA损伤对MGMT和DNA-PKcs的表达有明显的正性诱导作用。     

甲醇和汽油汽车尾气对A549细胞株细胞毒性及增殖和凋亡功能的影响

目的:比较甲醇燃料汽车尾气和汽油燃料汽车尾气对A549细胞株的细胞毒性及增殖和凋亡功能的影响。方法:1)MTT比色法检测受试物细胞毒性。2)受试物体外培养实验:汽油组剂量分组为:0·125L/ml,0·0625L/ml,0·03125L/ml,0·0156L/ml,0·0078L/ml和一个空白对照;甲醇组剂量分组与汽油相同。A·细胞培养介质乳酸脱氢酶活性的测定;B·细胞形态学观察;C·流式细胞术a·检测细胞周期并计算细胞增殖指数;b·观察细胞亚二倍体峰的变化,计算凋亡百分比;结果:1)MTT比色法汽油组在0·125L/ml剂量组OD值与对照组相比差异有统计学意义(P<0·05);甲醇组在1·0L/ml剂量组OD值与对照组相比差异有统计学意义(P<0·05);2)受试物体外培养实验:A·细胞培养介质乳酸脱氢酶活性的测定:汽油组在0·0625~0·125L/ml各剂量组LDH值与对照组相比差异有统计学意义(P<0·05),同等剂量下甲醇组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0·05);B·细胞形态学观察:汽油组在0·125L/ml,可见大量死亡细胞和凋亡细胞数增加,相同剂量甲醇组未见明显改变;C·流式细胞术:仅汽油组0·0156,0·03125L/ml、0·0625L/ml剂量组细胞增殖指数显著低于对照组(P<0·05),汽油组和甲醇组在0·0156~0·0625L/ml剂量组凋亡百分比均高于对照组,但后者作用更强。结论:在同等剂量下,汽油燃料尾气对A549细胞株的毒性及对细胞增殖的抑制明显高于甲醇,但甲醇诱导A549细胞凋亡的作用略强。     

香烟烟雾对A549与A549-R细胞的氧化损伤

目的探讨hOGG1基因低表达对香烟烟雾作用下细胞氧化损伤效应的影响。方法不同浓度香烟烟雾暴露A549细胞和hOGG1基因低表达的A549-R细胞,MTT实验检测两种细胞存活率,彗星实验观察两种细胞DNA损伤,荧光法测定两种细胞内活性氧(ROS)含量,高效液相色谱-电化学法(HPLC-ECD)检测细胞基因组DNA中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含量。结果随着香烟烟雾暴露浓度的增加,两种细胞的存活率均下降,且A549-R细胞IC50显著小于A549细胞,差异有统计学意义(P<0.05);两种细胞ROS生成量与香烟烟雾浓度呈剂量-效应关系,当香烟烟雾浓度≥1.25支/升时,A549-R细胞ROS含量显著高于A549细胞(P<0.05);不同香烟烟雾浓度下,A549-R细胞拖尾率、尾长、OTM值均大于A549细胞,差异有统计学意义(P<0.05);A549细胞与A549-R细胞基因组DNA8-OHdG含量随香烟烟雾浓度的增加而升高,当香烟烟雾浓度为2.5支/升和5支/升时,A549-R细胞8-OHdG含量显著高于A549细胞(P<0.05)。结论香烟烟雾可导致A549细胞与A549-R细胞的氧化损伤,hOGG1基因低表达可增加A549-R细胞对香烟烟雾引起的氧化损伤的敏感性。     

吡非尼酮抗百草枯中毒小鼠肺纤维化的研究

目的 探讨吡非尼酮(PF)对百草枯(PQ)中毒小鼠肺纤维化的治疗作用,为临床治疗提供理论依据.方法 雄性ICR小鼠90只,随机分为正常对照组、PQ组、地塞米松组、25、50和100 mg/kgPF组,每组15只.正常对照组小鼠一次性空腹灌胃给予生理盐水,2 h后给予质量分数为1%羧甲基纤维素(CMC)灌胃,再每天定时空腹灌胃同等量CMC;PQ组、地塞米松组及各PF剂量组小鼠给予PQ100mg/kg一次性灌胃染毒,灌胃后2 h,再每天定时PQ组给予0.02ml/10 gCMC灌肠,PF组给予PF(25、50、100 mg/kg)和地塞米松(0.02 ml/10 g)灌胃,每天1次,共49 d.计算肺系数,HE染色,光学显微镜下观察肺组织病理改变;测定肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,转化生长因子(TGF-β1)的mRNA表达水平、蛋白表达水平,支气管肺泡灌洗液(BALF)中的TGF-β1蛋白含量.结果 PQ组3 d生存率为53.33%,25、50、100 mg/kg PF组3 d生存率分别为46.67%、73.33%、86.67%,地塞米松组3 d生存率为80%,地塞米松组、50、100 mg/kg PF组3 d生存率明显高于PQ组和25 mg/kg PF组,差异有统计学意义(P＜0.05).25、50及100mg/kg PF组小鼠肺系数均明显低于PQ组,差异有统计学意义(P＜0.05).地塞米松组肺组织中HYP含量为(50.95±11.65)mg/g,25、50、100mg/kg PF组HYP含量分别为(44.52±9.48)、(43.27±6.01)、(40.82±5.90)mg/g,较PQ组[(74.27±3.68)mg/g]明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.01).地塞米松组BALF中TGF-β1蛋白含量为(22.03±7.27)mg/ml,25、50、100 mg/kg PF组TGF-β1蛋白含量分别为(55.33±17.50)、(27.75±5.84)、(21.31±6.82)mg/ml,与PQ组[(52.52±15.51)mg/ml]相比,明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01);100 mg/kg PF组肺组织TGF-β1mRNA表达水平与PQ组相比,明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01)与PQ组比较,地塞米松组,50、100mg/kgPF组肺组织中TGF-β1蛋白表达下降,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 PF可以减少百草枯中毒小鼠肺组织胶原沉积,减轻肺部纤维化程度.

Abstract：

Objective To study the curative effects of pirfenidone (PF)on pulmonary fibrosis induced by paraquat (PQ) in mice and to provide the theoretical basis for clinical treatment. Methods Ninety adult healthy male ICR mice were randomly divided into six groups: control group, PQ group , 2 mg/kg Dexamethasone group, 25 mg/kg PF group, 50 mg/kg PF group and 100 mg/kg PF group, there were 15 mice in each group. The corresponding volume of normal saline was given to the each mouse in control group according to the weight, after 2 h 0.1% CMC was given to the each mouse of control group one time by intragastric administration, then the CMC was administrated at regular time until sacrifice. All mice for other 5 groups were exposed to 100 mg/kg PQ by intragastric administration. At 2 h after exposure to PQ, 0.02 ml/10 g dexamethasone and 25、50、100 mg/kg PF were given to mice for dexamethasone group and for 3 PF groups by intragastric administration each day for 49 days, respectively. The lung coefficient was calculated and pathological changes of lung tissue were observed by HE staining for each mouse. The hydroxyproline (HYP)level in lung tissue was measured for each mouse. The mRNA level of and the protein level of TGF-β1 in lungtissue for each mouse were determined, and the protein level of TGF-β1 in the bronchus-alveolus lavage fluid (BALF) of each mouse was detected. Results The survival rates on the 3rd day in PQ group, 3 PF groups and dexamethasone group were 53.33%, 46.67%, 73.33%, 86.67% and 80%, respectively. The survival rates on the 3rd day in dexamethasone group, 50 mg/kg and 100 mg/kg PF groups were significantly higher than those of PQ group and 25 mg/kg PF group (P＜0.05). The lung coefficients of 3 PF groups were significantly lower than that of the PQ group (P＜0.05). The lung tissue HYP levels of dexamethasone group and 3 PF groups were 50.95±11.65, 44.52±9.48, 43.27±6.01 and 40.82±5.90 mg/g respectively, which were significantly lower than that (74.27±3.68) of PQ group(P＜0.01 ). The TGF-β1 protein levels of BALF in dexamethasone group, 50 and 100 mg/kg PF groups were 22.03±7.27, 27.75±5.84 and 21.31 ±6.82 ng/ml respectively, which were significantly lower than that(52.52±15.51 ) ng/mlof PQ group(P＜0.01 ). The expression level of TGF-β1 mRNA in 100 mg/kg PF group decreased significantly, as compared with PQ group (P＜0.01). Conclusion PF could reduce the collagen deposition and pulmonary fibrosis induced by PQ in mice lungs.     

青石棉诱导A549细胞ERK1／2及E1k1激活的研究

目的　研究细胞外信号调节蛋白在青石棉致肺部疾病的作用。方法　用Western免疫印迹、免疫沉淀等对石棉刺激A5 4 9细胞后细胞外信号调节蛋白及其下游Elk1蛋白磷酸化等进行了研究。结果　石棉刺激细胞后 ,磷酸化ERK1 2、Elk1等高表达 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论　ERK1 2、Elk1磷酸化可能参与青石棉的致病过程     

青石棉诱导A549细胞ERK1/2及Elk1激活的研究

目的　研究细胞外信号调节蛋白在青石棉致肺部疾病的作用。方法　用Western免疫印迹、免疫沉淀等对石棉刺激A5 4 9细胞后细胞外信号调节蛋白及其下游Elk1蛋白磷酸化等进行了研究。结果　石棉刺激细胞后 ,磷酸化ERK1 2、Elk1等高表达 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论　ERK1 2、Elk1磷酸化可能参与青石棉的致病过程     

核因子-κB及细胞因子在百草枯致大鼠肺损伤中的动态变化

目的 观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠细胞因子白介素-1β(IL-1β)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血小板源性生长因子(PDGF)和肺组织核因子-kappa B(NF-κB)的变化及四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)的干预效果,以探讨百草枯致肺损伤机制.方法 SD大鼠随机分为对照组6只、PQ染毒组56只、PDTC干预组46只.染毒组和十预组给予生理盐水稀释PQ80 mg/kg一次性灌胃后2 h,染毒组给予等量生理盐水腹腔注射,PDTC干预组给予PDTC 100 mg/kg一次性腹腔注射;对照组给予生理盐水1 ml/kg灌胃后2h,给予等量生理盐水腹腔注射.ELISA法测定大鼠血清IL-1β、TGF-β1、TNF-α及PDGF水平,并分析它们分别与肺脏系数、羟脯氨酸含量的关系;电泳迁移率改变分析法测定肺组织NF-κB活性.结果 与对照组比较,染毒组IL-1β含量1、3、7 d明显升高,TGF-β1、TNF-α含量各时段均明显升高,PDGF含量7、14、28、5 6d明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);IL-1β、TNF-α分别与肺脏系数成正相关(r=0.37,0.46,P<0.05或P<0.01),TGF-β1、PDGF分别与羟脯氨酸含量成正相关(r=0.56,0.89,P<0.01);与对照组比较,染毒组肺组织NF.KB活性1、3.7、14 d明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).与染毒组比较,干预组血清IL-1β、TGF-β1、TNF-α、PDGF含量明显降低,相应时点差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);肺组织NF-κB活性1、3、7、14 d明显降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 NF-κB活化及细胞因子IL-1β、TGF-β1、TNF-α、PDGF的过度表达是参与PQ致肺损伤的重要机制;PDTC通过抑制NF-κB活化进而抑制上述细胞因子的表达,减轻PQ中毒大鼠的肺损伤.     

不溶性镍化合物对人肺癌A549细胞镍含量影响

目的 探讨不溶性镍化合物对细胞中镍含量的影响.方法 用不同浓度的水不溶性氧化镍(NiO)和二硫化三镍(Ni3S2)分别处理人肺癌A549细胞,用原子吸收分光光度计(AAS)检测染毒48 h后细胞内镍含量并估算其摄取率.结果 经过终浓度为0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3μg/cm²的Ni3S2处理后,平均每105个细胞中含镍量为0.002 4,0.077 1,0.015 7,0.226 8,0.475 4,0.7,0.988 2μg;终浓度为0,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0,16μg/cm²的NiO处理后,平均每105个细胞中含镍量为0.003,0.07,0.108,0.255,0.628,1.543,6.571μg;相同浓度(0.5,1.0,2.0μg/cm²)镍颗粒物处理下,Ni3S2处理组细胞镍含量分别为(0.077 1±0.006 6,0.157 4±0.019 0,0.475 4±0.112 1)μg/105个细胞,均高于NiO处理组(0.070 1±0.003 2),(0.108 1±0.015 9),(0.255 2±0.041 5)μg/105个细胞,各剂量组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 人肺癌A549细胞对不溶性镍化合物的摄取与其染毒剂量成正比,且相同浓度下对NiS的摄取率高于NiO.     

钝顶螺旋藻藻蓝蛋白抗百草枯诱导大鼠肺纤维化的研究

目的 探讨钝顶螺旋藻(spirulina platensis)藻蓝蛋白(C-phycoeyanin,C-PC)对百草枯(paraquat,PQ)染毒诱导大鼠肺纤维化的治疗作用.方法 选取健康Wistar大鼠90只,随机分为正常对照组、模型组(PQ组)和藻蓝蛋白治疗组(C-PC组),每组30只.PQ组、C-PC组以PQ(50 mg/kg)一次灌胃染毒造模.造模后,正常对照组、PQ组大鼠每天给予生理盐水(1 ml/100 g)灌胃,C-PC组每天给予C-PC (50 mg/kg)灌胃,并在第1、3、7、14、28天各组随机取6只大鼠右肺下叶肺组织匀浆测羟脯氨酸(HYP)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力;取左肺部分组织行HE染色、Masson染色进行病理观察,并用免疫组化方法观察肺组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、核因子-κB亚基p65(NF-κB p65)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达.结果 各观察时点C-PC组大鼠肺组织中HYP和14、28 d MDA含量明显低于PQ组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).1、7、14、28 d时C-PC组大鼠肺组织中SOD活力明显高于PQ组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).PQ组和C-PC组肺组织中TGF-β1的表达及NF-κB p65和TNF-α表达明显高于正常对照组,C-PC组肺组织的TGF-β1表达及NF-κB p65和TNF-α表达明显低于PQ组,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).病理学观察显示C-PC能减轻PQ染毒大鼠肺泡炎和肺纤维化程度.结论 C-PC对PQ诱导的大鼠肺泡炎及肺纤维化有抑制作用.