二烯丙基二硫下调uPA和MMP9抑制乳腺癌细胞侵袭迁移

目的 研究大蒜提取物二烯丙基二硫(DADS)对MCF-7和MDA-MB-231两种人乳腺癌细胞侵袭迁移的作用。方法采用不同浓度(0,0,200,0 μmol/L)DADS处理MCF-7和MDA-MB-231两种人乳腺癌细胞24 h,Transwell侵袭实验检测DADS对细胞侵袭能力的影响;划痕愈合实验观察DADS对细胞迁移能力的改变;western blot检测两种细胞中尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达。结果Transwell实验发现DADS呈浓度依赖性抑制MCF-7和MDA-MB-231两种乳腺癌细胞的侵袭,划痕愈合实验则发现DADS呈浓度依赖性抑制两种乳腺癌细胞的迁移。与此同时,Western blot结果显示DADS可浓度依赖性下调侵袭迁移相关蛋白uPA和MMP9的表达。结论DADS可下调uPA和MMP9表达,抑制乳腺癌细胞侵袭迁移。     

白藜芦醇对食管鳞癌Eca-109细胞侵袭迁移及EMT的影响

目的:研究白藜芦醇(RES)对食管鳞癌Eca-109细胞侵袭迁移及上皮间质转化(EMT)的影响.方法:用不同浓度(50和100 μmol/L)的RES处理Eca-109细胞,采用细胞划痕实验、Transwell小室实验检测细胞迁移侵袭能力,荧光定量PCR检测EMT蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和MMP-2、MMP-9 mRNA的表达,Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP-2和MMP-9蛋白表达.结果:与对照组比较,RES各浓度(50 μmol/L和100 μmol/L)组均可明显抑制Eca-109细胞侵袭迁移(P<0.01),下调N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达(P<0.05~P<0.01),增加E-cadherin mRNA和蛋白表达(P<0.01).结论:RES抑制Eca-109细胞侵袭迁移能力,其机制可能通过下调MMP-2、MMP-9的表达,调控EMT蛋白(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)的表达、抑制上皮间质转化过程.     

芍药苷对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移的影响及机制研究

【目的】观察芍药苷对人乳腺癌MCF-7细胞株增殖、侵袭和迁移的影响及相关机制。【方法】以不同浓度芍药苷(5、10、20μmol/L)作用于MCF-7细胞株。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测MCF-7细胞增殖能力;划痕实验检测MCF-7细胞的迁移能力;Transwell法检测MCF-7细胞侵袭能力;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测MCF-7细胞增殖和转移相关蛋白Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、p38、p-p38、热休克蛋白27(HSP27)、p-HSP27的表达水平;MCF-7细胞培养添加p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路抑制剂SB203580后,Western Blot法检测上述相关蛋白的表达水平。【结果】与空白对照组比较,芍药苷5、10、20μmol/L组细胞增殖倍数明显降低,划痕闭合程度明显降低,侵袭细胞数目显著减少,Ki67、PCNA、MMP-9、VEGF表达水平均显著降低,p-p38和p-HSP27表达水平均显著上升(均P 0.01),且随着芍药苷浓度的升高,效果越明显。添加SB203580后,MCF-7细胞p-p38和p-HSP27表达水平显著降低,Ki67、PCNA、MMP-9和VEGF表达水平均显著升高(均P 0.01);芍药苷与SB203580共同作用于MCF-7细胞后,p-p38和p-HSP27表达水平显著升高,Ki67、PCNA、MMP-9和VEGF表达水平均显著降低(均P 0.01)。【结论】芍药苷可抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭,其作用机制与调节p38MAPK信号通路的激活相关。     

褪黑素对卵巢癌SKOV3细胞侵袭、迁移和血管生成的影响

研究褪黑素对卵巢癌SKOV3细胞侵袭、迁移和血管生成的影响。MTT实验、划痕实验和Transwell侵袭实验分别观察褪黑素对SKOV3细胞增殖、侵袭和迁移的影响。诱导HUVECs成管,观察褪黑素对其影响。Western blot法检测SKOV3细胞内血管内皮生长因子(VEGF)、钙黏附蛋白E(E-cadherin)、基质金属蛋白酶9(MMP9)和波形蛋白(Vimentin)的表达。建立卵巢癌移植瘤模型,免疫组化检测CD31的表达。结果显示,褪黑素能抑制卵巢癌SKOV3细胞的侵袭和迁移,并且明显下调MMP-9、Vimentin和VEGF蛋白的表达,上调E-cadherin的表达。此外,褪黑素抑制了HUVECs的小管生成,体内CD31的免疫组化结果也显示褪黑素能够抑制微血管密度。结果提示,褪黑素能抑制卵巢癌细胞的侵袭、迁移和血管生成。     

AMPK抑制TGF-β信号通路减轻EMT诱导膀胱癌转移机制研究

目的探讨AMPK抑制TGF-β信号通路减轻EMT诱导膀胱癌转移机制。方法采用Lipofectamine2000介导AMPKα1转染至人膀胱移行上皮癌BIU-87,噻唑蓝(MTT)比色法和AnnexinV-FITC/PI双染法检测shRNA对细胞增殖和凋亡的作用。细胞划痕实验、Transwell小室侵袭实验检测体外细胞迁移和侵袭能力。Western blot检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达情况。结果转染后的C4-2 DN细胞生长速度明显慢于未转染的BIU-87细胞及转染空载体的C4-2 E细胞,且在24 h内的细胞凋亡率均明显高于转染空载体的C4-2 E,组间差异具有统计学意义(P0.05)。AMPK抑制TGF-β信号通路能够抑制人膀胱移行上皮癌BIU-87细胞的增殖和侵袭迁移(P0.05)。同时,AMPK抑制TGF-β信号通路下调N-cadherin和Vimentin蛋白水平,上调E-cadherin蛋白表达。结论 AMPK抑制TGF-β信号通路下调N-cadherin和Vimentin蛋白水平,上调E-cadherin蛋白表达,减轻EMT诱导膀胱癌转移。     

膜联蛋白A7低表达对人胃癌MGC-803细胞迁移和侵袭的影响

目的 探讨膜联蛋白A7(A N X A7)低表达对人胃癌M G C-803细胞迁移和侵袭的影响.方法 培养人胃癌MGC-803细胞并分成3组,采用脂质体转染法,将靶向ANXA7的siRNA转染于干扰组细胞,阴性siRNA转染阴性对照组,空白对照组常规培养.转染48h后应用Western blotting检测各组ANXA7的表达以鉴定转染效率;细胞划痕实验检测各组细胞的迁移能力;Transwell实验检测细胞的侵袭能力;Western blotting检测ANXA7低表达后E-钙黏蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶(MMP-9)表达水平的变化.结果 靶向ANXA7的siRNA显著抑制其在M G C-803细胞中的表达(P<0.05);干扰组细胞的迁移及侵袭能力均明显低于阴性组和空白组(P<0.05);E-cadherin的表达显著上调(P<0.05),MMP-9的表达显著下调(P<0.05).结论 ANXA7低表达可能通过调控E-cadherin和MMP-9的表达来抑制MGC-803细胞的迁移和侵袭能力.     

二烯丙基二硫在RORα抑制人胃癌细胞上皮间质转化中的作用

目的探讨二烯丙基二硫（DADS）是否上调维甲酸相关孤核受体α（RORα）抑制人胃癌细胞株MGC803 细胞上皮- 间质转化（EMT）。方法相差显微镜观察MGC803 细胞形态的改变。逆转录PCR（RTPCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）、免疫荧光与免疫组织化学检测EMT 的相关分子表达。裸鼠实验检测DADS 与沉默RORα对移植瘤生长的影响。结果相差显微镜显示,沉默RORα细胞较MGC803 细胞大小与形状差异更明显。DADS作用后,细胞大小较一致,呈圆形或椭圆形,梭形细胞减少,异型性下降。RT-PCR与Western blot显示,DADS 处理后较处理前各组RORα mRNA 与蛋白表达上调（p <0.05）。DADS 作用对照组与空载体组较沉默组效果更为明显（p <0.05）。RORα沉默较对照组和空载体组细胞锌指转录因子（Snail）和波形蛋白（Vimentin）mRNA与蛋白表达上调,而E- 钙黏蛋白（E-cadherin）mRNA 与蛋白下调（p <0.05）。DADS处理后,各组Snail蛋白下调、Vimentin mRNA与蛋白下调和E-cadherin mRNA与蛋白上调（p <0.05）。免疫荧光显示,沉默组细胞Snail与Vimentin阳性表达较对照组增强,而E-cadherin阳性表达减弱。DADS作用后,结果相反。裸鼠移植瘤实验显示,RORα沉默组移植瘤较对照组生长加快和体重增加（p <0.05）,增殖细胞核抗原（Ki-67）、Snail、CD34及Vimentin 阳性表达较对照组增加,而E-cadherin阳性降低。DADS 处理各组移植瘤生长与体积减慢与减小,Ki-67、Snail、CD34与Vimentin阳性表达较对照组减弱,而E-cadherin阳性表达增强。结论DADS 通过上调RORα 可体内外抑制人胃癌MGC803 细胞EMT。     

COLIA1调控小鼠神经细胞迁移在神经管畸形中的作用

目的探讨Ⅰ型胶原蛋白α1(COLIA1)调控神经细胞迁移活动对小鼠神经管闭合的作用。方法利用全反式维甲酸(ATRA)诱导建立神经管畸形(NTDs)小鼠模型。采用Western blotting检测COLIA1,上皮细胞间质转化(EMT)相关指标E-cadherin、 Snail、Vimentin表达情况。在C17.2神经干细胞中沉默COLIA1后,Western blotting检测COLIA1对E-cadherin、 Snail和Vimentin表达的调节作用,通过Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验观察细胞迁移生物学活动变化。结果在ATRA诱导的NTDs小鼠模型中,COLIA1表达下调,迁移相关的EMT指标Snail、Vimentin表达下调,E-cadherin表达上调。在C17.2神经干细胞中,沉默COLIA1表达后,EMT指标Snail、Vimentin表达下调,E-cadherin表达上调,细胞迁移能力降低。结论 COLIA1通过影响细胞迁移抑制NTDs的形成。     

厚朴酚葡萄糖苷对人乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响

目的:探索联苯型新木脂素类化合物厚朴酚葡萄糖苷（magnolol-2-O-β-D-glucopyranoside,Mag-glu）对人乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响,并对其可能机制进行研究。方法:MTT法检测化合物对MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖的影响;细胞划痕实验和Transwell小室法检测化合物对人乳腺癌细胞运动、侵袭和迁移能力的影响;Western blotting法检测化合物对缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和环氧化酶2（COX-2）蛋白表达的影响。结果:Mag-glu具有抑制MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖的作用,且呈现浓度和时间依赖性。划痕实验结果表明,经过不同浓度的Mag-glu处理MDA-MB-231细胞24 h后,细胞水平运动运动能力明显下降（P<0.01）。Transwell结果显示,经过不同浓度的Mag-glu处理细胞24 h和48 h后,细胞迁移和侵袭能力显著下降。Western blotting结果显示,随着Mag-glu浓度的增加,HIF-1α、MMP-9、COX-2的表达均下调。结论:Mag-glu在体外能够抑制人乳腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移,其机制可能是抑制了HIF-1α信号途径,导致其下游顾客蛋白COX-2和MMP-9的表达下调有关。     

DADS上调RORα抑制人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭

目的 研究二烯丙基二硫(DADS)是否通过上调维甲酸相关孤核受体α(RORα)表达抑制人胃癌MGC803细胞增殖、细胞周期与迁移侵袭。方法实验组分为6组,对照组,空载体组,RORα干扰组(miR-RORα),DADS组,空载体联合DADS组,miR-RORα联合DADS组。Western blot检测RORα、MMP-9与TIMP3蛋白表达。MTT、流式细胞术、迁移和侵袭实验分别检测细胞增殖、细胞周期与迁移侵袭的改变。结果DADS处理细胞24 h后,与对照组和空载体组比较,DADS上调RORα和TIMP3、下调MMP-9蛋白表达。干扰组较对照组与空载体组RORα表达明显下调。与DADS处理组比较,干扰RORα表达上调MMP-9、下调TIMP3蛋白表达。MTT实验显示,DADS抑制MGC803细胞增殖,而干扰RORα表达促进增殖。流式细胞术显示,DADS诱导G2/M期阻滞,下调RORα削弱其作用。迁移实验显示,DADS处理组迁移距离明显减少。RORα干扰组迁移距离明显高于对照组和空载体组。侵袭实验显示,DADS处理组较对照组和空载体组穿膜细胞明显减少。干扰组穿膜细胞明显多于对照组和空载体组。干扰RORα表达降低DADS对细胞迁移和侵袭的抑制作用。结论DADS上调TIMP3表达,下调MMP-9表达,抑制MGC803细胞增殖与迁移侵袭,其作用机制与上调RORα表达有关。     

大肠癌明胶酶和TGF-β1及其受体的表达

目的研究明胶酶（MMP-2,9）与转化生长因子（TGF-β1）及其Ⅰ型受体（TGF-β1RⅠ）在大肠癌组织中的蛋白表达及其相互关系。方法应用免疫组织化学S-P法检测89例大肠癌组织中MMP-2、MMP-9与TGF-β1、TGF-β1RⅠ蛋白的表达。结果大肠癌MMP-2、MMP-9、TGF-β1和TGF-β1RⅠ阳性率分别为67.4%、65.2%、85.4%和71.9%;MMP-2表达与肿瘤大小和淋巴结转移均呈正相关（均P〈0.01）,MMP-9表达与淋巴结转移呈正相关（P〈0.01）,TGF-β1RⅠ的表达与淋巴结转移呈负相关（P〈0．01）;TGF-β1表达状况与MMP-2和MMP-9的表达均呈显著正相关（r=0．256和0．365,P〈0．05和0．001）,TGF－β1RI和MMP-9的表达呈显著正相关（r=0．225,P〈0．05）。结论MMP－2,9的表达情况与大肠癌侵袭转移有密切关系。MMP-2,9的表达与TGF—β1、TGF-β1RI关系密切,可能在一定程度上受到TGF-β1及其受体的调控。     

雷帕霉素对肾小管上皮细胞生物学行为的影响及其治疗糖尿病肾病分子机制的初步研究

目的 研究雷帕霉素(RAPA)对肾小管上皮细胞生物学行为的影响及其治疗糖尿病肾病分子机制.方法 体外培养肾小管上皮细胞(HK-2),使用转化生长因子 β1(TGF-β1)处理HK-2细胞,以建立肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转化(EMT)的细胞模型,并联合RAPA处理HK-2细胞,通过Transwell迁移实验和侵袭实验观察HK-2细胞的迁移和侵袭等细胞生物学行为变化;通过RT-PCR、Western blot法观察EMT分子标志物表达的变化;结合前期建立的糖尿病肾病小鼠模型的肾组织及通过腹腔注射RAPA[1 mg/(kg·d)]处理后的模型小鼠肾组织,利用HE染色分析肾组织的病理变化;利用免疫组化检测EMT分子标志物的表达变化.结果 Transwell实验结果表明,TGF-β1诱导HK-2细胞发生迁移和侵袭能力明显增加;联合应用RAPA后,迁移和侵袭能力明显抑制.RT-PCR、Western blot和免疫组化结果显示TGF-β1可以促进间质细胞标志分子Vimentin的表达,而上皮标志分子E-cadherin的表达明显降低;联合应用RAPA后可以抑制TGF-β1诱发的EMT作用.HE染色显示,RAPA治疗后,能显著改善糖尿病肾病小鼠肾小管形态病变.结论 RAPA具有抑制肾小管上皮细胞发生EMT作用.     

华蟾素对TGF-β1诱导人结肠癌细胞上皮-间质化的实验研究

目的 研究华蟾素在体外对肿瘤坏死因子-β1(TGF-β1)诱导的人结肠癌细胞上皮-间质化(EMT)的作用.方法 将体外培养的人结肠癌细胞株(SW480)分为:(1)正常对照组;(2)TGF-β1 (10 ng/mL)单独处理组;(3)TGF-β1(10 ng/mL)+华蟾素(2.5、5、10、20、40、80 mg/mL)共同处理组,并在体外培养48 h.CCK8检测细胞增殖抑制情况,利用倒置相差显微镜观察各处理组细胞形态学变化,Transwell小室检测细胞侵袭与迁移能力,实时荧光定量PCR(QRT-PCR)和Western blot分别检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)在mRNA及蛋白水平表达的变化.结果 (1)与TGF-β1(10 ng/mL)单独处理组比较,TGF-β1(10 ng/mL)+华蟾素(10、20、40、80 mg/mL)共同处理组对SW480具有显著的增殖抑制作用(P＜0.05).(2)与正常对照组相比,TGF-β1单独处理组、TGF-β1(10 ng/mL)+华蟾素(2.5 mg/mL)共同处理组呈现典型的间质化表型,TGF-β1 (10 ng/mL)+华蟾素(5 mg/mL)共同处理组则呈现经典的上皮表型.(3)TGF-β1(10 ng/mL)+华蟾素(2.5、5mg/mL)共同处理组与TGF-β1单独处理组相比侵袭和迁移能力均明显减弱(P＜0.05).(4) QRT-PCR和Western blot结果显示TGF-β1单独处理组与正常对照组比较,Vimentin表达水平明显增强,E-cadherin表达显著减弱.TGF-β1 (10 ng/mL)+华蟾素(2.5、5 mg/mL)共同处理组与TGF-β1单独处理组、对照组相比Vimentin表达水平显著降低,E-cadherin表达显著增强.结论 华蟾素可抑制TGF-β1诱导的人结肠癌细胞SW480的增殖,其机制可能与促进E-钙黏蛋白表达增强,同时使波形蛋白表达减弱,从而与抑制TGF-β1诱导的EMT过程有关.     

西利马林抑制MCF-7细胞侵袭和MMP-9表达

目的探讨西利马林与紫杉醇对乳腺癌细胞MCF-7增殖侵袭以及MMP-9表达的影响。方法体外培养MCF-7细胞,并分为空白对照组、紫杉醇组、西利马林组和紫杉醇＋西利马林组。采用噻唑蓝法检测细胞的增殖情况,反转录PCR检测MMP-9mRNA的表达,小室侵袭实验检测细胞的侵袭力。结果西利马林和紫杉醇均能抑制MCF-7细胞增殖,并能抑制细胞侵袭力和MMP-9mRNA的表达。但两者联合使用时能进一步抑制细胞增殖、侵袭和MMP-9表达。结论西利马林能增强紫杉醇对乳腺癌细胞增殖侵袭的抑制效应,其机制可能与MMP-9表达有关。     

TGF-β1对绒毛膜癌JEG-3细胞基质金属蛋白酶-9基质金属蛋白酶抑制剂-1蛋白表达的影响

目的：观察转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）对绒毛膜癌JEG-3细胞系基质金属蛋白酶-9（matrixmetalloproteinases,MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）蛋白表达的影响。方法：体外培养人绒毛膜癌JEG-3细胞,分别给予不同浓度及不同作用时间的TGF-β1进行诱导,Western Blotting法检测MMP-9、TIMP-1蛋白的表达变化。结果：与对照组相比,100、200μg/L TGF-β1作用后,检测各组细胞MMP-9及TIMP-1蛋白的相对表达量均增加（P〈0.01）;与0h比较,12、24、48、72h各组细胞MMP-9及TIMP-1蛋白的相对表达量均增加（P〈0.05）,且各组MMP-9/TIMP-1大于1。结论：绒癌的浸润转移与MMP-9及TIMP-1的表达变化密切相关。     

扶正抑癌方含药血清对结肠癌lovo细胞侵袭转移能力及TGF-β_1与TβRⅡ蛋白表达的影响

目的:观察扶正抑癌方含药血清对结肠癌lovo细胞侵袭转移能力及TGF-β_1和TβRⅡ蛋白表达的影响,以探讨扶正抑癌方降低结肠癌转移的机制。方法:lovo细胞体外培养,制备大鼠不同浓度含药血清后,MTT测定不同浓度含药血清对细胞增殖的影响,以5-Fu作为阳性对照药;通过细胞迁移实验检测细胞运动能力,肿瘤细胞体外侵袭实验检测细胞侵袭能力,SABC免疫组化法检测TGF-β_1和TβRⅡ的蛋白表达。结果:高浓度含药血清24 h对lovo细胞作用有效,与对照组和空白组相比,扶正抑癌方含药血清能显著降低细胞的运动能力和侵袭能力,免疫组化提示扶正抑癌方含药血清能降低lovo细胞TGF-β_1的蛋白表达和提高TβRⅡ的蛋白表达,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:扶正抑癌方含药血清能有效抑制lovo细胞的增值和降低其侵袭力和运动能力,初步认为其作用机制与降低lovo细胞TGF-β_1的表达和升高βRⅡ的蛋白表达有一定的相关性。     

穿心莲内酯对胃癌AGS细胞增殖侵袭的影响

目的观察穿心莲内酯（AD）对胃癌细胞增殖侵袭以及Na＋-K＋-ATP酶活性的影响。方法体外培养胃癌细胞系AGS,分别用1.0、3.0、5.0μmol/L穿心莲内酯作用24～72 h,无机磷法检测AGS细胞Na＋-K＋-ATP酶活性改变情况;MTT和ELISA分析AGS细胞的增殖与断裂DNA含量;同时采用ELISA检测血管内皮生长因子（VEGF）和转化生长因子β1（TGF-β1）的水平;荧光共振能量转移法检测基质金属蛋白酶9（MMP-9）的活性;小室侵袭实验检测细胞侵袭。结果 1.0～5.0μmol/L穿心莲内酯能显著降低Na＋-K＋-ATP酶活性,并能在此浓度下抑制AGS细胞生长增殖以及增加断裂DNA水平。同时,穿心莲内酯也能减少VEGF和TGF-β1的水平（P〈0.05）,降低MMP-9酶的活性,并能有效减少癌细胞的侵袭（P〈0.05）。结论穿心莲内酯是一种有效的抗胃癌药物,它可能具有阻碍胃癌细胞侵袭的能力。     

核糖核酸酶抑制因子过表达抑制B16细胞的侵袭和转移

目的 构建人核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)真核表达载体,检测其对B16细胞侵袭和转移能力的影响.方法 提取人7703细胞中的总RNA,RT-PCR特异性扩增RI编码区序列,利用基因重组技术将其克隆到载体pIRES2-EGFP中,稳定转染B16细胞以后,经G418筛选出阳性克隆.根据转染质粒不同分别命名为B16细胞组(未转染组)、空质粒对照组(pIRES2 -EGFP组)和实验组(pIRES2-EGFP-RI组).RT-PCR检测B16细胞中RI mRNA水平的表达,并通过Western blot和细胞免疫化学检测RI蛋白水平的表达;HE染色观察细胞形态的改变,黏附实验、划痕实验和Transwell法检测细胞黏附、迁移和侵袭能力的变化;Western blot检测MMP-2、MMP-9和nm23-H1以及E-cadherin的表达;建立C57BL/6小鼠肺转移模型,观察肺上肿瘤转移灶的变化.结果 酶切和测序结果证明重组质粒构建成功,实验组细胞RI的mRNA和蛋白的表达较B16细胞组和空质粒对照组显著升高(P＜0.05);HE染色结果显示,细胞铺展良好,核质比减小;转染pIRES2-EGFP-RI质粒的实验组细胞的黏附、迁移及侵袭能力明显降低(P＜0.05);与两对照组相比,实验组细胞MMP-2和MMP-9的表达水平明显降低,nm23-H1和E-cadherin的表达水平明显升高(P＜0.05);动物实验结果显示与对照组相比,实验组的肺转移灶明显减少.结论 成功构建的RI真核表达质粒能升高RI基因及蛋白水平的表达,显著抑制了B16细胞的转移和侵袭能力.