两相体系超声辅助酶水解法提取异黄酮苷元

目的建立两相体系超声辅助酶水解法转化提取异黄酮苷元的制备工艺。方法采用油相萃取一水相酶解两相体系,通过单因素与正交试验,考察超声时间、温度、酶量、pH值等因素对超声辅助酶水解法提取游离型异黄酮苷元效果的影响,筛选优化提取条件。结果两相体系超声辅助酶水解法提取异黄酮苷元的最佳工艺条件是：超声时间60min,超声温度45℃,酶量10U／100mL,水解液pH值为5。结论该工艺流程简便,溶剂使用量少,酶解时间短,游离型异黄酮苷元的转化率较高。     

妇人,母猪,雌性大白鼠食用大豆后,尿中大豆异黄酮代谢物

目的：研究妇人，母猪，雌性大白鼠食用后，尿中大豆异黄酮代谢物成份的比较。方法：妇人食用大豆食品或以含大豆饲料喂食母猪，雌性大白鼠后，收集尿液，以液质联用分析仪分析尿液中大豆异黄酮代谢物的种类及含量。结果：在尿液样品中检测出大豆异黄酮及其糖苷酸代谢物。在大白鼠尿液中的大豆异黄酮代谢物主要为7—4’—异黄烷二醇葡萄糖百酸(equol glucuronide conjugate)，其次为7，5，4’—三羟基异黄酮糖苷酸(genistein glucuronide conjugate)及7，4’—二羟基异黄酮糖苷酸(daidzein glucuronide conjugate)。在妇人尿液中大豆异黄酮糖苷酸代谢物超过90％，在母猪尿液中大豆异黄酮糖苷酸代谢物介于80．5％—84．5％之间。在雌性大白鼠尿液中大豆异黄酮糖苷酸代谢物约有50％的大豆异黄酮糖百酸代谢物。结论：7．4’—异黄烷二醇为大白鼠尿液中的主要大豆异黄酮代谢物。猪模型比大白鼠模型较合适用来模拟人类食用大豆食品后的代谢研究。     

大豆异黄酮对胰岛素抵抗大鼠低度炎症因子水平的影响

目的探讨大豆异黄酮(SIF)对膳食诱导的胰岛素抵抗大鼠低度炎症介质水平的影响,以初步阐明大豆异黄酮改善肥胖性胰岛素抵抗状态的可能机制。方法选用高脂饲料诱导的IR雄性SD大鼠,随机分为模型对照组和3个SIF组(50、150及450mg/kg·b.w.)。各组给予相应受试物1月,禁食过夜后股动脉采血处死各大鼠,分离肾周及睾周白色脂肪。酶法检测各组动物空腹血糖,放免法检测空腹血胰岛素IL-6及TNF-α,酶免法检测血清C-反应蛋白、抵抗素与脂联素含量。结果与模型对照组比较:150mg/kg·b.w.与450mg/kg·b.w.组的内脏脂肪/体质量比、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数TNF-α及抵抗素含量明显降低;450mg/kg·b.w.组能明显降低血清IL-6及提高脂联素的含量;3个SIF组的C-反应蛋白水平与模型组比较无明显差异。结论SIF具有提高胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性的作用,可能是通过减少大鼠体内脂肪沉积、调整脂肪源低度炎症介质的分泌而实现的。     

LC-MS/MS法测定大鼠口服缩泉胶囊后胆汁中的代谢物（Ⅱ）

目的 研究大鼠灌胃缩泉胶囊后,益智黄酮（杨芽黄素、伊砂黄素、白杨素、山奈素和芹菜素-4＇,7-二甲氧醚）二相结合产物的酶水解。方法 雄性Sprague-Dawley大鼠胆管插管手术完毕后经灌胃给予缩泉胶囊（1.64 g/kg）后收集0~4 h胆汁。胆汁样品经β-葡萄糖醛酸水解酶（1 000 U/ml,pH为5的乙酸钠缓冲液）处理后,利用液相色谱-质谱联用仪（LC-MS/MS）进行分析。结果 益智黄酮的葡萄糖醛酸结合物在酶水解处理后,代谢物的色谱峰消失,释放出黄酮的原形物质形式。虽然脱甲基反应后形成葡萄糖醛酸结合物也被水解,但并未能检测到脱甲基产物。结论 β-葡萄糖醛酸水解酶处理可进一步确定益智黄酮在大鼠胆汁中的物质形式,也为定量分析奠定基础。     

菊粉低聚糖的水解工艺研究

目的研究确立菊粉低聚糖的最佳水解工艺条件。方法采用酸法、酶法两种方式,分别设计单因素实验对菊糖提取液进行水解。结果酸法水解最佳工艺条件为水解温度80℃、水解时间30 min、pH=2.0;酶法最佳工艺条件为水解温度65℃、水解时间18 h、底物浓缩比1∶1、酶用量0.4 g。结论酸法水解优于酶法,转化率高且操作条件简单易行。     

大豆异黄酮对2型糖尿病围绝经期模型大鼠氧化应激损伤的保护作用及其机制

目的：探讨大豆异黄酮对2型糖尿病围绝经期模型大鼠氧化应激损伤的保护作用,阐明其作用机制。方法：将60只大鼠随机取10只为对照组（n=10）,其余大鼠采用高糖高脂饲料喂养及切除双侧卵巢的方法建立2型糖尿病围绝经期大鼠模型,造模成功的46只大鼠随机分为假手术组（n=9）,模型组（n=8）,低（n=9）、中（n=10）和高（n=10）剂量大豆异黄酮组。假手术组大鼠切除两侧卵巢下方的部分脂肪组织,低、中和高剂量大豆异黄酮组大鼠分别灌胃给予不同剂量（90、180和360 mg·kg^-1）大豆异黄酮,对照组、假手术组和模型组大鼠则灌胃给予等体积生理盐水,连续8周。检测各组大鼠体质量和空腹血糖（FBG）水平,采用ELISA法检测各组大鼠血清雌二醇（E2）、促卵泡生成素（FSH）、促黄体生成素（LH）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）和活性氧（ROS）水平。结果：与模型组比较,低、中和高剂量大豆异黄酮组大鼠体质量和FBG水平明显升高（P<0.05）,血清中E2水平明显升高（P<0.05）,血清FSH和LH水平明显降低（P<0.05）,血清SOD、GSH-Px和NO水平均明显升高（P<0.05）,血清MDA和ROS水平均明显降低（P<0.05）。结论：大豆异黄酮可以调节大鼠血清雌激素水平,提高抗氧化应激能力,对2型糖尿病围绝经期模型大鼠氧化应激损伤有保护作用,且不存在剂量依赖性。     

大豆异黄酮对子代雄鼠生殖系统的危害

目的探讨大豆异黄酮孕期暴露对雄性子代大鼠生殖系统的危害，为阐明人群接触大豆异黄酮对子代生殖系统的不良影响提供参考依据。方法SD大鼠按2：1比例与雄性大鼠同笼交配获取40只孕鼠。将孕鼠随机分为4组，在孕鼠的E13-E19期间以花生油为溶剂灌胃染毒，子一代雄鼠继续饲喂至90天龄剖杀。结果与正常对照比较，高剂量大豆异黄酮组大鼠出生身长、肛殖距、包皮分离时体重水平显著下降，包皮分离时间显著延长，且肛殖距下降表现出剂量效应关系；光镜下可见睾丸组织结构异常。结论大豆异黄酮孕期暴露对子代大鼠的雄性生殖系统具有危害。     

大豆异黄酮对雄性子代大鼠生殖发育的影响

目的探讨雌性大鼠孕期暴露大豆异黄酮（SIF）对雄性子代生殖系统发育造成的影响。方法 SD大鼠按雌雄2：1同笼交配获取40只孕鼠。将孕鼠随机分为5组：0 mg/kg（对照组）、25mg/kg、50mg/kg、150mg/kg、450mg/kgSIF组。在孕期13~19天将SIF以花生油为溶剂灌胃染毒。雄性子代于出生后第18天检测子鼠生长发育指标,剖杀称取睾丸等内脏重量,用放免法检测血清黄体生成素（LH）和睾酮（TT）水平。结果 SIF在450mg/kg剂量时肛殖距（P〈0.05）和睾丸系数（P〈0.01）明显低于对照组。生后18天放免结果显示SIF可以降低LH的血清水平,但尚无显著性差异（P〉0.05）;在150mg/kg后,可以升高血清中睾酮水平（P〈0.05）。结论孕期暴露SIF对雄性子鼠的生殖发育的影响跟SIF存在关系,当SIF剂量较高时将对雄性子鼠生殖发育产生毒性作用。     

吉林市20～55岁女性膳食大豆异黄酮摄入量与其对血脂的作用

目的：了解吉林市成年女性膳食异黄酮摄入量与其对血脂的作用。方法：用膳食记账法问卷调查249名20～55岁吉林市部分女性3 d的膳食调查,空腹清晨抽取静脉血,分离血清,用日本Olympus AU640检测总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇。结果：按照膳食总大豆异黄酮的摄入量将249名研究对象分为低、中、高3组,摄入量分别为（4.7±2.3）mg,（13.9±2.4）mg,（36.6±14.9）mg,差异有统计学意义（P〈0.000 1）。低、中、高3组间总胆固醇（TC）分别为（4.7±0.7）mmol/L,（4.5±0.7）mmol/L,（4.4±0.7）mmol/L,低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）分别为（3.1±0.7）mmol/L,（2.9±0.7）mmol/L,（2.7±0.6）mmol/L,控制体质指数、总能量和脂肪供能比后,差异有统计学意义（P值分别为0.025 7和0.017）。结论：在成年女性膳食异黄酮摄入量有改善血脂的作用。     

大豆异黄酮对胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性及瘦素基因表达的影响

目的:观察大豆异黄酮(SIF)对高脂膳食诱导的胰岛素抵抗(IR)大鼠血清瘦素水平及白色脂肪组织瘦素mRNA表达的影响,并探讨SIF提高胰岛素敏感性的可能机制.方法:选用高脂饲料诱导的IR雄性SD大鼠,根据其胰岛素抵抗指数(IRI)随机分为模型对照组(水)和3个SIF组(50 mg/kg,150 mg/kg及450 mg/kg).各组经口灌胃给予相应受试物1个月,空腹过夜后取材,用酶法检测各组动物空腹血糖、用放射免疫法检测空腹血胰岛素、用酶联免疫法检测血清瘦素含量,以实时定量RT-PCR法检测肾周脂肪组织瘦素基因的mRNA水平.结果:与模型对照组比较,SIF 150 mg/kg和450 mg/kg组能显著降低空腹血胰岛素水平及IRI,SIF450 mg/kg组能明显降低大鼠体重及肾周脂肪组织瘦素基因mRNA的表达、提高血清瘦素的含量.结论:SIF可能具有改善瘦素抵抗的作用,并进而提高胰岛素的敏感性.     

大豆异黄酮对大鼠前列腺增生的抑制作用

OBJECTIVE: To explore the inhibitive effect of soybean isoflavone on benign prostatic hyperplasia in rats. METHODS: By subcutaneously injecting testosterone propionate to induce prostate hyperplasia in rats, the changes of prostate wet weight, prostatic index, morphological change, prostate-specific acid phosphatase (PAP), acid phosphatase in the control, the model, low, moderate, high dose of soybean isoflavone groups were observed. RESULTS: The ventral prostate wet weight, prostatic index, and PAP in the low, moderate, and high dose groups were significantly lower than those in the models (P < 0.05). The ventral prostate wet weight, prostatic index, and PAP in the moderate, and high dose groups were significantly lower than those in the low dose group (P < 0.05). CONCLUSION: Soybean isoflavone inhibits prostate hyperplasia and the increase of acid phosphatase and PAP in a dose-dependent manner in rats. Soybean isoflavone may serve as supplementary therapy and prevent benign prostatic hyperplasia.     

大豆异黄酮对去势大鼠血脂及动脉内皮舒张功能的影响

目的探讨大豆异黄酮对去卵巢大鼠的血脂代谢及血管内皮依赖性舒张功能的影响.方法50只健康雌性SD大鼠随机分成五组,A组假手术组,B组去卵巢(OVX) 高脂饲料,C组为OVX 高脂饲料 20 mg/(kgbw·d)大豆异黄酮,D组为OVX 高脂饲料 60 mg/(kgbw·d)大豆异黄酮,E组为OVX 高脂饲料 180 mg/(kgbw·d)大豆异黄酮.实验第61天股动脉放血处死大鼠,取血清测血脂、取胸主动脉做内皮依赖性舒张功能检测.结果A、C、D、E组大鼠血清TC、TG、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量都显著低于B组,C、D、E组血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著高于B组(P＜0.05);B组大鼠动脉对乙酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张反应显著低于A、C、D、E组(P＜0.05).结论大豆异黄酮能抑制血清TG、TC、LDL-C的升高,同时升高HDL-C,保护动脉内皮的正常功能,从而有益于预防绝经妇女动脉粥样硬化的形成.     

大豆异黄酮对60Co-γ线照射小鼠肝组织过氧化状态的影响

目的:观察大豆异黄酮对60Co-γ射线引起小鼠肝组织过氧化损伤的影响.方法:实验根据体质量将80只雌性昆明小鼠随机均分为5组,即正常对照、阳性对照(单纯辐照组)及低、中、高剂量大豆异黄酮实验组(50、100、400 mg/kg).辐照前正常对照、阳性对照组及实验组每天分别以溶剂0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)和不同剂量大豆异黄酮连续灌胃14 d,灌胃至第7天,除正常对照组外,其余各组小鼠均接受4.56 Gy60Co-γ全身性照射1次,照射后继续灌胃2 d及7 d后杀鼠取肝组织作生化分析.结果:照射后第2天100、400 mg/kg大豆异黄酮组及照射后第7天3个浓度大豆异黄酮组显著提高肝细胞质过氧化氢酶的活性(P<0.05);照射后第7天100 mg/kg大豆异黄酮组的肝组织谷胱甘肽过氧化物酶活性有显著提高(P<0.05);照射后第2天50 mg/kg大豆异黄酮使肝组织总超氧化物歧化酶活性显著下降(P<0.05),其余各组间无显著差异;照射后第7天100 mg/kg大豆异黄酮使肝组织丙二醛含量下降,与对照组有显著差异(P<0.05),照射后第2天各照射组肝组织丙二醛含量有一过性升高,但第7天实验组已降至正常水平.结论:大豆异黄酮可提高受照小鼠肝组织的抗氧化能力,但不呈量效关系.     

直链烷基苯磺酸钠对小鼠皮肤组织的氧化应激损伤 及大豆异黄酮的拮抗作用研究

目的:探讨不同剂量直链烷基苯磺酸钠(LAS)对小鼠皮肤组织氧化应激的影响及大豆异黄酮的拮抗作用。方法:将40只昆明种雄性小鼠随机分成4组,每组10只,分别为正常对照组、LAS低剂量组(LAS 150 mg/L)、中剂量组(LAS 300 mg/L)和高剂量组(LAS 600 mg/L)。用蒸馏水及不同剂量的LAS涂抹小鼠的背部剃毛处,连续涂抹60 d。将50只小鼠随机分为5组,分别为正常对照组、LAS氧化应激损伤组(LAS 300 mg/ L)及3个拮抗组(分别用50、100及150 mg/L大豆异黄酮涂抹,再用300 mg/L LAS涂抹),每天1次,连续涂抹60 d。取涂抹部位皮肤,剪碎制匀浆,检测其中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。结果:小鼠皮肤经不同剂量LAS处理后,MDA的含量均明显高于对照组(P<0.01),LAS高剂量组的MDA含量均明显高于低剂量组和中剂量组(P<0.01);LAS中、高剂量组 SOD和GSH-Px的活性均明显低于对照组(P<0.01),且随LAS剂量增加,酶的活性逐渐降低(P<0.01)。大豆异黄酮干预后,各拮抗组MDA含量均低于LAS氧化应激损伤组(P<0.05~P<0.01),但均高于对照组(P<0.01);除拮抗组1与LAS氧化应激损伤组GSH-Px活性差异无统计学意义(P >0.05)外,各拮抗组SOD和GSH-Px活性均高于LAS氧化应激损伤组(P<0.01),但均低于对照组(P<0.05~0.01);随异大豆黄酮浓度的增加,拮抗效果增加。结论:LAS可导致小鼠皮肤组织氧化应激损伤,大豆异黄酮在一定剂量范围内可以抑制这种应激损伤。     

大豆异黄酮对大鼠前列腺增生的抑制作用

目的 :探讨补充不同剂量大豆异黄酮对大鼠前列腺增生的影响。方法 :应用丙酸睾酮诱导大鼠前列腺增生 ,观察正常对照组、模型组、低剂量、中剂量及高剂量大豆异黄酮组大鼠前列腺的湿重、前列腺指数、形态学、前列腺特异性酸性磷酸酶及酸性磷酸酶改变。结果 :①低、中、高剂量组大鼠前叶前列腺湿重及前列腺指数、前列腺特异性酸性磷酸酶均显著低于模型组 (P <0 .0 5 ) ;②中、高剂量组大鼠前叶前列腺湿重及前列腺指数和前列腺特异性酸性磷酸酶均显著低于低剂量组 (P <0 .0 5 )。结论 :大豆异黄酮可显著抑制大鼠前列腺增生 ,抑制酸性磷酸酶水平的升高 ,且呈剂量依赖性。大豆异黄酮可能对预防和辅助治疗良性前列腺增生有一定作用。     

大豆卵磷脂联合大豆异黄酮改善大鼠学习记忆损伤及脑血管保护作用

目的 观察大豆卵磷脂(soy lecithin, SL)和大豆异黄酮(soy isoflavone, SIF)改善大鼠学习记忆损伤及脑血管保护的联合作用,探讨二者的最佳联合剂量,为明确大豆活性物质的神经保护作用及其联合效应提供科学依据。方法 本研究使用SPF级的成年雄性Wistar大鼠,采用两因素三水平正交实验设计分为对照组、β淀粉样肽(β-amyloid, Aβ)模型组和9个不同的SL+SIF剂量组合干预组。应用水迷宫、脑血管HE染色、酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)以及酶法试剂盒等方法,对大鼠学习记忆能力、脑血管病理损伤、体内氧化损伤水平以及氧化还原平衡体系等相关指标进行检测。结果 Aβ模型组大鼠逃避潜伏期显著延长(P＜0.05),脑血管组织形态异常改变明显,并且伴有体内丙二醛(malondialdehyde,MDA)和3-硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine,3-NT)显著上升(P＜0.05),谷胱甘肽与氧化型谷胱甘肽的比值(ratio of glutathione/oxidized glutathione, GSH/GSSG)显著下降(P＜0.05)。相反,SL+SIF各干预组与Aβ模型组比较,二者对上述改变均有不同程度的保护作用。SL(40 mg·kg^-1·d^-1)+SIF(50 mg·kg^-1·d^-1) 是改善大鼠学习记忆、保护脑血管以及调节体内氧化还原平衡体系的最佳联合剂量。结论 SL+SIF可以显著改善Aβ介导的大鼠学习记忆损伤,其神经保护作用可能与二者发挥抗氧化活性拮抗Aβ介导的脑血管损伤有关。二者的神经保护作用具有协同效应,SL(40 mg·kg^-1·d^-1)+ SIF(50 mg·kg^-1·d^-1)是大鼠神经保护的最佳联合剂量。     

大豆异黄酮衍生物的全合成研究

目的：设计并合成异黄酮类衍生物。方法：以取代苯乙酸、间苯二酚为原料,经傅克反应、增碳关环反应制备系列目标化合物1和2。结果：所合成的8个化合物经IR、1H-NMR及MS确证结构,其中异黄酮的关键中间产物脱氧安息香的最佳合成条件为：反应温度80℃,反应时间6h,三氟化硼乙醚的用量为5～12mL/10mmol取代苯乙酸。结论：通过全合成的方法可以得到结构多样的异黄酮类衍生物,为进一步结构修饰和构效关系的研究提供了基础。     

大豆异黄酮对去卵巢小鼠认知功能的影响

目的：研究大豆异黄酮对去卵巢小鼠认知功能的影响并探讨其机制。方法:45只健康雌性昆明种小鼠按体重随机均分为5组,A组为对照组（假手术组）,B组为去卵巢模型组（OVX）,C组为OVX+大豆异黄酮低剂量组,D组为OVX+大豆异黄酮中剂量组,E组为OVX+大豆异黄酮高剂量组。试验期为60 d。结果:B组小鼠到达水迷宫终点时间明显长于D组和E组（P<0.05）;跳台记忆试验B组小鼠平台潜伏期短于D组, 且错误次数高于A,C,D,E组（P<0.05）。A,C,D,E组小鼠血清SOD活力、脑组织Na+K+-ATP酶活力均高于B组,血清MDA水平均低于B组（P<0.05）;Ca2+ Mg2+-ATP活力A,D组高于B组,E组小鼠脑组织中AchE活力明显高于B,C,D,组（P<0.05）,单胺氧化酶活力B组高于D组(P<0.05)。结论:持续口服大豆异黄酮可以明显改善去卵巢小鼠的认知功能。     

大豆异黄酮对去卵巢大鼠子宫细胞凋亡影响的研究

目的:探讨大豆异黄酮对去卵巢大鼠子宫细胞凋亡的影响.方法:60只雌性Wistar大鼠,随机分为6组,正常组、模型组、雌二醇组、假手术组、大豆异黄酮低剂量组、大豆异黄酮高剂量组.给药6周后,处死大鼠,分离摘取子宫,常规石蜡包埋切片.凋亡细胞的检测使用TDT-mediated dUTP-biotin nick end labeling(TUNEL)方法.结果:TUNEL标记率为:正常组粘膜层和肌层分别3.84%和6.26%,模型组为14.18%和17.33%,雌二醇组为0.88%和0.40%,假手术组为3.74%和5.84%,大豆异黄酮低剂量组为7.78%和4.60%,大豆异黄酮高剂量组为2.26%和0.92%.与模型组比较各组凋亡率明显减少(P＜0.01).结论:大豆异黄酮能明显抑制去卵巢大鼠子宫细胞凋亡.     

人粪便中基因甲基化分析在大肠癌早期筛查中的意义

目的 探讨联合检测粪便中波形蛋白基因、肿瘤抑素受体(OSMR)基因和组织因子途径抑制物2( TFPI2)基因甲基化作为大肠癌早期筛查的可行性和临床意义。方法 收集郑州大学第一附属医院2009年5月至2010年8月收治的60例大肠癌患者、17例大肠腺瘤患者及30名健康对照者的粪便标本,采用甲基化特异性PCR方法 分析其波形蛋白基因,OSMR基因和TFPI2基因甲基化状态。结果 60例大肠癌患者粪便中波形蛋白基因、OSMR基因和TFPI2基因甲基化阳性率分别为53.3％ (32/60),68.3％（41/60）和75.0％ (45/60);17例大肠腺瘤患者3种基因甲基化阳性例数分别为5、7和11例;三者联合检测大肠癌和大肠腺瘤的敏感度分别为86.7％( 52/60)和76.5％(13/17),特异度为86.7％ (26/30)。结论 检测粪便中波形蛋白基因、OSMR基凶和TFPI2基因甲基化在大肠癌诊断和筛查中有潜在的应用价值。