雌激素对去卵巢大鼠基底前脑NOS及Nestin阳性神经元的影响

目的 观察雌激素替代对去卵巢大鼠基底前脑一氧化氮合酶(NOS)及巢蛋白(Nestin)阳性神经元的影响。方法 将28只健康成年雄性SD大鼠随机分为4个处理组:去势24 h雌激素替代组、去势2周雌激素替代组、去势植物油替代组及假手术组。用组织化学及免疫组织化学染色方法观察基底前脑的内侧隔核(MS)、斜角带垂直支(vDB)及水平支(hDB)的NOS和Nestin阳性神经元数的变化。结果 去势行植物油替代可使MS、vDB的NOS阳性神经元数明显下降(P<0.01);去势24 h或2周行雌激素替代均可使以上亚区的NOS阳性神经元数明显升高至正常水平(P<0.01)。去势行植物油替代或雌激素替代对hDB的:Nestin阳性神经元数的影响趋势与NOS阳性神经元的相似(P<0.01),但对MS及vDB的Nestin阳性神经元数影响不大(P>0.05)。结论 去卵巢行雌激素替代可选择性地使基底前脑不同亚区NOS、Nestin阳性神经元数升高,这可能与雌激素高调了NOS和Nestin的表达有关。     

雄性大鼠去势后基底前脑NOS及Nestin阳性神经元的变化

目的　探讨睾丸源性雄激素对基底前脑一氧化氮合酶 (NOS)及巢蛋白 (Nestin)阳性神经元的影响 ,为阐明基底前脑的功能提供资料。方法　将 16只成年健康雄性SD大鼠随机分为去势组和对照组 ,2周后用组织化学及免疫组织化学染色方法观察基底前脑的内侧隔核 (MS)、斜角带垂直支 (vDB)及水平支 (hDB)的NOS和Nestin阳性神经元的形态和数目变化。结果　与对照组相比较 ,去势组大鼠MS、vDB的NOS阳性神经元数分别明显升高了 37 2 %和 2 9 1% (P <0 0 5 ) ;而且去势组大鼠MS、vDB的Nestin阳性神经元数升高更明显 ,分别达 6 8 2 %和 5 6 9% (P <0 0 5 ) ,但去势组大鼠hDB的NOS和Nestin阳性神经元数均升高不明显 (P >0 0 5 )。去势组与对照组大鼠的NOS和Nestin阳性神经元的形态均相似。结论　雄性大鼠去势后可选择性地使基底前脑各亚区的NOS、Nestin阳性神经元数升高 ,但不影响神经元的形态 ,这可能与神经元的表达摆脱了睾丸源性雄激素的抑制作用有关。     

Nestin在成年大鼠基底前脑表达的鉴定

目的鉴定巢蛋白(Nestin)在成年大鼠基底前脑的表达。方法应用小鼠抗大鼠Nestin单克隆抗体(Rat401)对成年大鼠基底前脑进行了免疫组织化学研究和Westen-blot检测。结果Nestin免疫反应阳性神经元广泛分布于成年大鼠基底前脑的隔-斜角带(MS-DBB)复合体,基底前脑MS-DBB复合体的内侧隔核(MS)、斜角带垂直支(vDB)和斜角带水平支(hDB)分别有一相对分子质量约为240000的单一蛋白带。结论成年大鼠基底前脑MS、vDB和hDB均存在Nestin表达。     

雄激素替代对去睾丸大鼠基底前脑NOS及Nestin阳性神经元的影响

目的　观察雄激素替代对去睾丸大鼠基底前脑一氧化氮合酶 (NOS)及巢蛋白 (Nestin)阳性神经元的影响。方法　将 2 8只健康成年雄性SD大鼠随机分为 4组 :去势 2 4h雄激素替代组、去势 2w雄激素替代组、去势 2 4h芝麻油替代组及假手术组。用组织化学及免疫组织化学染色方法观察基底前脑NOS和Nestin阳性神经元变化。结果　去势芝麻油替代组内侧隔核 (MS)、斜角带垂直支 (vDB)NOS阳性神经元数明显多于假手术组 (P <0 .0 5 ) ;去势 2 4h或 2w行雄激素替代MS和vDBNOS阳性神经元数少于假手术组水平 (P <0 .0 5、P <0 .0 1) ,但去势芝麻油替代或雄激素替代对斜角带水平支 (hDB)的NOS阳性神经元数影响不大 (P >0 .0 5 )。去势芝麻油替代或雄激素替代 ,Nestin阳性神经数的变化趋势与NOS阳性神经元的相似。结论　去睾丸行雄激素替代 ,可选择性地使基底前脑的NOS、Nestin阳性神经元数明显下降 ,但与替代的时程关系不大 ,提示雄激素可能通过其受体下调NOS和Nestin的表达。     

成年大鼠基底前脑隔-斜角带复合体的巢蛋白免疫阳性神经元至海马的纤维投射

目的 观察大鼠基底前脑巢蛋白(nestin)免疫阳性神经元的纤维投射。方法 先用荧光素逆行追踪法显示基底前脑内投射至海马的荧光素标记神经元，观察摄片后再进行nestin免疫组织化学染色。对比荧光照片和免疫组织化学染色照片，辨认荧光素和nestin双标神经元。结果 在基底前脑注射侧的内侧隔核(MS)和斜角带核的垂直支(vDB)和水平支(hDB)均存在荧光素标记细胞，其中一部分为nestin免疫阳性。在MS、vDB和hDB，双标细胞占逆行标记细胞的比例分别为21．3％、25％和20．6％；占nestin阳性细胞的比例分别为26．6％、15．7％和16．3％。结论 大鼠基底前脑的nestin免疫阳性神经元发出神经纤维向海马投射。提示在基底前脑有一个平行于隔-海马胆碱能投射和GABA能投射的第3条通路。     

康复新对去卵巢大鼠学习记忆能力和基底前脑胆碱能神经元的影响

目的 探讨康复新对去卵巢大鼠的学习记忆能力的影响及其可能机制.方法 3月龄健康雌性SD大鼠36只,随机分成4组,即假手术组、去卵巢对照组、康复新低剂量组和康复新高剂量组,分别进行干预.8周后用Y迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力,用免疫组化染色检测大鼠基底前脑不同区域胆碱能神经元的数目.结果 康复新高剂量组大鼠"学会"所需总训练次数、训练错误次数及记忆检测时错误反应次数与去卵巢对照组比较明显减少(P＜0.05),与假手术组相比差异无统计学意义(P＞0.05);康复新液高、低剂量组大鼠基底前脑内侧隔核(MS)、斜角带核垂直支(vDB)和水平支(hDB)的ChAT阳性神经元数量增多;高剂量组基底前脑各区的ChAT阳性神经元数明显高于去卵巢对照组(P＜0.05),与假手术组相比差异无统计学意义(P＞0.05);而且康复新高剂量组大鼠vDB和hDB的ChAT阳性神经元数明显高于康复新低剂量组(P＜0.05).结论 康复新液可显著改善去卵巢大鼠学习记忆能力,其作用可能是通过增加基底前脑胆碱能神经元的功能实现的;康复新液有望成为防治雌激素撤退引起的神经功能障碍的药物.     

大鼠基底前脑Nestin-IR神经元的纤维投射

目的观察大鼠基底前脑巢蛋白(Nestin)免疫反应阳性神经元的纤维投射。方法采用荧光素逆行追踪技术显示基底前脑投射至海马和额皮质的荧光素标记神经元,结合Nestin免疫组织化学染色,计算荧光素和Nestin双标细胞分别占荧光素标记神经元和Nestin免疫反应阳性(Nestin-IR)神经元的比例。结果荧光素注射至海马后,双标细胞在同侧内侧隔核(MS)、斜角带垂直支(vDB)和斜角带水平支(hDB)占Nestin阳性神经元的比例分别为28.5%、19.6%和18.1%;占荧光素标记神经元的比例分别为25.3%、29%和23.8%,并且,在注射点的对侧也发现有双标细胞存在。荧光素注射至额皮质后,双标细胞在同侧MS、vDB和hDB占Nestin阳性神经元的比例分别为16.6%、8.7%和9.3%;占荧光素标记神经元的比例分别为11.3%、3.5%和5.6%,注射点对侧未发现有双标细胞存在。结论大鼠基底前脑的Nestin-IR神经元发出纤维投射至海马和额皮质,Nestin-IR神经元至海马为双侧投射,而至额皮质为单侧投射。     

神经激肽B在成年大鼠基底前脑Nestin阳性神经元的表达

目的观察基底前脑Nestin-IR神经元是否表达神经激肽B(NKB),探讨基底前脑Nestin-IR神经元的递质属性。方法应用免疫组织化学双标染色方法,观察10只SD大鼠基底前脑的Nestin-IR神经元是否表达NKB。结果Nestin-IR神经元和NKB-IR神经元间杂分布于隔-斜角带(MS-DBB)复合体,两者数量相当。双标神经元在内侧隔核(MS)、斜角带垂直支(vDB)和斜角带水平支(hDB)占Nestin-IR神经元的比例分别为31.5%(27.2%～35.5%)、17.2%(12.9%～22.1%)和23.3%(18.7%～27.4%),占NKB-IR神经元的比例分别为13.1%(9.8%～16.6%)、15.7%(11.2%～20.3%)和32.9%(26.5%～40.1%)。结论成年大鼠基底前脑部分Nestin-IR神经元表达NKB。     

BDNF和神经干细胞联用对老年痴呆鼠基底前脑 胆碱能神经元和学习记忆能力的影响

探讨脑源性神经营养因子(BDNF)和神经干细胞(NSCs)联合应用对老年痴呆大鼠基底前脑胆碱能神经元及大鼠学习记忆能力的影响。利用无血清培养技术获得新生SD鼠的海马NSCs,行BrdU标记。切断SD大鼠左侧穹隆海马伞,基底前脑注射NSCs,同时侧脑室注射BDNF,2周后行nestin和BrdU/NF、BrdU/GFAP免疫荧光双标染色,4周后行Y迷宫测试,免疫组化结合图像分析技术观察各组大鼠基底前脑神经营养因子受体(NGFR)阳性神经元数目变化。结果发现,移植后NSCs能够在宿主体内存活且分化成神经元和胶质细胞;免疫组化结果显示损伤组大鼠胆碱能神经元数在内侧隔阂(MS)和斜角带(VDB)分别减少64.3%和49.3%,较正常组明显下降(P<0.01);移植组神经元数下降34.1%和27.6%较损伤组有改善(P<0.05),但与正常组比较有显著性差异(P<0.05);联合组神经元数减少15.1%和18.6%,与正常组无显著性差异(P>0.05)。Y迷宫测试结果显示,大鼠的学习记忆能力与基底前脑NGFR阳性细胞数呈正相关。提示,BDNF和NSCs移植的联用较单独使用NSCs或BDNF更好地改善老年痴呆大鼠的学习记忆能力。     

侧脑室注射192-IgG-saporin致痴呆动物模型的实验研究

建立老年性痴呆模型大鼠,并观察其学习记忆能力及基底前脑胆碱能神经元数目的变化。在成年SD大鼠左侧侧脑室注射免疫毒素192-IgG-saporin(2.5μg/5μl),3周后行Y迷宫检测其学习和记忆能力;4周后处死大鼠,采用免疫组化结合图像分析技术观察各组大鼠基底前脑ChAT阳性神经元数目的变化。结果显示:模型组大鼠的学习记忆能力与正常组相比明显下降(P<0.01);模型组基底前脑的内侧隔核(MS)和斜角带垂直部(VDB)胆碱能神经元数目分别减少至正常组的9.70%和14.09%,与正常组相比均明显下降(P<0.01);学习、记忆能力与基底前脑胆碱能神经元数目密切相关。上述结果表明应用192-IgG-saporin免疫毒素能成功建立AD大鼠动物模型,该模型可用于抗痴呆药物的筛选及药效的评价。     

剥夺卵巢雌激素对成年大鼠基底前脑神经元表达Nestin的影响

目的 探讨剥夺卵巢雌激素对成年大鼠基底前脑神经元表达Ｎｅｓｔｉｎ的影响。方法 将健康成年雌性大鼠随机分为正常对照、卵巢切除２周及４周三组,用免疫组化法观察卵巢切除后基底前脑的内侧隔核（ＭＳ）、斜角带垂直支（ｖＤＢ）及水平支（ｂＤＢ）Ｎｅｓｔｉｎ免疫反应阳性（Ｎｅｓｔｉｎ－ＩＲ） 神经元的形态和数目变化。结果 卵巢切除２周、４周组ＭＳ、ｖＤＢ及ｈＤＢ的Ｎｅｓｈｎ－ＩＲ神经元形态与正常对照组相比无明显变化;但卵巢切除２周、４周组ＭＳ、ｖＤＢ及ｈＤＢ的 Ｎｅｓｔｉｎ－ＩＲ神经元的数目与正常对照组相比均有不同程度的减少,尤以ｈＤＢ的减少最明显（Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．０５）。结论 提示基底前脑Ｎｅｓｔｉｎ－ＩＲ神经元的Ｎｅｓｈｎ表达受卵巢雌激素的影响,ｈＤＢ的Ｎｅｓｈｎ－ＩＲ神经元的表达受此影响更大。     

Sex differences in the basal firing rate and the responsiveness to opioid peptides of rat hippocampal neurons.

The basal firing rate and the responsiveness to dynorphin and leu-enkephalin of the neurons in the pyramidal cell layer of the hippocampus were studied in intact male, castrated male, castrated female, and castrated female rats injected s.c. with 20 micrograms estradiol benzoate (EB) for 3 days. Most of the neurons studied had low spontaneous firing rate (less than 5 Hz) and burst-like activity in all the groups. The basal firing rates in castrated males and females were not different from those in intact males and castrated females treated with EB, respectively. However, neurons in intact and castrated males had significantly higher firing rates than those in castrated females with and without EB treatment, respectively. When effective, both iontophoretically applied dynorphin and leu-enkephalin evoked predominantly excitatory responses. Either castration of males or EB treatment to castrated females did not affect the neuronal responsiveness to these peptides. On the other hand, the responsiveness of neurons to leu-enkephalin, but not to dynorphin, was significantly different between castrated male and female rats. These results suggest that sex steroids do not affect the basal firing rate as well as the responsiveness to opioid peptides of the pyramidal cells in the hippocampus in adult animals. However, sex differences in the basal firing rate and in the responsiveness to leu-enkephalin might account for the differences in hippocampal functions between male and female rats.     

Presence of intact and gonadectomized juveniles and the reduction of fighting between adult male rats

Research is reported which investigated the aggressive interactions between adult male rats in the presence of 17-27 day old juvenile conspecifics. Following a brief exposure to an inaccessible juvenile male, juvenile female, estrous adult female, or empty compartment, the males of Experiment 1 were allowed to interact with another adult male. Results were that the presence of both genders of juveniles reduced fighting between the adult males, and pre-pubertal females were particularly effective as an aggression-inhibitor. The hormonal bases for those sex differences were examined in Experiment 2 using juveniles gonadectomized on Postnatal Day 10. Adult males were more aggressive following exposure to intact juvenile males than to castrated juvenile males; the latter males, intact juvenile females, and ovariectomized juvenile females provoked similar and low rates of fighting between adult males. These data suggest that the sexual dimorphism is a function of testicular hormones present during the juvenile stage which modify the stimulus characteristics of a pre-pubertal male rat.