肝细胞癌患者中p53基因的突变研究

为了解肝细胞癌（ＨＣＣ）中ｐ５３基因的突变情况，收集８６例ＨＣＣ手术切除标本，采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ／ＳＳＣＰ）、聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ／ＲＦＬＰ）和ＤＮＡ序列分析，研究了ｐ５３基因的突变情况。８６例ＨＣＣ中，ｐ５３基因的突变率为３６％，其中，密码子２４９的突变率为３３．７％，１例ＳＳＣＰ和ＲＦＬＰ均提示密码子２４９存在突变者经ＤＮＡ序列分析显示密码子２４９的第三个碱基发生了ＡＧＧ／ＡｒｇＡＧＴ／Ｓｅｒ突变。以上结果提示，ＨＣＣ中，ｐ５３基因的突变主要以点突变为主，主要发生在密码子２４９，其突变率、突变谱和突变方式与启东等ＨＣＣ高度流行区相似     

广西地区胃癌与P53基因突变关系的初步研究

用聚合酶链式反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）技术检测８例胃癌及１例正常胃组织Ｐ５３基因有２４９密码子点突变，结果未发现异常，提示Ｐ５３基因第７外显子第２４９密码子点突变不是本地区胃癌Ｐ５３基因突变的常见类型。     

食管癌组织p53抑癌基因等位基因杂合缺失及突变的研究

目的：为了探讨ｐ５３抑癌基因在原发性食管癌中的改变以及与食管癌的发生、发展可能存在的关系。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ），配合限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）和单链构象多态性（ＳＳＣＰ）分析法，对４８例新疆地区原发性食管癌及正常组织中ｐ５３抑癌基因的等位基因杂合缺失（ＬＯＨ）及突变进行了检测。结果：ＲＦＬＰ分析显示ｐ５３外显子４和内含子６的ＬＯＨ分别为８／１８和４／１３。ＳＳＣＰ分析显示，ｐ５３外显子５～８的突变率为５０％（２４／４８），且突变多出现在食管癌发展的较晚阶段。结论：ｐ５３基因缺失、突变可能在食管癌发生、发展过程中起重要作用     

对非同位素PCR-SSCP检测基因突变方法的探讨

目的：建立适合本实验室条件的非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－ＲＦＬＰ基因突变分析技术。方法：应用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测石蜡包埋复发肝细胞癌（Ｈｅｐａｔｏｃｅｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＨＣＣ）组织中Ｐ５３基因第七外显子突变。采用系列步骤克服非特异扩增；分析影响ＳＳＣＰ诸参数的优化；并与ＲＦＬＰ结果相印证。结果：检测复发ＨＣＣ标本２２例，ＳＳＣＰ阳性率７７．２７％（１７／２２），２４９位点突变率７２．７２％（１６／２２），ＲＦＬＰ与ＳＳＣＰ分析结果符合率１００％；另有２例发生２４９位点以外的突变。结论：该实验流程可靠、高效，适合大量标本的基因突变筛查     

广西原发性肝癌P^53基因第249密码子点突变的研究

用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性方法分析了原发性肝癌组织中Ｐ＾５３基因第２４９密码子的点突变，突变率为４８．４％，结果表明Ｐ＾５３基因的突变可能与环境致癌物ＡＦＢ１和ＨＢＶ有关。     

用PCR—SSCP方法探讨ras基因,p53基因突变与喉癌的关系

目的：研究ｒａｓ基因、ｐ５３基因突变与喉鳞状细胞癌发病的关系。方法：应用多聚酶链反应－单链构像多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法分析４０例喉鳞状细胞癌Ｈ－ｒａｓ,Ｋ－ｒａｓ,和Ｎ－ｒａｓ基因的第１２密码子,ｐ５３基因第５,７外显子中点突变的情况。结果：Ｈ－ｒａｓ基因突变９例,突变率为２２．５％（９／４０）;Ｋ－ｒａｓ基因突变８例,突变率为２０％（８／４０）,Ｎ－ｒａｓ基因突变５例,突变率为１２．５     

p53基因点突变与胃癌细胞恶性程度及临床预后的关系

为进一步明确胃粘膜癌变过程中基因变异的规律，本研究以胃癌手术标本、胃镜活检标本、体外培养细胞为研究体系，利用聚合酶链反应／限制性内切酶长度多态性（ＰＣＲ／ＲＦＬＰ）、ＰＣＲ／单链构象多态性（ＳＳＣＰ）、ＤＮＡ序列分析、免疫组化及原位杂交多项研究手段，系统研究了６０例胃癌、３０例异型增生和３３例肠上皮化生病变中基因的改变。这一结果提示ｐ５３基因异常与胃癌的发生、发展密切相关。     

p53基因抑制口腔粘膜鳞癌细胞株生长的实验观察

ｐ５３基因抑制口腔粘膜鳞癌细胞株生长的实验观察陈谦明彭文珍傅继梁杨光华李秉琦白少槐张旋波为了探讨野生型ｐ５３基因能否抑制聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）异常的口腔鳞癌细胞株的生长，从而求证银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法分析ｐ５３基因遗传...     

肺癌组织 p53 基因突变的研究

目的：探讨肺癌发生的分子遗传学机理，了解肺癌中ｐ５３基因突变的情况。方法：采取聚合酶链反应（ＰＣＲ）及聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）结合银染技术，对２０例肺癌组织中ｐ５３基因外显子５～８进行了突变分析。结果：ｐ５３基因突变１２例，占总人数６０％（１２／２０），分布于外显子５～８。其中第７外显子６例，第８外显子４例，第５、６外显子各１例。鳞癌突变率５０％（３／６），腺癌突变率６０％（６／１０），小细胞肺癌突变率７５％（３／４）。结论：ｐ５３基因突变与肺癌的发生发展有关。     

膀胱移行细胞癌ras,p53基因点突变检测及其临床病理学意义

为探讨基因的改变在膀胱移行细胞癌发生过程中的意义，应用聚合酶链反应——限制性片段长度多肽性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）法，检测５０例膀胱移行细胞癌ｒａｓ、ｐ５３基因突变。结果显示：正常膀胱粘膜未检测到基因突变，膀胱移行细胞癌Ｈａ－ｒａｓ基因第１２位密码子突变为１６例（３２％），ｐ５３基因突变为９例（１８％），均系２４８位点突变。Ｈａ－ｒａｓ－１２位点突变率随病理分级增高而增高，与膀胱移行细胞癌分级显著相关（Ｐ＜０．０５）。ｒａｓ基因、ｐ５３基因突变患者死亡率高于无突变患者。４例膀胱移行细胞癌存在ｒａｓ基因及ｐ５３基因共同突变。     

人胃癌组织p53基因异常的筛选及序列测定

人胃癌组织ｐ５３基因异常的筛选及序列测定张青云，吕有勇，李铮，李文梅，崔建涛，邓国仁本项研究应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＤＮＡ单链构象多态性（ＳＳＣＰ）分析，对中国人胃癌手术标本ＤＮＡ的ｐ５３基因异常进行筛选及序列测定，现将结果报道如下。一、材料和方...     

乳腺癌P53基因点突变的检测

目的：探讨Ｐ５３基因点突变检测在乳腺癌预后判断中的意义。方法：应用聚合酶链反应———单链构像多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）方法对３５例乳腺癌患者的Ｐ５３基因位点的点突变进行检测。结果：３例出现点突变，经ＤＮＡ序列分析，１例为第１３６密码子ＣＡＡ（Ｇｌｎ）被ＣＡＧ（Ｇｌｎ）替代，１例为第２２７密码子ＴＣＴ（Ｓｅｒ）被ＧＣＴ（Ａｌａ）替代，１例为第２７３密码子ＣＧＴ（Ａｒｇ）被ＣＡＴ（Ｈｉｓ）替代。结论：Ｐ５３基因突变可能是引起乳腺癌分化不良的因素之一，并可能预示着乳腺癌预后较差。     

肺癌MDM2蛋白表达与p53基因突变的关系

目的研究肺癌ＭＩＤ２蛋白表达与ｐ５３突变之间的关系。方法：用免疫组化检测１２５例肺癌ｐ５３和ＭＤＭ２蛋白表达，以聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法检测ｐ５３基因第５￣８外显子的突变。结果：ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测阳性的５２例肺癌ＭＤＭ２阳性率为１９．２％，而阴性的７３例肺癌ＭＤＭ２蛋白阳性率为３５．６％，统计学检验显示肺癌ＭＤＭ２蛋白表达与Ｐ５３突变之间呈负相关（Ｘ＾２＝３．９８，Ｐ     

人脑胶质瘤P53蛋白表达与P53基因突变的相关性研究

人脑胶质瘤Ｐ５３蛋白表达与ｐ５３基因突变的相关性研究刘爱学浦佩玉程爱国彭琼王春艳用单克隆抗体Ｐａｂ１８０１检测４４例脑胶质瘤细胞内Ｐ５３蛋白的表达，同时用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（聚合酶链反应－单链构象多态性）及ＤＮＡ测序检测其ｐ５３基因突变，并比较两者的检...     

P53肿瘤抑制基因突变分析的技术方法探讨

聚合酶链反应－单链构型多态分析－脱氧核糖核酸序列测定技术（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－ＤＮＡ技术），对正确检测和评价人食管癌和癌前病变组织肿瘤抑制基因Ｐ５３的基因变化的影响进行了分析。结果：ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－ＤＮＡ序列测定技术是分析肿瘤抑制基因Ｐ５３变化的较灵敏和可靠的方法。但是，肿瘤组织的取样误差和处理不当可造成对Ｐ５３基因突变的发生率和性质的错误结论。利用免疫组织化学技术定位检测Ｐ５３蛋白的变化，并据此在镜下组织切片中收集Ｐ５３蛋白免疫组化阳性细胞，然后进行ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－ＤＮＡ分析有助于提高Ｐ５３基因变化的检出率，阳性细胞浓集数量与Ｐ５３基因变化检出率呈正相关。     

人肝癌裸鼠移植瘤株p53基因突变及测序研究

目的 研究从厦门同安肝癌高发区所建的裸鼠移植瘤（ＨＨＣ，ＨＨＣ１５）是否存在ｐ５３基因突变。方法 从两移瘤提取的总ＤＮＡ用分子生物学方法检测并测序，如ＰＣＲ方法扩增ｐ５３基因部分第７外显子，地高辛标记ＤＮＡ探针斑点杂交法，ＤＮＡ限制性酶切片段长度多态分析和激光荧光ＤＮＡ测序等。结果 ＨＨＣ４细胞ＤＮＡ有ｐ５３基因第２５０密码子（Ｃ→Ａ）的突变；ＨＨＣ１５有ｐ５３基因第２４９密码子（Ｇ→Ｔ）的突变。     

肿瘤抑制基因p53在原发性肺癌中的改变

本文用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法，对１００例各种来源的标本，进行ｐ５３基因外显子７的扩增，产物经限制性酶片段长度分析（ＲＦＬＰ），结果在７９例肺癌中检出２１例（２６．６％）有２４９位点的改变，其发生率在有淋巴结或远处转移者显著大于无转移者。同时用单抗ＤＯ－７对２３例库存肺癌组织进行免疫组化（ＩＨＣ）染色，共检出９例（３９．１％）阳性。实验表明ｐ５３在原发性肺癌中有改变，可用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ或ＩＨＣ法检出；ｐ５３基因的改变对肺癌有判断预后的作用     

喉癌p53基因突变与人乳头状瘤病毒感染的关系

目的探讨喉癌细胞ｐ５３基因突变与人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）感染的关系及其临床意义。方法应用星普旋转离心柱Ｂ溶液系统,结合聚合酶反应链多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）及ＤＮＡ序列分析（ＰＣＲ－ＤＮＡＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）,对３６例喉癌组织新鲜标本进行ＨＰＶ定型、相对定量及ｐ５３基因第４至第８外显子突变检测。结果３６例喉癌标本中有１３例发生基因点突变或转码突变,其中１０例为ＨＰＶ１６／１８感染者,且与细胞内病毒含量呈正相关。２４例晚期喉癌（临床Ⅲ－Ⅳ期）有颈淋巴结转移者突变检出率明显高于无转移者（Ｐ＜０．０５）。结论喉癌ｐ５３基因突变与ＨＰＶ１６／１８感染有关,晚期喉癌颈淋巴结转移与ｐ５３基因突变有关。     

可疑肺癌病人纤支镜检查脱落细胞标本的p53基因突变检测

目的 探讨通过检测纤支镜检查脱落细胞标本的ｐ５３基因突变用于肺癌早期诊断的可行性。方法 采用聚合酶联反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ），对３５例怀疑为肺癌病人的６９份纤支镜检查（支气管灌洗、刷检、纤支镜后痰）标本，行ｐ５３基因５～８号外显子突变检测。结果 ９例病人有ｐ５３突变（２５．７％），其中以６ 外显子突变率最高（１７．１％）．在６９份标本中，ｐ５３突变率明显高于相应细胞学阳性率（ｔ     

白血病中P16基因突变的检测

用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）、ＤＮＡ直接测序和多重ＰＣＲ法，检测了１８例慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ），１例Ｋ５６２细胞株，９例急性粒细胞性白血病（ＡＭＬ），６例急性淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ），２例多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者外周血／培养细胞ＤＮＡ中Ｐ１６基因的点突变和基因缺失。用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ共筛查出５例ＣＭＬ中Ｐ１６基因的异常，突变率为２７．８％（５／１８），对其中１例外显子２异常者经测序证实为第１５１密码子ＣＣＣ→ＣＧＣ的转换，导致Ｐｒｏ→Ａｒｇ的错义突变；并检出１例ＭＭ中Ｐ１６基因外显子３的异常；受检的ＡＬＬ，ＡＭＬ，Ｋ５６２细胞株中，未检出突变。各病例中均未检出Ｐ１６基因的缺失。本文探讨了白血病中Ｐ１６基因突变的意义。