3种检测方法在丙型肝炎诊断中的临床评价

目的 通过对丙型肝炎3种检测方法的比较,探讨丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）和HCV-RNA在丙型肝炎诊断中的临床价值.方法 采用酶联免疫法（ELISA）和胶体金法检测抗-HCV特异性抗体;以荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测HCV-RNA,用上述3种方法同时检测206例临床诊断丙型肝炎患者（观察组）和175例健康体检者（对照组）,并对检测结果进行比较.结果 在观察组中,ELISA法和胶体金法分别检出抗-HCV阳性179例和165例,阳性率分别为86.89%和80.10%;FQ-PCR法检出HCV-RNA阳性128例,阳性率为62.14%,有5例抗-HCV阴性患者HCV-RNA却为阳性.对照组中HCV-RNA均为阴性,其中7例抗-HCV阳性.结论 同步检测抗-HCV和HCV-RNA可提高肝病患者HCV感染的检出率,为其诊断和治疗提供可靠依据.     

抗-HCV、HCV-RNA及ALT检测138例结果分析

目的：探讨丙型肝炎病毒（HCV）RNA与丙型肝炎抗体（抗-HCV）及丙氨酸氨基转移酶（ALT）之间的关系。方法：采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）测定138例疑似HCV感染者血清HCV RNA,ELISA法检测抗-HCV,全自动生化分析仪测定ALT。结果：138例标本中HCV RNA和抗-HCV均阳性者108例,HCV RNA阳性而抗-HCV阴性者3例,HCV RNA阴性而抗-HCV阳性者27例。ALT水平与HCV RNA含量无显著相关性。结论：同时检测HCVRNA和抗-HCV可提高丙型肝炎患者的检出率;HCV RNA含量不能反映肝脏损伤的程度。     

HCV RNA载量与肝脏组织损伤的关系

目的探讨丙型肝炎病毒（HCV）RNA复制水平与肝功能丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）之间的相互关系。方法收集1182例疑似丙肝病人血清标本,采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测HCV RNA,利用酶动力法测定ALT、AST,采用ELISA测定抗HCV抗体。数据采用SPSS16.0统计软件处理。结果病人血清样本中,HCV RNA阳性801例（64.8%）,其中抗HCV阳性766例（95.6%）;HCV RNA阴性381例（32.2%）,其中抗HCV阳性100例（26.2%）。HCV RNA阳性样本中同时抗-HCV阳性者ALT,AST异常率分别为59.0%和60.8%;抗-HCV阴性者为31.4%和34.2%。HCV RNA阴性样本中同时抗-HCV阳性者ALT,AST异常率分别为24.0%和15.0%,抗-HCV阴性者为13.9%和12.1%。HCV RNA含量与ALT、AST水平明显成正相关,r=0.62,P〈0.05。结论 HCV RNA含量与肝组织损伤程度成正相关。     

实时荧光定量聚合酶链反应在丙型肝炎诊断中的临床应用价值

目的探讨丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)和丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)荧光定量检测在丙型肝炎诊断中的临床应用价值。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测358例血清中HCV RNA载量及抗-HCV。结果 358例慢性丙型肝炎患者抗-HCV和HCV RNA检出率分别为78.8%和54.2%,经χ2检验差异有统计学意义(P<0.05),HCV RNA的平均载量为4.85×105 copies/mL。结论FQ-PCR检测血清中HCV RNA的载量,是判定HCV感染的直接证据,它反映HCV的活动性和复制程度,有利于抗病毒治疗的疗效观察。抗-HCV和HCV RNA联合检测对丙型肝炎病毒的早期诊断有重要临床应用价值。     

血清HCV RNA检测在慢性丙型肝炎诊断中的意义

目的探讨血清HCVRNA检测在慢性丙型肝炎临床诊断中的意义。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和荧光定量PCR（FQ-PCR）检测146例慢性丙型肝炎患者抗-HCV和HCVRNA。结果抗-HCV及HCV RNA检出率分别为73．9％（108／146）和52．1％（76／146）；抗-HCV（＋）组和抗-HCV（-）组HCVRNA的检出率分别为75．9％（82／108）和10．5％（4／38）。结论血清HCVRNA荧光定量是临床诊断丙型肝炎的直接证据，且可以弥补抗-HCV对丙型肝炎的漏诊等不足。     

酶联免疫法和PCR在丙型肝炎诊断中的应用对比

探讨酶联免疫法和PCR检测在丙型肝炎诊断中的应用。选取我院2015年1月~2015年12月收治的180例疑似丙型肝炎患者,对其血清标本进行酶联免疫法（ELISA）检测抗-HCV,并对所有标本进行荧光定量PCR法（FQ-PCR）检测HCV-RNA。ELISA检测抗-HCV的阳性率为49.4%,PCR法检测HCV-RNA的阳性率为46.7%,HCV-RNA阳性患者中抗-HCV阳性率和HCV阴性患者差异有统计学意义（P〈0.01）。PCR检测HCV-RNA在丙型肝炎诊断中具有很好的应用价值,ELISA法检测抗-HCV可作为丙型肝炎诊断的确证实验,结合酶联免疫法能有效提高丙型肝炎患者的检出率,具有积极临床意义。     

丙型肝炎患者血清丙型肝炎病毒核糖核酸与丙型肝炎抗体及肝功能的检测

目的对丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)定量检测结果与丙型肝炎抗体(抗-HCV)的检测结果以及丙氨酸转氨酶(ALT)水平进行比较分析,探讨其相关性及临床意义。方法对251例丙型肝炎患者血清标本,采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测HCV RNA含量,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测抗-HCV,用生化自动分析仪检测ALT值。结果251例丙型肝炎患者血标本均为抗-HCV或HCV RNA阳性,其中:①抗-HCV阳性235例(93.6%);HCV RNA阳性197例(78.5%)。②抗-HCV和HCV RNA同时阳性181例(72.1)%;抗-HCV阳性,HCV RNA阴性54例(21.5%);HCV RNA阳性,抗-HCV阴性16例(6.4%);③ALT异常者164例(65.3%),其中HCV RNA阳性143例,HCV RNA阴性21例;ALT正常87例,其中HCV RNA阳性54例,HCV RNA阴性33例;HCV RNA水平与ALT异常率呈正相关(rs=0.468,P=0.000),而与ALT水平高低无相关性(r=-0.048,P=0.447)。结论抗-HCV和HCV RNA含量的检测在丙型肝炎的诊断中具有重要意义;二者同时检测可以提高临床对丙型肝炎的诊断;丙型肝炎患者HCV RNA水平与ALT异常率呈正相关,而与ALT水平高低无相关性。     

血清HCV RNA检测在慢性丙型肝炎诊断中的意义

目的探讨血清HCVRNA检测在慢性丙型肝炎临床诊断中的意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量PCR(FQPCR)检测146例慢性丙型肝炎患者抗HCV和HCVRNA。结果抗HCV及HCVRNA检出率分别为73.9%(108/146)和52.1%(76/146);抗HCV(+)组和抗HCV(-)组HCVRNA的检出率分别为75.9%(82/108)和10.5%(4/38)。结论血清HCVRNA荧光定量是临床诊断丙型肝炎的直接证据,且可以弥补抗HCV对丙型肝炎的漏诊等不足。     

实时荧光定量PCR筛查献血者HCVRNA的初步研究

目的比较核酸扩增技术(NAT)和血清学酶联免疫试验(ELISA)对献血者丙型肝炎病毒(HCV)筛查的符合率。方法用实时荧光定量PCR方法对ELISA初、复检抗-HCV均为阳性的献血者血浆和抗-HCV阳性的丙型肝炎患者血浆作HCV RNA检测。结果①36例初、复检抗-HCV均为阳性的献血者血浆为HCV RNA13例阳性,答合率36.11%,31例抗-HCV阳性的丙型肝炎患者血浆的HCV RNA检测为24例阳性,符合率77.42%,两者符合率有显著性差异(χ2=11·49,P<0·005);②前述37例HCV RNA阳性血浆分别与23份初、复检抗-HCV和HCV RNA均为阴性的血浆混合后HCV RNA检测仍为阳性。且其中1例阳性血浆用上述阴性血浆100倍稀释后检测仍为阳性;③70,000例沈阳地区初、复检抗-HCV阴性献血者血浆样本NAT混合法筛查均为阴性。结论NAT可作为血清学ELISA法的补充用于对献血者血液HCV的常规筛查。     

丙型肝炎病毒抗体联合核酸定量检测对丙型肝炎患者的早期诊断价值研究

目的：探讨在丙型肝炎患者早期诊断中丙型肝炎病毒抗体联合丙型肝炎病毒核酸（HCV RNA）检测的临床价值。方法对116例鼓楼医院住院及门诊丙型肝炎患者采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）测定HCV RNA、酶联免疫吸附试验（ELISA）和金标法测 HCV抗体、速率法测丙氨酸氨基转移酶（ALT ）。结果116例丙型肝炎患者中,ELISA HCV抗体阳性97例（占83．6％）,HCV RNA阳性85例（占73．3％）,HCV 金标阳性77例（占66．4％）,ALT阳性69例（占59．5％）,HCV抗体和 HCV RNA联合检测总阳性率（指任-指标阳性即为阳性）为100．0％。结论 HCV抗体和HCV RNA联合检测扩大了丙型肝炎检测范围,降低了丙型肝炎的漏诊率,有利于丙型肝炎的早期诊断。     

梅毒患者246例肝炎病毒标志物的检测

目的调查梅毒患者病毒性肝炎的感染情况。方法用酶联免疫吸附实验（ELISA）对246例梅毒患者（观察组）和307例健康体检者（对照组）的乙型肝炎病毒（HBV）两对半、丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）进行检测。结果观察组乙肝表面抗原（HBsAg）、抗-HCV的阳性率分别为16．26％、8．54％,均高于对照组的8．79％、2．93％,差异具有统计学意义（P〈0．05）;观察组“大三阳”[指乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、己型肝炎病毒e抗原（HBeAg）、乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）阳性]比例62．50％高于对照组29．63％,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论梅毒患者HBV、HCV感染率高于普通人群,应加强梅毒患者的肝炎标志物的检测。     

三种方法检测乙型肝炎YMDD变异的比较研究及临床结果分析

目的对检测乙型肝炎病毒（HBV）YMDD变异的3种方法进行灵敏度和特异性比较,并结合患者治疗前HBVDNA载量、丙氨酸氨基转移酶（Au）水平免疫标志物和YMDD变异后HBVDNA载量等临床信息进行结果分析。方法分别以荧光定量PCR（FQ—PCR）、通用模板信号扩增PCR（UT—PCR）和聚合酶链反应微板核酸杂交一酶联免疫吸附法（PCRmnh—ELISA）,对拉米夫定治疗过程中血清出现HBVDNA由阴转阳的52例慢性乙型肝炎患者,进行HBVYMDD变异检测,比较3种方法的敏感性,并对3种方法检测结果不一致的标本进行测序,比较他们的特异性。结果FQ—PCR、UT—PCR和PCRmnh—ELISA对YMDD变异的检出率分别为：53．85％、48．08％、73．07％,FQ—PCR和UT—PCR均与PCRmnh—ELISA差异有统计学意义（P〈0．05）,FQ—PCR与UT—PCR差异无统计学意义（P〉0．1）。检测结果不一致的17例标本进行了测序,FQ—PCR、UT．PCR、PCRmnh—ELISA与检测结果的符合率分别为94．1％、70．6％、29．4％,3者之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论3种方法比较,FQ—PCR检测HBVYMDD变异具有较高的灵敏性和特异性,并能同时检测出野生株和变异的混合感染,与测序结果相符,是诊断HBVYMDD变异较好的方法。     

多重定量PCR法同步检测HBV、HCV和HIV-1在血液筛查中的优化及应用

目的 初步探讨多重定量聚合酶链反应（PCR）同步检测乙型肝炎病毒（HBV） DNA,丙型肝炎病毒（HCV） RNA及人类免疫缺陷病毒（HIV）-1 RNA在血液筛查中的应用前景.方法 选择2012年8月至12月,于孝感市中心血站志愿献血的合格献血者血样中,经2次酶联免疫吸附法（ELISA）检测HBV表面抗原（HBsAg）、抗HCV及抗HIV-1,检测结果均呈阴性的4 800份血样为研究对象.采用全自动核酸混合提取仪对该4 800份血样进行核酸提取,然后利用多重定量PCR方法对血样中HBV、HCV及HIV-1进行同步扩增检测.采用中国药品和生物制品检定所提供的HBV DNA、HCV RNA及HIV-1 RNA标准参考品,检测多重定量PCR的灵敏度,并与单重定量PCR的灵敏度进行比较.在HBV、HCV及HIV-1 3者中任意1种病毒基因组浓度较高的条件下,对多重定量PCR检测另2种低浓度病毒基因组的能力进行评估.结果 增加多重定量PCR中c-MMLV逆转录酶和Hot Taq酶的用量,并适量加入单链结合蛋白（SSB）,可使其扩增效率提升至单重定量PCR扩增水平.本组4 800份血样中,经多重定量PCR检测出3份HBV DNA阳性样品,ELISA漏检率为0.062 5％,未发现HCV RNA和HIV-1 RNA阳性样品;多重定量PCR检测HBV DNA、HCV RNA及HIV-1 RNA在95％置信区间的灵敏度浓度分别为115 IU/mL、376 IU /mL和232 IU /mL;单重定量PCR检测HBV DNA、HCV RNA和HIV-1 RNA在95％置信区间的灵敏度浓度分别为51 IU /mL、94 IU /mL和78 IU/mL.结论 本研究初步建立了对献血者血液同时进行HBV DNA、HCV RNA及HIV-1 RNA检测的多重定量PCR检测方法;该检测体系经过进一步优化后,有望应用于临床大规模血液病毒筛查.     

丙型肝炎病毒抗体检测试剂在高危人群中的应用评价

目的 对研制的丙型肝炎病毒（HCV）抗体检测试剂（双抗原夹心法）在高危人群中的应用进行评价，并与间接法进行比较。方法 收集河北省固安县丙型肝炎高发地区A村38份、B村47份，共85份样品，采用研制的抗-HCV检测试剂（双抗原夹心法）及间接法同时测定样品抗-HCV，对检测结果不符的样品用HCV-RIBA补充试剂进行确认。结果 85份样品中，间接法检测阳性76份（89．41％），阴性9份；双抗原夹心法检出阳性73份（85．88％），阴性12份。有3份间接法检测弱阳性，而双抗原夹心法检测为阴性，经HCV-RIBA补充试剂确认2份为阴性，1份仅1条带阳性，再经病毒核酸定量检测为（1．2～4．8）×10^2copies／ml，HCVRNA测定为阴性。结论 研制的双抗原夹心法抗-HCV检测试剂的灵敏度与间接法相同，特异性优于间接法。     

HCV-RNA与HCV-cAg检测的相关性分析

目的探讨丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)与HCV-RNA检测的相关性及其在丙型肝炎病毒感染诊断中的价值。方法采用双抗体夹心酶联免疫分析法(ELISA)检测HCV-cAg;采用实时荧光定量PCR法检测HCV-RNA,以了解两者检测方法的相关性。结果在160例HCV-RNA阳性血清中,HCV-cAg阳性148例,阳性符合率92.5%;在60例HCV-cAg阳性血清中,HCV-RNA阳性59例,阳性符合率98.3%。结论通过对HCV-RNA与HCV-cAg检测,说明HCV核心抗原与HCV-RNA检测可作为反映HCV复制的间接指标,预防窗口期感染。由于HCV-cAg在方法学上与HCV-RNA相比,具有方法简便、快速、价廉,所需设备简单,易于普及应用等优点,特别是在不具备HCV-RNA检测条件的基层医疗单位作为HCV感染检测的直接证据具有重要的意义。     

武汉地区254例丙型肝炎患者HCV基因分型结果分析

目的 应用基因测序技术检测分析武汉地区慢性丙型肝炎患者的HCV基因型及其分布特点.方法 收集2013年2月-2014年1月武汉大学人民医院感染科254例HCV-RNA阳性慢性丙型肝炎患者血浆标本,通过Sanger测序法测定靶片段的基因序列,然后与NCBI genebank数据库中HCV基因型数据进行比对,分析患者HCV基因型.结果 研究检测的慢性丙型肝炎患者血浆中,共检测出11种HCV基因型,分别是1a,1b,2a,3a,3b,6a,6b,1b/2a混合型,1b/2k混合型,6a/1b混合型和6d/6k混合型.其中,HCV1a型为2例（0.79％）,1b型189例（74.41％）,2a型35例（13.78％）,3a型4例（1.57％）,3b型12例（4.72％）,6a型6例（2.36％）,6b型1例（0.39％）,1b/2a混合型2例（0.79％）,1b/2k型1例（0.39％）,6a/1b混合型型1例（0.39％）和6d/6k混合型1例（0.39％）.结论 武汉地区HCV-RNA基因型以1b型为主,其次为2a型,亦可见其他型别,提示武汉地区HCV流行的基因型呈多样性.     

盐城市盐都区外来务工人员HIV、梅毒、HCV和HBV感染状况调查

目的调查了解盐城市盐都区外来务工人员中人类免疫缺陷病毒（HIV）、梅毒螺旋体（TP）、丙型肝炎病毒（HCV）和乙型肝炎病毒（HBV）感染状况,为在这类人群中开展相关传染病预防控制提供依据。方法采用ELISA法分别检测外来务工人员血清中HIV（1＋2）抗体、TP抗体、HCV抗体和HBsAg;HIV抗体阳性者按技术规范进行复检和确证;TP抗体阳性者用梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验（TPPA）进行复检,确认阳性者再作梅毒快速血浆反应素试验（RPR）;HCV抗体阳性者使用另一厂家试剂复检;HBsAg阳性者作乙肝五项血清标志物检测。结果共检测外来务工人员标本442例,发现HIV感染3例（0.68%）、TP感染10例（2.26%）、HCV感染1例（0.23%）、HBsAg阳性39例（8.82%）,其中HIV和HCV合并感染、TP和HBV合并感染各1例。TP感染者中RPR阳性6例（60.00%）,滴度1∶1-1∶4;HBsAg阳性者中出现6种乙肝＂两对半＂模式,其中以HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性为主[66.67%（26/39）]。结论盐都区外来务工人员中HIV、HBV、TP感染率均较高,应加大这类人群的监测和干预力度,有效控制相关传染病在人群中的流行。     

丙肝病毒核心总抗原定量检测的临床应用

目的 探讨定量检测丙型肝炎病毒核心总抗原（total HCV-cAg,tHCV-cAg）在丙型肝炎诊断中的作用及与病毒载量的相关性.方法 随机选取广州军区武汉总医院2010年10月-2013年3月丙肝患者血清标本66例,分别采用化学发光法检测血清tHCV cAg,酶联免疫法（ELISA）检测血清丙型肝炎游离核心抗原（free HCV-cAg,fHCV-cAg）及丙型肝炎抗体（hepatitis C virus antibody,HCV-Ab）,实时荧光定量PCR方法检测血清HCV-RNA,全自动生化分析仪检测血清谷氨酸氨基转移酶（ALT）.比较HCV-RNA,tHCV-cAg及fHCV-cAg阳性率差异,同时分析tHCV-cAg与HCV-RNA及ALT相关性,探讨tHCV-cAg联合检测HCV-Ab与HCV-RNA检测符合率.结果 66例丙型肝炎患者血清中,tHCV-eAg阳性率与HCV-RNA阳性率差异无统计学意义（χ^2=0.165,P＞0.05）;tHCV-cAg量与HCV-RNA呈正相关：logHCV Ag=0.81 log HCV RNA-1.31（γ=0.83,P＜0.05）.tHCV-cAg阳性率与fHCV cAg阳性率差异有统计学意义（χ^2 =12.53,P＜0.05）.HCV-cAg阳性组ALT值异常率与HCV-eAg阴性组ALT值异常率差异有统计学意义（P＜0.05,χ^2=17.47）.tHCV-cAg联合检测HCV-Ab符合率与HCV-RNA检测达100.00％.结论 化学发光法定量检测血清tHCV-cAg阳性率显著高于fHCV-cAg,与HCV RNA阳性符合率达96.08％ （49/51）,是丙型肝炎早期诊断的特异性指标.tHCV-cAg和HCV-RNA呈正相关性,与肝功能损害相关,是反映病毒的复制指标.tHCV-cAg联合检测HCV-Ab可减低丙型肝炎的漏诊率.