慢性脑低灌注对2型糖尿病模型大鼠空间学习记忆能力的影响及胆碱能神经元损伤的机制探讨

目的探讨2型糖尿病（DM）是否加重慢性脑低灌注（CCH）大鼠胆碱能神经元及空间学习记忆能力损伤。方法SD大鼠24只,随机分为4组（均n=6）：①对照组（正常饮食＋假手术）;②DM组[高脂饮食＋链脲佐菌素（STZ）];③CCH组[正常饮食＋双侧颈总动脉永久性结扎（2-VO）];④DM-CCH组（高脂饮食＋STZ＋2-VO）。采用Morris水迷宫测试各组大鼠学习记忆能力;免疫组化学法检测海马区乙酰胆碱转移酶（CHAT）阳性细胞表达和免疫印迹法检测海马ChAT相对表达量。结果DM＋CCH组逃避潜伏期与对照组比较明显延长,第2-4天（P〈0．001）、第5天（P〈0．01）;目标象限时『目】百分比明显低干对照组（P〈0．01）、DM组（P〈0．05）和CCH组（尸〈O．05）。DM＋CCH组海马区ChAT阳性细胞表达明显减少,ChAT相对表达量较对照组显著减少（P〈0．01）、DM组（P〈0．05）和CCH组（P〈0．05）显著减少。结论DM可加重CCH大鼠的空间学习记忆能力障碍,可能与海马区胆碱能神经元损伤有关。     

大鼠颞叶癫痫发作后学习记忆障碍与海马神经元内游离钙离子浓度变化的相关性研究

目的探讨大鼠颞叶癫痫发作后不同时间段学习记忆障碍程度与海马神经元内游离钙离子（[Ca^2＋]）浓度变化的相关性。方法立体定向方法建立大鼠颞叶癫痫模型后用Morris水迷宫实验评价不同时间段大鼠学习记忆障碍程度；利用钙离子探针Fluo-3／AM在激光扫描共聚焦显微镜下检测癫痫发作后不同时间段海马神经元内[Ca^2＋]i的变化。结果大鼠颞叶癫痫发作后均出现不同程度的学习记忆障碍，随发作时间的延长逐渐加重，发作2月后达到高峰。颞叶癫痫发作后右侧海马神经元内[Ca^2＋]i的荧光强度明显升高，6h达到高峰，发作2月内保持在较高水平，与正常对照组和注射生理盐水组比较有显著性差异（P〈0．05），而3月后则有下降并低于正常对照组的趋势；对侧海马神经元内[Ca^2＋]i的荧光强度高于正常对照组和注射生理盐水组，但低于右侧海马神经元内[Ca^2＋]i的荧光强度。结论大鼠颞叶癫痫发作后的学习记忆障碍随发作时间延长而加重，发作2月后达到最严重，与海马神经元内[Ca^2＋]i变化具有一定的时间相关性。     

侧脑室注射链脲佐菌素对大鼠脑内能量代谢及线粒体功能影响的研究

目的探讨侧脑室注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)对大鼠脑内能量代谢及线粒体功能的影响。方法 12只SD大鼠随机分为STZ组及生理盐水组。30天后电镜下观察两组大鼠海马及额顶颞皮层,并检测线粒体呼吸链复合物Ⅱ和Ⅳ、Na+ -K+ -ATP酶、活性,及三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)、二磷酸腺苷(adeno- sine diphosphate,ADP)的浓度。结果 STZ组海马及额顶颢皮层电镜下有明显改变,ATP浓度、ATP/ADP比值及线粒体功能降低明显(P>0．05),ADP浓度升高明显(P>0．05)。结论侧脑室注射STZ引起能量代谢明显异常及线粒体活性的下降并有神经细胞受损。     

西酞普兰对慢性应激大鼠行为及脑内ERK1/2磷酸化水平的影响

目的：探讨西酞普兰能否预防或减弱慢性应激的不良反应及其可能的作用机制。方法：对SpragueDawley大鼠,随机分为正常对照（NC）组,束缚应激（RS）组和西酞普兰预处理（CP）组。RS组大鼠每日束缚6h,连续21d。利用Morris水迷宫观察大鼠的空间记忆能力,运用免疫组织化学方法观察脑内细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase1／2,ERK1／2）磷酸化（p-ERK1／2）水平的改变。结果：RS组大鼠的Morris水迷宫试验目标象限活动时间和穿越站台次数比NC组大鼠显著减少（P〈0．05）;CP组大鼠的上述指标较RS组大鼠明显改善（P〈0．05）。RS组大鼠的前额皮质、杏仁内侧核以及杏仁皮质后内侧核中p-ERK1／2阳性细胞数均较NC组显著减少（P〈0．05）;而CP组大鼠以上各脑区中p-ERK1／2阳性细胞数均较RS组明显增多（P〈0．05）。结论：慢性束缚应激后大鼠的空间记忆明显受损;应激前和应激期间给予西酞普兰处理,能明显缓解应激对大鼠造成的记忆损伤,增加脑内ERK信号传导通路的活化。     

HSF1基因在空间学习记忆能力中的作用研究

目的探讨热休克因子1（heatshockfactor1,HSFI）在小鼠Morris水迷宫空间学习任务中的作用。方法HSFl＋／十小鼠12只,HSFI-／-小鼠12只,进入空间学习任务实验。小鼠在Morris水迷宫中训练7d后,处死,剥离前额叶,液氮冻存,Western blots检测磷酸化的细胞外调节蛋白激酶（phospho--Extracellular regulated proteinkinases,P—Erk1／2）表达水平。结果HSFI-／-小鼠在Morris水迷宫定向航行实验中,第1天至第7天逃避潜伏期均明显长于HSF1＋／＋小鼠（P〈0．05）。Western blots显示：HSFI-／-小鼠在Morris水迷宫学习任务中前额叶内P—Erk1／2水平明显低于HSF1＋／＋小鼠（P〈0．05）相应的脑区。结论HSF1在Morris水迷宫学习任务中能够维持前额叶Erk1／2激活,因而在Morris水迷宫空间学习任务中起着重要的作用。     

血管性痴呆大鼠学习记忆障碍及脑组织生长抑素的变化

目的探讨生长抑素（SS）参与血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆障碍的作用机制。方法采用双侧颈总动脉结扎法制备慢性前脑缺血动物模型，随机分为假手术组（S）、模型组（M）。造模2月后进行水迷宫试验，观察2组大鼠空间学习记忆能力的差异，应用免疫组化方法检测造模2月后VD大鼠海马及颞叶皮层生长抑素表达变化。结果与假手术组比较，大鼠水迷宫学习记忆能力在造模2月后差异有显著性意义（P〈0．05），大鼠海马及颞叶皮层SS表达在造模2月后降低（P〈0．05）。结论脑组织SS表达降低，导致血管性痴呆大鼠学习记忆障碍。     

脑梗死后遗症大鼠模型脑组织ATP、ADP及单胺类神经递质含量的变化

目的 研究脑梗死后遗症大鼠模型脑组织ATP、ADP及单胺类神经递质含量的变化。方法 建立脑梗死后遗症大鼠模型，用高效液相色谱（HPLC）法测定大鼠脑组织ATP、ADP及单胺类神经递质含量。结果 刺激组（SG）毛发相对黯淡无光、卷曲，精神萎靡，惊恐，消瘦，肢体无力，摄食减少，饮水减少，手术伤口愈合迟缓，符合中医脑梗死后遗症征候。正常组（NG）大鼠脑组织ATP、ADP含量显著高于SG组、术后不刺激组（SG）（P〈0．01），同时NSG组大鼠脑组织ATP、ADP含量显著高于SG组（P〈0．05）。SG组大鼠脑组织NE、DA和5-HT含量显著低于NG组（P〈0．01），NSG组（P〈0．05）；NSG组大鼠脑组织DA含量显著低于NG组（P〈0．05）。结论 脑梗死后遗症大鼠由于能量代谢障碍而出现脑组织的ATP、ADP含量降低，并且伴有大脑释放单胺类递质增加及脑细胞内的单胺类递质含量减少，单胺类递质分泌增加又加重了脑组织的损伤，加剧ATP、ADP等能量物质代谢障碍，形成恶性循环。     

姜黄素预防高原缺氧大鼠认知功能障碍的机制研究

目的探讨姜黄素（Curcumin）预防高原缺氧大鼠认知功能障碍的机制。方法将24只成年雄性sD大鼠随机分为健康对照组、模型组（model组）、姜黄素[按体重60mg／（kg·d）]防治组（curcumin组）。造模后,给予姜黄素防治,采用Morris水迷宫实验方法检测各组大鼠学习记忆功能变化,并运用Westernblot技术检测海马Bcl-2、Bax及活化的caspase-3等凋亡相关蛋白表达水平的变化。结果①模型组大鼠寻找平台的潜伏期明显长于对照组,具有统计学意义（P〈0．05）,姜黄素组寻找平台的潜伏期相对于模型组显著缩短（P〈0．05）。撤离平台后,模型组大鼠在平台所在象限的停留时间明显短于对照组（P〈0．05）,姜黄素干预后大鼠在平台所在象限的停留时间较模型组显著延长（P〈0．05）;②姜黄素可显著减轻慢性缺氧导致的Bax、活化的easpase．3表达水平升高级Bcl-2表达水平下降。结论姜黄素可显著改善高原缺氧大鼠认知功能障碍,其机制可能和减轻海马神经元的凋亡有关。     

硫化氢对慢性低氧高二氧化碳模型大鼠学习记忆的影响

目的：探讨硫化氢对慢性低O2高CO2模型大鼠学习记忆的影响。方法：经Morris水迷宫训练淘汰后的24只SD大鼠随机分为3组：正常对照（NC）组,低O2高CO2＋生理盐水（HHSS）组,低O2高CO2＋硫氢化钠（HHSH）组。HHSH组和HHSS组每天置常压低O2高CO2舱内8h,每周6d,共4周观察,4周后Morris水迷宫检查空间学习记忆变化,测定大鼠肺动脉平均压（mPAP）和右心室壁（RV）/左心室加室间隔（LV＋S）比值、血浆中硫化氢浓度。结果：①HHSS组与NC组相比,mPAP和RV/（LV＋S）比值升高,血浆中硫化氢浓度降低,平均逃避潜伏期和游泳总距离延长,穿越平台的次数减少（均P〈0.05）;②HHSH组与HHSS组相比,mPAP和RV/（LV＋S）比值降低,血浆中硫化氢浓度升高,平均逃避潜伏期和游泳总距离缩短（均P〈0.05）。结论：硫化氢可以改善慢性低O2高CO2模型大鼠的学习记忆障碍。     

链脲佐菌素侧脑室注射后大鼠海马SYP改变

目的研究侧脑室内注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）对大鼠海马突触素（synaptophysin,SYP）的影响。方法将40只SD大鼠随机分成对照组和模型组,于第1d和第3d侧脑室注射STZ3rag／kg建立大鼠AD模型,15d后进行Morris水迷宫试验,取海马后通过RT-PCR、western-blotting及免疫组织化学法检测SYP表达水平。结果与对照组相比较,侧脑室注射STZ后大鼠逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数明显减少,SYP表达明显减少。结论侧脑室注射STZ后大鼠空间记忆力减退与突触结构受损有关。