子宫内膜异位症中miR-143、miR-145和miR-126的差异表达

目的探索子宫内膜异位症（EMs）中miR-143、miR-145和miR-126的差异表达,以及不同月经周期的影响。方法利用realtimeRT-PCR技术,比较miR-143、miR-145和miR-126在EMs患者在位内膜（EU,2例）、异位内膜（EC,14例）、配对EU+EC（14例）,与非EMs患者内膜（EN,28例）中的表达差异;并分析EN和EC组不同月经周期对miR-143、miR-145和miR-126表达的影响。结果不同月经周期的影响分析,发现仅EN标本中miR-143增生期表达量高于分泌期,差异有统计学意义（P＜0.05）。与EN相比,miR-143和miR-145在EU中均表达上调（P＜0.05）,miR-143、miR-145和miR-126在EC中均表达上调（P＜0.01）。配对EU-EC中,miR-143、miR-145和miR-126在EC中均表达上调（P＜0.01）。结论miR-143、miR-145和miR-126在EMs中表达高于非EMs,在EC中表达高于EU。     

miR-126/miR-126*在肝细胞癌中的表达及其与临床预后的相关性

目的研究miR-126/miR-126*在肝细胞癌中的表达,探讨其表达与相关临床病理参数的关系。方法用RT-QPCR方法检
测74例肝细胞癌手术切除的癌组织与相应的非癌组织中miR-126/miR-126*的表达,分析其表达与相关临床病理参数的关系。
结果miR-126/miR-126*在癌组织中表达水平显著低于相对应的非癌组织;miR-126/miR-126*在肝癌中的表达呈正相关关系;
复发组癌组织中miR-126/miR-126*的表达显著低于未复发组癌组织;miR-126/miR-126*高表达组无瘤生存时间显著优于低表
达组。结论miR-126/miR-126*的的低表达可能是影响肝细胞癌转移并导致患者不良预后的一个重要因素。
     

食管癌组织和癌旁组织miR-9表达差异研究

目的：探讨食管癌癌组织和癌旁组织中miR-9的表达差异,并对潜在的miR-9靶基因进行预测。 方法：采用SYBR Green I染色的实时荧光定量PCR（qRT-PCR）对50例食管癌及配对癌旁正常组织 标本中miR-9基因的表达水平进行定量分析,并运用生物信息学技术对miR-9的靶基因进行预测。结 果：miR-9在食管癌组织中的表达显著低于癌旁正常组织（P〈0. 05）,且与患者淋巴结转移有关（P〈0.05）,与性别、年龄、组织学分型、TNM分期无关（P〉0. 05）。对miR-9预测得到GOLPH3、RAB34、 ALCAM靶基因。结论：miR-9在食管癌组织中低表达,而且与淋巴结转移有关,可能在食管癌的发病 中起重要作用。     

miR-143、miR-145在膀胱癌中的表达及意义

【目的】探讨膀胱癌中miR-143、miR-145的表达及其与膀胱癌临床病理特征的关系。【方法】采用miRNA表达谱芯片、Northen blot、Real-time PCR法检测miR-143、miR-145在膀胱癌中的表达,分析miR-143、miR-145的表达与膀胱癌临床分期分级的关系。【结果】miRNA表达谱芯片、Northen blot、Real-time PCR法均提示miR-143、miR-145在膀胱癌中较癌旁正常膀胱组织中表达明显降低,差异具有统计学意义。miR-143、miR-145的低表达在不同临床分期与分级的膀胱癌中差异不明显。【结论】miR-143、miR-145在膀胱癌中明显低表达,可能与膀胱癌的发生密切相关。     

miR-24和miR-22在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨miR-24和miR-22在胃癌细胞与组织中的表达及其与胃癌临床病理特征之间的关系。方法应用实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-24和miR-22在人正常胃黏膜细胞株(GES-1)、4株人胃癌细胞株以及胃癌组织和相应的癌旁胃黏膜组织中的表达,分析miR-24和miR-22在胃癌中的表达及其与胃癌临床病理特征之间的关系。结果与GES-1比较,miR-24在人胃癌细胞株SGC-7901和BGC-823中表达明显升高(P=0.003、P=0.007),而在MGC-803和AGS中表达差异无统计学意义(P=0.304、P=0.120);与GES-1比较,miR-22在SGC-7901中表达明显升高(P=0.000),在MGC-803中表达显著降低(P=0.000),而在AGS和BGC-823中表达差异无统计学意义(P=0.151、P=0.307);胃癌组织中miR-24的表达明显高于其相应的癌旁胃黏膜组织(P=0.005);miR-22在胃癌组织及其相应的癌旁胃黏膜组织中的表达差异无统计学意义(P=0.501);胃癌组织中除miR-24的表达与性别具有显著相关性外(P=0.029),miR-24、miR-22与其他临床病理特征,如年龄、肿块大小、浸润深度、分化程度、Borrmann分型以及淋巴结转移、TNM分期等均无明显相关性。结论 miR-24在人胃癌细胞株SGC-7901和BGC-803以及胃癌组织中表达是上调的,可能在胃癌的发生发展中发挥重要作用。     

血清miR-21在良恶性结直肠疾病患者的表达变化研究

目的 探讨血清miR-21是否可成为结直肠癌患者的肿瘤标志物.方法 以miR-16为内参,采用实时荧光定量PCR的方法检测miR-21在40例结直肠癌患者、29例良性结直肠疾病患者和27例健康体检者血清中的相对表达水平.结果 与健康体检者比较,血清miR-21在良性结直肠疾病时表达量无显著升高(P＞0.05);与健康体检者和良性结直肠疾病患者比较,血清miR-21在结直肠癌患者血清中表达量皆显著升高(P<0.05).ROC曲线分析显示,血清miR-21诊断结直肠癌的曲线下面积为0.761,特异性为69.3％时,敏感度为75％.进一步分析显示,血清miR-21表达量与患者性别、肿瘤发生部位、肿瘤分期、肿瘤分化程度、肿瘤是否发生淋巴结转移和远端转移等无显著相关性(P＞0.05).结论 血清miR-21在结直肠癌患者的表达量显著升高,具有肿瘤特异性;血清miR-21有望成为结直肠癌的肿瘤分子标志物.     

miR-21及PDCD4在乳腺癌的表达及预后的关系

目的：探讨miRNA-21（miR-21）和其靶基因程序性细胞死亡4（progranlmed cell death 4,PDCD4）在乳腺癌的表达及与预后的关系。方法：运用实时定量PCR检测87例乳腺浸润性导管癌组织miR-21和PDCD4的表达,并对生存时间进行分析。结果：miR-21与PDCIM的表达呈负相关．相关系数r=-0．631（P〈0．01）;在远处转移组中miR-2l的表达高于非远处转移组（P〈0．001）．PDcD4则低于非远处转移组（P〈0．001）;两者表达均与肿瘤组织学分级、肿瘤大小、淋巴结及远处转移情况相关（P〈0．05）。miR-2l高表达组和PDcD4低表达组患者有较长的无病生存期（DFS）和总生存期（OS）（P〈0．05）。结论：乳腺癌组织中miR-21高表达与PDCD4低表达与乳腺癌预后相关．可作为乳腺癌恶性程度的预测指标。     

miR-21在白血病发病过程中的作用研究

目的 本实验旨在研究miR-21在白血病细胞中表达情况,探讨miR-21基因与白血病发病的关系.方法 提取组织中的小于200 bp的RNA,用poly(A)聚合酶在其3′末端加尾,再用5′带40 nt延伸序列的单碱基锚定Olig-dT引物进行反转录,然后用特异引物进行real-time PCR扩增,从而检测部分miRNAs在白血病细胞株K562中的表达,并与正常人骨髓表达情况相对比.结果 通过real-time PCR 分析,癌基因miR-21在K562细胞中的表达量约为(1.73±0.24)×105 个拷贝,明显高于正常人骨髓组织中miR-21的表达(P＜0.01).结论 本研究表明miR-21在K562细胞中的表达量增高,可能在白血病的发生过程中起重要作用.     

宫颈癌患者血清miRNA-34a表达水平研究

目的分析血清miR-34a在宫颈癌中的表达水平,探讨血清miR-34a在宫颈癌中的可能作用。方法收集贵州医科大学附属肿瘤医院2020年10月至2021年3月宫颈癌患者血清为宫颈癌组,同时收集肺癌、结直肠癌患者和健康体检者血清作为疾病对照组和健康对照组,每组20例,提取血清微小RNA,逆转录后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测miR-34a基因的表达水平。结果与健康对照组比较,宫颈癌组miR-34a表达升高(40.2倍,P=0.003)。与肺癌组及结直肠癌组比较,宫颈癌组miR-34a表达明显升高(93.4倍,P<0.001;25.4倍,P=0.005)。结论与健康人群、肺癌及结直肠癌相比,宫颈癌患者血清miR-34a明显升高,提示其可能做为宫颈癌诊断的生物标志来进一步研究;其miR-34a表达水平和肺癌变化趋势一致,与结直肠癌相反,提示miR-34a在不同肿瘤中可能通过不同的机制发挥作用,值得进一步探讨。     

初发和复发膀胱尿路上皮癌中miR-21和miR-205的表达

目的检测microRNA-21(miR-21)与microRNA-205(miR-205)在初、复发膀胱尿路上皮癌中的表达情况,探讨microRNAs(miRNAs)在膀胱尿路上皮癌中的表达意义及是否与肌层浸润有关。方法采用基于2-△△CT的实时定量PCR(Real-time PCR)方法检测40例初、复发癌组织miR-21及miR-205的表达情况。结果与初发癌相比,复发癌miR-21表达上调(P<0.05),miR-205表达下调(P<0.05);与非肌层浸润性癌相比,肌层浸润性癌miR-21表达上调(P<0.05),miR-205表达下调(P<0.05);肌层浸润性癌miR-21与miR-205表达量的比值5倍于其在非肌层浸润性癌中表达量的比值。结论 miR-21高表达、miR-205低表达可能参与膀胱尿路上皮癌复发并与肌层浸润有关。     

实时定量PCR方法检测宫颈癌组织中SNAIL mRNA的表达

目的研究锌指转录抑制因子SNAIL mRNA在宫颈癌组织和宫颈癌细胞系中的表达情况并探讨其意义。方法采用实时定量PCR方法检测5例宫颈原位癌、55例宫颈浸润癌、14例癌旁组织和3种宫颈癌细胞系HeLa、SiHa、C33A中SNAIL mRNA的表达,并分析其与宫颈浸润癌各临床病理指标的相关性。结果正常宫颈组织、宫颈原位癌和宫颈浸润癌SNAIL mRNA的相对表达水平分别为0.01±0.01、0.08±0.05、0.09±0.07;宫颈原位癌和浸润癌均高于正常宫颈组织(P<0.05)。但在不同FIGO分期、病理分级、浸润深度及淋巴结转移情况之间SNAIL mRNA水平无明显变化。3种宫颈癌细胞系中均有SNAIL mRNA的表达,分别为0.06±0.06、0.18±0.05、0.09±0.08,以SiHa细胞系最高(P<0.05)。结论SNAIL基因在宫颈原位癌和浸润癌中高表达,提示SNAIL可能与宫颈癌的发生和发展有关。     

miR-21、miR-182、miR-382在非小细胞肺癌中的临床意义及益气除痰法的干预作用

[目的]分析miR-21、miR-182、miR-382基因对肺癌进展的影响及益气除痰法的干预作用.[方法]应用生存分析在线软件Kaplan-Meier plotter分析miR-21、miR-182、miR-382对肺癌预后的影响,应用功能富集分析工具FunRich数据库对miR-21、miR-182、miR-382...     

黄芩苷通过上调miR-126诱导乳腺癌细胞凋亡的机制研究

目的 用黄芩苷干预人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,观察黄芩苷对乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响及作用机制.方法 用qRT-PCR检测miR-126的表达变化,Western-blot检测Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3、p-p38和p53的表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 miR-126在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达比正常乳腺细胞低,黄芩苷干预乳腺癌细胞后miR-126上调最为明显(P<0.05).用miR-126 mimics、miR-126 inhibitors转染乳腺癌细胞,Western-blot显示黄芩苷及miR-126 mimics作用于人乳腺癌细胞后Bcl-2表达水平下降,Caspase-9和Caspase-3的裂解产物、p-p38、p53表达增加,差异有统计学意义(P<0.05).MTT法显示黄芩苷和miR-126均可抑制乳腺癌细胞的增殖,流式细胞术显示黄芩苷与miR-126 mimics促进癌细胞凋亡.结论 黄芩苷可以抑制乳腺癌细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与通过上调miR-126调节凋亡相关基因有关.     

miR-21负向调控宫颈癌HeLa细胞株中hTERT的表达

  目的  通过观察在miR-21作用下hTERT的表达情况，探讨在宫颈癌HeLa细胞中miR-21对hTERT的调控作用。  方法  利用RT-PCR 法及West Blot 法分别检测HeLa中miR-21 的表达，以及hTERT蛋白的表达情况；通过实验设计，生成miR-21模拟物和 miR-21抑制剂，并分别设立两组的空白对照序列；将空转liposome2000 （lipo2000）设为对照组，利用脂质体 liposome2000包裹宫颈癌细胞株 HeLa并予以转染。在转染后24 h及时检测hTERT及蛋白的表达量。  结果  HeLa细胞株中miR-21及hTERT表达阳性；转染后24 h模拟物组、模拟物对照组、抑制剂组、抑制剂对照组、脂质体组 hTERT mRNA相对表达水平分别为（0.51±0.33）、（0.69±0.19）、（1.33±0.39）、（0.83±0.26）和（0.58±0.16）；蛋白相对表达水平分别为（0.41±0.18）、（0.62±0.18）、（1.45±0.60）、（0.83±0.15）和（0.82±0.30）；模拟物组与其对照组及脂质体组相比较，hTERT mRNA及蛋白表达情况均较低且差异有统计学意义（P < 0.05）；相反，在抑制剂组与其对照组及脂质体组相比较中，hTERT mRNA及蛋白表达情况明显升高，差异有统计学意义（P < 0.05）。  结论  通过检测发现miR-21及hTERT基因在HeLa细胞株中均呈现高表达状态；miR- 21可以调节hTERT mRNA 和蛋白表达水平，从而发挥负向调控hTERT的作用。     

miR-143和miR-520d-5p在胃癌组织中的异常表达

目的 应用MicroRNAs （miRNAs）芯片技术筛选胃癌组织中差异表达的miRNAs,研究与胃癌相关的miRNAs.方法 从3对手术切除的胃和相配对的正常胃组织中提取总RNA,miRNA芯片检测miRNA表达情况,然后在47例配对的胃癌和正常胃组织中,用Real-time RT-PCR（Taqman）对部分差异表达miRNA进行验证.结果 芯片结果显示：与配对的正常胃组织相比,有62个miRNAs在胃癌中异常表达,其中42个miRNA高表达,20个miRNA低表达.用Real-time RT-PCR（Taqman）验证显示：miR-143在胃癌组织中表达显著降低（JP=0.002 9）;miR-520d-5p在胃癌组织中表达显著提高（P =0.032）.结论 miR-143和miR-520d-5p可能参与了胃癌的发生过程.