银染单链构象多态性技术检测原发性肝癌p53基因的突变

建立银染单链构象多态性技术检测原发性肝癌ｐ５３基因突变。方法用银染及单链构象多态性技术检测１６９例原发性肝癌的癌变及癌旁正常组织Ｐ５３基因第７，８外显子的突变，并进行了ＤＮＡ顺序，鉴定突变位点。４例患者Ｐ５３基因Ｅ７中第２４９叫密码子第３号碱基发生了Ｇ：Ｃ→Ｔ：Ａ的颠换，２例患者Ｅ８中第２７３号密码子第１号碱基发生了Ｃ：Ｇ→Ｔ：Ａ的转换，总的突变率达３８％；６例Ｐ５３基因突变的癌变组织中乙型肝炎病     

西南地区肝细胞癌抑癌基因p53突变谱的研究

采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术对西南地区２６例肝细胞癌抑癌基因ｐ５３外显子５、６、７和８突变进行了研究。发现肝细胞癌总突变率为５０％（１４／２８），突变模式为散在于各外显子。ＰＣＲ－ＲＦＬＰ证实２４９位密码子位点特异的突变率为１８．７％。结果表明西南地区肝癌存在明显的ｐ５３基因突变，其突变谱反映了该地区病因的复杂性，可能与黄曲霉毒素Ｂ１和乙肝病毒的双重作用有关。实验还建立了ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术，     

p53基因与肝癌的研究进展

p53基因在细胞的分化调控中，主要通过细胞分裂制动基因的激活以及程序性细胞死亡系统的启动，控制细胞增殖。而p53基因的突变，会阻碍其正常的生物学功能的发挥，使细胞生长繁殖失控，引起细胞的转化及癌变。原发性肝癌的发生与p53基因的突变密切相关，并以249位密码子的特异性突变和其他位点的散发性突变两种形式存在。249位密码子的特异性突变与黄曲霉素B1的作用以及乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒的诱发等多种因素有关。中国大陆、台湾、香港等地的原发性肝癌，以5～8外显子的166、172、214、247、249、255、273、279和286等位点的突变较为常见。     

反义P^53基因对人肺癌细胞生长蛋白表达的影响

Ｐ＾５３基因的突变浊肿瘤发生的重要事件之一，利用能表达反义Ｐ＾５３基因的逆转录病毒载体导入人肺癌细胞系ＧＬＣ－８２细胞，抑制其突变的Ｐ＾５３基因表达。并与导入的空载体ＰＤＯＲ－ｎｅｏ和未导入的ＧＬＣ－８２细胞作比较，用ＤＮＡ杂交证实重组子转入细胞，通过细胞生长曲线观察细胞生长情况，利用免疫组化法和流式细胞仪测定观察Ｐ＾５３蛋白表达，结果表明，反义Ｐ＾５３基因对ＧＬＣ－８２细胞生长速度及突变的Ｐ＾５     

银染PCR—SSCP检测大肠癌p53基因突变

采用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法检测肠癌细胞株及３０例新鲜肠癌Ｐ５３基因突变。结果发现ＬＯＶＯ细胞ｐ５３基因外显子５、６、７发生突变，ＬＳ１７４Ｔ细胞Ｐ５３基因的外显子５、８发生突变，３０例新鲜肿瘤标本ｐ５３基因外显子５、６、７、８的突变例数各为４、０、４、４例。大肠癌Ｐ５３基因突变热点为外显子５、７、８。     

银染单链构象多态性技术检测原发性肝癌p53基因的突变

目的建立银染单链构象多态性技术检测原发性肝癌ｐ５３基因突变。方法用银染及单链构象多态性（ＳＳ－ＳＳＣＰ）技术检测１６９例原发性肝癌的癌变及癌旁正常组织ｐ５３基因第７，８外显子（Ｅ７，Ｅ８）的突变，并进行ＤＮＡ测序，鉴定突变位点。结果４例患者ｐ５３基因Ｅ７中第２４９号密码子第３号碱基发生了Ｇ：Ｃ→Ｔ：Ａ的颠换（ＡＧＧ→ＡＧＴ），２例患者Ｅ８中第２７３号密码子第１号碱基发生了Ｃ：Ｇ→Ｔ：Ａ的转换（ＣＧＴ→ＴＧＴ），总的突变率达３８％（６／１６）；６例ｐ５３基因突变的癌变组织中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的整合率为５／６，８例未发生ｐ５３基因突变的癌变组织中ＨＢＶ的整合率仅为１／８，两者相比差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论ｐ５３基因突变是原发性肝癌发生发展过程中的常发事件，且与ＨＢＶ的慢性感染密切相关。进一步研究有利于探讨原发性肝癌的发病机制，并为基因治疗提供依据。     

以PCR—SSCP分析和核苷酸序列直接测定技术检测人类白血病p53…

以多聚酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析（技术研究）３６例不同类型的白血病ｐ５３抗癌基因点突变，结果在１４例淋巴细胞白血病中发现３例有ｐ５３基因片段的泳动变位。进一步对其中的１例急性淋巴细胞白血病进行核苷酸序列直接测定，显示在第７外显子的２５７位编码子核工本酸由ＣＴＧ突变为ＣＡＧ、氨基酸由天冬氨酸突变为缬氨酸，２２例髓系白 血病未发现有ｐ５３基因的点突变。结果提示ｐ５３抗癌基因点突变     

以PCR－SSCP分析和核苷酸序列直接测定技术检测人类白血病p53基因点突变

以多聚酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析（技术研究）３６例不同类型的白血病ｐ５３抗癌基因点突变，结果在１４例淋巴细胞白血病中发现３例有ｐ５３基因片段的泳动变位。进一步对其中的１例急性淋巴细胞白血病进行核苷酸序列直接测定，显示在第７外显子的２５７位编码子核昔酸由ＣＴＧ突变为ＣＡＧ、氨基酸由天冬氨酸突变为缀氨酸。２２例髓系白血病未发现有ｐ５３基因的点突变。结果提示ｐ５３抗癌基因点突变导致功能失活在淋巴细胞白血病的发病中可能起一定的作用。     

应用PCR—SSCP研究胆道肿瘤P53基因的突变

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测了１２例胆道肿瘤（胆管瘤７例，胆囊癌３例，壶腹癌２例）的Ｐ５３基因第５，７外显示，结果发现２例胆管癌和１例胆囊癌Ｐ５３基因有突变，采用免疫组化方法对２２例胆管癌和８例癌旁组织Ｐ５３蛋白产物进行了检测，染色阳性者分别为１１例（５０)和０。结果提示胆道肿瘤的发生与Ｐ５３基因的突变有关。     

P53基因与人类血液系统恶性肿瘤

Ｐ５３基因与人类血液系统恶性肿瘤许小平综述阎影，丁方杰审校早期的一些实验观察到Ｐ５３基因的表达产物Ｐ５３蛋白可以协同激活的ｒａｓ基因促进正常细胞转化，故把Ｐ５３基因也列为癌基因的一种￣［１］。１９８９年Ｆｉｎｌａｙ等￣［２］的研究证明与细胞癌变有关的...     

50例白血病P53基因点突变的检测

用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测５０例不同类型的白血病Ｐ５３基因点突变,结果２５例髓系白血病中２例有Ｐ５３基因点突变且均为ＡＭＬ－Ｍ２ａ型,１１例淋巴细胞白血病中２例有Ｐ５３基因点突变,都是Ｂ系淋巴细胞白血病。４例Ｐ５３基因点突变患者,一般情况差,对化疗不敏感,预后不佳。结果显示：Ｐ５３基因点突变导致功能失活在白血病发病过程中起一定作用并可作为判断预后的参考指标。     

细胞遗传变异是某些癌症的病因

某些癌症有家族性,现在已经知道癌基因能影响正常细胞的生理进程,所以可肯定某些癌症的发生与基因有关,其中以肿瘤抑制基因和原癌基因（ｐｒｔｏ－ｏｎｃｏｇｅｎｅ）最重要,该两种基因任何一项发生突变,都可导致癌症的发生。 肿瘤抑制基因肿瘤抑制基因位于染色体１７又名Ｐ５３,它可修复ＤＮＡ损伤,虽然它也引起细胞凋亡,但却能抑制或防止癌症的发生。当Ｐ５３基因突变后,细胞周期失去“制动”,从而导致产生异常细胞,并引发不同种类癌症。例如乳腺癌、肠癌、肾癌和某些肺癌就呈现Ｐ５３的突变。此外,ＲＢ１和ＷＴ１也是肿瘤抑…     

癌基因MDM2—P53基因的拮抗基因

癌基因ＭＤＭ２──Ｐ５３基因的拮抗基因晁恒军综述郝玉书审阅Ｐ５３基因的突变和失活已被公认为是肿瘤发生发展的重要机制之一，但目前仍有许多问题未能阐明。如：在相当一部分恶性肿瘤未能检出Ｐ５３基因的改变和失活；Ｐ５３基因在正常组织细胞及肿瘤细胞中的具体作用...     

支气管鳞状细胞癌及癌旁异型增生P53蛋白和PCNA表达的研究

应用免疫组化ＳＰ方法，对９５例支气管鳞状细胞癌及癌旁异型增生的Ｐ５３蛋白（ＤＯ－７）和ＰＣＮＡ（ＰＣ１０）进行了检测。结果显示，Ｐ５３蛋白阳性者６８例，其中高、中、低分化的鳞状细胞癌的Ｐ５３蛋白阳性率分别为６８％、７５％和７１％；异型增生中Ｐ５３蛋白阳性５１例，其中重度异型增生的阳性率与轻度或中度比较有显著差异（χ２＝３８．４７，Ｐ＜０．００５）；Ｐ５３蛋白阳性的５１例异型增生其相应鳞状细胞癌均呈Ｐ５３蛋白阳性，呈显著一致性（χ２＝２９．２０，Ｐ＜０．００５）；ＰＣＮＡ指数≥３０％的异型增生者其Ｐ５３蛋白阳性率显著高于ＰＣＮＡ指数＜３０％的异型增生（χ２＝２２．２０，Ｐ＜０．００５）。提示支气管癌前病变有Ｐ５３蛋白的过度表达，Ｐ５３基因突变是支气管鳞状细胞癌发生的早期事件；Ｐ５３蛋白阳性的异型增生者其控制细胞增生的功能发生异常，也可能是突变的Ｐ５３基因赋予这些细胞具有生长优势。     

内镜活检胃癌组织及细胞P53蛋白表达研究

内镜活检胃癌组织及细胞Ｐ５３蛋白表达研究广西医科大学第一附院消化内科（５３００２１）韩萍，姜海行广西医科大学第一附院病理科蒋一强，梁秀就Ｐ５３癌基因（Ｐ５３ｏｎｃｏｇｅｎｅ）突变与多种人类肿瘤发生的关系日益受到重视。免疫组织化学染色检测胃癌Ｐ５３蛋白...     

结核杆菌异烟肼表型耐药与katG基因突变相关性研究

目的:探讨结核分支杆菌异烟肼(INH)表型耐药与KatG基因密码子315位和463位基因改变的相关性。方法:采用基因直接测序法对结核分支杆菌分离株KatG基因进行分析。结果:132株异烟肼耐药菌株中68株KatG基因密码子315位有基因突变,突变率51.52%(68/132),野生型密码子315AGC(Ser)突变成ACC(Thr)60株,AAC(Asn)6株,ACA(Thr)1株,GGC(GIy)1株。133株INH敏感菌株未发现KatG 315位基因突变。132株INH耐药菌株中123株KatG基因密码子463位有基因突变,突变率为93.18%,野生型密码子463CGG(Arg)突变成CTG(Leu)123株;133株敏感菌株中114株KatG基因密码子463位有基因突变,突变率为85.71%,野生型密码子463 CGG(Arg)突变成CTG(Leu)114株。结论:①KatG基因315位密码子突变是菌株异烟肼表型耐药的重要分子基础,以Ser315Thr错义突变为主。②KatG基因463位密码子突变与异烟肼耐药表型没有相关性,不是结核杆菌异烟肼耐药的分子标志。该位点突变可能是基因多态性,与结核菌治疗带来的选择性压力无关。     

转导野生型pt3基因提高K562细胞对紫外线诱导的细胞凋亡的 …

观察野生型ｐ５３基因转染的Ｋ５６２细胞对紫外线诱导其细胞凋亡的影响。方法应用基因转转染技术将重组重生型Ｐ５３的逆转录病毒载体转导Ｐ５３蛋白缺失的Ｋ５６２细胞，用紫外线照射Ｋ５６２－Ｐ５３细胞不同的后再培养不同时间，用ＤＮＡ片段化和细胞ＤＮＡ     

K-ras突变多肽诱导胰腺癌免疫治疗的实验研究

【目的】研究以K ras为靶点体外诱导胰腺癌被动免疫治疗的可行性,为临床进行胰腺癌个体化治疗提供实验依据。【方法】利用RT PCR法克隆K ras基因,通过测序检测K ras癌基因突变类型。合成含突变位点的多肽,负载外周血单核细胞来源的树突状细胞(DC),检测其表达率,对T细胞进行激发活化,观察肿瘤特异性T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。【结果】Patu8988 胰腺癌株12 位密码子点突变为GGT→GTT,12位氨基酸突变为缬氨酸。合成突变多肽能有效地在树突状细胞表达突变位点,激发的肿瘤特异性T细胞(CTL)能有效地杀伤相应的肿瘤细胞。【结论】突变多肽能有效地诱导针对含K ras突变胰腺癌的免疫治疗。     

膀胱肿瘤P53基因突变临床意义

用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ对３０例福尔马林固定，石蜡包埋膀胱肿瘤标本进行研究。结果：ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测出Ｐ５３基因突变１０例，Ⅰ级１例，Ⅱ组４例，Ⅲ组５例，符合病理诊断及随访资料，Ｐ５３基因未突变组与突变组在病理分级、临床分期和生存时间上差异显著（Ｐ〈０．０５）。     

人β2—肾上腺素能受体基因第64位密码子突变频率的检测

建立一种简便，准确，实用的人β３－肾上腺素能受体基因第６４位密码子突变的检测方法。方法应用聚合酶链反应特异性扩增β３－肾上腺素能受体基因含编码６４位氨基酸的基因 列，扩增产物用限制性内切酶ＢｓｔＯＩ酶切，聚丙烯酰胺凝胶电泳后，观察酶切位点的限制性片段长度多态性图谱。