骨形态发生蛋白质诱导犬的自体气管移植段软骨再生

目的：将重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）植入的犬的自体气管移植段内，促进新生软骨形成，克服移植后软骨软化吸收造成的移植段气管塌陷。方法：24只杂种犬随机等分为三组，颈部切除5个气管环段作为移植段。A组原位再植，外覆带蒂大网膜；B组移植段植入rhBMP-2后埋入腹腔大网膜中；C组移植段植入rhBMP-2后原位再植，外覆带蒂大网膜。以上rhBMP-2均以胶原溶液作为缓释载体，用注射器直接注入各环间。术后1、2、4、8周处死动物，标本行大体及组织学观察。结果：三组移植体软骨环均有不同程度的吸收。B、C组移植体的rhBMP-2植入区有软骨再生，且以B组再生更明显。结论：rhBMP-2可刺激气管移植段软骨再生；胶原可充当rhBMP-2的缓释载体，用于气管移植有良好的协助促软骨再生作用。     

重组人骨形态发生蛋白诱导气管软骨再生的剂量效应

目的:观察重组人骨形态发生蛋白(rhBMP) 2诱导犬自体原位气管移植段软骨再生过程中的剂量效应.方法:4组小鼠气 管移植段各环间软组织中植入rhBMP 2胶原缓释系统,其rhBMP 2含量分别为1,2,5和10mg.将移植段气管原位移植,4wk后 观察标本大体和组织学改变,并将测得的新生软骨面积进行比较.结果:rhBMP 2植入组移植段环间均有不同程度的软骨再生 随植入物中rhBMP 2含量的增加,新生软骨面积分别为:(1768.1±449.0),(2364.1±444.3),(3000.7±488.3),(3188.3± 388.3)pixel.4组新生软骨面积差异有显著性(F=5.246,P<0.01).结论:rhBMP-2诱导气管移植段软骨再生的作用具有剂 量效应.     

BMP诱导同种异体气管移植体的软骨再生

目的 :重组人骨形态发生蛋白 2 (rhBMP 2 )植入犬的同种异体气管移植体内诱导软骨再生 .方法 :1 4只犬 ,两两配对 ,随机分为A ,B 2组 .配对者两两交换移植体 ,异位移植(植入腹腔大网膜内 ) .移植体一端环间植入rhBMP 2 ,另一端做对照 .B组术后加服免疫抑制剂 .术后 4wk处死动物 ,标本行大体及组织学观察 .结果 :2组实验动物均于术后 4wk处死 .移植段气管植入rhBMP 2后新生软骨面积为 (pix el) 1 4 1 8.7± 5 1 2 .3,对照组为 2 78.2± 1 83.1 (P <0 .0 1 ) .应用免疫移植剂后 ,植入rhBMP 2组新生软骨面积 (pixel)增加为 1 936 .0± 6 0 9.8(P <0 .0 5 ) .结论 :rhBMP 2可刺激同种异体气管移植体软骨再生 ;免疫抑制剂的应用将会增强其作用效果 .     

不同时间段内骨形态发生蛋白诱导移植气管软骨再生

目的:研究不同时间段内骨形态发生蛋白诱导犬自体移植气管软骨再生的作用.方法:36只杂种犬,随机分为A,B两组,颈部切去5个气管环,A组气管环间植入重组人骨形态发生蛋白2/胶原复合物,B组为空白对照组,然后植入自体腹腔大网膜中.在术后1,2,3,5,9,12wk分别从两组中各取3例移植段气管行组织学检查和骨钙素(BGP)的放免测定.结果:rhBMP2植入区内软骨再生存在于移植后的各个时间段,且以术后2wk至5wk较为明显.两组标本BGP水平测定均随着时间的延长而增高,除术后1wk无显著性差异(P>0.05),其余各时间段两组差异均有显著性(P<0.05).结论:rhBMP2可诱导气管移植段软骨再生,但在不同时间段的作用效果不同.     

BMP诱导自体气管移植段软骨再生的量效关系

目的：将重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)植入犬的自体异位气管移植段内诱发新生软骨,寻求rhBMP-2在气管移植段内诱发软骨的量效关系及最佳的rhBMP-2用量．方法：8只杂种犬,颈部切取5环气管段作为移植段．移植段各环间软组织中植入不同含量的rhBMP-2后埋入自体的腹腔大网膜中．不同含量的rhBMP-2均以胶原为缓释载体．术后4wk处死动物取材,并行大体及组织学观察．结果：各组移植段固有软骨环均被轻度吸收．rhBMP-2植入组移植段环间均有不同程度的软骨再生,且各组新生软骨量随植入物中rh—BMP之含量的增加而增加．结论：rhBMP-2可刺激气管移植段软骨再生,且存在量效关系,以每环间植入5mg的rhBMP-2较为合适．     

移植气管软骨再生的实验

目的 研究同种异体移植气管软骨的再生能力。方法 将供体犬气管置于受体犬腹腔内，以带蒂大网胞包绕，分别在术后1，2，3，4，5，6，7，8及12wk时，共9个时间段将移植段气管取出作病理及透射电镜检查，部分标本软骨用^3H-TDR(^3H-脱氧胸苷）标记，行放射自显影检查。结果 软骨再生存在于移植后的各个时间段的气管软骨膜下，其再生的程度与良好的血液循环有关。结论 同种异体气管移植，血液循环充分建立的条件下，软骨具有良好的再生能力。     

肌瓣包裹自体气管移植体复合BMP诱导软骨再生

目的:研究BMP复合肌瓣在自体移植中对软骨再生的作用.方法:将15只杂种犬随机等分为3组,均切取颈部5环气管段作为移植段,行自体移植.A组:肌瓣包裹组;B组:肌瓣复合BMP/I型胶原复合物组;C组:空白对照组.术后1,2,4,8及10 wk处死动物取材,观察和比较实验动物存活情况、移植体气管标本的大体和组织学改变,新生微血管密度(MVD)等指标,用改良钙-钴法测定软骨组织中碱性磷酸酶(ALP)的分布.结果:A, B组移植体均有不同程度的软骨再生:C组基本无再生;B组最明显.术后8 wk前,ALP染色阳性面积有统计学意义(t=3.269,P<0.05),在术后8 wk以后其差别无统计学意义.结论:BMP可提高移植段软骨的ALP表达,抑制软骨吸收.肌瓣包裹移植段,能够诱导出新生血管,利于软骨再生,二者复合可有效促进软骨再生.     

犬同种异体气管移植中骨形成蛋白-2对气管软骨碱性磷酸酶的影响

目的: 明确局部应用骨形成蛋白-2(BMP-2)对犬同种异体移植段气管碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.方法: 将西安地区健康雄性杂种犬40只随机平均分为实验组与对照组,两组间动物各取一6环颈段气管,交换后原位移植,应用犬双侧胸骨舌骨肌-胸骨甲状肌联合肌瓣包裹移植段气管提供良好血运,试验组在移植段气管环间注射BMP-2/I型胶原复合物,对照组仅注射I型胶原作为空白对照,术后2,4,8,12 wk分别处死实验动物,取移植段气管标本,观察其大体形态,HE染色观察软骨环的微观变化;改良钙-钴法测定移植段软骨组织中碱性磷酸酶的分布.结果: 术后4 wk后实验组移植段气管通畅度高于对照组(0.84±0.04, P<0.05); HE染色发现各个时间点两组移植段软骨细胞密度无显著性差异( P>0.05);应用图像分析软件计算切片染色阳性的像素面积,发现在术后8 wk及以前,试验组动物的碱性磷酸酶染色阳性面积比例明显高于对照组(0.29±0.02,P<0.05),术后12 wk两者的差别无统计学意义(P>0.05).结论: BMP-2可以提高移植段气管软骨碱性磷酸酶表达,增强气管软骨的钙化,维持移植段气管环状软骨形态及气管环的稳定,为临床应用同种异体气管移植解决大段气管缺失奠定基础.     

bFGF对rhBMP-2诱导犬气管损伤后软骨再生的作用

目的:研究应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导犬气管环部分缺损后软骨再生的可行性.方法:切除连续5个气管环前端的部分软骨,形成1 cm×3 cm的气管原位软骨缺损,建立犬气管软骨缺损模型.将18只犬随机分为A,B,C组,每组6只,A组为对照组,于软骨缺损处未行任何处理,B组于气管软骨缺损部位植入rhBMP-2/聚乙烯吡咯烷酮(PVP)复合材料,C组于气管软骨缺损部位植入rhBMP-2/bFGF/PVP复合材料.于术后12wk处死各实验犬,行大体及组织学检查,组织学半定量测定新生软骨情况.结果:A组气管软骨损伤残端出现气管软骨软化现象,气管管腔狭窄明显,软骨缺损处未见新生软骨生成;B,C两组气管软骨损伤部位残端未见气管软化,管腔狭窄不明显,软骨缺损处可见新生软骨及软骨岛生成,其中C组诱导新生软骨面积较B组更大(P<0.05).结论:rhBMP-2/PVP及rhBMP-2/bFGF/PVP缓释系统均可诱导气管软骨再生,rhBMP-2/bFGF/PVP缓释系统效果优于rh-BMP-2/PVP缓释系统.bFGF可能具有促进rhBMP-2诱导犬气管损伤后软骨再生的作用.     

骨形态发生蛋白-2对软骨寡聚基质蛋白在软骨细胞内表达的影响

目的 :定量研究骨形态发生蛋白 (BMP 2 )对软骨寡聚基质蛋白 (COMP)基因在人软骨细胞及ATDC5 5细胞内表达的影响。方法 :原代培养成人及胚胎的关节软骨细胞 ,经BMP 2刺激后 ,利用real timeRT PCR定量分析COMP基因的表达情况 ;采用静息期不表达COMP基因的鼠源性成软骨细胞株ATDC5 5作为研究对象 ,给以BMP 2刺激 ,通过RT PCR检测COMP表达的变化 ;将COMP基因的全长启动子克隆到报告基因Luciferase的上游并转染入ATDC5 5细胞 ,分别给以 5 0 0 μg·L-1的BMP 2和 /或 10 μg·L-1的Noggin刺激 ,测定其对Luciferase活性的影响。结果 :BMP 2使成人软骨细胞内的COMP基因表达提高近 3倍 ,而对胚胎软骨细胞的作用较弱 ,提高了1.5倍 ;COMP基因在胚胎软骨细胞内的基础表达量约是在成人软骨细胞内的 2倍 ;经BMP 2刺激后ATDC5 5细胞株明显表达COMP基因 ,并且BMP 2的这种效应能够被其拮抗剂Noggin所抑制 ;BMP 2明显促进了Luciferase的活性 ,约提高了 5倍 ,且Noggin特异性的抑制了BMP 2的这种作用。 结论 :BMP 2能够明显促进COMP基因在人关节软骨细胞及鼠源性成软骨细胞株ATDC5 5内的表达。     

双膦酸盐对骨形成蛋白诱导骨的作用

目的：研究双膦酸盐对骨形成蛋白（BMP）诱导骨的作用。方法：42只大白鼠背部植入BMP,诱导出异位骨后,将大白鼠分成实验组和对照组。实验组在BMP植入后第3～7周,每周腹腔注射双膦酸盐（YM175）3次, 剂量1 μg·kg^-1·d ^-1。对照组按同样的方式给予等量的生理盐水。在BMP植入第3、4、7和10周,将BMP诱导骨取出,采用显微放射照片（CMR）和HE染色方法观察双膦酸盐对骨形成蛋白诱导骨的作用。结果：BMP诱导骨3周时（即双膦酸盐未投药前）,在BMP植入体周边形成编织骨,大量破骨细胞出现在新生骨组织表面。在4周时,实验组和对照组新生骨组织均向BMP植入体内生长。在10周时,对照组骨细胞变小,实验组可观察到有规律地排列的板层状骨的特征。结论：双膦酸盐对骨形成蛋白诱导骨破骨骨吸收有明显的抑制作用。     

牛骨形态发生蛋白异位诱导小鼠成骨的超微结构观察

目的：牛骨形态发生蛋白（ｂＢＭＰ）植入小鼠肌袋后可诱导血管周围的间充质细胞分化形成软骨和骨组织．但ｂＢＭＰ诱导异位成骨过程的超微结构研究报道甚少．本研究的目的是利用透射电子显微镜（ＴＥＭ）观察ｂＢＭＰ植入区间充质细胞向生骨细胞分化及成骨的超微结构变化．方法：将牛骨中提取的ｂＢＭＰ５ｍｇ植入小鼠股部肌间隙内，术后５，９，１４和２１ｄ取材，制备光镜及电镜标本，镜下观察组织超微结构的变化．结果：ｂＢＭＰ植入后５ｄ，植入区内发现大量肥大的间充质细胞及纤维母细胞样细胞聚集；术后９ｄ，成熟的软骨细胞出现并可见丰富的细胞外软骨基质；术后１４ｄ，软骨细胞变性，基质钙化明显，骨母细胞功能活跃；术后２１ｄ，骨母细胞深陷于钙化基质中形成骨细胞，骨髓腔出现，原始骨髓形成．结论：ｂＢＭＰ能诱导具有分化潜能的间充质细胞进行分化，产生一个完整的骨发育过程．     

骨形态发生蛋白诱导髓外造血的实验研究

目的:探讨骨形态发生蛋白(BMP)诱导髓外造血以拯救骨髓造血衰竭的作用。方法:采用60Co-γ+氯霉素(CH)+环磷酰胺(CY)的方法诱导小鼠致死性再生障碍性贫血模型,实验组于诱导再障前6d肌肉内植入重组人-BMP-4(rh-BMP-4),对照组小鼠肌肉内植入琼脂。观察血象、病理形态等变化以及两组再障小鼠的死亡率。同时,给正常小鼠大腿肌肉内植入rh-BMP-4,动态观察植入后局部的形态变化、形成骨及骨髓的形态特点,脾集落形成单位(CFU-S)以及基质细胞干细胞生长因子(SCF)的表达。结果:正常小鼠在BMP肌肉内植入1周内,在BMP周围有大量间质细胞增殖,2周后才出现软骨化骨和骨小结形成,其骨髓基质细胞的SCF表达明显高于自体骨髓;BMP植入组的再障小鼠,不仅血象与对照组相比有明显改善,而且死亡率也明显下降,有46.7%存活超过3个月,其血象完全恢复正常,骨髓和脾脏的组织形态学改变也恢复正常。对照小鼠除1只存活超过3个月外(占6.7%),其余均死于急性再生障碍性贫血。结论:肌肉内植入BMP-4可诱导髓外造血,其机制可能与BMP-4诱导成年自体肌肉内存在的干细胞向造血分化有关,这一结果将为干细胞治疗提供了一条新的思路。     

重组人骨形成蛋白－2与异种骨复合移植的扫描电镜观察

目的：明确含有重组人骨形成蛋白－２（ｒｈＢＭＰ－２）的新型复合异种骨的骨修复能力。方法：将ｒｈＢＭＰ－２与经综合化学处理的新生小羊骨松质（ＣＢ）结合，制备成复合异种骨．将复合异种骨植人兔下颌骨缺损，并以单纯松质骨移植、自体骨移植作为对照组，术后２、４、８、１２周分别取材做扫描电镜观察。结果：复合异种骨移植后，植骨区有大量新骨形成，新骨的量随移植时间延长而逐渐增多。自体骨移植组扫描电镜下表现与复合异种骨组基本相同。而单纯骨松质载体移植后，植入区多为纤维结缔组织，新骨形成少．结论：ｒｈＢＭＰ－２可显著促进复合异种骨内的新骨形成。这种新型复合异种骨可能是一种较理想的植骨材料，可望用于人体植骨     

生物陶瓷／微孔钛混合烧结的口腔种植体复合骨形成蛋白骨界面结合的机理探讨

作者将钛（Ｔｃ＿４），羟基磷灰石（ＨＡ）和生物活性玻璃陶瓷（ＢＧＣ）颗粒混合烧结成生物活性微孔复合种植体复合骨形成蛋白（ＢＭＰ）移植于２０只成年杂种狗颌骨和股骨内，对１～１２周标本进行检测、观察和成骨量的测定．证明种植体与骨界面结合在于界面存在三相性（钛氧化膜：ＴｉＯ，Ｔｉ＿２Ｏ，Ｔｉ＿２Ｏ＿３，ＨＡ晶相和ＢＧＣ晶相），使钙、磷富集层形成，生物陶瓷降解产物再沉积，蛋白多糖、粘多糖类细胞外基质和天然骨粘合物粘连沉积并引导钙盐沉积在界面上，测得该种植体各项技术指标优于目前单一材料种植体技术指标．