人细胞色素p450 IA2基因的构建及其功能检测──该基因在啮齿类细胞中代谢

本文首先构建了含人类细胞色素ｐ４５０ＩＡ２ｃＤＮＡ的ｐＺｉｐ－ｐ４５０ＩＡ２的真核表达载体，并分别将其转染到Ｖ７９细胞和原代大鼠肝上皮细胞中．Ｎｏｒｔｈｃｒｎ杂交和免疫组化实验显示，Ｖ７９转染细胞中有人ｐ４５０ＩＡ２的ＲＮＡ和蛋白水平的表达。细胞毒实验和ＨＧＰＲＴ位点突变率检测结果证明，外源性ｐ４５０ＩＡ２基因可在Ｖ７９细胞中代谢活化黄曲霉毒素Ｂ１．转染有ｐＺｉｐ－ｐ４５０ＩＡ２质粒的原代大鼠肝细胞可代谢活化５ｎｇ／ｍｌ的黄曲霉毒素Ｂ１．本研究说明了人ｐ４５０ＩＡ２ｃＤＮＡ在ＭＭＬＶ的５′ＬＴＲ系统驱动下，可在体外啮齿类细胞中代谢活化黄曲霉毒素Ｂ１．它为ＡＦＢ１致癌机制的研究提供了一个新的、更为有效的途径。     

人细胞色素p450IA2基因的构建及其功能检测：——该基因在啮齿类细胞中代谢活

本文首先构建了含人类细胞色素ｐ４５０ＩＡ２ｃＤＮＡ的ｐＺｉｐ－ｐ４５０ＩＡ２的真核表达载体，并分别将其转染到Ｖ７９细胞和原代大鼠肝上皮细胞中，Ｎｏｒｔｈｃｎ杂交和免疫组化实验显示，Ｖ７９转染细胞中有人ｐ４５０ＩＡ２的ＲＮＡ和蛋白水平的表达。细胞毒实验和ＨＧＰＲＴ位点突变率检测结果证明，外源性ｐ４５０ＩＡ２基因可在Ｖ７９细胞中代 谢活化黄曲霉毒素Ｂ１。转染有ｐＺｉｐ－ｐ４５０ＩＡ２质粒的原代大鼠肝细     

限量饮食对黄曲霉素B_1-DNA加合物生成的影响

本实验用黄曲霉毒素Ｂ１（ＡｆｌａｔｏｘｉｎＢ１，ＡＦＢ１）作为致癌物代表，研究限量饮食（Ｆｏｏｄｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ，ＦＲ）对雄性Ｆ３４４大鼠和Ｂ６Ｃ３Ｆ１小鼠代谢活化ＡＦＢ１的影响。ＡＦＢ１－ＤＮＡ加合物（ＡＤＡ）作为ＡＦＢ１代谢活化的生物指标。结果显示ＦＲ降低大鼠和小鼠对ＡＦＢ１的代谢活化，ＡＤＡ的生成在大鼠和小鼠中分别减少４３％和３１％。ＡＤＡ的两种主要加合物的生成、分布和清除以及它们与ＡＦＢ１致癌作用的关系也作了讨论。     

重组DNA技术发展体外代谢活化测试系统的研究

重组ＤＮＡ技术发展体外代谢活化测试系统的研究薛开先（江苏省肿瘤防治研究所南京２１０００９）众多的原致癌剂、致突变剂需经代谢活化才能产生效应，细胞内参与活化的酶主要是细胞色素Ｐ４５０（ＣＹＰ４５０），但用于遗传毒理学检测的细胞系已丧失或较低水平地表达，...     

人肝细胞癌组织中黄曲霉毒素定量分析的方法学研究

人肝细胞癌组织中黄曲霉毒素定量分析的方法学研究周元平１彭文伟１姚集鲁１何光耀２倪尔葭３胡萍春黄曲霉毒素（ＡＦ）是一组真菌毒素，自六十年代发现以来，已一再在动物实验中证实ＡＦ可诱发肝癌，其中致癌性最强的是黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）［１，２］。本研究试图...     

人体膀胱癌细胞对丝裂霉素耐药机制的研究

作者以对丝裂霉素分别敏感和耐药的人体膀胱癌细胞Ｊ８２和ＳＣａＢＥＲ进行对照，研究ＳＣａＢＥＲ对ＭＭＣ的耐药机制。药物作用１小时，对ＳＣａＢＥＲ细胞的ＩＣ＿（５０）是对Ｊ＿（８２）细胞的２．７倍。ＳＣａＢＥＲ细胞中，两种生物激活酶，即ＮＡＤＰＨ细胞色素Ｐ＿（４５０）还原酶和ＤＴ－黄递酶较Ｊ＿（８２）细胞显著降低，提示该细胞对ＭＭＣ相对低敏感性是由于药物活化过程障碍。ＢＭＹ２５２８２苯醌还原能力弱，易于活化，其对两种细胞的ＩＣ＿（５０）值相似，进一步支持上述观点。ＳＣａＢＥＲ细胞的氧自由基形成较Ｊ＿（８２）细胞稍高，抗氧化酶活性无明显变化，提示ＳＣａＢＥＲ细胞对ＭＭＣ耐药不是由于氧自由基形成减少。此外，ＭＭＣ所致ＳＣａＢＥＲ细胞的ＤＮＡ链间交联（ＩＳＣ）较Ｊ＿（８２）细胞明显减少。研究结果表明，ＳＣａＢＥＲ细胞对ＭＭＣ耐药是由药物活化障碍和ＩＳＣ减少所致。     

人c－myc基因辅助黄曲霉毒素B1体外转化大鼠肝上皮细胞

人ｃ－ｍｙｃ基因辅助黄曲霉毒素Ｂ１体外转化大鼠肝上皮细胞袁宝珠，孙宗棠我们利用基因转染技术，探索黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）在人ｃ－ｍｙｃ基因辅助下，转化体外原代大鼠肝上皮细胞的可能性。首先，我们利用ＥｃｏＲＩ和ＫｐｎＩ将人ｃ－ｍｙｃ基因从ｐＢＲ３２２...     

限量饮食对黄曲霉素B1—DNA加成物生成的影响

本实验用黄曲霉霉素Ｂ１（ＡＦＢ１）作为致癌物代表，研究限量饮食（ＦＲ）对雄性Ｆ３４４大鼠和Ｂ６Ｃ３Ｆ１小鼠代谢活化ＡＦＢ１的影响。ＡＦＢ１－ＤＮＡ加合物（ＡＤＡ）作为ＡＦＢ１代谢活化的生物指标。结果显示ＦＲ降低大鼠和小鼠对ＡＦＢ１的代谢活化，ＡＤＡ的生成在大鼠和小鼠中分别减少４３％和３１％。ＡＤＡ的两种主要加合物的生成、分布和清除以及它们与ＡＦＢ１致癌作用的关系也作了讨论。     

人乙型肝炎病毒与黄曲霉毒素B1诱发树肝癌过程中肝组织p21表达与肝癌发生的关系

人乙型肝炎病毒与黄曲霉毒素Ｂ１诱发树肝癌过程中肝组织ｐ２１表达与肝癌发生的关系班克臣苏建家杨春黄国华覃柳亮李瑗罗小玲段小娴严瑞琪我们通过动态观察人乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）和（或）黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）诱发树原发性肝癌（ＰＨＣ）过程中肝组织ｒａｓ...     

化学诱导剂对培养细胞CytP450IA1基因mRNA水平诱导及肝组织该

化学诱导剂对培养细胞ＣｙｔＰ４５０ＩＡ１基因ｍＲＮＡ水平诱导及肝组织该基因基础表达水平的研究余应年，董海涛，吴健敏（浙江医科大学病理生理教研室及医学分子生物学实验室杭州３１００３１）细胞色素Ｐ４５０ＩＡ１（ＣｙｔＰ４５０ＩＡ１）基因表达可被多环芳烃类...     

CYP2B6cDNA导入V79、FL和CHL细胞中稳定表达及其初步鉴定

ＣＹＰ２Ｂ６ｃＤＮＡ导入Ｖ７９、ＦＬ和ＣＨＬ细胞中稳定表达及其初步鉴定吴健敏，董海涛，余应年，朱丽君（浙江医科大学病理生理学教研室及医学分子生物学实验室杭州３１００３１）细胞色素Ｐ４５０是代谢活化大多数前致突变物／致癌物的主要酶系，在建株细胞中这些基...     

环境致癌(突变)物和药物代谢相关的人细胞色素P450 cDNA的克隆和转基因细胞系的建立

目的：建立环境致癌（突变）物和药物代谢相关的人细胞色素Ｐ４５０１Ａ２,２Ａ６,２Ｅ１,３Ａ４ｃＤＮＡ的克隆和转基因细胞系。方法：从人肝组织中提取总ＲＮＡ,用逆转录酶生成ｃＤＮＡ。以各个ｃＤＮＡ编码序列两端设计引物,ＰＣＲ扩增各个人细胞色素Ｐ４５０基因的ｃＤＮＡ,并将其连接到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ－Ｔ或ｐＧＥＭ－Ｔ载体上,通过内切酶图谱分析及全序列测定,再将该ｃＤＮＡ片段重组于哺乳动物细胞表达质粒ｐＲＥＰ９。用改良磷酸钙共沉淀法转入ＣＨＬ细胞中,通过Ｇ４１８抗性筛选,扩大培养。提取细胞的Ｓ９组分,…     

中国人细胞色素P450IA1基因变异与吸烟相关性肺癌的风险

探讨多环芳烃类致癌物代谢酶细胞色素Ｐ４５０ＩＡ１基因多型性与中国人肺癌易感性的关系。方法应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法，分析１５０例原发性肺癌和３９１例正常对照者ＣＹＰＩＡ１基因的ｍ１、ｍ２和ｍ４位位于３’－端ＭｓｐＩ识别的定位和位于７外显子ＢｓｒＤＩ识别的位点具多态性，而位于第７外显子由Ｂｓａｌ识别的位点未见有变异。ｍ１变异型等痊频率在对照组中为０．３６，而在肺癌病例组中为０．４６。携带至少一个变异基     

SAM肝细胞色素P4503A对衰老的作用

大鼠肝细胞色素Ｐ４５０含量与年龄相关的变化是由特异的细胞色素Ｐ４５０酶引起的。探讨衰老与细胞色素Ｐ４５０３Ａ的活性是否有关。本文用红霉素Ｎ－脱甲基酶活性测定法分别检测了ＳＡＭ－Ｒ１、ＳＡＭ－Ｐ１和ＳＡＭ－Ｐ８三组衰老加速鼠中肝微粒体细胞色素Ｐ４５０３Ａ的活性。每动动物分为７ｗｋ、３６ｗｋ组。结果发现ＳＡＭ－Ｐ１和ＳＡＭ－Ｐ组中随年龄增长,ＣＹＰ３Ａ的活性均降低。１３ｗｋ时,ＳＡＭ－Ｐ１组ＣＹＰ３活     

去黄曲霉毒素灵在肝癌高发现场的试用

去黄曲霉毒素灵在肝癌高发现场的试用涂文升刘宗河黎远冬黎丹戎陈艳华杨寅中关键词黄曲霉毒素Ｂ１去黄曲霉毒素灵肝癌高发区中图号Ｒ７３０．２３Ｒ７３－３１黄曲霉毒素Ｂ１（简称ＡＦＢ１）与肝癌发生的关系十分密切。已为大量的流行病学调查资料和动物实验所证实。广...     

肝细胞癌p53基因特异点突变的分子流行病学意义

目的研究肝细胞癌（ＨＣＣ）ｐ５３基因突变热点的特异性及其分子流行病学意义。方法取广西高、中、低流行区ＨＣＣ样品，进行ＤＮＡ测序，并用限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析。结果ＤＮＡ测序结果为２４９密码子第３碱基Ｇ→Ｔ颠换占５７％（２０／３５）。ＲＦＬＰ分析表明ＨａｅⅢ酶切点丢失占６９％（３６／５２），与低发区的１０％（１／１０）和２０％（２／１０）比较，差异有显著意义（Ｐ＜０．０１）。结论广西ＨＣＣ高发主要原因为黄曲霉毒素（ＡＦＢ１）高污染。ｐ５３基因突变集中于２４９第３碱基Ｇ→Ｔ颠换。这个由ＡＦＢ１介导的特异位点、固定形式（Ｇ→Ｔ）和高频率的ｐ５３突变，应称为“ＡＦＢ１突变点”，具有分子流行病学意义，可用于确定流行区不同个体ＨＣＣ由ＡＦＢ１介导和某些地区受ＡＦＢ１污染的情况。用ＲＦＬＰ替代ＤＮＡ测序可获同样效果。     

茶多酚对氯霉素毒性作用的影响

氯霉素是一种广谱抗菌素，它的代谢失活主要器官为肝脏，首先被肝脏中细胞色素Ｐ４５０（ＣＹＰ４５０）单加氧酶氧化。我们实验室曾证明β－萘黄酮（β－ＮＦ）可诱导人羊膜上皮细胞ＦＬ系（ＦＬ细胞）的ＣＹＰＰ４５０１Ａ１同功酶的活性，而茶多酚可抑制ＦＬ细胞ＣＹＰ４５０１Ａ１同功酶的活性。本实验以人羊膜上皮细胞ＦＬ系（ＦＬ细胞）和转入ＣＹＰ４５０１Ａ１基因的ＦＬ细胞（ＦＬ－１Ａ１细胞）为实验材料，观察茶多酚（Ｇ     

茯苓对AFB1致突变的抑制作用

本文以小鼠骨髓嗜多染红细胞微核和染色体畸变为指标，检测了中药茯苓对黄曲霉毒素Ｂ１致突变作用的影响，结果表明，茯苓煎剂对显著地抑制ＡＦＢ１的致突变作用（Ｐ〈０．０５）并呈量效关系。     

细胞色素P450多态及其在肿瘤易感性和突变研究中的进展

细胞色素Ｐ４５０多态及其在肿瘤易感性和突变研究中的进展薛开先江苏省肿瘤防治研究所南京２１０００９近年来，ＣＹＰ４５０及其在肿瘤易感性、诱变性检测和抗突变机理研究中取得了显著的进展，现择要作一综述。１．外源性物质代谢与ＣＹＰ４５０（１－３）外源性化合物...     

鸭乙型肝炎病毒对肝脏细胞色素P450含量的影响

流行病学调查表明乙型肝炎病毒与人类肝癌的发生有密切关系。有些化学致癌物可以引发动物肝癌,如黄曲霉毒素已被列为人类的致癌物。乙型肝炎病毒与肝致癌物对肝癌是否有协同或相加作用,尚不清楚。 环境中存在的致癌物,包括肝致癌物,大多是间接致癌物,需经细胞色素P450代谢活化成亲电子