人睾丸中各级生精细胞的鉴定

目的:建立人睾丸生精细胞鉴定方法.方法:用机械法离散人睾丸细胞,涂片,用Diff-Quik法染色显示细胞形态.在Hoffman光学镜头下根据细胞形态进行活细胞分类,选取各类细胞分别涂片,行17号染色体着丝粒探针化学显色原位杂交和c-kit抗原表达免疫细胞化学染色.结果:在配置Hoffman镜头的倒置显微镜下人睾丸圆形细胞主要可分为4群:支持细胞(Sertoli)细胞,粗线期初级精母细胞,精原细胞,圆形精子细胞.原位杂交结果为:Sertoli细胞、粗线期初级精母细胞、精原细胞均显示2个着丝粒信号,圆形精子细胞及精子显示单个着丝粒信号.抗c-kit抗体免疫化学染色显示:粗线期初级精母细胞、精原细胞反应呈阳性,Sertoli细胞、圆形精子细胞、精子反应呈阴性.结论:人睾丸各类细胞在活体形态、染色形态、染色体倍性、抗原表达上均有各自显著的特征,其中据Hoffman成像形态区分各级生精细胞是在活体状态下一种简便有效的鉴别人生精细胞的方法.     

弱精子症患者精子中DKKL1的表达

目的探讨精子顶体相关基因（DKKL1）在弱精子症患者精子中的表达特征及临床意义。方法收集正常男性和弱精子症 患者精液,各取10 μL精液用全自动计算机辅助精液分析系统（CASA）对精液进行常规分析。为了避免白细胞和生精细胞对结 果的影响,剩余精液采用4个梯度的Percoll法离心分离和纯化精子。Trizol法提取精子RNA,实时荧光定量PCR从基因水平检 测DKKL1基因在正常人和弱精子症患者精子中的表达差异;最后采用Western blot方法从蛋白水平检测DKKL1蛋白在正常人 和弱精子症患者精子中的表达差异。结果精液常规分析结果显示,弱精子症和正常人两组之间的年龄、精液体积、精子浓度和 正常精子形态比例均没有统计学差异（P>0.05）。与正常对照组相比,弱精子症组PR 和PR+NP 精子的比例显著降低（P< 0.01）。实时荧光定量PCR结果显示,与正常对照组相比,DKKL1 mRNA在弱精子症患者精子中的表达量降低11.1倍。此外, Western blot结果显示,弱精子症组DKKL1蛋白的表达量与正常对照组相比,降低了2.4倍,差异具有统计学意义（P<0.01）,该 结果与实时荧光定量PCR结果一致。结论DKKL1在弱精子症患者精子中的表达水平明显下降,表明其与精子运动密切相关, 是导致弱精子症发生的原因之一。     

大鼠成体肝卵圆细胞分离培养及诱导分化的初步研究

目的 通过成体大鼠肝卵圆细胞分离培养获取纯净的干细胞并观察诱导分化前后从肝卵圆细胞到肝细胞的形态变化.方法 采用AAF/PH肝干细胞刺激模型,胶原酶Ⅳ消化分离和Percoll梯度离心纯化肝卵圆细胞的方法,用地塞米松、DMSO和EGF、HGF、SCF、LIF等生长因子联合应用诱导肝卵圆细胞增殖和分化为肝实质细胞.观察肝卵圆细胞到肝细胞形态变化过程,用免疫荧光技术,Western blotting分析检测了干细胞标志c-kit和RT-PCR分析法检测肝干细胞白蛋白和CK19 mRNA表达鉴定卵圆细胞.结果 分离得到的肝卵圆细胞活度达到90%,细胞形态包括大小和颜色呈不均质,卵圆细胞直径是肝细胞直径的1/4～1/6.诱导后出现大而圆的肝细胞,可见卵圆细胞到肝细胞的中间变化过程,新分离的肝卵圆细胞在生长因子诱导下有向肝细胞分化的特性.经c-kit免疫荧光染色显黄绿色荧光,Western blotting检测肝卵圆细胞有c-kit蛋白条带,而大鼠肝细胞及胆管细胞则未出现条带.PCR分析显示卵圆细胞有CK19和白蛋白mRNA表达.结论 新分离的肝卵圆细胞同时表达c-kit,CK19和白蛋白3种抗原,诱导分化出现一系列从卵圆细胞到肝细胞的形态学变化,这种现象证明分离的肝卵圆细胞就是肝干细胞,经诱导分化可以产生成熟的肝细胞,成为进一步研究肝干细胞生物学特性的基础.     

生精细胞超微结构及其线粒体琥珀酸脱氢酶的电镜细胞化学研究

精子的发生是生精细胞不断增殖和分化的复杂过程。不同分化阶段的生精细胞在形态和结构上有显著变化。本文从亚细胞水平观察了这些形态学变化,并应用电镜细胞化学方法对各级生精细胞线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性进行了研究,现将结果报道如下。     

精液转铁蛋白与生精细胞检查的临床应用

目的探讨精浆转铁蛋白(transferring protein,TRF)和精液生精细胞含量在男性不育症诊断中的作用。方法按生精细胞百分数<1%与生精细胞百分数>1%将精液分为正常组和异常组,同时进行精液TRF和生精细胞涂片染色分析,以轨道跟踪背影显像技术检测精子活动率、畸形率和活动力。结果生精细胞正常组的TRF显著高于异常组的TRF(P<0.05),TRF高水平组的精子活动率、活动力均>TRF低水平组(P<0.01),而TRF高水平组的精液精子畸形率<低水平组。结论精液TRF水平测定可以反映生精细胞功能状态和精子活动率、活动力和畸形率等,可以辅助诊断不育症。     

健康人精液细胞学的检测报告

本文对66例有生育力健康男性的精液细胞学进行了研究。结果表明，正常形态精子平均值为76.7％，其低限值＞60％；用1％伊红、10％黑色素染色法测得精液中活精子的平均值为71％，其低限值＞55％。并对精液中各类畸形精子、未成熟精细胞、白细胞、上皮细胞、吞噬细胞进行了定量计数，得到了正常有生育力男子精液中的上述各类细胞平均值。     

精液中SCF/c-kit值在肾虚男性不育辨证中的价值

目的：评价精液中干细胞因子（stem cell factor, SCF）及其受体（c-kit）在男性不育肾虚证中的临床诊断价值,为肾藏精主生殖的基本理论提供实验依据。方法选取45例肾虚不育型患者与30例正常生育者进行对照研究,用酶联免疫吸附试验（ELISA法）测定两组精浆中SCF含量,用实时荧光定量 PCR方法对精液离心沉淀物检测c-kit的ct值,并计算其相对表达量。结果两组患者SCF浓度比较无差异（P>0.05）,与正常生育组比较,肾虚不育患者前向运动精子数明显降低（P<0.01）、精液离心沉淀物c-kit相对表达量升高（P<0.05）。结论男性不育肾虚证与精子活动和精液中c-kit表达量密切相关,两者可以作为男性不育肾虚证辨证时重要的客观指标,同时为中医肾藏精主生殖理论提供科学依据。     

外周血FSH水平及精液生精细胞检查在判断精索静脉曲张无精子症预后中的价值

目的:探讨外周血FSH水平及精液生精细胞检查在精索静脉曲张无精子症手术指征的掌握及判断预后中的价值。方法:对23例精索静脉曲张无精子症患者行术前外周血FSH水平测定及精液生精细胞检查,术后3~6个月观察精液检查结果判断疗效。结果:23例精索静脉曲张无精子症患者术后3~6个月有10例精液质量恢复正常,13例精液质量无改善。将10例精液质量恢复正常组作为有效组,13例精液质量无改善组作为无效组。观查两组术前外周血FSH水平测定及精液生精细胞检查结果发现:13例无效组术前外周血FSH水平明显高于有效组,(P)差异有显著性。10例有效组术前均查到生精细胞,均病理性生精阻滞于精子细胞水平。13例无效组仅5例查到生精细胞,2例病理性生精阻滞于精原细胞阶段,1例病理性生精阻滞于次级精母细胞阶段,2病理性生精阻滞于精子细胞水平。结论:对精索静脉曲张无精子症患者行术前外周血FSH水平测定及精液生精细胞检查,有助于精索静脉曲张、无精子症手术指征的掌握及预后的判断。     

计划生育：基础理论

补肾生精中药辩证治疗少、弱精子症疗效分析；芹菜汁对小鼠精液参数及毒性作用的影响；沙眼衣原体在生精细胞中的定位研究；中草药桔梗提取液体外杀精子实验研究；Attrcatin在体外培养大鼠睾丸Leydig细胞的表达     

评刊之感

欣逢《中国医院》创刊6周年、公开发行两周年之际,谈点评刊之感,以兹庆贺、纪念。 从2001年7月起,我有幸担任本刊评刊员,真诚感谢给我这一“老有所学”机会,期期通读,收获甚丰。24期,千篇文章(含动态、短讯),颇有走进没设课桌的动态医院管理大学之感。《中国医院》杂志突出特点,一是政策性强,紧跟党中央、国务院、卫生部对医院改革发展,乃至整个卫生改革发展的部署,传递信息,答疑释惑;二是科学性强,理论阐述,经验介绍,感悟体会,都遵循经济社会规律和医学科学规律;三是权威性高,政府官员,学会领导,院士、博士专家,优秀院长、主任,国内国际名士,均为本刊撰稿。本刊对医院管理者和卫生管理者及时而良好的指导作用,已为业内人士所公认和赞许。     

依从性预测研究进展

依从性差是一个普遍存在的现象,也是疾病得不到有效控制的重要因素,其对临床效果及疾病康复有重要的影响; 早期预测患者依从性状况并找出重要的影响因素,将有助于医护人员采取有针对性的干预措施,从而提高患者的依从性, 改善预后。对依从性的定义和测量工具、依从性预测模型及评分系统等系列问题进行综述,以期为开展特定疾病的依从 性预测研究提供依据。     

磁共振横向弛豫时间测量方法的研究

目的研究磁共振横向弛豫时间测量方法,使病变诊断定量计算更为简便。方法本文拟在T2测量方面借助Matlab进行测算,依据T2的数学表达式特征,采用单双指数曲线拟合法、最小二乘法对测量数据进行处理,并对三种处理方法进行比较研究。结果通过Origin9．0软件评估,数值波动双指数拟合最小、最稳定;最小二乘法较大;单指数拟合最大。但最小二乘法和单指数拟合地更快。结论三种方法均可以测出横向弛豫时间T2的值。     

中药蛇床子的研究进展

概述近年来有关蛇床子的化学成分、药理作用和临床应用和研究进展。     

子宫输卵管造影的相关影响因素分析

目的:分析子宫输卵管造影(Hysterosalpingography,HSG)中使用双腔球囊导管置管和注药过程中影响诊断的相关因素,并分析预防措施。方法:搜集2007年1月至2010年11月在本院行HSG的患者2 308例,均使用双腔球囊导管。比较不同球囊大小、导管顶端插入深度和不同通液速度对HSG的影响。结果:不同球囊大小造影剂外溢、导管脱出、发生人工流产综合征和宫腔显影不全的比例有明显差异,部分差异有统计学意义(P<0.05);导管顶端位于输卵管开口处者82.69%(640/774)同侧输卵管、宫角不显影,经调整后71.45%(553/774)同侧宫角显影,55.17%(427/774)同侧输卵管显影;导管顶端位于宫腔内、宫颈管内者有37例和7例宫腔部分显影或不显影,经调整后宫腔均正常显影;不同通液速度疼痛和输卵管再通的比例有显著的统计学差异(P<0.05),而淋巴静脉返流的比例无显著的统计学差异。结论:在子宫输卵管造影中,根据宫腔大小和位置选用适当的球囊大小、导管位置和通液速度,获得最好的显影效果同时预防手术并发症的发生。     

国外医院患者入院过程概述

合理有效的做好患者人院安排是医院面临的一个比较重要的问题,笔者简单介绍了国外医院的入院过程,并提出改进患者人院过程应准确的记录患者信息、有效的使用各种技术、以及最优化医院的资源等策略,以期为中国医院患者入院以及挂号过程提供一些借鉴。     

《伤寒论》太阴病篇评述

对《伤寒论》太阴病篇有关问题进行了评述，指出太阴病篇所论之太阴病仅是脾的病变，不包括肺的病变；太阴病篇所论之太阴病的证治很不完整，太阴病的证治散见于其他各篇，学习时当结合其他病篇，方能全面；治疗太阴病的代表方剂当为理中汤(丸)；桂枝加芍药汤证、桂枝加大黄汤证的病机是脾络瘀滞，并无表证；太阴病的转归除转愈者外，更有虚实之辨。