喉癌人类组织相容性抗原Ⅰ缺失与癌组织中淋巴细胞浸润的研究

OBJECTIVE: To detect the deletion of human leucotyte antigen (HLA) class I antigen expression in laryngeal carcinoma tissue and discuss the relationship between its expression and tumor infiltrating lymphocyte (TIL) cell infiltration or/and malignancy of tumor cell. METHODS: From Feb 2001 to May 2001 specific mouse antihuman HLA class I monoclonal antibody was combined to examined tissue, 64 samples of laryngeal carcinoma were detected by streptavidin-peroxidase (SP) method immunohistochemistry. RESULTS: All of 64 cases, 57 were positive HLA class I antigen and 7 were negative, the negative expression rate was 10.9% (7/64). CD3+ and CD8+ T cell infiltrated in HLA class I positive tumor mass were significantely more than those in negative tissue. the malignant degree elevated along with the declination of HLA class I antigen expression. By 3 years follow up, the mortalitywas not statistically significant in both HLA- group and HLA+ group (P > 0.05). CONCLUSION: There is deletion of HLA class I antigen in laryngeal tissue, which favours penetration of cytotoxic lymphoid cells into tumor mass; alteration in HLA class I expression may be used by cancer cells to avoid immune surveillance.     

喉鳞癌组织中浸润淋巴细胞超微结构研究

对１４例喉鳞状细胞癌组织中淋巴细胞（ＴＩＬ）浸润状况及其与癌细胞间的相互关系进行透射电镜观察。结果显示喉鳞癌组织中普通存在着程度不等的淋巴细胞浸润，但多数表现为静止状态，少部分具有活化的母细胞特征且与癌细胞密切接触，使其自身和癌细胞均表现出明显的形态学变化，表明其可探讨ＴＩＬ对肿瘤细胞生长及杀伤机理提供重要的形态学依据。     

肿瘤浸润T淋巴细胞对喉鳞状细胞癌预后评估作用的研究进展

喉鳞状细胞癌（LSCC）是常见的头颈部恶性肿瘤之一,近年来发病率有逐渐增长的趋势,但患者5年生存率并无上升趋势,亟需更加稳定有效的预后评估指标来指导治疗、判断预后。肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）是一种存在于肿瘤组织内部具有高度异质性的淋巴细胞,以T淋巴细胞为主,在宿主抗原特异性肿瘤免疫应答中发挥关键作用。多项研究表明,TILs与LSCC患者预后密切相关。本文对TILs的一般特征、评估方法及肿瘤浸润T淋巴细胞对LSCC预后判断价值的研究进展进行综述。     

喉癌肿瘤细胞间树突状细胞浸润与局部淋巴转移及癌周淋巴细胞反应的关系

目的 探讨喉癌癌细胞间浸润树突状细胞在局部抗肿瘤免疫反应中有的作用及其与局部淋巴结转移的关系。方法 采用免疫组织化学方法,以S－100蛋白抗体标记23例喉鳞状细胞癌组织中树突状细胞,观察癌细胞间树突状细胞密度与淋巴结转移及其与癌周淋巴细胞反应的关系。结果 喉癌无淋巴结转移患者癌细胞间树突状细胞密度显著高于淋巴结转移患者（P＜0．01）。 癌周淋巴细胞反应强阳性患者喉癌突状细胞浸润密度高于癌周淋巴细胞反应中、弱阳性合并组患者（P＜0．05）。结论喉癌细胞间的树突状细胞在喉癌局部抗肿瘤反应中的起重要作用。喉癌细胞间树突状细胞浸润密度越高,局部淋巴结转移越少,癌周淋巴细胞反应越强。定量检测喉癌细胞间树突状细胞可作为判断预后的指标之一。     

喉癌患者肿瘤浸润淋巴细胞抗肿瘤活性的研究

采用双梯度不连续密度梯度离心的方法，由喉鳞状细胞癌组织中分离出肿瘤浸润性淋巴细胞（ｔｕｍｏｒ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ，ＴＩＬ），经重组人类白细胞介素－２（ｒｅｔｕｒｎ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２，ｒＩＬ－２）激活，成为活化的ＴＩＬ细胞。采用＾５１Ｃｒ体外释放的方法，检查活化的ＴＩＬ细胞对自体肿瘤细胞、异体肿瘤细胞的杀伤特性；并观察了ＴＩＬ细胞在裸鼠体内对自体肿瘤细胞生长的抑     

喉癌肿瘤细胞间树突状细胞浸润与局部淋巴转移及癌周淋巴细胞反应的关系

目的探讨喉癌癌细胞间浸润树突状细胞在局部抗肿瘤免疫反应中的作用及其与局部淋巴结转移的关系.方法采用免疫组织化学方法,以S-100蛋白抗体标记23例喉鳞状细胞癌组织中树突状细胞,观察癌细胞间树突状细胞密度与淋巴结转移及其与癌周淋巴细胞反应的关系.结果喉癌无淋巴结转移患者癌细胞间树突状细胞密度显著高于淋巴结转移患者(P<0.01).癌周淋巴细胞反应强阳性患者喉癌细胞间树突状细胞浸润密度高于癌周淋巴细胞反应中、弱阳性合并组患者(P<0.05).结论喉癌细胞间的树突状细胞在喉癌局部抗肿瘤反应中起重要作用.喉癌细胞间树突状细胞浸润密度越高,局部淋巴结转移越少,癌周淋巴细胞反应越强.定量检测喉癌细胞间树突状细胞可作为判断预后的指标之一.     

喉癌组织中转化生长因子-α的研究

应用分子杂交技术和放射免疫分析方法研究了人喉癌组织、喉癌瘤旁组织、正常喉组织中转化生长因子－α（TGF－α）mRNA的表达、TGF的活性以及c－myc、c－fos、c－N－ras及v－erbB四种癌基因mRNA的表达。主要结果为：①喉场组织TGF－αmRNA表达高于正常喉组织，也高于喉癌瘤旁组织；②喉癌组织中可以测到TGF－α免疫活性物质，而正常喉组织中未测到TGF－α活性；③与正常喉组织及癌旁组织比较，喉癌组织中有c－myc、c－fos、c－N－ras、v－erbB等用基因的较强表达。     

喉癌患者肿瘤浸润淋巴细胞抗肿瘤活性的研究

采用双梯度不连续密度梯度离心的方法，由喉鳞状细胞癌组织中分离出肿瘤浸润性淋巴细胞（ｔｕｍｏｒｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ，ＴＩＬ），经重组人类白细胞介素－２（ｒｅｔｕｒｎｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２，ｒＩＬ－２）激活，成为活化的ＴＩＬ细胞。采用￣５１Ｃｒ体外释放的方法，检查活化的ＴＩＬ细胞对自体肿瘤细胞、异体肿瘤细胞的杀伤特性；并观察了ＴＩＬ细胞在裸鼠体内对自体肿瘤细胞生长的抑制作用。结果发现活化的ＴＩＬ细胞对自体肿瘤细胞有较强的杀伤作用，但对异体肿瘤细胞的杀伤作用则较弱。实验还证明，在裸鼠体内，ＴＩＬ细胞能抑制自体肿瘤移植瘤系的生长。由新鲜喉鳞癌肿瘤组织中可成功地分离出ＴＩＬ细胞并可大量增殖，可望成为喉癌患者过继免疫治疗的有效来源。     

免疫组化法检测喉癌组织中p53表达的临床意义

采用免疫组化Ｓ－Ｐ方法检测９５例喉癌、１０例声带息肉和６例喉正常声带组织的ｐ５３表达，结果显示，ｐ５３蛋白主要定位于喉癌细胞内，呈棕黄色阳性颗粒，少部分位于细胞浆内，９５例中阳性显色４２例，阳性率４４．２％。１０例喉气带息肉和６例喉正常声带组织均为阴性。喉癌中ｐ５３基因表达阳性与声带息肉、正常声带组织相比差异显著（Ｐ〈０．０１）。喉癌组中，不同年龄组发病有显著性差异（Ｐ〈０．０５）。喉癌不同临床分     

喉癌血清DBP异质性和癌组织PCNA表达检测及临床意义

应用环状免疫单扩散法及免疫组化技术对44例喉癌病人血清及32例癌组织进行血清DBP异质性和组织PCNA表达检测,发现各期喉癌病人血清中均存在DBP异常表达,并与化疗及复发有关;而与分型、淋巴结转移及病理分化无关;且血清DBP阳性喉癌组织中PCNA的表达率较高。提示它有较高的增殖活性,血清DBP异质性与喉癌的发生发展有密切关系。     

增殖细胞核抗原在喉粘膜不典型增生及喉癌组织中表？…

目的：研究增殖细胞核抗原在喉粘膜不典型增生及喉癌组织中的表达。方法：采用免疫组化ＬＳＡＢ法，用抗增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的单克隆抗体对９例正常喉粘膜、２９例喉粘膜不典型增生及３６例喉鳞状细胞癌进行标记及分析。结果：随着喉粘膜病变的加重，ＰＣＮＡ的标记指数（ＬＩ）有逐渐增高的趋势。而ＬＩ与喉鳞状细胞癌的病理分级、Ｔ分期、淋巴结转移及肿瘤生长部位均无关。结论：ＰＣＮＡ对喉鳞状细胞癌的早期诊断有重要意     

喉癌癌周浸润细胞的表现型和临床预后的关系

应用免疫组化ＡＢＣ法及甲苯胺兰和ＨＥ染色对８２例喉癌切除标本癌周浸润的Ｔ淋巴细胞，Ｂ淋巴细胞，巨噬细胞，郎格罕细胞，肥大细胞和嗜酸性粒细胞的浸润程度、分布特点进行了观察。同时结合临床随访对与临床预后有影响的八个临床、病理学指标及六类浸润细胞进行多因素逐步Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析。结果发现喉癌局部有不同程度的上述细胞浸润。除Ｂ淋巴细胞以外各类细胞的浸润程度对临床预后（５年存活率）均有一定影响（Ｐ＜０．０１）。通过多因素分析认为嗜酸性粒细胞的浸润程度是影响预后的最重要因素（Ｐ＝０．００３），其次为Ｔ淋巴细胞（Ｐ＝０．００５）和肿瘤组织学分级（Ｐ＝０．０３３）。说明癌周浸润细胞在宿主局部抗肿瘤免疫反应中起重要作用。     

应用组织芯片探讨纤维连接蛋白和抑癌基因p53以及Ezrin表达与喉癌生物学行为的关系

目的探讨纤维连接蛋白(fibronectin,Fn)、抑癌基因p53和p81(Ezrin蛋白)在喉癌中表达,及其与喉癌流行病史、病理学分级、临床TNM分期和预后等生物学行为的关系. 方法应用组织芯片技术进行免疫组织化学链霉抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(streptavidin-peroxidase conjugated method,SP法)染色检测1992～2000年中手术治疗的85例喉鳞状细胞癌中FN、p53和p81等因子的表达,结合临床相关因素进行统计分析. 结果 85例中6例的组织芯片样本中肿瘤细胞较少或无肿瘤细胞.Fn染色70例中38例为阴性或低度阳性,32例为强阳性,在肿瘤T分级中Fn表达有统计学差异(P<0.05),患者吸烟、性别、年龄、肿瘤组织学分级、肿瘤临床分期、淋巴结转移、生存率等Fn表达无统计学差异.p81阳性细胞比率范0%-100%?～100%,平均53.7%,中位数58.7%,87.3%(69/79)有阳性表达.以中位数为界分为p81高、低表达组,两组T分级、临床早晚期、生存率有统计学差异(P<0.05),但与患者吸烟、性别、年龄、肿瘤组织学分级及淋巴结转移的差异无显著性(P>0.05).p53染色79例中37例阳性(46.8%),平均染色比率为21.6%,范围0～90.3%,中位数为5.9%.p53蛋白阳性表达与患者吸烟、性别、年龄、肿瘤组织学分级、淋巴节转移及生存率差异均无显著性(P>0.05). 结论组织微阵列是一种高效率的实验方法,具有快速、高通量、节约资源等特点.p81、FN表达与肿瘤的生长分化可能有关,进一步扩大样本验证后可作为临床预测预后重要参考指标.     

喉癌nm23,Cath—D和CD44表达与预后的相关因素分析

目的：探讨影响喉癌预后的相关因素。方法：采用免疫组化检测９６例喉鳞状细胞癌标本表达情况,并结合临床和病理资料分析喉癌预后因素。结果：ｎｍ２３、Ｃａｔｈ－Ｄ和ＣＤ４４的阳性表达率分别为４５．７％（４３／９４）、５２．１％（５０／９６）和４１．７％（４０／９６）。喉癌部位、大小、分化程度、Ｔ分期及ｎｍ２３表达与喉癌颈淋巴结转移有关（Ｐ〈０．０５）。结论：ｎｍ２３在喉癌中表达情况,对预测喉癌颈淋巴结转移     

喉鳞癌组织淋巴细胞亚群分布的免疫组化研究

采用免疫组化ＡＢＣ法检测了２８例喉鳞癌组织中淋巴细胞亚群的分布状态及数量，并与残喉的健侧组织对照研究。发现喉鳞癌局组织浸润的Ｔ淋巴细胞多于健侧喉正常组织，癌间质的Ｔ细胞多于实质，癌组织中ＣＤ＾＋８细胞数多于ＣＤ＾＋４细胞数多于ＣＤ＾＋４细胞。喉低分化鳞癌和晚期患者癌组织中浸润的ＣＤ＾＋４和ＣＤ＾＋８细胞少于高分化癌和早期患者。喉癌局部细胞免疫处于抑制状态，其Ｔ细胞亚群的分布与肿瘤临床分期及组织分化     

喉及下咽鳞状细胞癌的ras基因突变热点的研究

目的：研究ｒａｓ基因第１２密码子在喉及下咽癌组织中的突变情况。方法：采取多聚酶链延伸反应－限制性片段长度多态性分析方法，对３７例喉癌、下咽癌手术标本进行三种ｒａｓ基因测定。结果：三种ｒａｓ基因的１２位密码子在喉癌及下咽癌组织中的突变率为３５．１％，其中Ｎ－ｒａｓ基因的１２密码子突变率为１６．２％，Ｋ－ｒａｓ鹤率为１３．５％，Ｈ－ｒａｓ基因的突变率为５．４％，其突变率与喉癌、下咽癌组织分化和分化程度     

喉次全切除术在晚期喉癌中的应用与评价

目的评价Pearson喉次全切除术用于治疗晚期喉癌的疗效.方法对15例T3喉癌患者行Pearson手术,用残喉重建发音管.结果术后12例发声满意,3例发音管闭锁;3年生存率为66.7%.结论喉次全切除术的成功在于获得良好发声,关键是保留喉返神经对发音管的支配,并遵循肿瘤外科原则.缮     

高迁移率族蛋白1在喉鳞状细胞癌组织及血清中的表达及意义

目的 研究高迁移率族蛋白1( high mobility group box-1,HMGB1) mRNA及蛋白在喉鳞状细胞癌(简称喉鳞癌)组织及患者血清中的表达及其临床意义.方法 反转录聚合酶链反应( RTPCR)及Western blot分别检测HMGB1 mRNA及蛋白在30例喉鳞癌患者肿瘤组织及癌旁黏膜组织中的表达;酶联免疫吸附试验( ELISA)检测HMGB1蛋白在喉鳞癌患者及正常志愿者血清中的表达.结果RT-PCR结果示HMGB1 mRNA(HMGB1/GAPDH)在喉鳞癌组织、癌旁黏膜组织中的相对表达量((x)±s)分别为1.25±0.12、0.32±0.04,差异有统计学意义(t=40.27,P＜0.05);Western blot结果示HMGB1蛋白(HMGB1/β-actin)在喉鳞癌和癌旁黏膜组织中的相对表达量分别为1.29 ±0.10、0.34±0.03,两组间差异有统计学意义(t=49.84,P＜0.05).结果显示HMGB1 mRNA和蛋白的表达水平与患者的T分级、临床分期、有无淋巴转移及是否吸烟有关(P值均＜0.05);而与年龄、性别、是否饮酒及肿瘤病理分级无关(P＞0.05).ELISA结果显示,喉鳞癌患者及正常志愿者血清中HMGB1质量浓度分别为(24.80±14.08) ng/ml、(23.58±14.69)ng/ml,差异无统计学意义(t=0.37,P＞0.05).结论 HMGB1 mRNA及蛋白在喉鳞癌组织中的表达显著高于癌旁黏膜组织,且表达水平与T分级、临床分期及有无淋巴转移有关.