恶性血液病免疫球蛋白重链和T细胞受体γ基因重排的研究

目的本院1996～2003年诊断明确的175例恶性血液病(包括急性白血病和淋巴瘤)进行IgH和TCR γ基因重排实验,以探求恶性血液病与基因重排的相关性.方法用聚合酶链式反应方法检测175例恶性血液病骨髓或外周血单个核细胞(MNC)中单克隆性免疫球蛋白IgH和T细胞受体TCR γ基因重排.结果 43例ALL有21例发生IgH重排,18例发生TCR γ重排,4例IgH和TCR γ都发生重排.27例AML有10例发生IgH重排,13例发生TCR γ重排,4例IgH和TCR γ都发生重排.105例淋巴瘤患者中57例发生IgH重排,29例发生TCR γ重排,19例IgH和TCR γ都发生重排. 结论人类恶性淋巴增殖性疾病(急慢性淋巴细胞白血病和恶性淋巴瘤)是阻断在不同分化阶段的恶性淋巴细胞的克隆性增殖.IgH和TCR γ基因重排的检测为B、T淋巴增殖性疾病提供了克隆标记.但在非淋巴性恶性增殖疾病如ANLL中确实存在系列不保真现象.不仅具有较高的IgH重排,而且还具有较高的TCR γ基因重排.     

聚合酶链反应检测IgH和TCRγ基因重排在Lennert淋巴瘤诊断中的应用

目的 对免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）及Ｔ细胞受体（ＴＣＲγ）进行基因重排分析，并对其在Ｌｅｎｎｅｒｔ淋巴瘤诊断中的应用初步探讨，方法 新鲜的淋巴结标本用常规方法提取ＤＮＡ，经聚合酶链反应（ＰＣＲ）法扩增后进行ＩｇＨ及ＴＣＲγ基因重排分析。对ＩｇＨ基因扩增，选用嵌套式ＰＣＲ法，对ＴＣＲγ基因扩增，采用多对混合引物Ｍｉｘ１，Ｍｉｘ３和Ｍｉｘ２，Ｍｉｘ３分两组间同时进行，结果 经ＰＣＲ基因重排分析表明ＴＣＲ     

一例AML中一种新的TCRδ基因重排及其分析方法

Ｔ细胞抗原受体（ＴＣＲ）功能的表达有赖于该基因在正常Ｔ淋巴细胞发育过程中的重排。近年来，已发现一些肿瘤及白血病中出现该基因的异常重排。我们采用聚合链反应（ＰＣＲ）、“磁珠”固相纯化方法和ＰＣＲ产物直接测序等方法，从一例ＡＭＬ中发现了一种在白血病中未报道过的ＴＣＲδ基因重排，该重排是一种新报道的Ｄδ区ＤδＸ片段的重排，为ＤδＸＤδＤδＪδ不完全重排。在研究白血病ＴＣＲ基因重排中，采用本文所报道的方法     

非霍奇金淋巴瘤TCRδ基因不完全重排的研究

根据ＴＣＲδ基因的Ｖδ２、Ｊδ之间内含子序列设计两端引物，建立了ＴＣＲδ基因的Ｖδ２￣Ｄδ２不完全重排半嵌套式ＰＣＲ检测方法，对５７例非霍奇金淋巴瘤进行分析，５２．６％获得阳性结果；而正常人外周血淋巴细胞，淋巴结反应性增生及淋巴结转称性癌均为阴性，在此基础了，又建立了ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染检测方法进行分析，阳性病例呈现一系列清晰条带，而阴性者呈现模糊涂片现象，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ两种方法分析的结果一致，     

人T细胞白血病细胞株Jurkat的TCR基因重排

背景与目的:近年的一些体外实验研究发现,重组激活基因(recombi-nationactivatinggene)编码的RAG1与RAG2(recombinationactivatinggenes,RAGs)蛋白能够介导DNA链的转位(transposition)作用,因而,可能与淋巴系统肿瘤性疾病的发生有关,但迄今尚未有明确定论。我们在实验中发现,代表T细胞发育成熟阶段的人白血病细胞株Jurkat同时表达重组激活基因RAG1和RAG2,并且经适当诱导后有RAGs表达的变化。本研究旨在确证Jurkat细胞是否发生RAGs介导的T细胞受体(T-cellreceptor,TCR)基因重排。方法:采用巢式和半巢式PCR检测T细胞受体D!-J!之间的信号结合T细胞受体删除DNA环(signaljointT-cellreceptorexcisionDNAcircles,sjTRECs);连接介导的PCR(LM-PCR)法检测TCRβ链位点重排中间物-重组信号序列(recombinationsignalsequence,RSS)断点;RT-PCR法检测V(D)J重排第二阶段非同源末端连接(non-homologousendjoining,NHEJ)途径中的核心蛋白Ku70/Ku80及末端脱氧核苷酸转移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)。结果:在Jurkat细胞DNA中检测到结合区具有多样性特征的TCRDβ2-Jβ2sjTRECs和RSS5′端和3′端断裂点,并检测到TdT、Ku70/Ku80的表达。结论:Jurkat细胞有TCR基因重排的发生。Jurkat细胞可能成为研究RAGs和TCR基因重排与T细胞淋巴瘤的一个潜在的细胞模型。     

非霍奇金淋巴瘤TCRδ基因不完全重排的研究

根据ＴＣＲδ基因的Ｖδ２和Ｄδ３、Ｊδ之间内含子序列设计两端引物，建立了ＴＣＲδ基因的Ｖδ２～Ｄδ３不完全重排半嵌套式ＰＣＲ检测方法，对５７例非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）进行分析，５２．６％获得阳性结果；而正常人外周血淋巴细胞、淋巴结反应性增生及淋巴结转移性癌均为阴性，在此基础上，又建立了ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染检测方法进行分析，阳性病例呈现一系列清晰条带，而阴性者呈现模糊涂片现象，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ两种方法分析的结果一致，说明二者均可应用于ＴＣＲδ基因重排研究，区别淋巴系细胞的单克隆性或多克隆增生，确定肿瘤的克隆性，可以作为ＮＨＬ的一种基因标志用于淋巴瘤的诊断，并有助于分析淋巴细胞的分化情况。     

儿童淋巴系统恶性肿瘤免疫分型IgH,TCRγ基因重排关系的初步探讨

目的 了解儿童淋巴系统恶怀肿瘤分型与ＩｇＨ,ＴＣＲγ基因重排的关系。方法 应用ＰＣＲ方法检测８１例已做免疫分型的儿童恶性淋巴瘤和急性淋巴细胞性白血病患者的ＩｇＨ和ＴＣＲγ基因重排。结果 Ｂ－ＮＨＬ中,ＩｇＨ基因重排的检出率为８２．４％,ＴＣＲγ基因重排的检测率是７６．５％,Ｔ－ＮＨＬ中ＩｇＨ基因重排率为２５％,ＴＣＲγ基因重排未检出,在Ｂ－ＡＬＬ中ＩｇＨ基因重排出率为７４％,ＴＣＲγ基因重排检出率     

检测IgH和TCR γ基因重排对NHL分期参考价值的探讨

目的：探讨以IgH和TCR γ基因重排为标志对NHL患者临床分期的参考价值。方法：多聚酶链反应(PCR)技术结合限制性酶谱分析患者骨髓和淋巴结细胞DNA IgH和TCR γ基因重排的克隆性。结果：形态学无骨髓浸润的23例NHL患者发现6例(26．1％)具单克隆基因重排。结论：IgH和TCR γ基因重排作为分子标志对形态学检查不能确认骨髓浸润的NHL患者的分期诊断有一定参考价值。     

免疫球蛋白重链和T细胞受体γ基因重排在淋巴细胞来源肿瘤中检测的临床意义

目的 探讨克隆性免疫球蛋白重链（IgH)和T细胞受体γ（TCRγ) 排在淋巴细胞来源的肿瘤的检测意义。方法 用多聚酶链反应（PCR）方法检测15例急性淋巴细胞性白血病（ALL）、25例非霍奇金淋巴瘤（NHL）、10例多发性骨髓瘤（MM）、4例慢性B细胞性淋巴细胞性白血病（B－CLL）和20例正常人骨髓、周围血和（或）淋巴结中单个核细胞（MNCs)IgH、TCRγ基因重排。结果 IgH和（或）TCRγ基因重排在淋巴细胞来源的恶性肿瘤检出阳性率为92．6％（50／54）,在NHL为84．0％（21／25）,在ALL为100％（15／15）。IgH重排在T－NHL和B－NHL中阳性率分别为20．2％（2／10）和86．7％（13／15）,TCRγ是排在T－NHL和B－NHL中分别为80．0％（8／10）和53．3％（8／15）。22例NHL患者骨髓形态学检查阳性率50．0％（11／22）,基因检测阳性率81．8％（18／22）,两者差异有显著性（P＜0．05）。10例MM和4例B－CLL均检出IgH重排。20例正常人未检测出克隆性IgH、TCRγ基因重排。结论 IhG、TCRγ基因重排检测可用于NHL、ALL、MM和CLL等淋巴细胞来源的肿瘤的诊断和鉴别诊断,并判断NHL的早期骨髓浸润和临床预后。TCRγ、IgH基因重排在T、B淋巴细胞来源的肿瘤之间有交叉性。     

PCR检测T淋巴瘤细胞TCR基因重排

目的：探讨恶性淋巴瘤细胞TCR基因重排情况及意义。方法：采用PCR法检测10例T淋巴瘤细胞TCR基因重排，并与正常人对照。结果：10例TI林巴瘤细胞有2例重排阳性，均为高度恶性晚期淋巴母细胞性淋巴瘤。结论：TCR重排可作为恶性淋巴瘤疗效监测和估计预后的一项指标。     

PCR检测T淋巴瘤细胞TCR基因重排

目的　探讨恶性淋巴瘤细胞TCR基因重排情况及意义。方法　采用PCR法检测 10例T淋巴瘤细胞TCR基因重排 ,并与正常人对照。结果　 10例T淋巴瘤细胞有 2例重排阳性 ,均为高度恶性晚期淋巴母细胞性淋巴瘤。结论　TCR重排可作为恶性淋巴瘤疗效监测和估计预后的一项指标     

Ｂｃｌ-２／ＩｇＨ和ＩｇＨ基因重排与非霍奇金淋巴瘤诊断和化疗效果的相关性研究

目的：通过对Ｂｃｌ-２／ＩｇＨ及ＩｇＨ基因重排的联合检测,探讨两种标志物与Ｂ细胞型非霍奇金淋巴瘤（Ｂ-ＮＨＬ）诊断与疗效的相关性。方法：对４９例初治的Ｂ-ＮＨＬ患者采用以ＣＨＯＰ方案为基础的化疗,在化疗前及化疗后６周期时以ＰＣＲ一步法进行上述指标的检测。结果：化疗前４９例患者的Ｂｃｌ-２／ＩｇＨ和ＩｇＨ基因重排联合检测率达到９１.８％,治疗后达到ＣＲ的２１例病例中,４例ＩｇＨ基因重排转阴,２例Ｂｃｌ-２／ＩｇＨ转阴。结论：Ｂｃｌ-２／ＩｇＨ联合ＩｇＨ基因重排检测作为分子学标志物比单纯采用Ｂｃｌ-２／ＩｇＨ或是单纯ＩｇＨ重排更为敏感,但是取得ＣＲ的病例中,Ｂｃｌ-２／ＩｇＨ和ＩｇＨ基因重排在化疗前后无明显变化,提示短期内对于临床ＣＲ的患者,上述指标不能做为适时的分子学指标。     

用IgH、TCR基因重排技术检测疑难淋巴组织增生性病变

目的探讨IgH、TCR基因重排技术检测疑难淋巴组织增生性病变的意义。方法采用IgHTCR-β、TCR-γ基因重排标志检测,36例经常规HE、免疫组化不能诊断的疑难淋巴组织增生性病变,并进行克隆性分析。结果29例淋巴组织增生性病变呈克隆阳性,其中IgH、TCR双重排阳性者为1例,IgH单一阳性8例,TCR单阳性为8例。克隆阳性病例与免疫组化结果一致的为24/29例,7例阴性者,4例为反应性增生,2例经随诊为猫抓病淋巴结炎,1例为不典型增生。结论IgH、TCR基因重排技术对于疑难淋巴组织增生性病变的诊断和鉴别诊断有较大的意义。     

化疗对B-NHL患者外周血IgH基因重排的影响

目的：通过观察B细胞性非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）患者化疗过程中IgH基因重排的阴转情况,了解IgH基因重排能否作为适时的肿瘤分子水平缓解指标。方法：对20例B-NHL的初治患者于化疗前及化疗达到部分缓解及完全缓解后应用多聚酶链反应（PCR）进行IgH基因重排检测;对10例非淋巴瘤的肿瘤患者在化疗前后行IgH基因重排检测;同期检测10例正常人。结果：20例初治B-NHL患者,化疗前18例检测到IgH基因单克隆型重排;化疗后7例达到完全缓解,6例达到部分缓解。18例阳性患者中,除1例化疗后达到完全缓解的患者IgH基因重排转阴外,余未变化。2例IgH基因单克隆型重排阴性的病例化疗后检测结果仍为阴性。对照组的肿瘤患者化疗前后外周血以及正常人外周血IgH基因单克隆重排均为阴性。结论：IgH基因单克隆型重排虽可以作为诊断B-NHL及检测微小残留病变的重要指标,但是肿瘤缓解后的短期内还不能作为适时的肿瘤分子水平缓解指标。     

急性非淋巴细胞性白血病中TCRδ基因重排的研究进展

急性非淋巴细胞性白血病中ＴＣＲδ基因重排的研究进展李扬秋综述汪明春校暨南大学血液病研究室（广州·５１０６３２）Ｔ细胞抗原受体（ＴＣＲ）是识别与主要组织相容复合物（ＭＨＣ）产物相关的抗原的受体，它包括αβ、γδ两种异二聚体。ＴＣＲαβ在大部分外周血Ｔ细...     

甲状腺原发MALT淋巴瘤12例临床病理、免疫表型及IgH基因重排研究

目的：观察甲状腺原发MALT淋巴瘤的临床病理表现、免疫组织表型和免疫球蛋白重链(IgH)基因重排情况。方法：对12例甲状腺原发MALT淋巴瘤进行回顾性研究，包括临床病理表现、免疫表型(CD20、CD45RO、CD5、CDl0、CyclinD1、bcl-2、κ、λ)分析及多聚酶链反应(PCR)检测IgH基因重排。结果：按2001新版WH0关于淋巴造血组织肿瘤分类．12例均被确诊为MALT淋巴瘤。其中男2例，女10例，男女之比为1：5，中位年龄为63岁。免疫表型检测：所有病例之瘤细胞均表达B细胞分化抗原CD20；4例(33．3％)检测出免疫球蛋白轻链限制性表达；bcl-2阳性1例；CD45RO、CD5、CD0和Cyclin D1均为阴性。8／12例(66．7％)检测出IgH基因克隆性重排。随访11例，失访1例，死亡3例(25％)，存活8例(66.7％)。结论：甲状腺原发MALT淋巴瘤属惰性淋巴瘤，需要结合其病理组织形态、免疫组织化学染色及必要的分子生物学技术才能作出正确的诊断。     

弥漫性大B细胞淋巴瘤中Bcl-2基因重排与蛋白表达的关系探讨

目的 探讨Bcl-2在弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)不同类型中的表达及意义。方法 应用免疫组织化学S-P法检测60例弥漫性大B细胞淋巴瘤标本中Bcl-2蛋白的表达水平;同时行RT-PCR检测外周血Bcl-2/IgH的表达水平。结果 60例DLBCL中,Bcl-2阳性率分别为61.67%(37/60);Bcl-2/IgH的阳性表达12例(12/60)。结论 Bcl-2有望成为DLBCL亚分类的指标。     

应用Ig／TCR重排监测儿童淋巴瘤微小残留病

 淋巴瘤微小残留病（ MRD）的准确检测对判断预后、评价疗效、监测复发和指导治疗具有十分重要的意义。免疫球蛋白（Ig）／T细胞受体（TCR）重排可以作为肿瘤特异性PCR标志用于MRD的监测。BIOMED-2 策略是欧洲协作组制定的标准化多重PCR反应方法。MRD的检测可以通过实时荧光定量PCR的方法完成。对Ig／TCR重排监测儿童淋巴瘤MRD的原理及其相关研究进展进行了综述。