2-甲氧基雌二醇合成方法的改进

 目的 合成新生血管抑制剂2-甲氧基雌二醇。 方法 以雌二醇为原料经过双乙酰化，四氯化锆催化下发生2-位乙酰基重排，溴苄保护3-位羟基，Baeyer-Villiger氧重排反应后产物再经过碱水解，2-位甲醚化，最后用盐酸脱去3-位苄基共6步合成2-甲氧基雌二醇。 结果 将文献报道路线缩短了一步，与原文献相比将改进的六步反应总收率提高了10%。合成获得的2-甲氧基雌二醇成品进行了结构确证。 结论 通过改进2-甲氧基雌二醇的合成工艺，简化操作，缩短反应时间，与原文献相比改进后的合成条件更温和更环保，更有利于规模化生产需要。     

3-(4-羟基苯基)-6-甲氧基-7-羟基-4H-色烯-4-酮的合成及其抑制新生血管的作用

 目的 合成目标化合物3-(4-羟基苯基)-6-甲氧基-7-羟基-4H-色烯-4-酮(化合物1)，考查该化合物抑制新生血管生长活性。 方法 以异香兰素为起始原料，经过插氧、水解、酰化和环合四步反应合成目标化合物；以新生血管抑制剂2-甲氧基雌二醇为阳性对照，采用人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial Cells, HUVECs)筛药模型和子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells, ESCs)模型分别测定该化合物的新生血管抑制活性和细胞毒性。结果 在合成路线上改进了文献方法，用常规反应替代了文献方法中较难控制的微波反应，同时提高了合成收率；生物活性测定结果显示目标化合物的EC50和TI值分别为47.37 μmol/L和7.39。 结论 首次报道了目标化合物抑制新生血管的作用，该化合物具有与2-甲氧基雌二醇相近的体外活性。     

2-(4-甲氧基苯基)-6-甲氧基苯并噻吩的合成

目的合成目的产物2-（4-甲氧基苯基）-6-甲氧基苯并噻吩。方法以3-甲氧基苯硫酚和对甲氧基-苯乙酮为原料经溴化、烃基化、环合重排排制得目标产物。结果此法操作简便并得到高收率的标题化合物。结论改进的合成路线适合于工业化生产。     

1-溴-2,4-二氟苯合成工艺的研究

目的探讨1-溴-2，4-二氟苯合成工艺的经济方法。方法以间苯二胺为原料，经Schiemann反应及溴化，合成1-溴-2，4-二氟苯。结果总收率为40％，纯度大于98％。结论本法具有产率高，成本低的优点。     

奥美拉唑中间体的合成

目的：改进奥美拉唑中间体2-硝基-4-甲氧基-氨基苯的合成方法。方法：以扑热息痛为原料，经甲基化、硝化、还原等反应路线合成。结果：合成得到2-硝基-4-甲氧基-氨基苯，收率在70％左右。结论：该合成路线具有原料易得，反应条件温和等优点，并优化了原反应条件，提高了产率，适合工业化生产。     

2-甲氧基雌二醇-RGD肽缀合物的合成及其抗血管生成作用

以2-甲氧基雌二醇为先导物,将其3位和17位通过连接基团与RGD肽偶联,合成了一系列2-甲氧基雌二醇-RGD肽缀合物,其中13个化合物未见文献报道,结构经IR,MS及¹H NMR确证,并采用细胞迁移划痕试验初步测定了6个目标缀合物的抗血管生成活性。结果显示,化合物26c表现出较强的活性,强于先导物2-甲氧基雌二醇,从而证明了其潜在的抗血管生成作用。     

2-甲氧基雌二醇中有机溶剂残留量的气相色谱法测定

目的:测定2-甲氧基雌二醇中残留溶剂甲醇和二氯甲烷的含量.方法:采用气相色谱法检测3批2-甲氧基雌二醇样品中的组分.应用氢火焰离子化检测器( FID),以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂,采用HP-INNOWAX柱(30mx0.53 mm×1 μm),以PEG20M为固定相,柱温45℃,保持3 min,然后以20℃/min的...     

奥美拉唑中间体的合成

目的:改进奥美拉唑中间体2-硝基-4-甲氧基-氨基苯的合成方法。方法:以扑热息痛为原料,经甲基化、硝化、还原等反应路线合成。结果:合成得到2-硝基-4-甲氧基-氨基苯,收率在70%左右。结论:该合成路线具有原料易得,反应条件温和等优点,并优化了原反应条件,提高了产率,适合工业化生产。     

3-[(3-甲氧基-4-乙酰氧基-5-溴)苯基]丙烯酸的合成

目的：合成3-[（3-甲氧基-4-乙酰氧基-5-溴）苯基]丙烯酸。方法：以香草醛为原料，经溴代、Knoevenagel反应、乙酰化得到目标化合物。结果与结论：目标化合物结构经元素分析、IR的验证，其未见文献报道。     

白藜芦醇的全合成

目的合成天然活性物质白藜芦醇。方法以3，5-二甲氧基苯甲酸为原料，经还原、溴代后，与亚磷酸三乙酯反应成3，5-二甲氧基苄磷酸酯，再与市售茴香醛进行Wittig-Homer反应后，脱去酚羟基保护基而得到目标产物白藜芦醇。结果成功合成得到了白藜芦醇。结论该合成路线具有工艺简单、试剂价格低廉等优点。     

2-甲氧基雌二醇对复发难治性骨髓瘤患者骨髓瘤细胞作用的实验研究

目的探讨2-甲氧基雌二醇（2-ME）对复发性难治性骨髓瘤患者骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法对复发性难治性骨髓瘤细胞进行分离、培养,用不同剂量的2-ME处理不同的时间,然后用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞活力和流式细胞分析细胞周期分布和细胞凋亡率。结果随着2-ME剂量的增加和作用时间的延长,细胞抑制率和凋亡率增加;G0/G1期细胞比例增加,而S期细胞减少,各组之间差异有显著性（〈0.05）。结论2-ME对复发难治性骨髓瘤患者的骨髓瘤细胞具有抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用。     

2-甲氧基雌二醇对大鼠神经元及C6胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响

目的：探讨2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol,2-ME)对大鼠神经元及C6胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响。方法：将神经元及C6胶质瘤细胞分为对照组和实验组,实验组按2-ME浓度不同分为1、5、10、15μmol/L 4个亚组。2-ME作用于大鼠神经元及C6胶质瘤细胞不同时间后,采用MTT法检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期,并在光镜及电镜下观察其形态学变化。结果：C6胶质瘤细胞经2-ME作用后细胞活性受到抑制,呈现时间变量依赖性,各亚组与对照组差异具有统计学意义(P<0.05)。2-ME可诱导C6胶质瘤细胞凋亡,各亚组与对照组差异具有统计学意义(P<0.05);可使C6胶质瘤细胞G₁及S期细胞减少,G₂期细胞增多,一定范围内呈现剂量依赖性,各亚组与对照组差异具有统计学意义(P<0.05)。神经元经药物作后,各亚组与对照组细胞活性差异无统计学意义。结论：2-ME可抑制C6胶质瘤细胞生长,诱导C6胶质瘤细胞凋亡,而对正常神经元无影响。     

2-甲氧基雌二醇对骨髓瘤细胞作用机制的实验研究

目的 探讨2-甲氧基雌二醇（2-ME）对骨髓瘤细胞作用的机制.方法 对1例复发性和难治性骨髓瘤细胞进行分离、培养,予0、1、2、4、8和16 μmol/L的2-ME对骨髓瘤细胞处理48h（以0 μmol/L的2-ME作为对照组）.后采用酶联免疫法检测培养上清中的血管内皮细胞生长因子（VEGF）和IL-6的表达水平,同时采用免疫组化法检测c-myc和bcl-2蛋白阳性表达的骨髓瘤细胞.结果 随着2-ME浓度的增加,培养上清中VEGF和IL-6的表达水平均较对照组明显降低（均P〈0.01）,且骨髓瘤细胞中c-myc和bcl-2蛋白表达阳性率均较对照组明显降低（均P〈0.01）.结论 2-ME对难治性骨髓瘤患者骨髓瘤细胞具有抑制VEGF、IL-6分泌和C-myc、bcl-2蛋白表达水平的作用.     

2-甲氧基雌二醇对胶质瘤细胞增生及凋亡的影响

目的 探讨2-甲氧基雌二醇(2-ME)对体外培养的U87胶质瘤细胞增生、凋亡及细胞周期的影响.方法 将不同浓度的2-ME分别作用于U87细胞,采用倒置显微镜观察细胞形态学变化;四甲基偶氮哩蓝(MTT)法检测2-ME对U87细胞增生的抑制作用;流式细胞术分析2-ME对U87细胞凋亡及细胞周期的影响.结果 1～15μmol/L浓度的2-ME在24、36、48及72 h均可明显抑制U87细胞增生并诱导其凋亡.并在一定范围内呈时间和剂量依赖性;各亚组与对照组差异具有统计学意义(P<0.05).U87细胞经2-ME作用后G2/M期细胞增加,而G0/G1期和S期细胞减少.结论 2-ME可明显抑制U87胶质瘤细胞增生并诱导其凋亡,在一定范围内呈时间和剂量依赖性.     

不同时期放置宫内节育器的临床效果及副反应初步观察

本文以前瞻性方法研究不同时期放置宫内节育器（ＩＵＤ）２５０例，其中产后即时１５６例，剖宫产后即时６０例，产后３０～９０天３２例及中期妊娠引产后２例。并选择同期年龄、胎产次、产程和产科情况相似的未放置ＩＵＤ者１００例产妇作为对照，进行临床效果、副反应观察，并随访一年。结果表明：不同时期放置ＩＵＤ无一例发生产科并发症和感染；产后出血发生率、产后恶露天数、各组与对照组间无显著性差异（Ｐ＞０．０５），哺乳量及月经恢复时间也基本相似，续用率在产后即时组一年为９３．６％，剖宫产后即时组９８．３％，产后３０～９０天组９６．９％；副反应发生率３个月时为２０％，６个月时１７．５％，１２月时１５％，有逐渐下降趋势，且经对症处理后无一例因症取出ＩＵＤ者。本研究提示：以上四个时期放置ＩＵＤ是安全、可行、可靠的避孕方法。     

2-甲氧基雌二醇对胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响

目的 探讨2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol,2-ME)对体外培养的SGC-7901胃癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响.方法 将不同浓度的2-ME不同时间作用于SGC-7901,采用倒置显微镜观察细胞的形态学变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测2-ME对SGC-7901细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;电镜观察细胞超微结构变化.结果 2-ME对SGC-7901细胞有很强的抗增殖的作用,引起大量细胞凋亡,且在一定范围内呈剂量和时间依赖性,作用组与对照组之间的差异具有统计学意义(P<0.05).细胞周期检测发现作用组大量细胞阻滞于G2/m期G0/G1及S期细胞减少,与对照组存在显著差异(P<0.05).结论 2-ME可抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖并诱导其凋亡.     

C-erbB-2癌基因激活在大肠癌变过程中的作用

目的：探讨Ｃ—ｅｒｂＢ—２癌基因过表达在大肠癌变过程中的作用。方法：用免疫组化ＳＡＢＣ法检测３５例结肠癌及癌旁非典型增生上皮和１７例大肠乳头状腺瘤中Ｃ—ｅｒｂＢ—２蛋白的表达。结果：Ｃ—ｅｒｂＢ—２在大肠癌变各阶段（正常—非典型增生／乳头状腺瘤—癌）均有不同程度的表达,前两阶段间表达的差异显著（Ｐ＜０．０５）。结论：Ｃ—ｅｒｂＢ—２基因激活是大肠癌变过程中的前期事件,通过诱导细胞增殖而参与促进癌的形成。     

外源性基因经乳腺导管注射在大鼠乳腺组织中表达的机制研究

目的研究外源性基因经乳腺导管注射在乳腺组织中表达的机制。方法依据乳腺发育时期的不同（即9周龄未孕、妊娠7d、妊娠12d、妊娠18d、产后7d、产后14d）将36只SD大鼠分为6个实验组（6只／组）,以绿色荧光蛋白（GFP）高效表达质粒pCE-29与脂质体混合后,经乳腺管导人各组大鼠第5对乳腺。48h后取材冰冻切片,荧光显微镜下观察各组GFP的表达情况,如有表达则对该张冰冻切片行HE染色,前后图像对比以确定GFP表达位置。另取不同发育时期正常大鼠乳腺组织制作石蜡切片,HE染色。结果pCE-29质粒由乳头管导人后,实验组中妊娠12d组和产后7d组中各有2只有GFP表达,图像对比后确定GFP是在乳腺腺泡细胞中表达：石蜡切片HE染色后观察大鼠乳腺组织,在从妊娠初始到产后的发生变化过程中,在妊娠12d和产后7d时处于分裂期的腺细胞较多,而其他时期处于分裂期的腺细胞较少。结论在妊娠12d和产后7d这两个时期,外源性基因经乳腺管注射可以转入腺泡上皮细胞而得到表达。表达的机制可能是在妊娠期及分娩后,由于体内激素作用,乳腺干细胞在以上两个时期不断分化．启动腺细胞分裂增殖,分裂期的腺细胞进行DNA复制,因此可能接受外源性基因的机率大。本实验为外源性基因经乳腺管注射在动物乳腺的表达提供了重要的研究资料。