肾细胞癌组织中内皮抑素、MVD表达变化及意义

目的检测肾细胞癌（RCC）组织中内皮抑素的表达与肿瘤微血管密度（MVD）,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化SABC法检测50例RCC组织及30例正常肾组织中的内皮抑素及CD34。结果正常肾脏组织中内皮抑素阳性表达率为36.7%,RCC组织中为76%,二者相比,P〈0.01。内皮抑素在Ⅲ~Ⅳ期RCC中的表达情况与Ⅰ~Ⅱ期RCC相比,P〈0.05。RCC组织中的MVD均值为（35.62±11.38）条/HP,明显高于正常肾脏组织的（18.71±9.53）条/HP,P〈0.01。Ⅲ~Ⅳ期RCC组织中的MVD为（41.29±10.65）条/HP,显著高于Ⅰ~Ⅱ期的（24.74±7.83）条/HP,P〈0.01。RCC组织中的Endostatin与MVD有相关性（P〈0.05）。结论 RCC组织中内皮抑素表达上调,MVD升高。二者可作为评估RCC恶性程度、转移及预后的重要指标。     

肾细胞癌MMP-2、血管内皮生长因子表达与血管生成的关系

采用免疫组化法检测75例肾细胞癌（RCC）、12例正常肾组织中的基质金属蛋白酶．2（MMP-2）与血管内皮生长因子（VEGF）表达情况，计数微血管密度（MVD）。结果与正常肾组织比较，RCC组MMP-2、VEGF表达明显升高（P〈O、05），不同病理类型组织中二者表达无统计学差异，不同临床分期组织中二者表达有统计学差异（P〈0.05）。MVD与VEGF、MMP-2蛋白表达呈显著相关性（P〈0．05），VEGF与MMP-2蛋白表达呈显著相关性（P〈0．05）。提示MMP-2、VEGF与RCC的血管生成有关，二者表达可作为反映RCC侵袭和转移的生物学指标。     

RCC组织中KISS-1蛋白的表达变化及意义

目的观察。肾细胞癌（RCC）组织中KISS-1蛋白的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测50例RCC、15例癌旁组织及15例正常肾组织中KISS-1蛋白。结果RCC组织中的KISS-1蛋白的阳性表达率为32．00％,明显低于癌旁组织的73．00％和正常肾组织的66．67％（P均〈0．05）;KISS-1蛋白与RCC的临床分期、淋巴结转移及分化程度有关（P均〈0．05）,KISS-1蛋白阳性表达率与RCC分化程度呈负相关（rs=-0．481,P=0．000）。结论RCC组织中KISS-1蛋白表达明显下调,其对RCC的发生发展有一定的抑制作用;KISS-1蛋白可能成为预测RCC恶性程度的新的生物学指标。     

肾癌组织中MMP-10的表达变化及意义

目的观察肾癌组织中基质金属蛋白酶10（MMP-10）的表达并探讨其意义。方法用免疫组化SP法检测82例肾癌患者肿瘤组织,10例肾癌患者癌旁组织及10例肾切除患者正常肾组织中MMP．10的表达。结果MMP-10在肾癌组织中阳性表达率为64．63％。在正常肾组织和癌旁组织中不表达。MMP－10在肾癌中的表达与RCC病理学分级、临床分期和淋巴结转移有关（P〈0．01）。结论肾癌组织中MMP－10呈高表达,MMP-10的表达与肾癌的浸润转移有关。     

胃癌淋巴结转移与VEGF—D、VEGFR-3、LVD的关系

目的探讨胃癌淋巴结转移与血管内皮生长因子D（VEGF—D）、血管内皮生长因子受体3（VEGFR-3）、淋巴管密度（LVD）表达间的关系。方法对59例胃癌术后标本采用免疫组织化学sP法检测VEGF—D表达,用VEGFR-3抗体免疫组织化学sP法标记淋巴管,检测肿瘤组织及正常组织LVD。结果VEGF—D、VEGFR-3在癌组织中表达率分别为59．32％、67．80％,明显高于癌旁不典型增生组织及正常胃黏膜组织（P〈0．05）。癌周组织的LVD表达为（21．29±8．21）,明显高于周边正常组织（P〈0．05）。VEGF—D表达阳性组35例与阴性组24例的LVD分别为（23．15±7．58）和（11．93±5．31）,其差异具有统计学意义（P〈0．05）。VEGF—D、LVD在癌组织中的表达与淋巴结直径、淋巴结分期、浸润深度、TNM分期及分化程度有关（P〈0．05）。结论VEGF．D在胃癌组织中高表达,并与肿瘤的淋巴管形成及淋巴结转移密切相关。     

肾透明细胞癌组织中Id4因子的表达变化及意义

目的观察分化抑制因子4（Id4因子）在肾透明细胞癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测30例肾透明细胞癌（肾癌组）、10例癌旁（癌旁组）和10例正常肾组织（正常组）中Id4因子,并分析其与肾透明细胞癌病理分级、临床分期的关系。结果肾癌组Id4因子阳性表达率为70％,明显高于癌旁组的30％和正常组的20％（P均〈0．05）;Id4因子的阳性表达率随肾透明细胞癌病理分级、TNM分期的增高而增加,但P〉0．05。结论Id4因子在肾透明细胞癌的组织中表达增强,可能在本病的发病机制中起重要作用。     

食管鳞癌组织中IGF-1R、VEGF-C的表达变化及意义

目的观察食管鳞癌组织中的胰岛素样生长因子-1R（IGF．1R）、血管内皮生长因子C（VEGF—C）的表达变化,并探讨其意义。方法分别采用免疫组化法、免疫印迹法检测食管鳞癌和癌旁正常食管组织中的IGF-1R、VEGF—C。结果食管鳞癌组织中IGF-1R、VEGF—C阳性率分别为81．05％、67．37％,癌旁组织中分别为20％、5％,P均〈0．01;食管鳞癌组织中IGF—IR、VEGF．C蛋白条带灰度比值分别为0．58土0．03、0．43±0．05,癌旁组织中分别为0．43±0．02、0．31±0．04,P均〈0．05。IGF—IR、VEGF—C表达与食管鳞癌淋巴结转移、浸润深度有关（P均〈0．01）,二者表达呈正相关（r=0．29,P〈0．05）。结论食管鳞癌组织中IGF—IR、VEGF—C高表达,在食管鳞癌的发生发展及转移中有重要作用。     

肾透明细胞癌miRNA-34a、Notch1和Hes1的表达及意义

目的观察miRNA-34a、Notch1和Hes1在肾透明细胞癌组织的表达，探讨其与肾癌发生发展的关系及可能的临床意义。方法运用实时荧光定量PCR方法检测miRNA-34a、Notch1和Hes1在肾透明细胞癌组织及其相应的癌旁正常组织的表达，并分析其与临床病理特征的关系。结果与正常组织相比，miRNA．34a在肾癌组织中高表达（P〈0．05），Notch1、Hes1在肾癌组织中低表达（P〈0．05）；miRNA-34a随着肾癌病理分级的增高而增高，Notch1的表达则随着肾癌病理分级的增高而降低（P均〈0．05）。结论高表达的miRNA-34a通过下调其靶基因Notch1参与肾透明细胞癌的发生发展，此有望成为肾癌诊断的分子标志物及潜在的治疗靶点。     

小儿肾母细胞瘤组织中survivin蛋白、VEGF的表达变化及意义

目的观察小儿。肾母细胞瘤组织中survivin蛋白及血管内皮生长因子（VEGF）的表达,探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测36例小儿肾母细胞瘤组织中survivin蛋白及VEGF。另取20例瘤旁正常肾组织为对照。结果肾母细胞瘤组织中survivin蛋白及VEGF的表达均明显高于瘤旁正常肾组织（P〈0．05）;Ⅲ～Ⅳ期、预后不良组织型及有淋巴结转移者,其survivin蛋白、VEGF表达明显高于Ⅰ～Ⅱ期、预后良好组织型及无淋巴结转移者（P均〈0．05）。结论肾母细胞瘤组织中survivin蛋白及VEGF表达上调,且与肿瘤分期、预后及淋巴结转移有关;检测survivin蛋白及VEGF可以作为肾母细胞瘤病情和预后的评估指标。     

卵巢癌组织中C—erbB-2、p53、VEGF的表达变化及意义

目的观察C-erbB-2、p53、血管内皮生长因子（VEGF）在卵巢癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测45例卵巢癌及其癌旁正常组织中的C-erbB-2、ps3、VEGF。结果卵巢癌组织中C-erbB-2、p53、VEGF表达明显高于癌旁正常组织（P均〈0．05）,三者表达与卵巢肿瘤大小无关（P〉0．05）,均与肿瘤组织分级有关（P〈0．05）,VEGF与淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论卵巢癌组织中C-erbB-2、ps3、VEGF呈高表达,联合检测对判断卵巢癌预后有一定作用。     

涎腺黏液表皮样癌组织中5-LOX、MVD的表达变化及意义

目的观察5-脂氧合酶（5-LOX）、微血管密度（MVD）在涎腺黏液表皮样癌（MEC）中的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化EliVision法检测40例涎腺MEC、20例多形性腺瘤、20例癌旁2 cm正常组织中的5-LOX、CD34（以此标记MVD）。结果涎腺MEC中5-LOX的阳性表达率为67.5%（27/40）、MVD为（24.825±9.685）条/HP,多形性腺瘤、癌旁正常组织分别为0（0/20）和（8.20±1.735）条/HP、5.0%（1/20）和（9.9±1.373）条/HP,前者与后两者的两个指标相比,P均〈0.05。5-LOX的表达与涎腺MEC的分化程度有关（P〈0.05）,MVD的表达与涎腺MEC的分化程度、淋巴结转移有关（P均〈0.01）。结论5-LOX、MVD在涎腺MEC组织中呈高表达,且与肿瘤分化程度、淋巴结转移有关,可以作为诊断涎腺MEC及判断其生物学行为的参考指标。     

脑膜瘤组织中中期因子蛋白的表达及意义

目的探讨脑膜瘤组织中中期因子蛋白（MK）的表达及其与脑膜瘤血管生成、侵袭性、瘤周水肿和临床病理的关系。方法采用免疫组化SP法检测52例脑膜瘤组织和10例正常脑膜组织MK的表达及微血管密度（MVD）,并对二者的关系进行统计学分析。结果52例脑膜瘤组织中,MK阳性表达率为63.5%,MVD为（82.0±22.7）个/HP;正常脑膜组织中无MK表达,MVD为（25.8±6.2）个/HP（P〈0.05）。MK阳性表达程度与MVD呈正相关（r=0.756,P〈0.05）。MK阳性表达与患者年龄、性别和肿瘤大小无关（P〉0.05）,而与患者病情分级、肿瘤病理分级、类型、侵袭性、瘤周水肿程度有关（P〈0.05）。结论MK在脑膜瘤组织中呈过度表达,其与脑膜瘤血管生成、侵袭性、瘤周水肿及病理分级相关。     

VEGF和MVD可作为判断胃癌患者预后和上消化道出血风险的指标

背景:血管内皮生长因子(VEGF)是主要血管生成调控因子之一,与肿瘤血管发生密切相关,微血管密度(MVD)是评价肿瘤血管发生的重要指标。有研究发现VEGF表达和MVD与胃癌患者的上消化道出血(UGIB)风险相关。目的:探讨VEGF和MVD与胃癌患者临床病理特征、预后和UGIB风险的关系。方法:收集60例伴或不伴UGIB胃癌患者的胃癌手术标本石蜡包埋组织,以免疫组化方法检测VEGF表达和MVD(计数CD34阳性血管内皮细胞)。结果:胃癌组织VEGF阳性表达率为51.7%(31/60),MVD均值为35.18±19.72。伴UGIB的胃癌患者VEGF阳性表达率和MVD均值显著高于不伴UGIB者(VEGF:64.5%对37.9%,P<0.05;MVD:42.70±15.50对27.13±20.80,P<0.01)。VEGF表达和MVD均与胃癌T分期和pTNM分期呈正相关(P<0.01),VEGF表达与肿瘤组织分化呈负相关(P<0.05),MVD与N分期呈正相关(P<0.001)。COX多元回归分析显示MVD是影响胃癌患者术后生存时间的危险因素,而VEGF与术后生存时间无关。结论:VEGF表达和MVD与胃癌患者的临床病理进展和UGIB风险相关,MVD为胃癌患者术后生存时间的重要影响因素,两者可共同作为判断胃癌患者预后和UGIB风险的有效指标。     

血管内皮生长因子和内抑素在大鼠糖尿病肾病发病中的作用

目的研究血管内皮细胞生长因子（VEGF）作为促血管生长因子和内抑素（ENS）作为血管生成抑制因子,在糖尿病肾病（DN）血管生成中的作用。方法以正常大鼠为对照,30只雄性Wistar大鼠建成糖尿病模型,分别于糖尿病模型建立2、4、8周观察24小时尿白蛋白排泄率（UAER）,用免疫组织化学染色显示大鼠肾组织VEGF和ENS的表达及半定量分析;用酶联免疫法测定血中VEGF和ENS的浓度,根据DN病理学改变确定DN的血管增生严重性,分析内皮细胞增生、肾小球中弥漫或结节病变及肾小球硬化与VEGF和ENS的关系;采用RT-PCR的方法观察大鼠肾脏VEGF和ENSmRNA的表达。结果DN大鼠肾组织VEGF和ENS的mRNA和蛋白表达水平明显高于对照组（P〈0．05）;DN大鼠血清VEGF和ENS水平也明显高于对照组（P〈0．05）。DN大鼠UAER与血浆VEGF和ENS相关（r=0．468,P〈0．01;r=0．395,P〈0．05）,DN大鼠无论在血中还是肾组织免疫组化和RT-PCR都有VEGF和ENS的表达,VEGF的表达与DN血管增生程度密切相关（r=0．404～0．476,P〈0．01～0．05）,ENS的表达也与DN严重程度密切相关（r=0．409~0．617,P〈0．05～0．01）,血浆VEGF和ENS二者具有正相关性（r=0．484,P〈0．01）。结论VEGF和ENS与DN血管增生密切相关。     

肝细胞癌组织微血管密度与血小板源性生长因子BmRNA表达的关系

目的初步探讨肝细胞癌组织中血小饭源性生长因子B（PDGPB）mRNA的表达与微血管密度（MVD）之间的关系。方法用RT-PCR法柃测51例肝细胞癌和20例正常肝组织PDGF-BmRNA。采用免疫组化（sABC）法检测MVD的表达。结果肝细胞癌组织PDGFBmRNA的表达量明显高于正常肝组织，两者比较有显著性差异（P〈0．01）。肝癌组织和正常肝组织的MVD值分别是29．43±4．818和14．56±1．96（P〈0．01）。结论PDGF-B作为一个血管内皮细胞生长调节因子，在肝癌的发生、发展过程中可能起着重要的促进生长和转移作用。     

LOX、VEGF在胃癌进展中的作用关系

目的探讨赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)、血管内皮因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在胃癌进展中的作用关系。方法收集手术切除的新鲜胃癌组织65例,采用Western blotting方法检测胃癌组织中的LOX、VEGF蛋白表达,并比较二者在T1T2与T3T4胃癌组织、有无淋巴结转移胃癌组织中的关系。结果 (1)LOX在T3T4胃癌中的相对表达量为0.6003±0.1279,在T1T2胃癌中的相对表达量为0.4278±0.1437,差异有统计学意义(P0.05);(2)VEGF在T3T4胃癌中的相对表达量为0.6975±0.1639,在T1T2胃癌中的相对表达量为0.4263±0.1128,差异有统计学意义(P0.05);(3)LOX在伴有淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.6827±0.1987,在无淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.4235±0.1763,差异有统计学意义(P0.05);(4)VEGF在伴有淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.6769±0.1659,在无淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.4128±0.1471,差异有统计学意义(P0.05);(5)在T1T2和T3T4胃癌组织中,LOX与VEGF的表达水平呈正相关(r=0.735,P0.05),在有淋巴结转移和无淋巴结转移的胃癌组织中,LOX与VEGF的表达水平也呈正相关(r=0.914,P0.05)。结论 T3T4胃癌中LOX与VEGF的表达水平明显高于T1T2胃癌,在有淋巴结转移的胃癌组织中,LOX与VEGF的表达水平明显高于无淋巴结转移的胃癌组织中,且LOX与VEGF表达呈正相关;LOX与VEGF在胃癌的进展中有促进作用,并且相互协同。     

2型糖尿病大鼠急性心肌缺血对心肌新生血管的影响

目的探讨糖尿病急性心肌缺血对心肌新生血管生成的影响及其机制。方法清洁级健康雄性8周龄sD大鼠52只,任意选取其中20只以高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型;以糖尿病建模成功的大鼠与16只正常大鼠以结扎冠状动脉前降支制作急性心肌梗死模型;另外16只大鼠只开胸不造模、不给药作为假手术组。心肌梗死造模术后2周,处死各组动物,取左心室梗死区及相邻区域心肌,采用免疫组化方法检测各组大鼠缺血周边区微血管密度（MVD）,Western blotting法检测血管内皮生长因子（VEGF）及其信号转导蛋白[磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、磷酸化eNOS（p-eNOS）]、内皮抑素蛋白的表达。组间数据比较采用单因素方差分析,样本均数间两两比较采用q检验,两组计量资料比较采用t检验。结果3组成活大鼠分别为：糖尿病心肌梗死组12只,非糖尿病心肌梗死组（对照组）13只,假手术组14只。与对照组相比,糖尿病组缺血心肌新生血管明显减少（19．7±3．8比14．2±3．6,q=2．98,P〈0．05）。糖尿病组、假手术组VEGF表达显著低于对照组（分别为0．89±0．12、0．65±0．23和1．53±0．20,F=6．52,P〈0．01）。糖尿病组和对照组p-Akt和eNOS蛋白表达差异无统计学意义（t值分别为3．02、2．78,P〉0．05）,但糖尿病组p-eNOS蛋白表达显著减少（0．49±0．09比1．16±0．12,t=5．68,P〈0．05）。糖尿病组内皮抑素表达显著高于对照组（4．6±0．6比2．3±0．4,t=8．63,P〈0．05）。结论糖尿病大鼠急性缺血心肌的新生血管生成低下,VEGF转导通路在多个水平上参与其中,并与内皮抑素共同作用。     

LKB1和血管内皮生长因子在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨LKB1和血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学(SP)法检测115例胃癌组织和20例胃正常组织中LKB1和VEGF的表达,并探讨其与胃癌分期、淋巴结转移、Lauren's分型及预后的关系。结果 LKB1在胃癌组织中的阳性率为20.9%,低于正常胃组织中的95.0%(P0.01);VEGF在胃癌组织中的阳性率为64.3%,高于正常胃组织中的5.0%(P0.01)。LKB1在胃癌组织中的低表达与胃癌的TNM分期、淋巴结转移、Lauren's分型及预后有关(P0.05);VEGF在胃癌中的表达与淋巴结转移、远处转移、TNM分期及预后相关(P0.05)。结论 LKB1的低表达与胃癌的发生、发展有关,对胃癌恶性生物学行为的评估及预后判断具有重要的指导意义。     

肝癌组织、缺氧SMMC-7721细胞中HPA的表达变化及机制探讨

目的观察肝癌组织及缺氧培养的肝癌SMMC-7721细胞中乙酰肝素酶（HPA）和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达变化,并探讨其机制。方法免疫组化法检测50例肝癌组织、28例肝癌癌旁组织、14例正常肝组织中的HPA、HIF-1α蛋白。分别采用RT-PCR和Western blot法检测常氧和缺氧培养的人肝癌SMMC-7721细胞中HPA mRNA及其蛋白。结果 HPA、HIF-1α蛋白在肝癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁和正常肝组织（P〈0.05）;肝癌组织中HPA、HIF-1α蛋白的表达呈正相关（r=0.295,P〈0.05）。缺氧培养20 h后,SMMC-7721细胞HPA mRNA表达量（6.234±0.457）显著高于常氧培养细胞的表达量（2.910±0.137）,两者相比,P〈0.05;其HPA蛋白表达量（65 kD为1.437±0.067,50 kD为1.706±0.066）也显著高于常氧培养细胞的表达量（65 kD为1.192±0.060,50 kD为1.580±0.265）,两者相比,P〈0.05。结论肝癌组织中HPA蛋白阳性表达率升高,缺氧肝癌SMMC-7721细胞中HPAmRNA及蛋白表达量均升高,可能与缺氧导致的HIF-1α表达上调有关。