抗艾滋病病毒疫苗研究现状(摘要)

发现艾滋病病毒(HIV)已有近30年,尽管其他病毒性疾病(如脊髓灰质炎、麻疹、腮腺炎、风疹、乙型病毒性肝炎和流行性感冒等)的疫苗研究都取得了成功,研制有效的抗HIV疫苗却一直未能有所突破。和其他感染性病毒相比,HIV具有一些独特的特性,使其疫苗研发面临更大的挑战。HIV主要感染免疫系统,尤其是特异性地攻击CD4+T淋巴细胞,具有逃避免疫清除的一些机制,同时还可以通过整合到宿主的染色体中建立1种潜伏的贮库。由高突变率和基因重组引起的HIV基因极端多样性则使疫苗研发更具有挑战性。已知HIV有二大类型:HIV-1和HIV-2。目前全球流行的主要是HIV-1;HIV-2则主要流行于非洲西部和中部。至少有2~3种不同猩猩来源的HIV-1引起M,O和N组在人类中的传播。M组又可进一步分为9种不同的亚型和数目众多的流行重组体(CRF)。同一亚型的病毒基因差别可达20%。在非洲一些地方,多种亚型同时流行,HIV包膜蛋白高变区的差异可达38%。事实上,单个HIV患者体内的HIV多样性就可能超过全球流感病毒多样性的总和,后者则需要每年制备新的疫苗以应对当年的流行株。目前HIV感染人数已超过3300万,因此,仅HIV序列多样性一项就对疫苗研制、诊断及治疗构成了巨大的挑战。然而,相信尽管HIV的进化是1种持续的过程,且高变区域(如包膜蛋白编码区域)的变异不断累积,为保持病毒蛋白的功能及病毒的感染性,HIV基因型的数目仍然是有限的。因此,应用针对所有或多数HIV病毒株多种不同的抗HIV的抗体及T细胞免疫反应可发挥广谱的抗HIV作用,并克服HIV序列多样性。为实现这一目的,本研究所研发了一系列的工具,如可产生纯的HIV包膜蛋白重组基因的HIV-env重组系统,生产具有复制活性的SHIV-env病毒系统,可用来筛选分泌具有广谱中和活性抗HIV抗体的杂交瘤细胞的huCD4/huCCR5 B细胞转基因小鼠模型及293TTK/env细胞系以及1种新的可同时诱发体液和细胞免疫反应的HIV疫苗载体系统。希望上述策略将使有效抗HIV疫苗的研制变为可能。     

狂犬病病毒用作HIV疫苗的载体

美国 Jefferson医学院的研究人员运用减毒的狂犬病病毒作为表达人类免疫缺陷症病毒 (HIV)包膜蛋白的载体 ,研制 HIV疫苗。这是一种新方法 ,因为狂犬病病毒或不分节段的负链 RNA病毒用于 HIV疫苗尚属首次。　　研究人员将 HIV- 1 gp1 6 0基因插入减毒的狂犬病病毒产生重组病毒。然后将其注射小鼠 ,并加强注射一次 HIV gp1 2 0蛋白以致敏免疫系统。结果该病毒成功地表达出 gp1 6 0糖蛋白 ,并诱导强的抗 HIV- 1包膜蛋白的体液免疫应答。另外 ,在小鼠血清中检出滴度高达 1 :80 0的抗 HIV中和抗体。而一些广泛使用的重组病毒载体 (表达…     

TSG101蛋白在HIV-1出芽过程中的作用及其抑制剂

tsg101基因是一个抑制肿瘤基因，其翻译产物TSG101蛋白具有多重生物学功能。近年来的研究发现，TSG101蛋白通过与HIV-1 Gag蛋白结合，辅助HIV-1病毒颗粒从被感染细胞中释放出来，这说明TSG101可作为一个新的抗HIV-1靶点。基于TSG101蛋白与HIV Gag的相互作用和结构，研究人员设计合成了几类TSG101蛋白抑制剂，并通过测定这些抑制剂对TSG101蛋白的亲和力，发现其中某些化合物具有比野生型Gag更强的TSG101蛋白亲和力，值得进一步研究。     

HIV-1疫苗诱导广泛中和抗体应答

 诱导中和抗体是许多有效疫苗的关键特征,也是在动物模型中唯一证明能完全阻断HIV感染的免疫应答.但是,HIV-1广泛的遗传变异性和复杂的免疫逃避机制,已经使得迄今为止所有利用HIv-1疫苗免疫原诱导有效中和抗体应答的尝试受到阻碍.最近对病毒免疫逃避机制有了进一步了解,同时对病毒包膜糖蛋白结构和免疫生物学特性的研究也不断深入,这些都将有助于克服困难,设计出新的免疫原诱导产生保护性抗HIV-1抗体.     

携带HIV-1包膜基因的重组病毒艾滋病疫苗的潜在负效应

由1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)包膜糖蛋白(gp120/160)制备的多种候选艾滋病疫苗正在HIV阴性健康志愿者以及HIV感染者中进行临床试验(I和II期).这些疫苗大多使用携带HIV gP120/160基因的重组病毒载体。最近报告的HIV-1gP120和人类免疫球蛋白(Ig)可变区之间序列和基因的相似性,可能对这类疫苗的进一步开发和目前应用产生负效应.     

HIV DNA疫苗对黑猩猩有效

美国Apollon公司报道了人类免疫缺陷症病毒(HIV)疫苗在临床前动物研究中的一项新的、极显著的结果.此疫苗是由病毒的两部分DNA序列组成,它能完全保护两只黑猩猩抵御大剂量HIV的攻击.Apollon公司的方法是以裸DNA接种为基础,将DNA质粒直接注入肌肉组织,细胞接受基因物质后产生由NDA编码的蛋白,注射病毒DNA后,随着病毒蛋白的产生,出现类似感染的效果,但不是真正的感染,无发病的危险.Apollon公司认为,此法主要特点是能刺激强烈的细胞毒性T细胞和抗体免疫应答.在猴实验中,Apollon公司和宾夕法尼亚大学的研究者研制了由两种DNA质粒组成的疫苗,其中一种质粒含编码HIV包膜蛋白gp160的基因和调节rev基因,另一种含编码核心蛋白p24的gag和pol基因.研究者用上述疫苗接种3只黑猩猩,另1只对照黑猩猩接受了非相关质粒.选取其中两只产生强免疫应答的动物,与对照动物一起用足够感染250只黑猩猩量的HIV攻击.攻击后数周接种动物血液中的病毒水平升高,但是没有进一步感染的迹象.于攻击后22周取淋巴结活检,用聚合酶链反应检测未见HIV征象.反之,对照动物在攻击后两周及其后的实验中出现明显感染.试验令人鼓舞的方面是,猴受到与疫苗株略有不同的HIV株的攻击,提示疫苗可能应付一定量的HIV突变倾向.     

表达HIV-1Nef辅助蛋白的质粒DNA诱导的体液免疫应答的鉴定[英]

1型人类免疫缺陷症病毒（HIV-1）的nef基因产物是25～27kDa的辅助性胞质蛋白。研究表明感染了缺失大部分nef的猴免疫缺陷症病毒的恒河猴其病毒负荷低而且不发展为艾滋病样疾病。鉴于Nef蛋白在病毒生活周期早期便可产生,故Nef似乎为有效的HIV疫苗候选物。     

HIV变异性与艾滋病疫苗的前景

本文概述了为研制有效艾滋病疫苗而进行的诱导中和抗体研究工作;并描述了1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)包膜上的主要中和性抗原决定簇(PND);讨论了PND的变异性与代表PND的合成肽对中和抗体的诱导。应用代表大多数HIV-1分离株PND顺序的不同肽的混合物以及组建含几个病毒分离株PND的杂交免疫原可解决与PND变异性有关的问题。本文还讨论了另一种有可能诱导某种细胞内免疫力的方法:作者用HIV-1感染者淋巴细胞培养上清液感染Hut-78细胞获得的细胞克隆(F12),虽有完整的HIV-1前病毒,但不能释放病毒颗粒。并且F12细胞能完全抵抗HIV-1或HIV-2分离株的重复感染。目前,作者试图将该克隆的F12/HIV基因组转入HIV易感细胞以产生同源病毒干扰作用,从而使这些细胞抵抗HIV感染.     

HIV-1C疫苗研究进展

 对于HIV-1,抗逆转录病毒药物能显著改善HIV/AIDS病人的健康并延长其寿命.但高昂的费用和治疗条件令大多数HIV患者望而却步,尤其在感染水平高、公共资源极度匮乏的发展中国家.到2004年底,撒哈拉以南非洲地区有2540万HIV感染者,该地区迄今仍是HIV-1C感染最严重的地区.几种候选HIV-1C疫苗目前正在进行临床前和临床研究.这些候选疫苗的设计主要是来自HIV-1C的HIV-1调控蛋白和结构蛋白.本文重点介绍HIV-1C疫苗的研究进展.     

治疗HIV-1感染的DNA疫苗的首次人体试验:安全性及宿主应答[英]

本文报道了含有编码人类免疫缺陷症病毒（HIV）env及rev蛋白基因的DNA质粒构建物APL400-003接种无症状HIV感染者的安全性及宿主应答的试验结果。受试者为15例平均年龄为36岁的无症状HIV感染者,将受试者分为3组,每组5人,肌肉接种APL400-003DNA疫苗,剂量     

病毒蛋白的核输入过程：抗HIV-1药物研究的新靶点

核输入是HIV-1生命周期中的关键步骤,主要指HIV-1的整合前复合体（PIC）及病毒辅助蛋白通过核孔蛋白复合物进入到细胞核的过程。HIV-1的PIC包含了病毒的基质蛋白、整合酶、病毒蛋白R、cDNA以及多种细胞辅助因子,如晶状体上皮细胞衍生生长因子（LEDGF/p75）、输入蛋白α和转运蛋白SR2。因此HIV-1核输入是一个多因子参与的复杂过程,依赖于PIC成分或单独HIV-1蛋白与细胞核输入因子之间的蛋白质-蛋白质相互作用。相对于传统的抗HIV治疗方法（如靶向于逆转录酶、整合酶、蛋白酶等）,针对核输入过程的治疗有可能成为一种新的选择。目前,作用于核输入过程的抗HIV药物研发主要基于两种途径：将功能蛋白的关键区域直接衍生或经修饰而得到具有抑制活性的多肽;基于蛋白质-蛋白质相互作用的具体模式进行合理设计,或通过筛选发现小分子抑制剂。本文综述了关于HIV PIC核输入机制、核输入过程中的关键因子、以及有抑制作用的多肽和小分子化合物的研究进展。     

作用于HIV gp120的进入抑制剂研究进展

HIV-1病毒为包膜病毒,其感染靶细胞的第一步是由HIV包膜蛋白表面亚基gp120与靶细胞上的CD4分子和辅助受体（趋化因子受体CCR5或CXCR4等）结合,导致gp41的构型发生改变,启动病毒包膜与靶细胞膜的融合。与gp120相结合的一些抗体、蛋白、多糖、多肽和小分子化合物,都可能影响HIV-1病毒包膜和靶细胞膜融合的过程,从而起到抗HIV-1病毒的作用。该文对近年来以HIV gp120为靶点的HIV进入抑制剂的研究进展进行综述。     

新型嵌合Rev、Tat和Nef(Retanef)抗原作为SIV/HIV疫苗的组分

猴免疫缺陷病毒 ( SIV)和人类免疫缺陷病毒 ( HIV)的早期调节基因是疫苗开发的标靶 ,某些蛋白的免疫抑制活性可能限制了它们的免疫原性 ,为了解决这一问题作者构建了一种新型嵌合聚蛋白疫苗候选制剂 ( Re-tanef) ,对其在转染细胞胞质中的表达情况以及免疫原性进行了测定。　　嵌合的 Retanef是由 SIV的经遗传修饰和重配的 rev、tat和 nef基因开读框架所构成 ,将 DNA- SIV- Retanef或 p CMV/Gag转染 Hela- Tat细胞 ,并进行免疫荧光测定及共定位分析。于 0、4及 1 2周对恒河猴肌注或皮内注射 DNA- SIV- Retanef,继之于 2 5周单剂…     

基于结构的HIV-1整合酶抑制剂设计:计算机模拟方法

HIV整合酶是一种病毒编码蛋白质，它催化病毒DNA整合进入宿主基因组，这为开发新的抗HIV和抗艾滋病疗法提供了一个重要的靶标。综述通过计算机模拟方法进行基于结构的：HIV-1整合酶抑制剂设计，内容包括基于配体(如药效团)和基于靶向(如对接)的设计方法以及三维定量构效关系研究。     

基于伤寒杆菌的HIV-1载体疫苗的构建和鉴定

由于Ⅰ型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)通过胃肠道外及性进行传播,因此,开发HIV疫苗的主要目标是构建作用于全身和粘膜免疫系统的免疫原。为此,作者构建了一种表达重组HIV-1gp120(rgp120)的伤寒杆菌减毒株。 作者将编码rgp120的基因表达盒整合进伤寒杆菌减毒株的aroC基因座,以构建一种疫苗株。作者首先构建了双启动子系统(P_(lpp)和P_(lacUV5)),通过定位诱变将P_(1pp)的-35和-10区靠近σ70启动子共有序列,以提高蛋白表达。其次,将lacO插入启动子使lacI能调控表达。最后,在P_(1ac UVS)后加人工终止密码子,使5′到P_(lpp)核糖体结合位点(RBS)一段序列成为框内RBS,这种框内RBS-终止-RBS     

重组gp160疫苗用于早期人类免疫缺陷症病毒感染者安全性和免疫原性的Ⅰ期临床评价

1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)虽然能刺激机体产生细胞免疫和体液免疫应答。但仍引起慢性进行性免疫功能失调,这可能是由于病毒调节蛋白或病毒对细胞致病力发生变化所致。为此作者用HIV gp160对HIV感染早期病人进行主动免疫来研究增强对HIV特异性免疫的可能性。30名志愿者均为HIV早期感染者,抗HIV抗体阳性,CD4细胞数不少于400/ml,年龄为18～50岁。疫苗来自HTLV-Ⅲ的亚单位糖蛋白gp160,此为杆状病毒表达的重     

HIV-1DNA疫苗和趋化因子

DNA疫苗已被证实具有在动物模型和人体中诱导体液及细胞免疫应答的能力。同样也证实由质粒表达载体传递的基因能在宿主中表达功能蛋白。另外 ,注射编码细胞因子、趋化因子或共刺激分子的质粒 (也称作免疫调节质粒 )能使该技术进一步扩展至定向免疫。作者研究了趋化因子与 1型人类免疫缺陷症病毒 (HIV- 1 ) DNA疫苗共同免疫的效果以及机体对 DNA免疫产生应答后趋化因子水平的变化。　　分别对小鼠和黑猩猩注射 5 0 μg和 5 0 0 μg表达 HIV- 1 env蛋白和 gag/pol蛋白的重组质粒 ,同时注射表达 IL- 8、VIP- 1 0、MIP- 1 α、MCP- 1…     

基于Vif-APOBEC3G相互作用的抗HIV-1药物研究

载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G（apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalyticpolypeptidelike3G,APOBEC3G或A3G）是人体天然抗病毒分子,可以使病毒逆转录形成的cDNA的胞嘧啶（C）脱氨为尿嘧啶（U）,产生鸟嘌呤（G）→腺嘌呤（A）超突变,导致病毒转录产物突变,从而达到抑制病毒复制的作用。HIV-1的辅助蛋白Vif,可与APOBEC3G相互作用并导致其被降解,使得这一天然抗病毒机制失效,进而增强了HIV的感染力。Vif与APOBEC3G这种相互作用为抗HIV药物提供了新靶点。针对Vif-APOBEC3G相互作用的抗HIV抑制剂已经成为研究热点。本文综述了Vif和APOBEC3G的结构、二者的相互作用,以及基于这一相互作用的抗HIV-1抑制剂研究进展。     

新的HIV DNA候选疫苗通过Ⅰ期临床试验

最近已证明两种新的HIV DNA疫苗在健康成年人中具有安全性和良好的耐受性。第一种疫苗是表达A、B和C亚型HIV-1 Env蛋白和B亚型HIV-1融合蛋白（Gag—Pol—Nef）的混合质粒。第二种疫苗是利用重组腺病毒（rAd5）来传递上述HIV抗原。     

对HIV-1 env DNA疫苗免疫应答的遗传学控制

含有编码1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)env蛋白的HIV-1特异性DNA疫苗可诱导强的体液和细胞介导免疫应答。作者用不同品系的小鼠研究了HIV-1特异性DNA疫苗诱导抗体产生及迟发型超敏反应(DTH)的遗传学控制。