大鼠脑内白细胞介素-1Ⅰ型受体在致痫活动中的表达变化

为了探讨白细胞介素 -1I型受体 ( IL-1RI)在癫痫发病中的作用 ,本实验采用免疫组织化学方法观察了致痫大鼠行为改变与脑内 IL-1RI表达变化。结果发现 ,侧脑室注射白细胞介素 -1β( IL-1β)后再注射阈下剂量谷氨酸钠 ,可导致动物痫样发作 ,其大脑皮质及海马锥体细胞层 IL -1RI免疫反应阳性细胞数量较对照组明显增多 ,免疫反应增强 ;如先注射白细胞介素 1受体拮抗剂 ( IL-1ra)、再注射 IL-1β和阈下剂量谷氨酸钠 ,则动物无痫样发作 ,且大脑皮质及海马锥体细胞层 IL-1RI免疫反应阳性细胞数量较注射 IL -1β和阈下剂量谷氨酸钠组减少 ,免疫反应着色减弱。结果提示 ,IL -1β有明显促进谷氨酸钠致痫的作用 ,IL-1RI可能参与致痫过程 ,IL-1ra具有抗痫效应。     

IL-1β对谷氨酸致痫大鼠大脑皮质、海马内NMDAR_1免疫反应变化的影响

为了进一步探讨 IL -1β在促进癫痫发作中的机制 ,用免疫组织化学方法比较了单纯用致痫量谷氨酸钠致痫的大鼠和预先向侧脑室注射 IL-1β再用阈下剂量的谷氨酸钠共同致痫的大鼠脑内 NMDAR1 免疫反应的变化。结果表明 ,IL-1β和谷氨酸钠共同致痫的大鼠大脑皮质及海马 CA3区 NMDAR1 免疫反应较对照组明显增强 (P<0 .0 5 ) ,与单纯用谷氨酸钠致痫的大鼠没有明显区别。如果预先给予 IL-1ra或 D-AP5则 IL-1β和谷氨酸钠的共同致痫效果不出现 ,脑内 NMDAR1 免疫反应与对照组比较未见明显增强 (P>0 .0 5 )。本实验结果表明 ,IL -1β具有促进癫痫发作的效应 ,这种促癫痫效应的发挥与谷氨酸受体具有协同作用 ,并与通道型 NMDA受体 R1 亚单位表达的增加有关     

谷氨酸和白细胞介素-1β致痫大鼠海马PKAcβ、PKCα的免疫反应变化

目的：研究谷氨酸和白细胞介素-1β(IL-1β)致痫大鼠海马PKAcβ、PKCα的免疫反应变化。方法：大鼠于脑立体定位仪上行侧脑室注射,A组为生理盐水对照组;B组注射阈下致痫量的L-谷氨酸钠;C组注射致痫剂量的L-谷氮酸钠;D组单纯注射IL-1β;E组联合注射IL-1β和阈下致痫量的L-谷氨酸钠。注射完毕1h后用SABC法显示5组大鼠海马的PKAcβ、PKCα的免疫反应变化。结果：C、D、E3组大鼠均有明显的痫性发作,且海马PKAcβ、PKCα的免疫反应均明显强于A组。结论：在谷氨酸和IL-1β的致痫活动中,PKAcβ、PKCα参与了其细胞内信号转导过程。     

白细胞介素1β致痫对脑内Gas蛋白和cAMP含量变化的影响

目的探讨白细胞介素1β(IL-1β)致痫或促痫的细胞内信号转导机制。方法动物行为学观察、免疫细胞化学方法和放射免疫分析法。结果行为学观察表明：IL-1β组大鼠有轻至中度癫痫发作,IL-1β和谷氨酸(Glu)联合注射组有中至重度癫痫发作,IL-1受体拮抗剂(IL-1ra)预处理可减轻或抑制癫痫发作。IL-1β致痫或促痫时,大脑皮质和海马神经元Gas蛋白免疫反应明显增强,海马组织cAMP含量明显增高,IL-1ra预处理,则可抑制cAMP的升高。结论IL-1β可能有致痫和促进Glu致痫作用,IL-1ra可抑制此作用。IL-1β致痫或促痫的细胞内信号转导机制在海马区与Gas蛋白介导的AC-cAMP途径可能有密切关系。     

谷氨酸钠致痫大鼠海马mGluR5的表达变化

本研究目的为探讨谷氨酸钠(GluNa)诱导大鼠癫痫发作时海马mGluR5的表达变化。将动物随机分为正常对照组、Glu—Na致痫组及D—AP-5(非竞争性：NMDA受体拮抗剂) GluNa组。通过免疫组织化学方法观察了多克隆抗体抗mGluR5在海马各区及齿状回的免疫反应阳性细胞的变化，同时观察并记录各组大鼠的行为变化。结果证明：GluNa注射后的大鼠均出现严重的癫痫发作。正常组大鼠海马中有丰富的mGluR5表达，以齿状回颗粒细胞层和CA1锥体细胞层的表达为最高，而GluNa致痫组海马各区mGluR5表达明显下调。D—AP-5 GluNa组海马各区mGluR5表达较之GluNa致痫组又上调。同时观察到三个组的mGluR5的表达主要集中在细胞膜上。结果提示mGluR5在癫痫发作后表达下降可能在癫痫诱导过程中具有重要作用，其作用机制可能为NMDA受体依赖性的。     

白细胞介素-1β或白细胞介素-6致痫大鼠脑内γ-氨基丁酸和谷氨酸免疫反应性的变化

目的研究白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-6（IL-6）致痫过程中谷氨酸（Glu）和γ-氨基丁酸（GABA）在大脑皮质及海马内表达的变化,探讨IL-1β及IL-6在癫痫发病中的作用机制。方法大鼠随机分为生理盐水对照组、IL-1β组、IL-6组,侧脑室注射相应试剂120min后观察大鼠行为变化,并采用免疫组织化学方法检测大脑皮质及海马内Glu及GABA的表达变化。结果动物行为学观察,生理盐水对照组无明显癫痫发作,IL-1β组、IL-6组发作程度达中度。免疫组织化学染色显示,在注射IL-1β或IL-6 120min后,IL-1β、IL-6组Glu表达在大脑皮质及海马较对照组明显升高,GABA表达较对照组明显降低,差异显著。结论IL-1β或IL-6可能通过升高Glu含量并降低γ-氨基丁酸的含量参与促痫和致痫过程,从而使神经元兴奋性升高促进癫痫发作。     

白细胞介素-1β对谷氨酸钠致痫大鼠海马Gs蛋白表达的影响

目的 探讨白细胞介素-1β(Interleukin-1,IL-1β)在谷氨酸钠致痫大鼠中对海马兴奋性G-蛋白α亚基(stimulated G-protein α subunit,Gsα)蛋白表达的影响,为阐明IL-1β在致痫中的作用机制提供线索。方法 免疫组织化学方法结合行为观察(SD大鼠随机分为对照组、GluNa组、IL-1β GluNa组、rhIL-1ra IL1β GluNa组和D-AP-5 IL-1β GluNa组)。结果 行为观察显示,IL-1β GluNa组大鼠痫性发作潜伏期(平均2min)较其他组(平均6min)明显缩短,且发作程度(Ⅲ～Ⅳ级)较其他组(Ⅰ～Ⅲ级)严重;对照组无痫性发作。免疫组织化学染色显示,Gsα蛋白在海马各区均有表达,IL-1β GluNa组大鼠在齿状回、CAl区和CA3区Gsa表达较其他组明显增强。结论 IL-1β参与致痫,且在谷氨酸致痫中可能通过Gs蛋白介导发挥作用。     

谷氨酸钠致痫大鼠海马mGluR_5的表达变化

本研究目的为探讨谷氨酸钠 (Glu Na)诱导大鼠癫痫发作时海马 m Glu R5的表达变化。将动物随机分为正常对照组、Glu-Na致痫组及 D-AP-5 (非竞争性 NMDA受体拮抗剂 ) + Glu Na组。通过免疫组织化学方法观察了多克隆抗体抗 m Glu R5在海马各区及齿状回的免疫反应阳性细胞的变化 ,同时观察并记录各组大鼠的行为变化。结果证明 :Glu Na注射后的大鼠均出现严重的癫痫发作。正常组大鼠海马中有丰富的 m Glu R5表达 ,以齿状回颗粒细胞层和 CA1 锥体细胞层的表达为最高 ,而 Glu Na致痫组海马各区 m Glu R5表达明显下调。D-AP-5 + Glu Na组海马各区 m Glu R5表达较之 Glu Na致痫组又上调。同时观察到三个组的m Glu R5的表达主要集中在细胞膜上。结果提示 m Glu R5在癫痫发作后表达下降可能在癫痫诱导过程中具有重要作用 ,其作用机制可能为 NMDA受体依赖性的     

NMDA受体1和雌激素受体在白细胞介素-2致痫大鼠脑内的表达变化和共存

目的 探讨白细胞介素2(IL-2)致痫与NMDA受体(NMDAR)和雌激素受体(ER)的关系.方法 应用免疫组织化学、免疫荧光双标和激光共焦显微镜技术研究IL-2致痫大鼠及经免疫抑制剂预处理后再致痫大鼠脑内NMDAR-1、ER的表达变化以及NMDAR/ER和NMDAR/IL-2R共存情况.结果 大鼠侧脑室注射IL-2以后,动物出现明显的癫痫发作,其大脑皮质和海马部位NMDAR-1及ER表达较对照组明显增多,免疫反应平均吸光度(A)值与对照组相比有极显著性差异;而用IL-2抑制剂环胞霉素(CsA)或糖皮质激素(G)预处理后再注射IL-2,动物未出现或仅出现轻微的癫痫发作,其NMDAR-1和ER表达较IL-2组明显减少(P＜0.05).研究还观察到大鼠脑内大脑皮质和海马部位NMDAR/ER或NMDAR/IL-2R之间存在着广泛共存.结论 IL-2有致痫作用,NMDAR-1、IL-2R和ER在致痫活动中可能存在协同和互动作用.     

癫痫大鼠海马和大脑皮质糖皮质激素受体变化的观察

为了探讨糖皮质激素受体（ＧＲ）与癫痫发病机制间的关系，本研究应用免疫细胞化学ＰＡＰ法显示马桑内酯致痫大鼠海马和大脑皮质内ＧＲ的变化，并用显微图像分析仪进行检测分析。结果显示：ＧＲ主要表达在海马回的锥体细胞层、齿状回颗粒细胞层及大脑皮质各层，特别是Ⅳ、Ⅴ层。ＧＲ免疫反应主要定位于细胞核内，胞浆内有较弱的免疫反应。图像分析及统计学处理表明：癫痫大鼠海马回、齿状回、大脑皮质含ＧＲ免疫反应阳性细胞数目、平均总面积、平均光密度均明显低于对照鼠，有极显著性差异。结果提示：ＧＲ的减少可能与癫痫的发病机制有密切关系     

体内和体外实验中马桑内酯对大鼠大脑皮质神经元白细胞介素…

为了探讨免疫调质与癫痫发病机制的关系，本文应用免疫细胞化学ＰＡＰ法对体内和体外实验中马桑内酯（致痫剂）对大鼠大脑皮质神经元白细胞介素－２受体表达的影响进行了研究。在体内实验中，对照组大鼠大脑皮质仅见少量弱阳性白细胞介素－２受体免疫反应神经元，其免疫反应性定位于神经元膜上。大鼠一侧侧脑室注射马桑内酯诱发癫痫后，大脑皮质白细胞介素－２受体阳性神经元明显增多，免疫反应增强。在体外实验中，用马桑内酯温育培     

体内和体外实验中马桑内酯对大鼠大脑皮质神经元白细胞介素-2受体表达的影响

为了探讨免疫调质与癫痫发病机制的关系，本文应用免疫细胞化学PAP法对体内和体外实验中马桑内酯（致痫剂）对大鼠大脑皮质种经元白细胞介素-2受体表达的影响进行了研究．在体内实验中，对照经大鼠大脑皮质仅见少量弱阳性白细胞介素-2受体免疫反应神经元，其免疫反应性定位于种经元膜上．大鼠一侧侧脑室注射马桑内酯诱发癫痫后，大脑皮质白细胞介素-2受体阳性神经元明显增多，免疫反应增强．在体外实验中，用马桑内酯温育培养大双皮质神经元24h，其白细胞介素2受体阳性神经元也比对照组增加了1．5倍，免疫染色加深．本实验结果提示，大脑皮质神经元上的白细胞介素-2受体可能参与癫痫的病理机制．     

糖皮质激素治疗癫癎的机制及其与白细胞介素-2受体关系探讨

目的 :研究糖皮质激素治疗癫的机制及其与白细胞介素 2受体 (IL 2R)的关系。方法 :用腹腔注射美解眠制作大鼠癫模型 ,致前后分组分别给予地塞米松 ,观察大鼠出现癫发作的潜伏期及持续时间 ,并用脑电图仪和免疫细胞化学方法研究地塞米松对癫大鼠脑电图和皮层及海马区IL 2Rβ免疫反应阳性细胞的影响。 结果 :对照组无癫发作。致前给予地塞米松组大鼠较癫组大鼠癫发作潜伏期延长 (12 .2 5± 1.6 3对 3.85± 0 .81min) ,持续时间缩短 (9.6 8± 3.16对 14 .98±2 .18min) (P <0 .0 1) ,脑电图高电位样波发放减少 ,顶区皮层和海马IL 2Rβ免疫反应阳性细胞数减少 (5 .31± 1.11对 12 .84± 1.5 3,2 .80± 0 .76对 6 .79± 1.14个 ) (P <0 .0 1)。致后给予地塞米松组 ,上述指标与癫组相比 ,差异无显著意义 (13.86± 2 .31对 12 .84± 1.5 3,5 .89± 0 .95对 6 .79± 1.14个 )(P >0 .0 5 )。结论 :糖皮质激素抑制癫发作与其快速膜效应及通过IL 2对免疫 神经 内分泌网络的调节有关。     

人工牛黄对实验性惊厥大鼠脑内海马及门区神经元丢失的抑制和GAD免疫反应阳性细胞的保护作用研究

目的:研究人工牛黄对致痫大鼠行为的影响，海马及门区神经元丢失情况和谷氨酸脱羧酶(GAD)免疫反应阳性细胞数目的改变，探讨该药的抗惊厥作用。 方法: 采用戊四唑急性惊厥模型，参照Racine标准观察行为学表现，用Nissl染色作海马及门区神经元计数，用免疫组织化学方法作GAD免疫反应阳性细胞计数。 结果: 牛黄防治组惊厥发作的潜伏时间较对照组长，发作次数较惊厥组少，而在海马及门区的神经元和在海马的GAD阳性细胞的丢失数量较惊厥组的少。 结论:人工牛黄能延长惊厥发作的潜伏期，减少发作次数，减轻神经元丢失和保护GAD免疫反应阳性细胞。     

IL-1β对谷氨酸钠致痫大鼠海马代谢型谷氨酸受体5的表达的影响

目的：探讨IL-1β对谷氨酸钠(GluNa)致痫大鼠海马代谢型谷氨酸受体(mGluR)5的表达变化的影响。方法：把大鼠随机分为生理盐水组、GluNa组、IL-1β GluNa组、人重组IL-1受体拮抗剂(rhIL-1ra) IL-1β GluNa组及D-AP-5(非竞争性NMDA受体拮抗剂) IL-1β GluNa,利用免疫组织化学并结合图像分析进行研究。结果：Glu-Na注射后的大鼠均出现严重癫痫发作。mGluR5表达在生理盐水组大鼠海马中丰富,GluNa致痫组则明显下调,IL-1β GluNa组比GluNa组明显下调,rhIL-1ra IL-1β GluNa组和D-AP-5 IL-1β GluNa组比IL-1β十GluNa组明显增加。同时观察到3个组的mGluR5的表达主要集中在细胞膜上。结论：mGluR5在癫痫发作后表达下降可能在癫痫诱导过程方面具有重要作用,其与IL-1β受体之间可能存在相互作用。     

海马内微量注射硫酸镁对马桑内酯诱发大鼠痫样放电的影响

目的和方法:采用皮层应用或海马内注射马桑内酯的方法致痫大鼠,用钙离子选择性微电极检测了致痫动物皮层、海马细胞外Ca2+浓度的变化,观察了海马CA2区注射硫酸镁对致痫大鼠脑电图和皮层、海马诱发电位的影响.结果:马桑内酯致痫时,皮层、海马细胞外Ca2+浓度分别降低了0.61 mmol·L-1和0.74 mmol·L-1,海马内注射硫酸镁能明显地抑制致痫动物皮层、海马诱发电位和脑电图痫样放电.结论: 镁盐的上述作用可能与抑制Ca2+流入神经元内有关.     

癫痫大鼠海马和大服皮质糖皮质激素受体变化的观察

为了探讨糖皮质激素受体（ＧＲ）与癫痫发病机制间的关系，本研究免疫细胞化学ＰＡＰ法显示马桑内酯致痫大鼠海马和大脑皮质内ＧＲ的变化，并用显微图像分析仪进行检测分析，结果显示：ＧＲ主要表达在海马回的锥体细胞层、龋状回颗粒细胞及层大脑皮质各层、特别是Ⅳ、Ⅴ层。ＧＲ免疫反庆主要定位于细胞核内，胞浆内有较弱的免疫反应，图像分析及统计学处理表明，癫痫大鼠海在、齿状回、大脑皮持含ＧＲ免疫反庆阳性细胞数目，平均总面     

rhIL-1β、rhIL-2和rhIL-6对体外培养海马神经胶质细胞c-fos表达的影响

采用免疫组织化学方法观察了重组人白细胞介素-1β、重组人白细胞介素-2和重组人白细胞介素-6对体外培养大鼠海马神经胶质细胞c-fos表达的影响。结果证明，培养12d的海马神经胶质细胞与重组人白细胞介素-1β（100U／ml）、重组人白细胞介素-2（200U／ml）和重组人白细胞介素-（200U／ml）一起孵育2h后出现FOS-免疫反应阳性的细胞核，随着所给剂量的逐渐加大，FOS反应阳性胞核数量也逐渐增多．图象分析的结果显示，FOS反应阳性胞核的平均光密度亦随剂量的逐渐加大而逐渐增加．本研究的结果提示：重组人白细胞介素-1β、-2及-6均能诱导体外培养大鼠海马神经胶质细胞c-fos的表达。说明三者对体外培养的海马神经胶质细胞具有生物学作用。推测c－fos表达可能是这些细胞因子发挥生物效应的重要中间途径。     

免疫抑制剂对IL-2致痫大鼠大脑皮质内一氧化氮合酶表达的影响

为探讨免疫抑制剂对致痫大鼠大脑皮质内一氧化氮合酶(NOS)表达的影响,本实验采用Western blot法和图像分析技术观察了经免疫抑制剂预处理后致痫大鼠行为的改变与大脑皮质内NOS表达的变化。结果发现:(1)侧脑室注射白细胞介素-2(IL-2)可引起大鼠明显癫痫发作症状,可使大脑皮质内NOS表达较生理盐水对照组明显升高(P<0.05);(2)环胞素-A(cyclos-porine,CsA)预处理可减轻癫痫发作程度,并使NOS表达明显下降(P<0.05);(3)糖皮质激素(glucocorticoids,GC)注射组大鼠呈抑制状态,且其皮质内NOS表达较生理盐水组显著下降(P<0.05)。结果提示,IL-2具有致痫效应和促进NOS表达的作用,免疫抑制剂具有明显的抑制NOS表达的作用和抗痫效应。     

rhIL—1β,rhIL—2和rhIL—6对体外培养海马神经胶质细胞c—fos表 …

采用免疫组织化学方法观察了重组人白细胞介素－１β、重组人白细胞介素－２和重组人白细胞介素－６对体外培养大鼠海马神经胶质细胞ｃ－ｆｏｓ表达的影响。结果证明，培养１２ｄ的海马神经胶质细胞与重组人白细胞介素－１β（１００Ｕ／ｍｌ）、重组人白细胞介素－２（２００Ｕ／ｍｌ）和重组人白细胞介素－６（２００Ｕ／ｍｌ）一起孵育２ｈ后出现ＦＯＳ－免疫反应阳性的细胞核，随着所给剂量的逐渐加大，ＦＯＳ反应阳性胞核数量也