人喉鳞状细胞癌中PTEN、PCNA的表达及临床意义

目的　研究抑癌基因PTEN(phosphotaseandtensionhomologdeletedfromchromsome 10 )、增殖细胞核抗原PCNA(proliferatingcellnuclearantigen)在人喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义。 方法　应用免疫组化S -P法检测 10例正常喉组织 ,2 0例癌旁组织和 6 0例喉鳞状细胞癌中抑癌基因PTEN ,增殖细胞核抗原PCNA的表达。结果　 10例正常喉组织和 2 0例癌旁组织均有较强的PTEN蛋白的表达 ,15 % (9/ 6 0 )的喉癌呈PTEN蛋白阴性 ,31.7% (19/ 6 0 )的喉癌呈PTEN蛋白弱阳性 ,5 3.3% (32 / 6 0 )的喉癌呈PTEN蛋白阳性或强阳性 ;PTEN阴性喉癌颈部淋巴结转移率为 77.8% (7/ 9) ;PTEN阳性喉癌颈部淋巴结转移率为 33.3% (17/ 5 1) ,两者之间差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。 83.3% (5 0 / 6 0 )的喉癌呈PCNA阳性表达 ,显著高于正常及癌旁组织 (P <0 .0 1)。晚期、低分化、伴颈部淋巴结转移的喉癌组织中PCNA阳性表达率显著高于早期、高分化、无颈部淋巴结转移的喉癌组织(P <0 .0 1)。结论　抑癌基因PTEN的表达异常可能与喉鳞状细胞癌的发生、发展有关 ;PCNA在喉癌中的表达与其分级、临床分期、淋巴结转移密切相关 ,PCNA可作为喉癌进展的重要参考指标。     

喉癌组织ICE基因蛋白表达与喉癌临床的相关性研究

目的 :探讨喉癌组织白细胞介素 1β转换酶 (ICE)基因蛋白表达与喉癌发生、发展的关系。 方法 :采用免疫组化SP法测定 5例正常人声带组织、30例癌旁鳞状上皮不典型增生组织和 73例喉癌组织标本中ICE基因蛋白表达。结果 :ICE主要表达于正常人喉上皮棘层及角化层细胞胞膜 ,基底层细胞呈阴性或弱阳性表达 ,随着正常喉上皮向不典型增生转变 ,其ICE蛋白表达明显减少。喉癌组织中ICE基因蛋白表达与癌细胞分化程度有关 ,细胞分化程度越好ICE表达越强 (P <0 .0 5 )。结论 :ICE蛋白分布形式和数量变化与喉不典型增生有关 ,ICE的表达与喉癌的预后有一定的关系 ,可作为喉癌预后的一个监测指标     

抑癌基因PTEN在喉鳞状细胞癌和转移淋巴结中的表达

目的研究抑癌基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)在喉鳞状细胞癌、癌旁安全缘、声带息肉、转移淋巴结和无转移淋巴结中的表达,探讨其在喉鳞状细胞癌发生、发展和转移中的作用和意义,探讨喉鳞状细胞癌和转移淋巴结在分子水平的差异.方法采用免疫组织化学SP法检测了57例喉鳞状细胞癌患者的病理标本,随机抽取的27例癌旁安全切缘、22例声带息肉与57例标本中18例淋巴结转移阳性的喉状细胞鳞癌、转移淋巴结、无转移淋巴结中PTEN的表达进行检测和统计分析.结果PTEN在喉鳞状细胞癌、癌旁安全缘和声带息肉中的阳性率分别为89.5%(51/57)、88.9%(24/27)和95.5%(21/22),三者之间无显著性差异(P＞0.05),但喉鳞状细胞癌、癌旁安全缘中PTEN的阳性表达程度较声带息肉中为低,有显著性差异(P＜0.01);PTEN的阳性表达在不同性别、年龄、发病部位、分化、T分期、临床分期、淋巴结转移组间未见显著性差异(P＞0.05).无转移淋巴结中均未见PTEN的表达,18例转移淋巴结阳性患者喉鳞状细胞癌和转移淋巴结中PTEN的阳性率均为94.4%(17/18),但转移淋巴结中PTEN的表达强度较喉鳞状细胞癌高,差异有显著性(P＜0.05).结论在喉鳞状细胞癌发生的过程中,PTEN可能发生部分变异,属喉鳞状细胞癌癌变的早期分子事件,但与喉鳞状细胞癌的进展无关.喉鳞状细胞癌与转移淋巴结在分子水平存在差异.     

Survivin与PTEN在喉部鳞状细胞癌变中的表达关系初探

目的:研究声带息肉、成人型喉乳头状瘤和喉鳞状细胞癌3种疾病中Survivin和PTEN的表达特点,以了解喉鳞状细胞从增生到癌变的可能机制。方法:选取符合临床与病理诊断的声带息肉患者18例、成人型喉乳头状瘤患者10例和喉鳞状细胞癌患者18例,将每个患者的病理蜡块标本各连续切片2张,分别进行Sur-vivin和PTEN免疫组织化学检测。比较致癌基因Survivin和抑癌基因PTEN在这3种疾病同一区域鳞状上皮细胞中的表达差异。结果:声带息肉的Survivin和PTEN阳性率均显著低于喉乳头状瘤和喉鳞状细胞癌(P<0.05),而喉乳头状瘤的Survivin和PTEN阳性率均低于喉鳞状细胞癌,但均没有显著性差异(P>0.05),Sur-vivin和PTEN形成近似声带息肉<成人型喉乳头状瘤<喉鳞状细胞癌的表达趋势。在声带息肉、喉乳头状瘤及喉鳞状细胞癌3种疾病中,PTEN的阳性率均显著低于Survivin(P<0.05)。结论:Survivin和PTEN在喉良性增生性疾病的鳞状细胞中部分表达,而在良性和恶性肿瘤中过度表达,体现出随恶性程度增加而逐渐升高的表达趋势,Survivin和PTEN虽然功能相反,但作用机制不同,非对立消长关系,PTEN体现出一定的竞争表达特点,并从属于Survivin的表达,两者的统一部分决定了喉鳞状细胞的恶变程度。     

抑癌基因p15、Rb在喉鳞状细胞癌中表达的研究

目的 :研究抑癌基因p15、Rb蛋白表达对喉鳞状细胞癌诊断、治疗及预后判断的意义。方法 :用免疫组化SABC法检测喉癌组 45例石蜡标本与对照组 15例喉部正常或增生的黏膜上皮标本的 p15、Rb蛋白表达情况。结果 :喉鳞状细胞癌组p15蛋白阳性率 (48.9%)与对照组阳性率 (10 0 .0 %)比较 ,差异有极显著性意义 (P<0 .0 1) ;喉癌组中 0～Ⅱ期 p15蛋白阳性率 (6 6 .7%)与Ⅲ～Ⅳ期阳性率 (33.3%)比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;喉癌组Rb蛋白阳性率 (88.9%)与对照组阳性率 (93.3%)比较 ,差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;2× 2列联表 χ2 检验 ,p15、Rb蛋白表达无相关性 (P >0 .0 5 ) ;对照组中 ,p15蛋白的表达以鳞状上皮组织中远离基膜的棘层细胞、颗粒层细胞明显 ,而Rb蛋白的表达则以基底层细胞及近侧棘层细胞明显。结论 :抑癌基因 p15的表达缺失对喉鳞状细胞癌的发生、发展有一定的作用 ,p15蛋白的检测对喉鳞状细胞癌的治疗及估计预后有指导意义 ;喉鳞状细胞癌组织中 p15、Rb的蛋白表达无相关性 ;正常及增生的喉部鳞状上皮的细胞层次间 ,p15、Rb蛋白表达不一致 ,p15蛋白表达对细胞增殖有抑制作用。     

抑癌基因PTEN在喉癌中的表达及临床意义

目的：研究抑癌基因PTEN在喉癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学SP法,检测PTEN在68例喉鳞状细胞癌组织（喉癌组）及33例癌旁正常黏膜组织（对照组）中的表达。结果：①喉癌组PTEN蛋白阳性表达率为61．8％（42／68）,对照组为100．0％（33／33）,喉癌组PTEN蛋白阳性表达率显著低于对照组（P＜0．01）。②PTEN蛋白阳性表达与喉癌临床病理特征的关系：高、中分化组与低分化组之间PTEN蛋白阳性表达率比较（79．3％：48．7％）差异有统计学意义（P〈0．01）;淋巴结转移者PTEN蛋白阳性表达率（55．0％）显著低于无淋巴转移者（71．4％）（P＜0．05）;根据临床病理分期,Ⅰ加Ⅱ期与Ⅲ加Ⅳ期之间PTEN蛋白阳性表达率（76．0％：53．5％）差异有统计学意义（P＜0．05）;随临床分期增加、喉癌分化程度降低及淋巴结的转移,PTEN蛋白阳性表达率逐渐降低。另外,PTEN蛋白阳性表达与患者年龄、性别、肿瘤组织大小及部位无关（P〉0．05）。结论：抑癌基因PTEN在喉癌的发生及发展中起重要作用,对其蛋白的检测可作为判定喉癌发生及侵袭转移能力的一项客观指标。     

喉鳞状细胞癌中细胞周期素E的表达及临床意义

目的：探讨细胞周期素E（cyclin E）在喉鳞状细胞癌的表达及临床病理学意义。方法：采用免疫组织化学技术检测10例声带息肉、20例不典型增生病变和50例喉鳞状细胞癌组织中cyclinE的表达。结果：cyclin E阳性表达定位于细胞核,cyclin E在喉癌细胞的阳性表达率为6％（3／50）,同声带息肉组10％（1／10）,不典型增生组15％（3／20）比较,差异无统计学意义（P〉0．05）,但cyclin E在喉癌间质血管内皮细胞阳性表达意义显著,同临床分期及淋巴结是否转移相关（均P〈0．01）。结论：cyclin E在喉癌组织呈非特异性表达,或许并不参与喉癌细胞的恶性转化事件,但cyclin E对于间质中血管增生相对敏感,参与血管内皮细胞分裂增殖,其阳性高表达或可用来间接评估喉癌的恶性进程。     

利用组织芯片探讨PTEN在喉鳞状细胞癌中的表达

目的:探讨PTEN在喉癌中的表达以及与病理学分级、临床TNM分期和预后等因素的关系。方法:应用组织芯片技术结合免疫组织化学、原位杂交的方法对146例喉鳞状细胞癌、40例癌前期病变以及26例声带息肉患者组织中PTENmRNA以及蛋白的表达,结合临床相关因素进行统计分析。结果:PTEN蛋白在声带息肉中无表达,癌前期病变以及喉癌组织的阳性表达率分别为40.00%、43.15%。在喉癌组织中的表达与喉癌的病理分级以及预后差异有统计学意义,与发生部位、临床分期、淋巴结转移差异无统计学意义。PTEN在癌前期病变及喉癌组织的原位杂交阳性表达率分别为77.50%与59.59%。PTEN在癌前期病变以及喉癌组织的原位杂交阳性表达率高于免疫组织化学的蛋白阳性表达率。结论:组织微阵列是一种高效率的实验方法,具有快速、高精确度、节约资源的特点。PTEN的表达与喉癌的预后有关。     

MIF、GSK-3β在喉鳞状细胞癌中表达的临床意义及相关性研究

目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)及糖原合成激酶-3(GSK-3β)在喉鳞状细胞癌中表达的临床意义及相关性。 方法 采用免疫组化法检验30例喉癌患者癌组织及相应癌旁组织中MIF、GSK-3β的表达情况,并以10例非喉鳞状细胞癌患者喉部正常黏膜组织作对照;分析喉组织中MIF、GSK-3β表达与患者临床病理因素之间的关系,探讨喉鳞状细胞癌中MIF与GSK-3β表达的相关性。 结果 喉癌组织中、癌旁组织及喉正常喉黏膜中MIF表达率分别为73.33%,40.00%,20.00%,喉癌组织中、癌旁组织及喉正常喉黏膜中GSK-3β阳性表达率分别为70.00%,13.33%,20.00%;MIF、GSK-3β在喉癌中表达与肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移均相关(P<0.05);与患者年龄、性别、吸烟史和饮酒史均无相关性(P>0.05)。MIF、GSK-3β在喉癌中的表达具有相关性(r=0.592,P=0.003)。 结论 喉鳞状细胞癌中MIF、GSK-3β的高表达可促进喉癌的发生及发展,MIF、GSK-3β可作为喉癌的潜在的组织生物标志物和喉癌患者疾病进展监控及预后观测的指标。     

增殖和凋亡基因在喉上皮良恶性病变中的检测及其意义

目的 :探讨增殖相关基因Ki 6 7和凋亡相关基因Bax、Bcl 2在喉上皮良、恶性疾病中的表达和临床意义。方法 :采用免疫组织化学SP法检测存档石蜡标本喉癌、不典型增生、喉乳头状瘤、声带息肉、喉正常粘膜组织中Ki 6 7和Bax、Bcl 2表达。结果 :Ki 6 7在以上组织中的表达率依次为 5 2 .0 %、5 0 .0 %、4 7.8%、4 1.7%、10 .0 % ,喉癌明显高于喉正常粘膜 4 4 .0 % (P <0 .0 5 ) ,不典型增生明显高于喉正常粘膜 (P <0 .0 5 )。Bcl 2的表达率在不典型增生为 11.0 % ,在喉癌中为 4 4 .0 % ,其余 3组为 0 %。喉癌表达明显高于不典型增生和正常粘膜(P <0 .0 5 ) ,极显著高于喉乳头状瘤和声带息肉 (均P <0 .0 1)。Bax在各组织中表达率依次为 76 .0 %、77.8%、6 9.6 %、5 8.3%、80 .0 % ,各组差异无显著性意义。在喉乳头状瘤中Ki 6 7、Bcl 2表达成正相关 (P <0 .0 5 )。结论 :Ki 6 7、Bcl 2在喉乳头状瘤中的协同表达提示细胞内无法控制的增殖 ;二者有可能是癌变的前提 ,在癌前病变中有一定的诊断价值     

联合检测喉癌及癌前病变中两种肿瘤相关蛋白的表达

目的联合检测喉癌及癌前病变中细胞S期激酶相关蛋白2 （S phase kinase associated protein 2, Skp2）、与细胞骨架蛋白tensin同源的10号染色体有缺失的磷酸脂酶（phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten, PTEN）蛋白表达，探讨它们的临床意义及相互关系。方法采用免疫组化方法检测skp2和FYEN蛋白在79例喉癌组织、16例声带不典型增生、14例成人喉乳头状瘤和27例声带息肉组织中的表达，分析它们在不同病变组织中的表达情况、相互之间及与喉癌临床病理指征的关系。采用Kaplan-Metier法计算生存率。结果在声带息肉、成人喉乳头状瘤、声带不典型增生和喉癌组织中skp2组间差蛋白的阳性率分别为11．11％、14．29％、37．50％、39．24％，表达强度各异有统计学意义（Hc=11．57，P〈0．01）。PTEN蛋白在各病变中的阳性率分别为100％、92．86％、75．00％、56．96％，表达强度各组间差异有统计学意义（Hc=62．86，P〈0．05）；在喉癌组织中skp2和PTEN蛋白的表达呈负相关关系，相关系数r=-0．4512，P〈0．01。skp2在喉癌中阳性表达的患者5年生存率为31．25％，低于阴性表达的患者85．71％，差异有统计学意义（χ^2=21．46，P=0．000）。结论skp2和PTEN蛋白表达与喉癌的发生、侵袭转移有关。在喉癌中Skp2蛋白高表达与PTEN蛋白的低表达呈负相关，提示抑癌基因PTEN可能参与skp2表达的调节。     

蛋白酪氨酸磷酸酶基因启动子过甲基化与喉癌的关系

目的：探讨蛋白酪氨酸磷酸酶（PTEN）基因启动子过甲基化与喉癌的关系。方法：采用过甲基化特异性PCR和RT-PCR法分析喉癌（喉癌组）及正常喉组织（对照组）PTEN基因启动子过甲基化及其mRNA表达情况。结果：喉癌组有16例（40．0％）PTEN基因启动子过甲基化;对照组未发现过甲基化。对照组PTEN基因mRNA的高、中、低表达率及阴性率分别为77．8％（7／9）、22．2％（2／9）、0和0,淋巴结转移组分别为26．7％（4／15）、33．3％（5／15）、26．7％（4／15）和13．3％（2／15）,两组比较,PTEN mRNA表达差异有统计学意义（P〈0．05）。病理高分化PTEN基因mRNA高、中、低表达率及阴性率分别为60．0％（6／10）、30．0％（3／10）、10．0％（1／10）和0,病理低分化mRNA分别为16．7％（2／12）、25．0％（3／12）、41．7％（5／12）和16．7％（2／12）,两者比较,其mRNA表达差异有统计学意义（P〈O．05）。PTEN基因在喉癌组织中,mRNA呈现低表达的10例中有7例（70．0％）出现启动子过甲基化,mRNA呈现高表达的17例中仅有4例（23．5％）出现启动子过甲基化;PTEN基因mRNA高表达与低表达在启动子过甲基化率的差异有统计学意义（P〈O．05）。结论：PTEN基因启动子过甲基化是该基因在喉癌中失活的原因之一,PTEN基因表达下降与喉癌淋巴结转移及病理低分化有关。     

p27基因在喉鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨喉鳞癌p27基因表达水平及其临床意义.方法用原位杂交方法检测49例喉鳞癌、19例声带息肉、12例癌旁增生组织及8例非典型增生组织中p27的表达.结果喉鳞癌组织p27阳性表达率12.24%(6/49),声带息肉63.16%(12/19),癌旁增生组织33.33%(4/12),非典型增生组织25.00%(2/8),喉鳞癌组织p27mRNA表达显著低于其他各组(P＜0.05),与临床分期有显著相关性(P＜0.05).结论喉鳞癌组织中存在p27基因的低表达,与喉癌临床分期显著相关.     

喉鳞状细胞癌中Survivin和PTEN基因的表达及临床意义

目的：探讨凋亡抑制基因Survivin和抑癌基因PTEN在喉鳞状细胞癌（LSCC）中的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学Envision法检测71例LSCC标本中Survivin、PTEN蛋白的表达，并以10例声带息肉组织为对照。结果：Survivin蛋白在声带息肉中不表达；在71例LSCC中，53例（74．6％）表达阳性；Survivin阳性表达率与LSCC患者的年龄、性别、肿瘤大小均无相关性（均P〉0．05），均与肿瘤发生部位、临床分期、病理分级、淋巴结转移、预后有关（均P〈0．05）。PTEN蛋白在声带息肉中强表达（100%）；在71例LSCC中，33例（46．5％）表达阳性；PTEN阳性表达率与LSCC患者的年龄、性别、肿瘤大小、发生部位均无相关性（均P〉0．05），均与临床分期、病理分级、淋巴结转移、预后有关（均P〈0．05）。在LSCC组织中Survivin与PTEN的表达呈负相关（P〈0．05）。结论：Survivin、PTEN基凼的异常表达与LSCC的发生、发展及预后有关，可作为评价LSCC生物学行为的重要参考指标。二者在LSCC的发生、发展中起协同作用。     

凋亡抑制蛋白Livin在喉癌中的表达和意义

目的研究凋亡抑制蛋白Livin在喉癌周黏膜、喉不典型增生和喉鳞状细胞癌(简称喉癌)组织中的表达以及与喉癌各临床因素的相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测10例喉癌周黏膜,12例喉不典型增生和61例喉癌中Livin蛋白的表达,分析其与喉癌发生、发展及预后的关系。结果Livin在喉癌中阳性表达率为67.21%(41/61);在喉不典型增生中为25% (3/12);在喉癌周黏膜中表达阴性。在喉癌组中Livin高表达与临床分期、T分期、病理分化程度呈显著相关(P<0.05);与年龄、部位、淋巴转移无显著相关(P>0.05),随访发现该蛋白的表达与患者5年生存率无显著相关(P>0.05)。结论凋亡抑制蛋白Livin在喉癌的发生、发展中起着重要作用,尚不能作为判断患者预后的一项指标,该基因有望成为喉癌基因治疗的一个新的有效的靶点。     

Notch1在喉癌组织中的表达及意义

目的探讨喉癌组织中Notch1蛋白的表达及与患者临床病理资料的关系和对预后的影响。方法采用免疫组化Envision二步法检测62例喉癌标本中Notch1的表达,同时选取1 5例不典型增生、10例声带白斑、l0例声带息肉标本作对照,结合患者临床病理资料分别进行分析。结果 62例喉癌组织中Notch1蛋白高表达率61.3%(38/62),低表达38.7%(24/62),其高表达率与不典型增生、声带白斑及声带息肉相比差异均有统计学意义(P<0.01),Notch 1高表达与T分级、临床分期及病理分级显著相关(P<0.0 5)。单因素分析Notch1高表达组总生存率较低表达组高(P<0.05),无瘤生存率两组差异无统计学意义(P>0.0 5),多因素分析复发、临床分期及Notch 1表达情况对生存率影响较大,复发、高分期患者和Notch1低表达组生存期短。结论 Notch 1在喉癌发生、发展中起重要作用,在评估喉癌预后方面有一定价值。     

喉癌手术切缘中Survivin和Caspase-3及p53的表达意义及相关性研究

目的:研究Survivin、Caspase-3及p53在喉鳞状细胞癌手术切缘中的表达意义及相关性.方法:116例患者术后按肿瘤复发情况分成4组,分别为:复发≤1年组,＞1～3年组,＞3～＜5年组,≥5年组(包括5年后无复发),应用免疫组织化学方法检测手术切缘Survivin、Caspase-3及p53的表达情况.结果:Survivin在4组中的表达分别为92.9%、85.0%、50.0%及21.1%(P＜0.01)Caspase-3在4组中的表达分别为50.0%、50.0%、66.7%及89.5%(P＜0.01);p53在4组中的表达分别为57.1%、37.5%、45.8%及18.4%(P＜0.05);Survivin、Caspase-3及p53在4组的表达均有统计学意义.结论:喉癌手术切缘中Survivin、Caspase-3及p53的表达在喉鳞状细胞癌的发生、发展中可能起重要作用,并对喉鳞状细胞癌的早期诊断和预后判断有意义.     

缺氧诱导因子1α和环氧化酶2在喉鳞癌组织中的表达及意义

目的 探讨喉鳞癌组织中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)和环氧化酶2(cyclooxygenage-2,COX-2)的表达情况及其与患者临床病理资料的关系和对预后的影响.方法 免疫组化Envision二步法检测60例喉鳞癌标本中HIF-1α和COX-2蛋白的表达,15例不典型增生、10例声带白斑、10例声带息肉标本作对照.结合喉鳞癌患者临床和病理资料进行分析.结果 60例喉鳞癌组织中HIF-1α呈高表达为35.0%(21/60),COX-2高表达为38.3%(23/60).两者阳性表达率与不典型增生、声带白斑及声带息肉组相比差异均具有统计学意义(Fisher确切概率法,P值均<0.01).喉鳞癌组织中HIF-1α和COX-2的表达结果 呈正相关(r=0.526,P<0.01).喉癌HIF-1α高、低表达组在临床分期(X2=4.331,P<0.05)及淋巴转移方面(Fisher确切概率法,P<0.05)组间差异具统计学意义;COX-2高、低表达组在T分期及临床分期方面组间差异具统计学意义(X2值分别为6.792和8.539,P值均<0.01).单因素分析HIF-1α高、低表达组间生存率及无瘤生存率差异均具统计学意义(X2值分别为6.003和5.010,P值均<0.05),COX-2高、低表达组生存率差异及无瘤生存率差异均具统计学意义(X2值分别为9.489和6.102,P值均<0.05).多因素分析提示复发及COX-2表达是影响喉癌患者预后的重要危险因素(相对危险度分别为7.104和5.714,P值均<0.01).结论 HIF-1α和COX-2在喉鳞癌发生、发展中起重要作用,两者可能有协同关系.COX-2表达及肿瘤复发情况可能作为评估喉鳞癌预后的重要危险因素.