罗格列酮对2型糖尿病并发非酒精性脂肪肝大鼠肝脏解偶联蛋白-2表达的影响

目的观察罗格列酮对2型糖尿病（T2DM）并发非酒精性脂肪肝（NAFLD）大鼠肝脏解偶联蛋白-2（UCP-2）表达的影响,探讨其防治T2DM并发NAFLD的部分作用机制。方法高脂高糖饮食结合小剂量链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立T2DM并发NAFLD大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组、罗格列酮治疗组,每组各16只,并设立正常对照组。治疗组给予罗格列酮3 mg/（kg.d）灌胃治疗。于实验第16（治疗后8周）、20周（治疗后12周）末分批处死大鼠,检测肝功能、空腹血糖、血脂和血清胰岛素水平,光镜下观察大鼠肝脏组织学形态,分别以免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测肝组织UCP-2蛋白和UCP-2mRNA的表达情况。结果与正常组相比,模型组大鼠血清转氨酶、空腹血糖、血清胰岛素及血脂水平均明显升高,胰岛素敏感指数明显下降（P均〈0.01）,肝脏出现不同程度脂肪变性,肝组织UCP-2蛋白和UCP-2 mRNA表达增高,以20周末最为明显。在16周末（治疗后8周）和20周末（治疗后12周）,治疗组大鼠血清转氨酶、血糖、血清胰岛素及血脂水平均有改善,胰岛素敏感指数明显升高,肝细胞脂肪变性明显减轻,肝组织UCP-2蛋白和UCP-2 mRNA表达明显下降,与模型组比较差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论 T2DM并发NAFLD大鼠肝组织UCP-2表达增强,罗格列酮可以调控T2DM并发NAFLD大鼠肝脏UCP-2 mRNA和UCP-2蛋白的适度表达,这可能是其治疗T2DM并发NAFLD的分子机制之一。     

罗格列酮治疗非酒精性脂肪肝的实验研究

目的研究罗格列酮对非酒精性脂肪肝(NAFL)的作用,并探讨胰岛素抵抗(IR)与NAFL的关系。方法以喂食高脂饲料建立大鼠NAFL模型,将其随机分为罗格列酮治疗组和模型对照组,治疗4周后处死动物,观察肝脏组织学变化,并测定肝功能、FBG、FIns、血脂、瘦素、脂联素等指标。结果罗格列酮组与模型对照组相比,肝脂肪变性明显好转,肝功能明显改善,丙氨酸氨基转移酶为54±19U/L与101±24U/L,门冬氨酸氨基转移酶为151±37U/L与198±48U/L,碱性磷酸酶为87±16U/L与115±39U/L(P<0·01);脂联素水平显著上升,瘦素水平明显减低;胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)明显减低,分别为6·9±1·8和12·0±1·2(P<0·01);血清TG、TC、LDL-C水平显著降低(P<0·01)。结论IR在NAFL的发生发展过程中可能发挥重要作用,罗格列酮可有效逆转动物模型的NAFL。     

罗格列酮对非酒精性脂肪肝中白细胞介素18和caspase-1表达的影响

目的探讨罗格列酮对非酒精性脂肪肝（NAFL）肝组织中自细胞介素18（IL-18）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（caspase-1）表达的影响及其意义。方法24只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、罗格列酮干预的模型组。以高脂饲养建立NAFL的动物模型。采用免疫组织化学染色及逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测IL-18和caspase-1在NAFL肝组织中的表达。结果NAFL模型组中IL-18和caspase-1mRNA的表达水平与正常对照组比较明显升高（P＜0 .05），蛋白表达水平也有相同的变化趋势。罗格列酮治疗可部分逆转NAFL模型的IL-18和caspase-1表达增加。结论IL-18和caspase-1在大鼠NAFL模型肝组织中表达显著增高，提示促炎症性细胞因子在NAFL的发病中可能起重要的作用，罗格列酮可能通过抑制细胞因子表达而逆转NAFL的进展。     

大鼠非酒精性脂肪肝中UCP2的动态表达

目的探讨解偶联蛋-2(uncoupling protein-2,UCP2)在大鼠非酒精性脂肪肝发病机理中的作用.方法Wistar大鼠64只,随机分为高脂饮食诱导脂肪肝组和正常对照组,用免疫组织化学和Western blot技术检测肝组织中UCP2表达变化,生化检测大鼠血清甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FAA)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量.结果大鼠非酒精性脂肪形成过程中UCP2阳性细胞数和表达强度逐渐增加,血清TG、FAA和ALT含量较对照组增高,以高脂饮食喂养8、12周为著.结论随着非酒精性脂肪的形成和程度加重,UCP2表达逐渐增强,其介导的酶活性显著增高,启动脂质过氧化反应,促进脂肪肝的形成和发展.     

罗格列酮联合还原型谷胱甘肽对非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗作用的研究

目的研究罗格列酮联合还原型谷胱甘肽对非酒精性脂肪肝(NAFL)大鼠胰岛素抵抗状态及相关生化指标的影响。方法建立NAFL大鼠模型。设计正常组、模型组、罗格列酮组、罗格列酮联合还原型谷胱甘肽组,应用ELISA、免疫组化等方法检测血清和胰腺内胰岛素水平,同时检测血清各生化指标。结果模型组血清白蛋白、ALT、总胆固醇显著高于正常组(P0.01),甘油三酯、空腹血糖水平显著低于正常组(P0.01);罗格列酮对上述少数生化指标有改善作用,但与模型组相比无显著差异(P0.05);模型组血清和胰腺组织内胰岛素水平显著高于正常组(P0.01),而罗格列酮组血清和胰腺组织内胰岛素水平较模型组显著下降(P0.01);模型组血清胰岛素抵抗指数明显高于正常组(P0.01),罗格列酮单独或联合还原型谷胱甘肽组胰岛素抵抗指数明显下降(P0.01)。结论大多数NAFL大鼠肝功能指标出现异常,同时出现明显的胰岛素抵抗,罗格列酮可以不同程度改善部分生化指标,对其胰岛素抵抗状态具有显著改善作用,但罗格列酮和还原型谷胱甘肽没有显著的联合作用。     

罗格列酮联合双环醇治疗非酒精性脂肪肝临床观察

非酒精性脂肪肝（NAFLD）是一种常见的慢性肝脏疾病，随着肥胖症和糖尿病患者的不断增多，其发病率逐年上升且呈现出低龄化的趋势。我们采用罗格列酮联合双环醇治疗非酒精性脂肪肝，并与常规治疗方法进行比较。现将结果报道如下。     

罗格列酮对大鼠非酒精性脂肪性肝炎逆转机制的研究

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）激动剂罗格列酮对库普弗细胞中LPS诱导的IκB激酶-β（IKK-β）表达以及对NASH大鼠肝组织核因子-κB（NF-κB）活性和环氧合酶-2（COX-2）表达水平的影响及意义。方法 采用Ⅳ型胶原酶消化和密度梯度离心的方法分离纯化正常Wistar大鼠库普弗细胞,并应用LPS（1μg／ml）及不同浓度的罗格列酮（10 nmol／L和50 nmol／L）干预培养,收集细胞及培养上清液。体内实验：健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组,后者以高脂饲料（2％胆固醇＋10%猪油＋5％玉米油）喂养复制NASH大鼠动物模型,造模成功后,分别以1 mg·kg^-1·d^-1、4mg·kg^-1·d^-1剂量的罗格列酮和等容积等渗盐水灌胃,实验结束后采集大鼠血清和肝组织标本。RT-PCR检测库普弗中细胞IKK-β、肝组织中COX-2 mRNA的表达,Western blot和电泳迁移率改变分析（EMSA）分别检测库普弗细胞中IKK-β蛋白表达和肝组织NF-κB活性变化,ELISA检测细胞培养上清液及血清中TNFα水平。结果 LPS可显著增高体外培养库普弗细胞中IKK-βmRNA、蛋白的表达及上清液中TNFα水平。模型组大鼠肝组织COX-2 mRNA和蛋白的表达均较正常对照组增强,NF-κB活性与COX-2的表达和血清TNFα水平呈正相关。罗格列酮体外可抑制LPS诱导库普弗细胞中IKK-βmRNA和蛋白的表达,体内通过抑制肝组织NF-κB活化,减少COX-2表达,均表明罗格列酮可通过抑制炎症细胞活化,下调炎症介质基因表达,从而减少了NFα等炎症介质合成、释放,抑制肝脏炎症反应。结论 PPAR-γ特异性激动剂罗格列酮通过干预IKK-β／IκB／NF-κβB／TNFα信号通路而发挥抗炎作用,从细胞分子水平逆转NASH大鼠肝组织的炎症反应,这为临床上有效治疗NASH提供了新思路。     

罗格列酮治疗2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝的随机对照研究

目的 观察罗格列酮(RGZ)治疗非酒精性脂肪肝(NAFL)的疗效. 方法 95例经CT确诊的NAFL同时合并新诊断的2型糖尿病患者随机分成三组:RGZ组予罗格列酮4mg,日一次;二甲双胍(Met)组予二甲双胍0.5g,日三次;对照(Con)组予以除二甲双胍及噻唑烷二酮类以外的其他降糖药物治疗,共6个月.结果 治疗后RGZ组肝脾CT比值、胰岛素敏感指数(ISI)和脂肪肝消失率最高,Met组次之,Con组最低.RGZ组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)最低,Met组次之,Con组最高.RGZ组和Met组FIns明显低于Con组.结论 RGZ能够治疗NAFL,增加胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗,疗效优于二甲双胍,对肝功能无明显损害.     

高脂饮食对实验性大鼠非酒精性脂肪肝UCP2表达的影响

目的:通过高脂饮食制作非酒精性脂肪肝(NAFLD)动物模型;观察高脂饮食对实验性大鼠NAFLD解偶联蛋白2(UCP2)的影响。方法:通过高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪性肝病模型。观察肝脏病理改变并检测肝脏UCP2表达情况。结果:与正常对照组相比,高脂饮食大鼠肝脏UCP2表达显著上升,肝组织广泛脂肪变性,形成单纯性脂肪肝。继续给予高脂饮食使肝脏UCP2表达水平进一步增加,肝脏发生进一步病理改变而形成脂肪性肝炎。结论:高脂饮食成功地复制了NAFLD动物模型;NAFLD时肝脏UCP2表达上调,可能是机体的一种适应性反应;但是UCP2过度表达,可能诱导或加剧肝脏病理改变。     

罗格列酮和二甲双胍对大鼠非酒精性脂肪肝病的预防及机制研究

目的观察罗格列酮和二甲双胍对大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的预防作用,并探讨其可能作用机理。方法32只雄性SD大鼠分为4组:正常对照组、NAFLD对照组、罗格列酮干预组、二甲双胍干预组。以高脂饲料饲养诱发脂肪肝大鼠模型。12周末,处死所有动物,检测血脂、肝功能、肝脂质含量、肝组织病理学等,并检测血肿瘤坏死因子α(TNF-α)及肝组织TNF-α、肉毒碱软脂酰转移酶Ⅰ(CPT-Ⅰ)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)的mRNA表达等指标。结果与NAFLD对照组比较,罗格列酮干预组及二甲双胍干预组的血TG(0.55±0.08,0.71±0.15 vs 0.85±0.15)mmol/L、ALT(49.1±7.4,56.0±33.6 vs 110.6±44.2)U/L及肝组织TG含量(33.7±8.2,37.2±7.8 vs 54.8±7.6)mg/g均显著下降(P均<0.05),其肝脂肪变性及炎症程度亦显著减轻,其血清TNF-α(187.5±20.3,211.9±26.6 vs 324.2±34.2)pg/ml及肝组织TNF-α(0.35±0.12,0.49±0.18 vs 0.85±0.20)、FAS mRNA表达水平(0.34±0.13,0.45±0.15 vs 0.68±0.19)亦显著下降(P均<0.05)。结论罗格列酮和二甲双胍,可对高脂饲料饲养诱发的大鼠NAFLD产生保护作用;其保护作用与减少TNF-α和FAS表达有关。     

Silymarin in non alcoholic fatty liver disease

AIM: This study was undertaken to evaluate the hepatic effects of silybum marianum on non alcoholic fatty liver disease (NAFLD).METHODS: In 72 patients affected by NAFLD, main metabolic, hepatic and anti-inflammatory parameters were assayed after 3 mo of a restricted diet and before silymarin treatment (twice a day orally). The brightness of liver echography texture (hepatorenal ratio brightness) was also defined at same time. These evaluations were repeated after 6 mo of treatment.RESULTS: Serum levels of some metabolic and anti-inflammatory data nonsignificantly lowered after 6 mo of silymarin. On the contrary, Steato test, alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST) and gamma-glutamyl transpeptidase were significantly (P < 0.001) reduced. Instead, the AST/ALT ratio unchanged. Finally, the hepatorenal brightness ratio, as an index of hepatic steatosis, significantly (P < 0.05) dropped.CONCLUSION: The obtained results indicate that silymarin appears to be effective to reduce the biochemical, inflammatory and ultrasonic indices of hepatic steatosis. Some parameters indicative of early stage of atherosclerosis were also lowered.     

COX-2与氯丙嗪所致大鼠药物性肝损伤的研究

目的探讨COX-2在氯丙嗪所致大鼠药物性肝损伤中的作用。方法 40只SD大鼠随机分成空白对照组、西乐葆对照组、氯丙嗪组、氯丙嗪+西乐葆组,每组10只。单次给药,24 h后采集血液测定肝脏生化指标,之后处死大鼠,取肝脏组织做病理检查以及应用免疫组织化学染色方法检测COX-2的表达。结果氯丙嗪组肝损伤明显,氯丙嗪+西乐葆组肝损伤较氯丙嗪组严重。对照组大鼠肝脏组织未见COX-2的阳性表达;氯丙嗪组有8例COX-2呈阳性表达,阳性率为80%,氯丙嗪+西乐葆组有2例COX-2呈阳性表达,阳性率为20%。结论 COX-2在氯丙嗪所致大鼠急性肝损伤肝组织中表达明显升高,阻断COX-2后肝损伤加重,COX-2表达增高可能是机体对抗氯丙嗪所致大鼠急性肝损伤的一种保护性机制。     

选择性环氧合酶-2抑制剂塞莱希布对大鼠肝纤维化的作用

目的:探讨选择性COX-2抑制剂塞莱昔布对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的作用.方法:5-6周龄的♂SD大鼠50只,随机分为6组.A组(肝纤维化模型组):10只,50%CCl4橄榄油溶液1mL/kg,每周2次皮下注射,同时给予生理盐水灌胃;B组(早期治疗组):10只,造模同时给予塞莱昔布15mg/kg溶于生理盐水中灌胃,每天1次;C组(中期治疗组):10只,造模同时给予生理盐水灌胃,第3周起改为塞莱昔布灌胃;D组(晚期治疗组):10只,造模同时给予生理盐水灌胃,第5周起改为塞莱昔布灌胃;E组:5只,给予相同体积的橄榄油皮下注射,同时给予相同剂量的塞莱昔布灌胃;F组:5只,给予相同体积的橄榄油皮下注射和生理盐水中灌胃.上述处置共8wk.实验结束后腹主动脉取血,取肝组织,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)水平;病理组织学HE染色及Masson染色观察肝纤维化严重程度并评分,免疫组织化学方法检测肝组织Ⅰ胶原、α-SMA、COX-1、COX-2的表达.结果:A组与F组相比,可见显著的肝纤维化改变(P<0.01);与A组相比,B组病理染色可见肝纤维化程度明显减轻(P<0.01),血清ALT、...     

Oral administration of S-nitroso-N-acetylcysteine prevents the onset of non alcoholic fatty liver disease in rats

AIM:To evaluate the potential of S-nitroso-N-acetyl-cysteine(SNAC)in inhibition of lipid peroxidation andthe effect of oral SNAC administration in the preventionof nonalcoholic fatty liver disease(NAFLD)in an animalmodel.METHODS:NAFLD was induced in Wistar male rats bycholine-deficient diet for 4 wk.SNAC-treated animals(n=6)(1.4 mg/kg/day of SNAC,orally)were comparedto 2 control groups:one(n=6)received PBS solutionand the other(n=6)received NAC solution(7 mg/kg/d).Histological variables were semiquantitated with respectto macro and microvacuolar fat changes,its zonal dis-tribution,foci of necrosis,portal and perivenular fibro-sis,and inflammatory infiltrate with zonal distribution.LOOHs from samples of liver homogenates were quanti-fied by HPLC.Nitrate levels in plasma of portal vein wereassessed by chemiluminescence.Aqueous low-densitylipoprotein(LDL)suspensions(200 μg protein/mL)wereincubated with CuCl_2(300 μmol/L)in the absence andpresence of SNAC(300 μmol/L)for 15 h at 37℃.Extentof LDL oxidation was assessed by fluorimetry.Linoleicacid(LA)(18.8 μmol/L)oxidation was induced by soy-bean lipoxygenase(SLO)(0.056 μmol/L)at 37℃ in the presence and absence of N-acetylcysteine(NAC)andSNAC(56 and 560 μmol/L)and monitored at 234 nm.RESULTS:Animals in the control group developed mod-erate macro and microvesicular fatty changes in peripor-tal area.SNAC-treated animals displayed only discretehistological alterations with absence of fatty changes anddid not develop liver steatosis.The absence of NAFLD inthe SNAC-treated group was positively correlated with adecrease in the concentration of LOOH in liver homog-enate,compared to the control group(0.7±0.2 nmol/mgvs 3.2±0.4 nmol/mg protein,respectively,P<0.05),whileserum levels of aminotransferases were unaltered.Theability of SNAC in preventing lipid peroxidation was con-firmed in in vitro experiments using LA and LDL as modelsubstrates.     

Noninvasive investigations for non alcoholic fatty liver disease and liver fibrosis

Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) includes a spectrum of diseases that have insulin resistance in common and are associated with metabolic conditions such as obesity, type 2 diabetes mellitus, and dyslipidemia. NAFLD ranges from simple liver steatosis, which follows a benign course, to nonalcoholic steatohepatitis (NASH), a more severe entity, with necroinflmmation and f ibrosis, which can progress to cryptogenic cirrhosis and end-stage liver disease. Liver biopsy remains the gold standard for evalu...     

肌苷对脑缺血再灌注后COX-2表达的调节作用

目的　研究肌苷对大鼠脑缺血再灌注后COX 2mRNA及其蛋白表达的影响 ,探讨其神经保护作用机制。方法　应用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注动物模型 ,腹腔注射肌苷 (1 0 0mg/kg) ,原位杂交法和免疫组织化学法检测大鼠脑缺血再灌注后COX 2mRNA及蛋白的表达。 结果　①对照组皮质和纹状体区COX 2mRNA表达于脑缺血再灌注 6h开始增强 ,1 2h达高峰 ,持续 2 4h～ 3d ,然后逐渐降低 ,至 1 4d降至再灌注 2h水平 ,同一时间点皮质区高于纹状体区。肌苷组COX 2mRNA表达于脑缺血再灌注 2h～ 1 4d较对照组显著减低 (P <0 0 1 )。②对照组皮质和纹状体区COX 2蛋白表达的变化趋势与COX 2mRNA相似 ,但其高峰出现在 2 4h ,较COX 2mRNA略延迟 ,且持续时间短 ,至 7d已降至再灌注 2h水平 ,同一时间点皮质区高于纹状体区。肌苷组COX 2表达于脑缺血再灌注 2h～ 1 4d较对照组显著减低 (P <0 0 1 )。结论　肌苷对脑缺血的保护作用可能是通过下调COX 2mRNA及蛋白表达而实现的     

饮食疗法在非酒精性脂肪性肝病治疗中的作用

非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一组肝组织学改变与酒精性肝病相似,但无过量饮酒史的临床综合征,包括单纯性脂肪肝(NAFL)、脂肪性肝炎(NASH)和肝硬化。随着肥胖、糖尿病、高脂血症的高发,NAFLD的患病率逐渐增加。目前这种与肥胖有关的脂肪性肝病已成为重要的公共健康问题。然而,迄今为止尚无治疗     

解偶联蛋白2与酒精性肝病

解偶联蛋白2(UCP2)是线粒体内膜上可以调节质子跨膜转运的载体蛋白,可以驱散质子电化学梯度,使氧化呼吸与ATP合成解偶联。UCP2与能量消耗和脂质代谢密切相关,可能参与酒精性肝病(ALD)发病过程中的氧化应激和脂质过氧化。进一步探讨UCP2在ALD中的作用对于ALD的防治具有重要意义。     

大麻素受体1在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用

目的动态观察内源性大麻素受体l（CB1）在大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）中的表达,初步探讨CB1在NAFLD发病中的作用。方法雄性SD大鼠48只,随机分3组：对照组（普通饲料）、模型组（高糖高脂饲料）、干预组（高糖高脂饲料＋利莫那班）,分别于实验第4、8周末每组各取8只处死,测体重、计算肝指数,检测血清ALT、AST、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）;ELISA法检测血清瘦素（Leptin）、肿瘤坏死因子（TNF）α含量,肝组织HE染色,观察其病理形态变化,免疫组化染色法观察NAFLD不同阶段肝组织CB1表达。采用单因素方差分析对各组间进行比较,组间两两比较采用SNK-q检验,组内比较采用两独立样本t检验,两指标间的相关性采用Pearson直线相关分析法。结果 （1）模型组大鼠血清ALT、AST、TC、TG、Leptin及TNFα水平均较对照组及利莫那班组高（P〈0.05）;（2）肝组织学改变：模型组第4周呈单纯性脂肪肝改变,第8周呈弥漫性肝脂肪变伴炎细胞浸润,干预组较同期模型组肝病变减轻;（3）肝脏CB1免疫组织化学检测：对照组表达阴性;模型组和干预组表达呈阳性。通过积分光密度值比较,模型组高于同期干预组（P〈0.05）。结论 CB1在NAFLD患者中表达增强,并可能与TNFα和Leptin共同作用促进NAFLD进展。