c-erbB-2反义寡核苷酸对胃癌细胞株SGC7901的影响

目的　观察c erbB 2反义寡核苷酸 (ASODN)对胃癌细胞株SGC790 1细胞的影响。方法　采用脂质体c erbB 2反义 (ASODN)组及空白对照、错配 (SCODN)组转染SGC790 1细胞 ,采用Westernblot观察c erbB 2蛋白表达的变化 ,采用四氮唑盐 (MTT)比色法测定细胞增殖以及对顺铂细胞毒性的影响。结果　转染ASODN能特异性下调c erbB 2蛋白表达和抑制胃癌细胞增殖。此外 ,顺铂在空白组、ASODN组及SCODN组的抑制率分别为 ( 3 3 .3± 2 .0 ) %、( 4 9.9± 5 .9) %和 ( 3 4.8± 3 .0 ) %。与空白对照组相比 ,ASODN组的抑制率显著增加 (P <0 .0 1)。结论　c erbB 2ASODN能抑制胃癌细胞的增殖并增强顺铂的细胞毒性     

端粒酶11-聚体寡核苷酸对肺癌细胞的作用

目的探讨端粒酶11-聚体正义寡核苷酸(S0DN)、反义寡核苷酸(ASODN)对肺腺癌细胞株(SPC-A1)的作用。方法脂质体介导的11-聚体正、反义寡核苷酸与肺腺癌低分化SPC-A1细胞株共培养后，MTT法检测细胞生长抑制率；瑞氏染色后观察细胞形态学变化；流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡。结果①ASODN抑制肺腺癌细胞SPC-A1生长，诱导细胞凋亡。②SODN抑制肺腺癌细胞SPC-A1生长，可能通过诱导细胞分化途径。③无义寡核苷酸(NODN)对肺腺癌细胞SPC-A1生长无抑制。结论ASODN和SODN分别通过诱导细胞凋亡和诱导细胞分化途径抑制肺腺癌细胞SPC-A，生长。     

毛兰素对胃癌细胞SGC-7901端粒酶活性的影响

目的探讨毛兰素对胃癌细胞端粒酶活性的影响。方法MTT法检测毛兰素对人胃癌细胞SGC-7901的增殖抑制作用,AnnexinⅤ/PI双染色法流式细胞仪检测细胞凋亡率,TRAP实时荧光定量PCR检测端粒酶活性。结果毛兰素能抑制胃癌细胞SGC-7901增值,48小时IC50值为0.056μg/ml;毛兰素抑制胃腺癌SGC-790细胞端粒酶活性早于诱导凋亡,且都表现为时间和浓度依赖性。结论毛兰素能诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡,可能与其对端粒酶活性的抑制有关。     

端粒酶反义寡核苷酸对肝癌细胞生长抑制作用

目的本研究将互补于hTR模板区的全硫代修饰型反义寡核苷酸（PS-ASODN）经lipotap脂质体转染作用于肝癌细胞系BEL-7402,观察其对肝癌细胞端粒酶活性的影响,同时检测其对癌细胞的生长抑制作用,旨在探讨PS-ASODN对肝癌的治疗价值,为临床治疗肝癌提供一定的试验数据。方法分别采用MTT法、流式细胞术、酶联免疫吸附（ELISA）法检测不同浓度PS-ASODN对bel-7402的细胞增殖、细胞凋亡和端粒酶活性的作用。结果PS-ASODN能抑制BEL-7402细胞的生长,降低其端粒酶活性并诱导细胞凋亡。结论端粒酶与BEL-7402增殖活性有关,抑制端粒酶活性可能成为肝癌基因治疗的新靶点。     

端粒酶反义寡核苷酸对MCF—7细胞端粒酶活性及细胞生长的影响

为探讨端粒酶反义寡核苷酸对人乳腺癌MCF－7细胞端粒酶活性及细胞生长的影响,应用与人端粒酶RNA组分（hTR）模板区互补的硫代反义寡核苷酸处理MCF－7细胞。发现经反义hTR寡核苷酸作用后,细胞端粒酶活性明显受到抑制,至作用后72h,端粒酶活性较对照组降低61.0%（P＜0.05）;细胞生长明显受到抑制;细胞周期发生显著变化,G0／G1期细胞数增多,S期及G2／M期细胞数则减少;细胞增殖指数由0.46降低至0.29;并可观察到凋亡细胞的出现,凋亡发生率为10.7%;而无义寡核苷酸处理组及空白对照组以上各指标均无明显变化。提示：端粒酶反义寡核苷酸可明显抑制乳腺癌细胞端粒酶活性,抑制细胞生长和增殖,诱导细胞凋亡;表明应用反义技术抑制端粒酶活性治疗乳腺癌可能具有广阔的前景。     

阿斯匹林对胃癌细胞株SGC-7901的细胞毒作用及体外增效作用

目的：观察阿斯匹林（ASA）对胃癌细胞株SGC－7901的细胞毒作用以及联用其它抗肿瘤药的增效作用。方法：应用流式细胞仪（FCM）测定细胞周期,噻唑蓝（MTT）法测定药物细胞的抑制率。结果：MTT显示体外ASA对SGC－7901有细胞毒作用,与ASA的浓度和作用时间有显著的相关性。同时可使SGC－7901细胞周期中S期及G2／M期比例升高,G1期比例下降,呈一定的剂量效应关系。低浓度ASA与5－氟脲噻啶（5－Fu)、阿霉素（DOX）和丝列霉素（MMC）合用,可增强它们对SGC－7901的杀伤作用,与各药物有相加或协同作用。结论：ASA体外对SGC－7901有细胞毒作用,可明显阻断SGC－7901细胞在S期和G2／M期;增强上述药物对SGC－7901的杀伤作用。鉴于所试药物对细胞周期的影响不同,提示ASA的体外增效作用可能与此相关。     

端粒酶反义寡核苷酸及其联合顺铂对胃癌细胞的影响

目的探讨端粒酶反义寡核苷酸及其联合顺铂对胃癌细胞的影响。方法利用脂质体将端粒酶反义寡核苷酸导入SGC7901胃癌细胞。TRAP—ELISA法检测端粒酶活性，噻唑蓝（MTT）法测定端粒酶反义寡核苷酸对胃癌细胞SGC7901的抑制；过氧化物酶的抗荧光素抗体法检测癌细胞凋亡指数。结果经端粒酶反义寡核苷酸处理的胃癌细胞端粒酶活性显著下降，端粒酶反义寡核苷酸明显抑制胃癌细胞的生长和诱导胃癌细胞的凋亡，端粒酶反义寡核苷酸联合顺铂，能增强对胃癌细胞生长的抑制和诱导胃癌细胞的凋亡。结论端粒酶反义寡核苷酸能有效抑制胃癌细胞生长，与顺铂协同作用，效果更为明显。     

bcl—2 mRNA反义寡核苷酸对胃癌SGC—7901细胞端粒酶活性的影响

目的 探讨bcl-2反义寡核苷酸（antisense phosphorothioate oligodeoxynucleotide,ASODN)对胃癌SGC－7901细胞端粒酶活性的影响。方法 应用脂质体瞬时转染法介导bcl-2反义寡核苷酸,处理人胃癌细胞系SGC－7901后,分别采用Northern blot、Western blot检测bcl-2 mRNA、蛋白表达,用端粒微孔板杂交法检测端粒酶活性。结果 bcl-2 ASODN处理的胃癌SGC－7901细胞端粒酶活性明显受到抑制,并与ASODN的浓度和处理时间有关。结论 bcl-2反义寡核苷酸可抑制胃癌细胞端粒酶活性。     

Skp2反义寡核苷酸对胃癌细胞SGC-7901生长增殖的影响

目的：研究S期激酶相关蛋白2反义寡核苷酸（Skp2 antisense oligodeoxynucleotide，Skp2 ASODN）对胃癌细胞SGC-7901生长增殖的影响及其可能机制。方法：采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000 Reagent包裹Skp2寡核苷酸（ODNs）转染SGC-7901细胞，通过显微镜和MTT实验观察细胞的生长和增殖情况；应用流式细胞术检测细胞周期；应用逆转录聚合酶链反应检测Skp2、P27mRNA表达变化；应用Western blot法检测Skp2蛋白及其底物p27蛋白表达变化。结果：Skp2ASODN对SGC-7901细胞的生长和增殖产生浓度依赖性抑制效应，且各组细胞的抑制率均在48h达到最高峰，其中200nmol／LASODN在48h对细胞的抑制率为42．4％，P〈0．01。200nmol／LASODN组细胞周期发生改变，S期细胞所占比例明显高于正常对照组细胞，P〈0．05。在200nmol／L浓度下，ASODN组Skp2mRNA和蛋白表达水平均低于正常对照组和Skp2无义寡核苷酸（Skp2 nonsense oligodeoxynucleotide，Skp2NSODN）组，P〈0．05；而p27mRNA表达未发生变化，但其蛋白水平明显高于正常对照组和NSODN组，P〈0．05。结论：Skp2ASODN能抑制SGC-7901细胞生长和增殖，这种抑制作用主要是通过干预泛素-蛋白酶体途径影响细胞周期而实现的。     

四君子汤含药血清与氟尿嘧啶合用对胃癌细胞SGC-7901的生长抑制作用

目的 观察四君子汤含药血清和氟尿嘧啶(FU)合用对体外培养的人胃癌细胞SGC - 7901生长与增殖的抑制效应.方法 将低、中、高3种剂量的四君子汤含药血清与FU配伍分别作用于3个实验组的人胃癌SGC - 7901细胞,另设不含药血清组和FU单用组,共计5个组,药物作用时间均为24h.采用倒置显微镜观察各组SGC - ...     

反义hTRT转染对SGC-7901胃癌细胞株形态学的影响

目的 探讨人端粒酶蛋白催化亚单位（hTRT）反义基因转染对SGC－7901胃癌细胞株形态学的影响;方法 采用脂质体法将hTRT正、反义真核表达载体导入SGC－7901胃癌细胞株中,从光镜、电镜水平观察转染细胞形态学的变化。结果 与未转染细胞相比,光镜下hTRT反义基因转染的SGC－7901胞体增大,胞浆丰富,分裂相减少,核浆比增大,异型性减小;透射电镜下反义基因转染细胞细胞器丰富,胞浆内出现分泌泡样结构及胞质内微囊;扫描电镜下反义基因转染细胞表面微绒毛增多,胞体周围可见大量颗粒样物质,根据AB／PAS染色结果,这些颗粒样物质有可能是其分泌的粘液颗粒。结论 hTRT反义基因有促进SGC－7901细胞分化的作用。     

端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸对HL-60细胞生长的作用

目的：观察端粒酶反义寡聚脱氧核着酸对急性髓细胞白血病细胞株HL-60的作用、方法：采用台盼蓝排斥法进行药物敏感试验,流式细胞仪测定凋亡细胞含量结果：端粒酶反义寡聚脱氧核着酸对HL-60细胞有生长抑制作用,作用具有序列特异性及剂量依赖性．流式细胞仪检测到凋亡峰,含量为28．8％．无关寡聚核着酸片段无此作用．结论：端粒酶对维持白血病细胞的生长可能起十分重要的作用,它有可能成为白血病治疗的新靶点．     

反义hTR对人胃癌细胞株SGC-7901恶性表型的逆转作用

目的 探讨反义ｈＴＲ基因转染对胃癌细胞系ＳＧＣ－７００１恶性有型的逆转作用及其在肿瘤基因治疗中的价值。方法 构建包含端粒重复序列模板区的反义ｈＴＲ基因真核表达载体用脂质体法将其转染率胃癌细胞系ＳＧＣ－７９０１,比较观察反义ｈＴＲ基因转染后７９０１细胞的ｈＴＲＲＮＡ表达、端粒酶活性、体外生长增殖降低,体外生长增殖能力降低,接触抑制恢复、细胞凋亡率增加、软琼脂集落形成能力和裸鼠体内致瘤能力完全消失。结     

As2O3对胃癌细胞周期及端粒酶活性的影响

目的 探讨三氧化二砷（As2O3)对SGC－7901胃癌细胞端粒酶活性及细胞周期的影响及其机制。方法 细胞凋亡、细胞周期分布及相关蛋白的表达采用流式细胞术;端粒酶活性的检测采用端粒末端重复序列扩增－ELISA法（TRAP－ELISA）,端粒酶亚单位mRNA及c-myc mRNA的表达采用RT－PCR技术。结果 As2O3可明显抑制SGC-7901细胞的生长,细胞凋亡率明显增加,C0/G1期细胞减少,S和G2／M期细胞增加,Bcl-2、c-myc、PCNA蛋白表达减少,Bax蛋白表达增加,端粒酶活性明显下降;端粒酶亚单位hTR是TP1 mRNA无明显变化,hTRT mRNA表达减少,同时,c-myc mRNA的表达亦减少。结论 As2O3对SGC－7901细胞的抑制作用可能是通过二条途径实现：一个是诱导细胞凋亡,另一个是通过下调hTRT mRNA的表达来下调端粒酶活性,其机制有可能与c-myc和Bcl-2基因的减少以及Bax基因的增加有关。     

反义寡核苷酸抑制端粒酶活性对鼻咽癌细胞增殖的影响

目的：检测针对端粒酶的反义寡核苷酸(AS-ODN)对鼻咽癌HNE-1细胞株增殖的影响。方法：用PCR-ELISA法检测细胞内端粒酶活性。采用MTT法及平板集落形成实验评价细胞增殖活性。结果：鼻咽癌细胞株HNE-1与5μmol/L，20μmol/L反义寡核苷酸共同孵1d，对其细胞内端粒酶活性抑制率分别为32.9％、61.6％。而同浓度正义寡核苷酸(S-ODN)对细胞端粒酶活性无抑制作用。5μmol/L、20μmol/L反义寡核苷酸与HNE-1细胞共同孵育2d，对细胞增殖的抑制率分别为34.4％，72.9％，同浓度正义寡核苷酸的抑制率为14.4％、15.6％。20μmol/L反义寡核苷酸和20μmol/L正义寡核苷酸对细胞克隆形成能力的抑制率分别为78.39％、23.37％。结论：该反义寡核苷酸可抑制鼻咽癌细胞端粒酶活性，此作用有序列特异性和浓度依赖性。该反义寡核苷酸明显抑制了鼻咽癌细胞HNE-1的增殖，此作用有剂量、时间依赖性和序列特异性。     

端粒酶的义寡核苷酸抑制肺癌细胞端粒酶活性的研究

目的探讨端粒粒酶反义寡核苷酸对肺癌细胞端粒酶活性的抑制作用.方法脂质体介导的端粒酶反义寡核苷酸转染A549肺腺癌细胞株,采用TRAP-PCR-ELIsA法半定量检测转染后肺腺癌细胞端粒酶活性,观察它们的变化结果端粒酶反义寡核苷酸转染A549细胞72h后,A549细胞端粒酶活性明显下调.结论端粒酶反义寡核苷酸可以有效抑制肺腺癌细胞端粒酶活性.     

端粒酶RNA反义寡核苷酸对鼻咽癌HNE-1细胞生长的影响

目的检测针对端粒酶RNA的反义寡核苷酸对鼻咽癌HNE-1细胞株生长的影响。方法用PCR—ELISA法检测细胞内端粒酶活性。采用MTT法及平板集落形成实验评价细胞增殖活性。采用电镜观察细胞超微结构的改变。结果端粒酶RNA反义寡核苷酸作用HNE-1细胞后,细胞端粒酶活性受到明显抑制;细胞增殖受到明显抑制,此作用有剂量、时间依赖性和序列特异性;电镜发现少量细胞肿胀坏死,但未见细胞凋亡和大片坏死灶。结论端粒酶RNA反义寡核苷酸可抑制鼻咽癌HNE-1细胞的生长。     

苦参碱诱导人胃癌细胞凋亡及对端粒酶活性的影响

目的 研究苦参碱对人胃癌细胞诱导凋亡作用及端粒酶活性变化。方法苦参碱处理人胃癌细胞株SGC-7901后，用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长抑制效应，显微镜下观察胃癌细胞形态变化，应用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期和凋亡，用PCR-ELISA法对胃癌细胞端粒酶活性进行检测。结果不同浓度的苦参碱对SGC-7901有明显抑制作用，且呈时间依赖性及剂量依赖性，形态学观察也发现大量神经细胞的染色质凝聚，核碎裂，凋亡小体产生，细胞即出现明显的凋亡形态特征，FCM检测结果显示苦参碱作用后，G0／G1期细胞比例增高，S期、G2／M期细胞比例下降，苦参碱在诱导细胞凋亡的同时伴随端粒酶活性下调，且随苦参碱浓度增大和时间延长，抑制作用逐渐增强。结论苦参碱对人胃癌细胞具有明显抑制作用，诱导细胞凋亡并抑制端粒酶活性可能是其发挥抗癌作用的机制之一。     

NHE-1反义基因对胃癌细胞的酸化作用及其意义

目的 探讨Na -H 交换泵-1(Na -H exchanger1,NHE-1)反义基因转染对人胃癌细胞内pH值(intracellular pH,pHi)的调节作用及其在肿瘤基因治疗中的价值.方法 构建人NHE-1基因反义真核表达载体,采用脂质体法将其转染至SGC-7901胃癌细胞中, 采用荧光探针检测转染前后细胞内pH值的变化以及对细胞增殖和凋亡的影响.结果 转染反义基因的细胞pHi明显降低,增殖能力降低,细胞凋亡率增加.结论 NHE-1基因的表达在肿瘤细胞pHi及增殖和凋亡调节中起重要作用.     

端粒酶反义RNA对人髓性白血病细胞系HL-60的作用

目的 探讨抗端粒酶在急性白血病治疗中的意义。方法 用脂质体介导法将pBBS212-hTR(反义端粒酶RNA真核表达载体）导入人髓性白血病细胞系HL-60中,采用TRAP法测定端粒酶活性,细胞生长动力学检测,电镜,DNA片段分析等方法观察其对HL-60细胞的端粒酶活性、细胞增殖及细胞凋亡影响。结果 端粒酶反义RNA能显抑制HL-60细胞的端粒酶活性,抑制HL-60细胞的增殖并促进其凋亡。结论 以端粒酶反义RNA抑制端粒酶活性是治疗白血病的潜在途径。