葡萄球菌肠毒素A脂质体诱导人肝癌肿瘤浸润淋巴细胞分泌细胞因子的实验研究

目的 :研究脂质体包裹的葡萄球菌肠毒素A(SEA)是否仍然具有游离SEA刺激淋巴细胞分泌细胞因子的能力。　方法 :从 5例原发性肝癌患者癌组织中分离培养肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL) ,分别以葡萄球菌肠毒素A脂质体(L SEA)、游离葡萄球菌肠毒素A(SEA)和白细胞介素 2 (IL 2 )刺激后 ,以ELISA法检测其产生的细胞因子肿瘤坏死因子 α(TNF α)和γ干扰素 (IFN γ)的浓度。　结果 :除第 4天L SEA刺激组IFN γ水平低于SEA刺激组 (P <0 .0 5 )外 ,此两组的细胞因子分泌无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,而且都高于IL 2组 (P <0 .0 5 )。　结论 :L SEA仍然具有SEA刺激TIL分泌细胞因子的能力     

葡萄球菌肠毒素A脂质体不良反应的初步研究

目的：观察葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A，SEA)脂质体的不良反应。方法：用逆相蒸发法制备SEA脂质体(L-SEA)，静脉注射L-SEA，用ELISA法检测小鼠血浆中细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、γ-干扰素(IFN-γ)的水平，并观察L—SEA对新西兰大白兔血压、呼吸及体温的影响。结果：L-SEA组小鼠血浆中细胞因子水平较游离SEA组显著降低，对新西兰大白兔血压、呼吸及体温的影响也明显低于游离SEA组。结论：L-SEA可以显著降低SEA的不良反应，其机制可能是L—SEA能减少血浆中细胞因子的产生。     

葡萄球菌肠毒素A脂质体的制备及其体内分布试验

目的　制备葡萄球菌肠毒素 A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)脂质体 ,研究其在体内的分布特性 ,为 SEA脂质体治疗肝癌提供依据。方法　用 1 2 5I标记 SEA,逆相蒸发法制备 SEA脂质体 ,考察其包封率及粒径 ,观察 1 2 5I- SEA及 SEA脂质体静脉注射后不同时间小鼠体内的分布。结果　 5批 SEA脂质体样品平均粒径为5 0 5± 34 nm,平均包封率为 44 .4%± 4.8%。SEA脂质体主要分布于肝、脾 ,尤以肝脏中分布最多 ,而在血中清除加快 ,在其他组织中分布显著减少 ,与游离 SEA比较具有显著差异 (P<0 .0 5 )。结论　逆相蒸发法制备 SEA脂质体简单、重复性好 ,可获得较高的包封率和符合肝靶向要求的脂质体 ;SEA脂质体具有一定的肝靶向性 ,可为减轻SEA的毒副作用以及肝癌的治疗提供新途径     

白介素─2活化的肾癌肿瘤浸润淋巴细胞抗肿瘤活性的实验研究

作者对１２例肾癌组织标本肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）的抗瘤活性进行了研究。结果显示，自１２例肾癌标本中１０例成功地分离到ＴＩＬ，经４周培养平均扩增８５．９２倍，表型分析以Ｔ淋巴细胞为主，随培养时间延长Ｔ４比率逐渐减少，Ｔ８比率逐渐增加，培养后ＴＩＬ抗瘤活性显著增强但对自体肿瘤细胞特异杀伤问题需进一步研究，初步结果表明ＴＩＬ治疗肾癌具有可行性。     

超抗原葡萄球菌肠毒素A在体外激活淋巴细胞抗成骨肉瘤的作用

目的：探讨超抗原葡萄球菌肠毒素Ａ（ＳＥＡ）对成骨肉瘤患者外周血淋 寺殖及伤活性的调节作用。方法：分离成骨肉瘤患者外周血淋巴细胞,体外分别经ＰＨＡ,ＳＥＡ和ＳＥＡ加ＩＬ－２刺激后,＾３Ｈ－ＴdＲ参入法检测淋巴细胞对人成骨肉增殖水平,ＭＴＴ间接比色法检测活化的淋巴细胞对人成骨肉瘤细胞（ＳＯＳＰ－９６０７）的杀伤活性。结果：淋巴细胞经ＳＥＡ刺激２４h后增殖和钉伤活笥明显增强且呈剂量信依赖性（Ｐ〈０．０５     

肿瘤浸润淋巴细胞

肿瘤浸润淋巴细胞孙艳综述陈晓君审阅（郧阳医学院病理教研室十堰４４２０００）肿瘤生物治疗是肿瘤治疗的一个崭新领域。肿瘤生物治疗是细胞因子、活性细胞、单抗、疫苗等生物技术产品作为主要治疗手段，调节患者生物反应以达治疗目的。ＬＡＫ细胞的产生为肿瘤治疗带来了...     

树突状细胞激活的肿瘤浸润淋巴细胞体外抗小鼠乳腺癌活性的研究

目的:探讨致敏的树突状细胞(DC)激活的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)体外抗小鼠乳腺癌活性.方法:从小鼠四肢长骨骨髓中获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)和肿瘤全细胞性抗原致敏DC,然后用DC激活TIL,观察TIL在体外对小鼠C127乳腺癌细胞、小鼠MA782乳腺癌细胞和小鼠B16黑色素瘤细胞的杀伤活性.结果:经C127细胞全细胞性抗原致敏的DC激活的TIL具有很强的对C127细胞的杀伤活性[杀伤活性为(70.21±2.86)%],明显高于其对MA782和B16细胞的杀伤活性[杀伤活性分别为(51.31±3.25)%,(31.41±2.65)%],也明显高于未经DC激活的TIL、C127-DC-小鼠脾淋巴细胞和未经DC激活的小鼠脾淋巴细胞对C127细胞杀伤活性[杀伤活性分别为(48.30±2.97)%,(47.76±3.43)%和(17.23±2.56)%]和对MA782细胞杀伤活性[杀伤活性分别为(38.52±2.87)%,(36.62±2.75)%和(18.07±2.40)%]以及对B16细胞杀伤活性[杀伤活性分别为(25.38±2.63)%,(24.82±2.81)%和(17.34±2.81)%],同时B16细胞全细胞性抗原致敏的DC激活的TIL(TIL来源于C127瘤体)也可诱导相对较低的对B16细胞的特异性细胞杀伤活性.结论:经C127细胞全细胞性抗原致敏的DC能诱导TIL产生高效而特异的体外抗小鼠乳腺癌免疫.     

PCR技术检测金黄色葡萄球菌A型肠毒素基因的实验研究

目的建立一种检测金黄色葡萄球菌A型肠毒素的PCR方法，以期用于葡萄球菌肠毒素食物中毒的诊断。方法根据文献报道选择金葡菌SEA基因中比较保守的片段设计引物，优化各种工作条件，建立PCR检测方法，并鉴定其敏感性和特异性以及抗杂菌干扰性。扩增片段应用限制性核酸内切酶RsAI消化进行分析。结果所建立的方法敏感性和特异性均较好，有较强的抗杂菌干扰能力。结论应用PCR法检测SEA基因为SEA基因的诊断提供了病因学基础。     

胃肠道肿瘤浸润淋巴细胞的表型与细胞毒活性

作者旨在分析胃肠道肿瘤ＴＩＬ的表型和细胞毒活性及其相关关系。实验发现，新鲜分离的ＴＩＬ杀伤活性较低，ＣＤ３＋、ＣＤ４＋；及ＣＤ８＋细胞比例较低；经ｒＩＬ—２刺激后，ＴＬＬ的细胞毒活性显著增强，尤其对自体瘤细胞显示特异性杀伤活性，各Ｔ细胞亚群比例明显上升。多因素相关分析表明，ＴＩＬ的细胞毒活性与其ＣＤ３＋细胞比例的相关关系具显著性意义（Ｐ＜０．０５），与ＣＤ８＋亚群比例的相关关系亦有显著性意义（Ｐ＜０．０５），而与ＣＤ４＋亚群比例的相关关系无显著意义。证实，ＴＩＬ细胞毒活性与其ＣＤ３＋和ＣＤ８＋细胞的比例密切相关。     

各淋巴细胞亚群杀伤肿瘤细胞的初步研究

应用单克隆抗体分离主要的淋巴细胞亚群NK、CD_+~4、CD_8~+、B细胞,分别测定其对K_(562)瘤细胞的杀伤活性及各亚群细胞的协同作用。本实验结果表明,除NK细胞外,CD_4~+、CD_8~+、B细胞均能单独杀伤肿瘤细胞,各亚群的对比无显著差异。淋巴细胞中除某一亚群的混合细胞杀伤力大于该亚群本身,并提示T细胞系统在肿瘤免疫中的重要作用。     

姜黄素诱导人肺癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨姜黄素对人肺腺癌细胞（SPC－A1）抗癌作用机理。方法 采用细胞培养、荧光显微镜、原位末端标记、荧光探测等技术，探讨姜黄素抗癌作用及其机理。结果 ①姜黄素作用于癌细胞后，光镜下可见有细胞脱壁；荧光镜下可见细胞核破碎，细胞裂解成大小不等的凋亡小体；原位末端标记法进一步证实20μM姜黄素作用24h细胞凋亡率达42.67%。②姜黄素作用于癌细胞后，使细胞内Ca^2 、cAMP浓度升高。结论 姜黄素可诱导人肺癌细胞凋亡，其作用机制可能与细胞内Ca^2 、cAMP浓度升高有关。     

人血清对大蒜新素细胞毒性及其抗人巨细胞病毒效应影响的实验研究

目的:探讨人血清干预对大蒜新素细胞毒性及其抗人巨细胞病毒(HCMV)效应的影响。方法:将系列浓度大蒜新素与不同浓度血清共同作用于人胚肺成纤维细胞，观察细胞增殖活力(MTT法)、细胞形态和超微结构及HCMV蚀斑抑制率的改变。结果:①不加血清时，细胞对大蒜新素最大耐受浓度(MTC)为9．6μg／ml；加入20％灭活血清后，MTC增至21μg／ml。②血清干预前，21μg／ml大蒜新素使60％细胞坏死，胞质与胞核疏松混浊、呈筛状，内质网、线粒体弥漫性肿胀空泡变明显，异染色质减少；血清干预后，细胞形态与超微结构均明显改善，尤其在干预后48h，细胞超微结构与正常细胞相似。③20％血清干预提高细胞对大蒜新素的最大耐受浓度，后者对HCMV抑制率由干预前的65．92％提高至82．98％。结论：20％血清干预可明显改善大蒜新素的细胞毒性、保护细胞超微结构；增加大蒜新素用量，进而提高其抗HCMV效应。     

从蜥蜴尾部再生看肿瘤对机体的危害

文章从再生角度论述了肿瘤 (癌 )的生长和对机体的危害。再生是有分化、有功能、有限度的生长 ,对机体起到保护和功能恢复作用。其中分化是功能恢复的基础 ,也是有限生长前提。肿瘤是无分化、无功能、无限度的生长 ,对机体有危害作用 ,最终导至死亡。其中无分化是危害机体的核心 ,转移是无限生长的一种形式。肿瘤 (癌 )作为再生疾病 ,使其再生分化无疑是其最佳治疗方法     

加味四君子汤抗小鼠宫颈癌作用的实验研究

目的:观察加味四君子汤对小鼠移植型宫颈癌的治疗作用。方法:实验一:将小鼠宫颈癌U14瘤株细胞悬液注射于小鼠(30只)右腋窝皮下,24h后随机分为3组:一组为生理盐水组,二组为加味四君子汤组,三组为顺氯氨铂(DDP)组,每组10只。分别给予相应药物10d后处死实验动物,剥取瘤块、称重,计算抑瘤率。实验二:将U14细胞悬液注射于小鼠腹腔24h后随机分为3组,分组方法同上。连续给药8d后停药。观察本方对荷腹水型宫颈癌小鼠存活期的影响。结果:加味四君子汤组抑瘤率为37.3%,与生理盐水组比较差异非常显著。加味四君子汤组小鼠存活期为18.6d±4.40d,生理盐水组为14.4d±2.07d,两者比较差异显著(P<0.05)。结论:加味四君子汤具有抗小鼠实体型宫颈癌(U14)的作用,并能显著延长荷腹水型宫颈癌(U14)小鼠的生存期。     

重组人生长激素对人胃肠道肿瘤细胞生长影响实验研究

人生长激素（hGH）具有促进蛋白质合成,加速脂肪酸分解氧化,纠正负氮平衡,调节免疫功能的作用。重组人生长激素（rhGH）对消化道恶性肿瘤患者术后进行代谢调理治疗,明显促进了肿瘤患者的康复。但人生长激素（hGH）作为一种生长因子能促进正常细胞的增生分裂,故有学者认为它可以促进肿瘤细胞的生长。因而肿瘤患者术后能否使用rhGH存在争议。本研究通过体外实验探讨rhGH对人胃、直肠癌细胞株BGC823、HR8348生长的影响以及建立裸鼠人胃癌细胞移植瘤模型探讨rhGH在体内对人胃癌细胞生长的影响,为临床胃、直肠癌患者术后能否应用rhGH进行代谢调理提供一定的参考。     

SPP-1、GDF-15和CXCL-1在人小肝癌中表达的初步研究

目的:针对前期应用基因芯片(Affymetrix Rat Genome 230.2.0)筛选出的大鼠早期肝癌中高表达的人同源分泌蛋白基因SPP-1、GDF-15和CXCL-1,定量验证其在人小肝癌中mRNA和血清蛋白的表达水平,并探讨其临床应用价值。方法:应用实时定量PCR和双抗体夹心法ELISA,检测15例小肝癌及正常肝脏组织(癌旁正常肝脏组织)的mRNA水平及对应小肝癌血清和正常人血清中的蛋白表达水平。结果:①SPP-1、GDF-15和CXCL-1基因在小肝癌组织中较对照组表达显著上调,其差异有统计学意义(P<0.05);②SPP-1血清蛋白检测值与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);GDF-15血清蛋白含量在小肝癌组中表达水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);小肝癌组中CXCL-1血清蛋白含量较正常对照组表达下调,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:①NF-κB信号通路基因(CXCL-1)、P53信号通路基因(GDF-15)和SPP-1基因在人小肝癌组织中高表达,可能与肝癌发生的早期过程相关;②分泌性蛋白GDF-15和CXCL-1显示出小肝癌筛选诊断的潜在价值。     

树突状细胞分泌的exosomes体外诱导特异性CTL抗肾癌的初步研究

 目的提取树突状细胞外来体(DC)分泌的外来体(exosomes),检测其体外刺激同源T细胞活化和诱导特异性细胞毒性T细胞(CTL)抗肾癌769-P的免疫效应。方法从健康志愿者外周血单个核细胞中诱导培养DC,流式细胞术检测DC的表型;通过超速离心法结合超滤法制备DC分泌的exosomes,透射电镜观察exosomes的形态,MTT法检测DC分泌的exosomes诱导T细胞的增殖和特异性CTL对769-P的体外杀伤活性。结果超速离心法结合超滤法能从DC上清中分离exosomes,并且肿瘤抗原致敏DC分泌的exosomes能有效促进T细胞的增殖及特异性CTL抗769-P效应,T细胞增殖倍数达(1.68±0.22)%,CTL杀瘤活性为(38.23±2.16)%。结论抗原致敏DC分泌的exosomes能有效诱导激活具有较强杀瘤活性的肿瘤特异性CTL。