滇藏荨麻提取物的5α-还原酶抑制活性的研究

目的研究滇藏荨麻提取物各极性部位的5α-还原酶抑制活性。方法基于酶联免疫方法，建立抑制5α-还原酶体外模型，从大鼠前列腺组织中提取5α-还原酶，与底物睾酮以及供氢体NADPH共同组成了一种微量反应体系。利用酶标仪检测双氢睾酮（DHT）的含量。以DHT的含量来判断5α-还原酶的活性，用非那雄胺做阳性对照药。结果滇藏荨麻根95％乙醇提取物的正丁醇萃取物具有显著的抑制5α-还原酶的活性。结论滇藏荨麻根95％乙醇提取物的正丁醇萃取物为抗BPH的有效部位。     

一种非同位素5α-还原酶抑制剂体外筛选模型的建立和应用

目的:建立一种非同位素5α-还原酶抑制剂体外筛选模型.方法:从大鼠前列腺组织中提取物5α-还原酶,与底物睾酮(T)以及供氢体NADPH共同组成了一种微量反应体系.反应产物二氢睾酮(DHT)用酶免技术(EIA)测定,以产物生成量确定酶活性;对反应底物、NADPH、酶浓度以及反应最佳温度和时间进行了优化.结果:当底物、NADPH、酶提取物浓度分别为0.25μM、1mM和0.3mg,37℃反应60分钟可获最大酶活性.特异性5α-还原酶抑制剂非那雄胺显著降低5α-还原酶催化产物DHT的生成.进一步对24种中药进行筛选,姜黄、夏枯草等中药提取物具有5α-还原酶抑制剂作用.结论:本文建立的非同位素方法有效、可行,可作为一种体外模型筛选和研究5α-还原酶抑制剂.     

应用体外模型从植物提取物中筛选治疗雄激素源性脱发的5a-还原酶抑制剂

目的应用5a-还原酶抑制剂体外筛选模型,寻找植物提取物中天然5a-还原酶抑制剂,用于雄激素源性脱发的治疗。方法通过HPLC测定底物睾酮(T)在酶促反应中的下降速率计算酶活力,建立5a-还原酶抑制剂体外筛选模型。采用此体外模型对多种植物提取物进行酶抑制作用筛选,继而对筛出的植物提取物采用制备液相进行组分分离制备,测定各段组分酶抑制活性,最终找出具有酶抑制作用的活性成分。结果通过体外模型筛选发现有酶抑制活性的咖啡提取物,并找到其活性成分咖啡鞣酸。结论通过体外模型筛选5a-还原酶抑制剂,结合制备液相分离植物提取物组分,是发现新活性物质的有效手段     

复方贞术调脂方调节HMG-CoA还原酶活性成分的快速筛选

目的优化快速筛选影响羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoA还原酶)活性成分的方法,并筛选复方贞术调脂方(FTZ)中抑制HMG-CoA还原酶的活性成分。方法利用纯化的猪肝HMG-CoA还原酶,从HMG-CoA还原酶浓度、HMG-CoA和NADPH底物浓度三方面优化HMG-CoA还原酶筛选方法,评价FTZ和FTZ中不同药物成分对HMG-CoA还原酶活性的影响。结果猪肝HMG-CoA还原酶粗酶制剂具有明显的酶促动力学特性,反应体系中30μgHMG-CoA还原酶粗酶、200mmol/LNADPH、6μmol/LHMG-CoA是检测HMG-CoA还原酶活性和筛选影响酶活性成分的优化条件;FTZ和人参皂苷Rb2、三七总皂苷和阳性对照普伐他汀对HMG-CoA还原酶活性有显著的抑制作用,最大抑制率分别为23.7%、44.6%、35.5%、45.7%(P0.05或P0.01)。结论 HMG-CoA还原酶是FTZ调节脂代谢的靶点之一,人参皂苷Rb2、三七总皂苷是FTZ中抑制HMG-CoA还原酶的活性成分。     

新疆两色金鸡菊对自由基的清除能力及醛糖还原酶活性的抑制作用

目的考察新疆两色金鸡菊乙酸乙酯(EAE)和正丁醇(BE)提取物对自由基清除能力和醛糖还原酶的抑制活性。方法以叔丁基对羟基茴香醚(BHA)和维生素C(Vitamin C)为阳性对照,分别测定提取物对DPPH、ABTS、羟自由基(*OH)和超氧阴离子(*O_2~-)等自由基的清除能力;以槲皮素为阳性对照,DL-甘油醛为底物,醛糖还原酶(来源于大鼠眼晶状体)和辅酶NADPH组成的反应体系,测定提取物抑制醛糖还原酶的活性。结果与阳性对照BHA和Vitamin C比较,两色金鸡菊提取物对DPPH、ABTS、*OH和*O_2~-等自由基有不同程度的清除作用;与阳性对照药物槲皮素相比,提取物对醛糖还原酶的抑制能力用IC_(50)值表示,差异有统计学意义(P0.05),提取物对醛糖还原酶有一定的抑制作用但弱于槲皮素。结论新疆两色金鸡菊乙酸乙酯和正丁醇提取物有清除自由基的能力,同时具有一定抑制醛糖还原酶的活性。     

新疆两色金鸡菊自由基清除及醛糖还原酶抑制活性

目的 考察新疆两色金鸡菊乙酸乙酯和正丁醇提取物对自由基清除能力和醛糖还原酶的抑制活性. 方法 以叔丁基对羟基茴香醚(BHA)和Vitamin C为阳性对照,分别测定提取物对DPPH、ABTS、羟自由基（*OH）和超氧阴离子（*O2?）等自由基的清除能力;以槲皮素为阳性对照,DL-甘油醛为底物,醛糖还原酶（来源于大鼠眼晶状体）和辅酶NADPH组成的反应体系,测定提取物抑制醛糖还原酶的活性。结果 与阳性对照BHA和Vitamin C相比,两色金鸡菊提取物对DPPH、ABTS、*OH和*O2?等自由基有不同程度的清除作用;与阳性对照槲皮素相比,提取物对醛糖还原酶的抑制能力IC50值有显著性差异（P<0.05）,提取物对醛糖还原酶有一定的抑制作用但弱于槲皮素。结论 新疆两色金鸡菊乙酸乙酯和正丁醇提取物有清除自由基的能力,同时具有一定抑制醛糖还原酶的活性。     

马尾松树皮提取物对癌细胞内硫氧还蛋白还原酶的影响

目的 探索马尾松树皮提取物(PMBE)对体外培养的人肺腺癌细胞Glc-82、肝癌细胞Bel-7402和宫颈癌细胞Hela内的硫氧还蛋白还原酶(TrxR)的抑制作用.方法 运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、酶联免疫吸附法(ELISA)、NADPH还原反应和DCF荧光法检测细胞存活率及癌细胞内的TrxR浓度、TrxR活性和活性氧(ROS)水平.结果 MTT和ELISA检测未见PMBE所引起的三种癌细胞内TrxR蛋白含量的明显升高;在生理条件及氧胁迫下,PMBE均可显著抑制三种癌细胞内的TrxR活性;ROS测定说明氧胁迫下PMBE不能有效降低三种癌细胞内的ROS水平.结论 PMBE能够有效抑制人体呼吸、消化和生殖系统的三种癌细胞内的TrxR活性,并降低了其对氧胁迫的耐受性.     

植物中抑制5α-还原酶的活性成分研究进展

5α-还原酶活性筛选是抑制前列腺增生和抑制前列腺癌药物筛选过程中的一个重要指标。综述了近10年来植物中抑制5α-还原酶的活性成分研究概况,结果发现具有5α-还原酶抑制活性的化学成分在植物中广泛存在,其中脂溶性成分以苯丙素类、萜类、醌类、三萜及甾体类为主,水溶性化合物主要包括鞣质类、黄酮类化合物。不同类别的5α-还原酶抑制剂的活性参差不齐,其中三萜类化合物、甾体类化合物和鞣质类化合物的活性相对较强。     

海金沙孢子的抗雄激素和促生发作用（1）：抑制睾酮5α-还原酶的活性成分

在寻找天然抗雄激素活性药物的研究中,发现海金沙(Lygodium japonicum)孢子50％乙醇提取物体外显示抑制睾酮5α-还原酶的活性;用阉割的叙利亚仓鼠和睾酮处理后的C57Black/6CrSlc小鼠,检测其体内抗雄激素活性;并以睾酮5α-还原酶抑制活性为指导,对其进行分离,得到活性成分油酸、亚油酸、棕榈酸。     

海南五层龙根乙醇提取物中抗糖尿病组份的筛选

目的筛选海南五层龙根乙醇提取物中抗糖尿病的组份。方法采用萃取和色谱技术,对海南五层龙根乙醇提取物进行组份分离;然后对分离所得的各组份进行体外α-糖苷酶和醛糖还原酶抑制活性测定。结果海南五层龙根乙醇提取物用有机溶剂萃取后的水层上D101大孔吸附树脂吸附后5,0%乙醇洗脱物具有明显的α-糖苷酶和醛糖还原酶抑制活性,其浓度为100μg/ml时,对两种酶的抑制率分别为(74.1±1.8)%和(81.0±1.9)%,效果明显优于阳性对照药阿卡波糖和槲皮素。结论 50%乙醇洗脱物对α-糖苷酶和醛糖还原酶具有明显的抑制活性,为海南五层龙根乙醇提取物抗糖尿病活性成分集中的组份。     

含委陵菜属植物提取物的醛糖还原酶抑制剂可治疗糖尿病

一种醛糖还原酶抑制剂的活性成分是委陵菜属植物的水或亲水性有机溶媒提取物。所用的委陵菜属植物,包括白亮委陵菜(Potenlilla candicans),金黄色委陵菜(P.aureaLin),委陵菜(P.chinensis Set.),三叶委陵菜(P.freyniana Borum)和P.tormentilla Schrk。以水或含水有机溶媒在室温或约80—100℃提取该植物全草或根。提取物具有抑制醛糖还原酶的作用,可用来预防或治疗糖尿病并发症。     

索骨丹提取物抑制黄嘌呤氧化酶活性及抗氧化作用

目的 观察索骨丹不同提取物对黄嘌呤氧化酶(XOD)的影响及抗氧化作用.方法 采用铁氰化钾还原法测定还原力,通过邻二氮菲和Fe2+产生有色络合物及XOD催化黄嘌呤生产尿酸的方法,分别测定索骨丹提取物对几种反应体系吸光度值的影响.结果 索骨丹乙醇提取物对XOD的最大抑制率为85.18％,水提物和醋酸乙酯提取物略次之,醋酸乙酯提取物具有较强的还原能力,乙醇提取物与亚铁离子螯合率最高达75％.结论 索骨丹提取物具有较强的抑制XOD活性的作用并具有较强的体外抗氧化作用.     

牡丹皮体外抑制AGEs生成及活性成分筛选研究

通过构建体外非酶糖基化反应模型——牛血清白蛋白/丙酮醛反应体系(BSA/MGO reaction system),评价牡丹皮体外抑制晚期糖基化终产物(AGEs)生成的活性,同时借助HPLC和LC-ESI-MS/MS检测辨识牡丹皮中抑制AGEs生成的活性成分。采用荧光光度法考察不同浓度的牡丹皮提取物(生药浓度50,100,150,200,250 g·L-1)体外抑制AGEs生成的规律,结果表明不同浓度的牡丹皮提取物都有一定的体外抑制AGEs生成的活性,各组于反应24 h后AGEs的生成速度趋于平缓,反应6 d后测得抑制率分别为(36.2±5.3)%,(43.5±6.2)%,(55.4±7.8)%,(68.6±6.7)%,(70.4±8.2)%,并呈现出剂量依赖性。同时,利用HPLC分析牡丹皮与丙酮醛孵育前后的色谱图,结果发现反应后有5个色谱峰发生变化,并出现色谱峰减少或增加的现象。经LC-ESI-MS/MS分析鉴定表明,这5个成分分别为三没食子酰葡萄糖、四没食子酰葡萄糖、没食子酰芍药苷、六没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷。因此得出,牡丹皮具有显著的体外抑制AGEs生成的活性,三没食子酰葡萄糖、四没食子酰葡萄糖、没食子酰芍药苷、六没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷5个成分可能是牡丹皮防治糖尿病肾病的活性物质,丰富了牡丹皮的基础研究,为其后续研究的开展提供了思路启发和参考依据。     

羌活中5-脂氧合酶和环氧合酶的抑制活性成分

研究了羌活(Notopterygium incisum)地下部分的正己烷提取物对5-脂氧合酶(5-LO)和环氧合酶(COX)的抑制活性,并与几种羌活商品药材进行了比较。结果:在体外试验中,羌活提取物对5-LO和COX呈现明显的抑制活性;活性成分的分离:从羌活中分离到3种活性成分phenethyl ferulate,falcarindiol和(一)-bornyl ferulate,其对5-LO和COX的IC_(50)分别为5.75和4.35,9.4和66.0,10.4和12.0μM。对几种羌活商品药     

牡丹皮组分抑制“毒损因子AGEs”生成的作用及机制研究北大核心CSCD

晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)可导致糖尿病及其并发症等多种疾病。该研究构建体外非酶糖基化反应模型——牛血清白蛋白/丙酮醛(BSA/MGO reaction system)与牡丹皮提取物孵育,采用HPLC和UPLC-Q-TOF-MS/MS检测辨识牡丹皮提取物与丙酮醛共孵育液中抑制AGEs生成的活性成分,筛选出salvianan、paeoniside、苯甲酰芍药苷、牡丹苷J、没食子酰氧化芍药苷、氧化苯甲酰芍药苷、5-羟基-3S-羟甲基-6-甲基-2,3-二氢苯并呋喃、没食子酰芍药苷等差异性成分,推测其为牡丹皮提取物捕捉MGO的潜在活性成分;同时采用BSA-葡萄糖反应体系考察不同浓度的牡丹皮提取物(饮片质量浓度40、80、120、160、200 mg·mL^(-1))体外抑制AGEs生成的作用规律,进一步评价牡丹皮提取物及差异成分没食子酰芍药苷和苯甲酰芍药苷抑制高糖诱导的HUVEC内AGEs生成情况,并采用AO/EB双荧光染色法观察细胞凋亡。结果显示牡丹皮提取物及差异成分对AGEs的形成有一定的抑制作用,可降低细胞凋亡。该研究为牡丹皮通过抑制毒损因子AGEs治疗糖尿病血管并发症具有参考价值。     

小茴香等药食两用中药提取物抑制Aβ 42聚集活性研究

目的:研究几种药食两用中药提取物的Aβ42多肽聚集抑制活性。方法:选择小茴香、花椒、薄荷、玫瑰等10种药食两用中药为研究对象,分别用索氏提取法、溶剂浸取法制备石油醚、乙酸乙酯和甲醇提取物;用体外ThT荧光光谱法和E.coli细胞模型对各提取物进行Aβ42聚集抑制活性研究。结果:各中药石油醚和甲醇提取物在体外ThT试验和E.coli细胞模型中均没有明显活性;小茴香和玫瑰花乙酸乙酯提取物则可以显著降低样品作用体系ThT相对荧光强度,分别为0.64和0.59;同时对E.coli细胞具有显著的生长促进作用,相对生长率分别为56.88%和44.59%(200μg/mL),超过阳性对照表没食子儿茶素没食子酸脂(EGCG)(41.87%)。结论:小茴香、玫瑰花等中药乙酸乙酯提取物在体外和E.coli模型中具有Aβ42聚集抑制活性。     

蛇床子等中药抑制Aβ42多肽聚集活性研究

目的 研究几种中药抑制Aβ42多肽聚集沉淀的活性.方法 分别制备蛇床子等十二味中药的石油醚、乙酸乙酯和甲醇提取物,用ThT荧光光谱法和E.coli模型对各提取物进行Aβ42聚集抑制活性研究.结果 苦参、蛇床子和陈皮乙酸乙酯提取物能够大大降低作用体系ThT荧光强度,同时在E.coli模型中可以显著促进E.coli细胞生长(超过阳性对照样品EGCG).此外,川楝子石油醚提取物也具有较强活性.结论 川楝子、苦参、蛇床子、陈皮等含有抑制Aβ42聚集沉淀的活性成分,可作为抗AD中药进行深入系统研究.     

刺头复叶耳蕨不同提取部位体外抗HIV-1蛋白酶活性的研究

目的 对鳞毛蕨科复叶耳蕨属植物刺头复叶耳蕨不同提取部位体外抗HIV-l蛋白酶活性进行研究.方法 用荧光光度法测定蛋白酶的半数抑制浓度(IC5o).结果 刺头复叶耳蕨乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提取物抑制HIV-1蛋白酶的半数有效浓度IC50分别为0.73,1.17,2.47 μg/ml.结论 刺头复叶耳蕨乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物与水提取物具有体外抑制HIV-1蛋白酶活性.     

保健食品中含有的天然成分对CYP的影响:葡萄种子的抑制作用

探讨了保健食品中含有的天然成分对CYP酶的影响。 方法:制备SD系雄性大鼠肝微粒体(Ms),添加各种天然物的提取物。用CYP分子的探针底物测定活性。另外,NADPH、Ms与葡萄种子提取物(GSE)、GSE的各种组分(fr)、茶提取物(GTE)温育后,检测红霉素(ERM)-N脱甲基化酶的活性。 结果:14种天然物提取物中,GSE与GTE可明显抑制氨基比林N-脱甲基化酶活     

不同采收期牛至叶提取物体外抗氧化和降糖活性研究

目的对比研究不同采收期牛至叶提取物的物质组成与体外抗氧化和降糖活性。方法采用乙腈-水(1∶1)提取制备牛至叶提取物,福林酚法测定其中总酚含量,AlCl_3比色法测定其中总黄酮含量,LC-Q-TOF-MS法分析主要成分。采用ABTS自由基清除和FRAP总抗氧化实验评价不同采收期牛至叶提取物的抗氧化活性,荧光葡萄糖摄取法和对α-葡萄糖苷酶的体外抑制实验评价不同采收期牛至叶提取物体外降糖活性。结果从牛至叶提取物中鉴定出6种主要成分,分别为牛至苷I、木犀草素7-O-葡萄糖醛酸苷、芹菜素7-O-葡萄糖醛酸苷、迷迭香酸、紫草酸、牛至苷I衍生物;提取物中总酚含量以开花期7月份采收的最高,总黄酮含量以成熟期9月份采收的最高。不同采收期牛至叶提取物均有较好的抗氧化和降糖作用,其中7月份采收的牛至叶提取物体外抗氧化活性最强,10月份采收的牛至叶提取物体外降血糖活性最强。结论牛至叶乙腈-水(1∶1)提取物具有潜在的抗氧化及降糖活性,其抗氧化及降糖活性强度受牛至叶采收时间的影响。