单纯疱疹病毒糖蛋白的特性及其临床意义

单纯疱疹病毒I型（HSV－1）有12种已命名的特异性的抗原糖蛋白，其中大部分具有诱导病毒原发感染的功能，是细胞免疫和体液免疫的主要靶标，也是预防和治疗HSV－1感染的亚单位疫苗或DNA疫苗的候选基因。本文综述了HSV囊膜糖蛋白的特性和其在复制循环中的作用以及其临床意义，为研制预防为治疗单疱病毒性角膜炎的糖蛋白联合疫苗提供了理论基础。     

单纯疱疹病毒糖蛋白的特性及其临床意义

单纯疱疹病毒I型(HSV-1)有12种已命名的特异性的抗原糖蛋白,其中大部分具有诱导病毒原发感染的功能,是细胞免疫和体液免疫的主要靶标,也是预防和治疗HSV-1感染的亚单位疫苗或DNA疫苗的候选基因.本文综述了HSV囊膜糖蛋白的特性和其在复制循环中的作用以及其临床意义,为研制预防和治疗单疱病毒性角膜炎的糖蛋白联合疫苗提供了理论基础.     

单纯疱疹病毒1型约105000道尔顿糖蛋白的鉴定及其编码基因的定位

用放射免疫沉淀试验和用单纯疱疹病毒1型与2型(HSV-1/HSV—2)型间重组林作物理图谱的方法,鉴定出单克隆抗体(McAb)1A12目标抗原是一分子量约为105,000道尔顿的糖蛋白,存在于HSV—1感染的BHK细胞提取物中,其编码基因定位于长单一序列(UL)上,在0.640-0.682遗传单位之间。由于该糖蛋白的编码基因与gC编码基因部分重叠,因此该糖蛋白可能是gC的另一种形式。     

单纯疱疹病毒1型约105000道尔顿糖蛋白的鉴定及其编码基因的定位

本报道一种分子量约为105,000道尔顿的HSV糖蛋白并定位了其编码基因。将HSV-1SM44分别感染BHK细胞单层,用[~3H]-DL-亮氨酸或[U-~(14)C]-D-果糖参入标记。用含1％ NP 40的pH 7.4 0.1mol/L Tris-HCl-0.15mol/L NaCl-0.1mmol/L PMSF(氟化磺酰苯甲烷)裂解细胞。加入McAb 1A12腹水与相应抗原结合。加入兔抗鼠IgG血清,用     

单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)包膜糖蛋白gG-2相关研究进展

本文综述了单纯疱疹Ⅱ型的包膜糖蛋白gG-2作为抗原在HSV-2血清学诊断分型脐包膜糖白gG-2作为疫苗成分的研究进展     

单纯疱疹病毒糖蛋白的研究进展

目前已发现并正式命名的单纯疱疹病毒的包膜糖蛋白共有１１种。它们在病毒在复制循环和致病中起着至关重要的作用，并且也是诱生机体体液及细胞免疫反应的主要免疫原。本文综述了近年来该所病毒糖蛋白的研究进展，对５种新命名的糖蛋白进行了重点阐述。     

单纯疱疹病毒2型30kD糖蛋白的鉴定及其编码基因的定位

用放射免疫沉淀试验和单纯疱疹病毒1型与2型(HSV-1／HSV-2)型间重组株作物理图谱的方法，鉴定出单克隆抗体(McAb)CH-A9靶抗原是一分子量约为30kD的糖蛋白，存在于HSV-2感染的BHK细胞膜上，其编码基因定位于长单一序列(UL)上，在0.490～0．564遗传单位之间，与已报道的HSV-2蛋白编码基因元重叠，因此g30kD可能是一种新的HSV-2糖蛋白。     

单纯疱疹病毒2型30kD糖蛋白的鉴定及其编码基因的定位

用放射免疫沉淀试验和单纯疱疹病毒1型与2型(HSV-1/HSV-2)型间重组株作物理图谱的方法,鉴定出单克隆抗体(McAb)CH-A9靶抗原是一分子量约为30kD的糖蛋白,存在于HSV-2感染的BHK细胞膜上,其编码基因定位于长单一序列(UL)上,在0.490～0.564遗传单位之间,与已报道的HSV-2蛋白编码基因无重叠,因此g30kD可能是一种新的HSV-2糖蛋白。     

单纯疱疹病毒糖蛋白模拟位的研究

目的 为了充分认识单纯疱疹病毒（HSV）糖蛋白的抗原表位，寻找HSV多组分疫苗和新型基因工程疫苗更有效的小片段短肽作为该病毒疫苗的备选免疫原。方法 利用有动物保护活性的抗HSV糖蛋白C（gC)单克隆抗体（McAb)1A12淘筛噬菌体随机12肽库，经4轮筛选后进行ELISA检测，随机挑取14个阳性克隆进行序列测定，序列比较后得到保守序列，做ELISA阻断实验进一步鉴定筛选结果并与相关天然蛋白HSV gC进行序列比较。结果 获得保守序列－SG（L）RHII－和其侧翼辅助序列－AK－、－VW－，其与天然相关蛋白HSV gC114-116位氨基酸十分相似。携有此短肽的噬菌体可以与McAb特异结合，并可部分阻断抗体与HSV囊膜抗原的反应。结论 所筛选到的保守序列可模拟McAb针对的抗原表位，可能是HSV的替代抗原。这一研究方法有望使短肽替代庞大的糖蛋白全长氨基酸序列，为研制更有效及更广谱的基因工程疫苗提供依据，也使研制基于抗原表位水平的特异诊断试剂成为可能。     

单纯疱疹病毒糖蛋白C的鉴定

业已发现的单纯疱疹病毒(HSV)糖蛋白有6种即gB、gC、gD、gE,gG和gH。糖蛋白C(gC)既可诱生中和抗体,也能诱导细胞免疫,gC-1还起到补体C3b受体的作用。本文采用放射免疫沉淀试验和用HSV-1/HSV-2型间重组株作物理图谱等方法,鉴定出6株单克隆抗体(McAb)的靶抗原为gC。 6株抗HSV的MeAbs 1A12、1C4     

单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）包膜糖蛋白gG-2相关研究进展

本文综述了单纯疱疹Ⅱ型的包膜糖蛋白gG-2作为抗原在HSV-2血清学诊断分型脐包膜糖白gG-2作为疫苗成分的研究进展     

单克隆抗体作单纯疱疹病毒糖蛋白的特性鉴定以及临床应用

应用本室制备的8株抗单纯疱疹病毒糖蛋白单克隆抗体(抗HSV McAb)进行了系列研究,①鉴定出一种新的HSV糖蛋白g30K、gC的一种新形式,以及gC和gD;②建立了HSV感染的临床标本作抗原抗体分型检测的McAb-ELISA双夹心法,检测961份标本效果良好,并己在全国各地一些医疗单位推广使用;③证明McAb治疗家兔实验性单纯疱疹性角膜炎(HSK)有显著效果,并探讨其治疗机理主要为中和作用和ADCC效应;④对部分志愿者用McAb治疗单纯疱疹性角膜炎、妇女生殖器疱疹和小儿口腔疱疹性糜烂,取得明显疗效。     

新生儿(双胎)单纯疱疹病毒感染2例

病例 患儿双胎(长女,次子),为第二胎第二产,胎龄36~( 4)W,剖宫产分娩,出生体重均为2600g,生后1min Apgar评分均为7分,有轻度室息,经吸痰吸氧后入新生儿监护室保温观察。询问患儿父母体健,其母孕期无妊娠合并症及明显病毒感染史。 长女于生后3天无明显诱因出现间断性发热,体温37.5℃左右,经补充入量,开包降温,体温渐恢复正常,生后7天该患儿体温再度升高达38.5℃,精神反应差,皮肤颜色发暗,口周发绀,吐沫,吸吮力较前不降,皮肤黄染加重,听诊双肺呼吸音粗糙,外周血常规示白细胞30.5×10~P/L,血红蛋白213g/L,淋巴31％,中性37％,给予吸氧,补液,抗炎抗病毒     

表达2型单纯疱疹病毒糖蛋白D的重组痘苗病毒对动物…

用表达２型单纯疱疹病毒糖蛋白Ｄ的重组痘苗病毒免疫ＣＢＡ小鼠，通过间接免疫荧光和甲甲基偶氮唑蓝法动态观察细胞毒性Ｔ细胞活性，均见增高并检测了其产生的抗体和动物的保护作用。同时对Ｒ－ｇＤ－Ｖ和２型单纯疱疹病毒产生的二次ＣＴＬ活性进行了比较，结果表明，Ｒ－ｇＤ－Ｖ产生抗体３周达高峰，７周下降为１：３２０，抗体对病毒击动物有保护作用，其中和指数为６３ 。     

McAb夹心法ELISA检测血清单纯疱疹病毒2型糖蛋白gC型特异性抗体

建立了检测单纯疱疹病毒2型(HSV-2)糖蛋白gC型特异性抗体的方法。用本法同免疫荧光血清分型,抗原竞争ELISA和微量中和实验(MNT)进行了比较,检测HSV-2抗体的感度均优于后3种方法。实验结果表明:本法特异、敏感、简便。不仅可用于区分人群中HSV感染型别的流行病学调查,也适用于HSV-2糖蛋白gC的特异性研究。     

McAb夹心法ELISA检测血清单纯疱疹病毒2型糖蛋白gC型特异性抗体

建立了检测单纯疱疹病毒2型(HSV-2)糖蛋白gC型特异性抗体的方法。用本法同免疫荧光血清分型，抗原竞争ELISA和微量中和实验(MNT)进行了比较，检测HSV-2抗体的感度均优于后3种方法；实验结果表明：本法特异、敏感，简便。不仅可用于区分人群中HSV感染型别的流行病学调查，也适用于HSV-2糖蛋白gC的特异性研究。     

单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA聚合酶的纯化与鉴定

单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)可以在受染细胞中诱导许多病毒特异性多肽的合成,其中少数具有特异性酶活性,例如HSV-2诱导的DNA聚合酶等。我们从HSV-2感染的Vero细胞中分离纯化了DNA聚合酶,并且对其特性进行了比较研究。     

单纯疱疹病毒糖蛋白B的结构与功能区

单纯疱疹病毒1(HSV-1)是双链线性DNA包膜病毒,其DNA编码至少有11种特异型的糖蛋白,其中gB、gD、gH和gL是病毒复制、穿入、病毒胞间扩散和病毒囊膜与感染的细胞膜融合必须糖蛋白[1～5].gB是病毒囊膜的组成部分,是HSV-1感染晚期糖蛋白,在感染的细胞中,gB是跨膜蛋白,穿膜时是以二聚体和糖基化形式由胞外区穿向细胞膜,存在于感染细胞的胞膜上、内质网、高尔基复合体和核膜上.HSV-1 gB在疱疹病毒家族中是高度保守蛋白,各毒株间差异较小,且与所有的疱疹类病毒亚群有较大的同源性[6～9];gB是病毒复制必须的多功能蛋白,是宿主免疫反应的主要靶抗原,能诱导细胞免疫、体液免疫和细胞毒T淋巴细胞反应[10～14].鉴于gB蛋白的多种生物活性,近年来许多学者对gB的抗原和功能区进行大量研究.HSV-1 gB由UL27基因编码,全长2172bp,编码904氨基酸,由-30(有的是29)氨基酸序列组成的信号肽、-696氨基酸序列组成的在氨基端具有亲水性的胞外区、-69氨基酸序列组成的具有疏水性的跨膜区、-109氨基酸序列组成的羧基端具有极性胞内区[15].HSV-1 gB含有6个一致序列N-连接糖基化位点和10个半胱氨酸序列,在与gB同源序列中是高度保守序列,这些结构是整个分子内的重要结构[16].     

单纯疱疹病毒1型糖蛋白D主要抗原表位区的表达、纯化及鉴定

 目的 原核表达单纯疱疹病毒1型(HSV-1) 糖蛋白D(gD)主要抗原表位区,纯化融合表达蛋白并对其进行鉴定。方法 用Lasergene7.0中Protean软件对HSV-1 gD氨基酸序列进行抗原表位预测和分析,筛选出gD主要抗原表位区(gD MED),人工合成该区域cDNA序列,构建原核表达载体pET-GST-gD MED;将重组质粒转化大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3) pLysS,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过GST?Bind 纯化试剂盒对gD MED融合蛋白进行纯化;Western blot对gD MED融合蛋白的免疫活性进行分析。结果 HSV-1 gD在266~394区域富含抗原表位,人工合成了该区域的cDNA序列,并成功构建了原核表达载体pET-GST-gD MED;gD MED融合蛋白主要以可溶形式表达,分子质量约为45 ku,纯度能达95%;Western blot结果显示,gD MED融合蛋白能与感染HSV-1患者的血清发生特异结合。结论 成功表达和纯化了具有良好抗原性的HSV-1 gD MED融合蛋白,为HSV免疫诊断试剂盒和基因工程疫苗的研制奠定了基础。     

单纯疱疹病毒1型和2型的单克隆抗体

一、引言 本章叙述1型和2型单纯疱疹病毒(HSV-1、HSV-2)的杂交瘤及其单克隆抗体作为血清学试剂,在研究病毒糖蛋白抗原决定簇方面的应用。HSV-1和HSV-2都含有一个分子量为10~8的线状双股DNA基因组,由162个壳微粒组成的立体对称衣壳、以及衣壳经感染细胞膜出芽时获得的囊膜。HSV病毒体由四种形态上不同的结构组成。最里面是由蛋白组成的一层已确定的衣壳所包绕的DNA核心,中间一层称为体皮(Tegument)的无定形蛋白,第三层是病毒的囊膜。囊膜由病毒特异的糖蛋白组成,在免疫血清的中和试验基础上,可将