PCR法与ELISA法检测丙型肝炎病毒及乙型肝炎病毒比较

目的:探讨PCR与ELISA 2种方法检测丙型肝炎病毒和乙型肝炎病毒的差异和临床意义.方法:随机抽取无偿献血者标本300份,分为ALT升高组和ALT正常组,用ELISA法检测抗-HCV和HbsAg,用RT-PCR检测HCV-RNA和HBV-DNA.结果:抗-HCV阳性标本26例阳性率为8.7%,经RT-PCR检测,HCV-RNA均为阳性,抗-HCV阴性的标本中有2例HCV-RNA为阳性.HCV-RNA的阳性率为16%,2种方法检测结果差异有统计学意义(P<0.01);300份标本中HBsAg阳性和HBV-DNA阳性比率分别为11.3%和12.7%,两者无明显差异(P>0.05).结论:ELISA方法检测丙型肝炎病毒存在一定的漏检现象,应用RT-PCR检测HCV-DNA利于早期诊断,也是筛选献血员是否携带丙型肝炎病毒的较可靠方法.     

丙氨酸转氨酶升高者肝炎病毒感染情况调查

用ELISA法测定了154份丙氨酸转氨酶（ALT）升高者血清的抗－HAV IgM,HBsAg,抗－HCV,结果表明,抗－HAV IgM,HBsAg,抗－HCV的阳性率分别为7．8％,14．3％,3．2％;抗－HAV IgM阳性率随ALT值的升高而增加,男女HBsAg阳性率有显著性差异,HBV,HCV混合感染发生率为0．6％,提示ALT升高者中存在着甲,乙,丙型肝炎病毒的感染,以乙肝病毒感染为主,不同型肝炎病毒存在混合感染。     

实时荧光定量PCR检测丙型肝炎病毒

目的探讨实时荧光定量PCR（FQ—PCR）技术检测丙型肝炎病毒（HCV）RNA载量与抗-HCV及丙氨酸氨基转移酶（ALT）异常的相关性。方法用FQ—PCR检测115份疑似HCV感染的病人血清HCV—RNA，ELISA法检测抗-HCV，全自动生化分析仪测定ALT。结果以80拷贝／ml血清为标准，115份标本中HCV—RNA阳性率为54．8％（63／115）；抗-HCV阳性率为53．9％（62／115）；ALT异常率为40．9％（47/115）。HCV—RNA载量与抗-HCV（＋）例数呈正相关（r=0．986，P〈0．01）。HCV—RNA载量与ALT异常例数（r=0．94，P〈0．01）、含量（r=0．624，P〈0．01）呈正相关。结论HCV—RNA载量升高，抗-HCV阳性率相应增加，ALT高于正常值（40U／L）的异常率和浓度也增高，均呈正相关。FQ—PCR法可作为临床检测丙型肝炎的确诊方法之一。     

丙型肝炎病毒母婴垂直传播的研究

目的：了解丙型肝炎病毒（HCV）母婴垂直传播情况,方法：采肜酶联免疫法（ELISA）和聚合酶链反应（PCR）检测1047例肝病孕产妇血清丙型肝炎病毒抗体（抗－HCV）和丙型肝炎病毒基因（HCV－RNA）,对HCV感染产妇血清进行HCV分型及半定量分析。再对HCV感染产妇的丈夫静脉血及新生儿脐血,出生后24小时的,1,6,12个月股静脉血进行抗－HCV,HCV－RNA和HCV分型的检测,结果：1047例肝病孕产妇中有12例（1．15％）HCV感染,其丈夫血清抗－HCV,HCV－RNA均为阴性,而12名新生儿中有3例脐血及出生后24小时内外周血均抗－HCV阳性其中2例HCV－RNA同时阳性,仅1例婴儿在出生后1,6,12个月时检测抗－HCV与HCV－RNA均阳性,且与其母所感染的HCV基因型相同,其余2例婴儿出生后1个月均阴转,本组HCV母婴传播率为8．3％,结论：支持我国存在HCV母婴垂直传播。     

乙型和丙型肝炎病毒重叠感染的研究

目的：我国是乙型肝炎和丙型肝炎发病率较高的国家。而HBV和HCV有着相同的传播途径，为了解乙型肝炎病毒携带者和乙型肝炎患者重叠感染丙型肝炎病毒（HCV）状况，并探讨乙型肝炎病毒（HBV）、HCV重叠感染相互之间的影响。方法：应用ELISA法对726例HBV携带者和乙型肝炎患者进行了血清抗-HCV检测和HBV标志物检测。结果：726例HBV携带者和乙型肝炎患者血清抗-HCV阳性率为10．47％，男性阳性率为15．78％，女性阳性率为1．87％，年龄组以31—40岁阳性率最高为24．64％，不同人群以吸毒人员阳性率最高为78．89％。结论：HBV、HCV重叠感染通过注射是主要感染途径；HBV、HCV重叠感染者血清抗-HBe阳性率高于HBV携带者，显示HBV、HCV重叠感染使HBV的复制受到抑制。     

荧光定量PCR在丙型肝炎病毒感染检测中的应用

目的　观察荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)在丙型肝炎病毒 (hepatitisCvirus ,HCV )感染检测中的临床应用情况。方法　用FQ PCR检测 3 15份怀疑HCV感染的临床血清标本 ,并同时采用酶联免疫吸附测定法 (ELISA)检测抗HCV ,用生化仪测定血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)水平 ,了解样本中HCV RNA含量与抗HCV及ALT的相关性。结果　 3 15份标本中有 2 2 5份HCV RNA含量高于 80拷贝·ml-1,2 5 0份抗HCV阳性 ,14 5例ALT异常 ,HCV RNA含量与抗HCV阳性率间有显著的相关性 (r =0 .682 ,P =0 .0 0 2 ) ;HCV RNA含量与ALT异常率间也有显著的相关性 (r =0 .92 3 ,P =0 .0 3 2 )。结论　FQ PCR技术检测HCV RNA特异性强 ,灵敏度高 ,具有良好的临床应用价值。     

双色酶联免疫吸附实验同时检测HBV和HCV感染

为了降低诊断乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）感染的成本，缩短检测所需时间，本文创立了一种同时检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）和抗丙型肝炎病毒抗体的双色酶联免疫吸附实验（ELISA）的方法。用纯化的标准品HBsAg测定了该方法的敏感度为10ng／ml，与单色ELISA的结果一致。对300份HBSAg阳性血清，120份抗HCV抗体阳性血清和32份双阳性血清所做的研究表明：双色ELISA的结果与单色ELISA的结果完全吻合。650份待测血清的检测结果表明单色和双色ELISA测定HBSAg阳性结果完全吻合，测定抗HCV抗体阳性结果吻合率为92％，且双色的阳性率略高于单色，但其差异没有显著性意义。因此认为双色ELISA是同时检测HBV和HCV感染的一种简便、快速、节俭的方法。     

核酸检测与酶免检测平行筛查血液的效果评价

目的：初步了解本站采取核酸检测与酶免检测平行筛查血液的效果。方法：对2011年6月15日～2014年6月底共计39236份献血者标本的 ELISA 检测结果（HBsAg、抗－HCV、抗－HIV）和 NAT 检测结果进行比较分析。结果：39236份标本中 NAT 阳性220份,阳性率为0．56％;ELISA阳性（HBsAg、抗－HCV、抗－HIV 3项）199份,阳性率为0．51％;NAT、ELISA 阳性157份,占0．40％;ELISA 阴性 NAT 阳性63份,占0．16％,鉴别出27例 HBV －DNA 和1例 HCV －RNA;NAT 阴性 ELISA 阳性42份,占0．11％,ELISA 双试剂检测阳性与 NAT 阳性符合率为78．9％,HBsAg、抗－HCV、抗－HIV 双试剂阳性与 NAT 阳性符合率分别为80．3％、66％、100％。结论：NAT 与 ELISA 平行检测血液筛查模式既能够防漏互补,同时也可以缩短血液检测周期,保障血液的及时安全供应。     

丙型肝炎病毒RNA定量检测与抗-HCV及ALT的关系

目的了解丙型肝炎病毒核糖核酸（HCV RNA）定量与丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）及丙氨酸氨基转移酶（ALT）的关系。方法用荧光定量逆转录聚合酶反应（FQ—RT—PCR）检测239例抗-HCV阳性者的HCVRNA定量，同时检测ALT水平。结果239例中，150例（62．8％）HCV RNA定量高于80拷贝／ml；133例ALT异常，其异常率随HCV RNA定量的升高而增加。ALT异常例数与正常例数差异有统计学意义（P〈0．01），ALT水平与HCVRNA定量无相关性（r=0．524，P〉0．05），而ALT异常率与HCV RNA定量呈正相关（r=0．955，P〈0．05）。结论HCV RNA是反映HCV复制的可靠指标，结合ALT结果可帮助了解HCV在体内复制状况。     

甘肃省1050例不同人群血清抗—HCV的检测

本文采用第二代酶联免疫试验（ELISA）对我省1050例不同人群血清标本进行丙型肝炎病毒抗体（抗－HCV）检测，。结果表明：健康人群抗0HCV是性率为5．2％，存在HCV无症状携带者或隐性感染者；职业供血员中HCV感染严重，两组抗－HCV阳性率分别为30．1％和71．8％，受血者抗－HCV阳性率为20．7％，表明输血是HCV的主要传播途径，各类肝病中抗－HCV阳性率为21．1％，存在HBV和HCV和重叠感染，在孕妇和新生儿中检出抗－HCV阳性者，提示HCV有经母婴传播的可能。     

血透患者血清庚型肝炎病毒RNA及抗体检测

目的:了解血透患者庚型肝炎病毒(HGV)感染率及与其他肝炎病毒重叠感染的情况。方法:收集57份血透患者血清标本,根据HGV RNA保守片段5′非编码区序列,设计了两对引物,采用逆转录巢式PCR扩增HGV RNA,以及EIA法检测HGV IgG抗体。同时还检测了HBV DNA及HCV IgG抗体。结果:57份标本中,4份HGV RNA阳性(7.0％),2份HGV IgG抗体阳性(3.5％)。HGV RNA与HGV IgG抗体呈“分离”现象。4份HGV RNA阳性标本中2份为HBV DNA阳性,2份为HCV IgG抗体阳性;其中1份标本HBV DNA和HCV IgG抗体均为阳性。结论:血透患者HGV感染率高于健康献血员和正常人群,HGV可与HBV和HCV重叠感染。     

丙型肝炎病毒检测与抗体检测的比较

应用ELISA法检测抗-HCV抗体的阳性检出率不及PCR法检测HCV RNA。据文献报道HCV的感染率高于抗-HCV抗体检测的结果,而PCR法可检出携带者血内少量的丙型肝炎病毒,因此被视为较有效的检测手段。我们对本院各科送检丙型肝炎的部分标本及少量献血员标本进行抗-HCV抗体和HCVRNA的检测,以比较两种方法在临床检验中的意义。     

抗-HCV不同试剂检测结果分析

目的探讨不同检测方法、试剂对丙型肝炎病毒（HCV）抗体检测结果的影响。方法以不同试剂采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对献血者血浆标本进行抗-HCV检测,呈反应性标本采用HCV RNA RT—PCR荧光定量确证检测。结果ELISA再次检测抗HCV抗体阳性率明显低于初次检测阳性率,差异有统计学意义（P〈0．01）,确证试验阳性率低于初次检测和再次检测的阳性率,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论ELISA测定结果为HCV抗体阳性者应经HCVRNART—PCR荧光定量加以确认。     

乙型肝炎病毒血清学标记物与PCR HBV—DNA检测结果的比较

对309例乙型肝炎病毒血清学标记物15种阳性形式进行PCR HBV－DNA检测比较，HBsAg( )、HBeAg( )形式的PCR阳性率95．2％；HBsAg( )、HBeAg( )、抗-HBc( )形式的PCR阳性率83．3％。抗－HBs( )、抗-HBc( )形式的PCR阳性率为0；抗－HBc( )形式的PCR阳性率亦为0。结论：PCR HBV－DNA检测具有特异性高、敏感性强、准确性大的优点，值得推广应用。     

广西部分地区人类免疫缺陷病毒感染者合并丙型肝炎病毒感染情况分析

目的 了解广西人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者中HIV/丙型肝炎病毒(HCV)的混合感染率及其HCV RNA的阳性率,为今后HIV患者丙肝筛查及预防提供参考.方法 采用ELISA法检测HIV感染者血清中的丙肝病毒抗体,按结果分成抗-HCV(+)组和抗-HCV(-)组,再用巢式PCR法检测血清的HCV RNA,分析比较HCV RNA阳性率.结果 在300例HIV感染者中,有146例抗-HCV阳性,154例抗-HCV阴性;在抗-HCV阳性组中,HCV RNA的阳性率为78.08％(114/146);在抗-HCV阴性组中,HCV RNA阳性率为26.62％(41/154);ELISA法和巢式PCR法检测HCV感染的符合率为75.67％[(113+114)/300].结论 在广西的HIV感染者中HCV感染状况较严重.对HIV感染者进行丙肝筛查时,为减少漏诊率,建议采用PCR方法检测抗-HCV阴性血清中的HCV RNA.     

丙型肝炎与乙型肝炎病毒重叠感染的初步观察

对210例乙型肝炎患者和52例非肝病患者进行了血清丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）检测，在慢性迁延性肝炎的阳性率为11．1％，慢性活动性肝炎为17．2％，肝硬化为34．0％。丙型肝炎病毒（HCV）与乙型肝炎病毒（HBV）重叠感染率为17．1％（36／210）。抗-HCV阳性者80．5％有输血史。未发现HCV感染对HBV复制有抑制的现象．HCV和HBV重叠感染肝硬化患者肝功生化指标与单纯HBV感染肝硬化患者比较无明显差异，但重叠感染的肝硬化患者的并发症较多见。     

检测乙、丙型肝炎病毒基因芯片的制备

目的：探讨研制检测乙型和丙型肝炎病毒的基因芯片。方法：以HBV、HCV高度保守的基因片段为探针,同时用没有同源性的植物基因片段为内参照基因,制备成“乙、丙型肝炎病毒双检基因芯片”。检测时抽提患者血清中的病毒核酸,进行RT－PCR扩增及荧光标记,然后与双检基因芯片杂交,结交结果用ScanArray3000扫描仪扫描。结果：双检基因芯片的内参照结果能做到绝对阳性和绝对阴性,同时对不同血清（正常人血清,乙肝E抗原阳性血清,丙肝RNA阳性血清,乙肝、丙肝阳性混合血清）能有效检测区分。结论：本研究成功地制作了乙、丙型肝炎病毒双检基因芯片,可望使用于临床。     

HBV DNA荧光定量PCR与乙型肝炎病毒血清标志物检测的相关性探讨

目的探讨鞍山地区HBV DNA荧光定量PCR与乙型肝炎病毒血清标志物检测的相关性。方法用深圳匹基生物工程股份有限公司生产的HBVDNA荧光定量PCR检测试剂。结果乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒核心抗体(抗-HB)三项均阳性，患者血清标本中检出HBV DNA阳性率高达98．4％；HBsAg、乙型肝炎病毒e抗体(抗-HBe)、乙型肝炎病毒核心抗体(抗-HBc)三项均阳性，患者血清标本中检出HBV DNA阳性率达63．1％。结论HBV DNA荧光定量PCR检测在临床上对乙型肝炎基因诊断，特别是进行抗病毒治疗和治疗监测方面具有重要意义。     

基因芯片技术检测乙、丙型肝炎病毒临床研究

探讨基因芯片技术在乙、丙型病毒检测的作用。方法 用迈科锐HBV、HCV联合基因芯片检测血清HBV—DNA和HCV—RNA。结果 基因芯片检测42例HBV—DNA的检出率为86％(26／30)，符合率为88％(37／42)，假阳性为8％(1／12)。检测HCV—RNA检出率为71％(5／7)。符合率为92％(39／42)，假阳性为2％(1／35)。结论 HBV、HCV联合基因芯片检测HBV—DNA和HCV—RNA有较好的敏感性和特异性。     

汕头市大学生乙型肝炎病毒血清标志物的检测报告

目的 了解本市大学生中乙型肝炎病毒(HBV)的感染状况，评价乙型肝炎疫苗在人群应用的效果。方法 采用ELISA方法检测所取1514份新生血清的HBV血清标志物。结果 1514份血清中，HBsAg( )，HBBAg( )，抗-HBe( )标本236份，阳性检出率为15．59％；HBsAg( )，抗-HBe( )，抗-HBc( )标本112份，阳性检出率7．40％：抗-HBs( )标本675份，阳性检出率44．58％；总的阳性率为67．57％。结论 入学新生的HBV血清标志物阳性率偏高，应加强预防工作。