膀胱移行细胞癌差异表达基因的克隆与鉴定

应用抑制消减杂交(ssH)构建膀胱移行细胞癌差异表达的消减文库，再应用Dot blot方法筛选出差异表达的基因，为研究膀胱癌发生、发展提供实验依据。现报告如下。     

生长抑制基因p33INGl在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的探讨膀胱移行细胞癌（TCC）组织中生长抑制基因p33ING1表达的意义.方法采用免疫组织化学方法,对68例膀胱TCC组织标本中p33ING1表达进行检测.男58例,女10例.平均年龄65岁.病理分级Ⅰ级16例,Ⅱ级22例,Ⅲ级30例.临床分期T125例、T217例、T314例、T412.例.复发性膀胱癌47例.12例正常膀胱组织作对照.结果 12例正常膀胱黏膜组织中p33ING1均为强阳性.68例TCC标本中,p33ING1表达阳性23例,阳性率为33.8%.p33ING表达与膀胱TCC病理分级、临床分期以及复发密切相关（P＜0.05）.结论 p33ING1在膀胱TCC组织中存在表达缺失,其表达缺失程度与肿瘤病理分级、临床分期及复发相关,可作为观察膀胱TCC复发指标之一.     

Uroplakin Ⅱ基因在膀胱移行细胞癌中的表达及相关性研究

目的　探讨UroplakinⅡ基因 (UPⅡ )在原发和转移性膀胱移行细胞癌 (TCC)中表达与意义。方法　收集 45例膀胱癌 (其中TCC 3 9例 ,非TCC 6例 )患者的癌组织 ,外周静脉血标本 ,提取总RNA ,行逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR ) ,检测UPⅡ基因mRNA的表达。 2 5例其他部位肿瘤及 8例非肿瘤患者组织标本和静脉血作为对照。结果　 45例膀胱肿瘤组织标本中 ,UPⅡ基因在TCC组织中平均阳性率 82 .1% (3 2 /3 9) ,6例非TCC类型膀胱癌 0表达。在T1、T2、T3、T4期膀胱TCC患者组织中UPⅡ基因阳性率分别为 76.5 %、71.4%、90 .9%、10 0 .0 % ;在患者外周血中UPⅡ基因阳性率分别为 5 .9%、14 .2 %、72 .7%、10 0 .0 %。在组织和外周血中低分期 (T1、T2 )与高分期 (T3、T4)TCC表达UPⅡ基因阳性率差异有显著性 (P <0 .0 5 )。其中 4例转移者均阳性 ,接受全身化疗后 3例未再表达。 2 5例其他部位肿瘤组织标本 ,7例肺癌在组织中有 1例阳性表达 ,外周静脉血中 0表达 ;5例肾移行细胞癌在组织中 2例阳性 ,外周静脉血 0表达 ;8例非肿瘤患者组织标本及外周静脉中 0表达。结论　组织及外周血中UPⅡ表达阳性率与肿瘤分期 ,是否转移呈相关性 ;检测TCC患者血中UPⅡ基因可作为监测TCC患者是否转移的指标 ,并可在一定程度上反映化疗疗效 ;     

E-Cadherin在膀胱移行细胞癌中的表达

目的 探讨Ｅ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ在膀胱移行细胞癌中表达的临床意义。方法 采用免疫组织化学方法,检测６３例膀胱移行细胞癌石蜡标本Ｅ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ表达情况。结果 ６３例膀胱癌组织标本中Ｅ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ表达异常者４２例（６７％）,异常表达率与膀胱癌的病理分期、分级、肿瘤复发和生存率间的差别均有显著性意义。结论 Ｅ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ的异常表达与膀胱癌的恶性程度及复发密切相关,可作为判定肿瘤预后和复发     

神经生长因子在膀胱移行细胞癌中表达的意义

应用免疫组化方法检测神经生长因子 (ＮＧＦ)在膀胱癌中的表达 ,探讨其临床意义及与细胞增殖、血管形成之间的关系 ,报告如下。材料与方法　膀胱移行细胞癌患者83例 ,年龄 15～ 81岁。Ⅰ级 2 5例、Ⅱ级 34例、Ⅲ级 2 4例。Ｔ0～ 15 4例、Ｔ2～ 42 9例。 72例获随访 1年以上 ,其中复发18例。 16例正常膀胱粘膜组织作为对照。石蜡包埋存档标本均经病理组织学证实。免疫组化采用ＳＰ方法。ＮＧＦ(1∶80 )和Ⅷ抗原相关因子 (1∶10 0 )为多克隆抗体。增殖细胞核抗原 (ＰＣＮＡ ,1∶5 0 )为单克隆抗体。ＳＰ试剂盒由北京中山生物公司提供。ＤＡＢ…     

膀胱移行细胞癌Mta-1基因与蛋白表达及其临床意义

目的:检测膀胱移行细胞癌(BTCC)中Mta-1mRNA与蛋白表达,分析其与BTCC临床分期、病理分级、转移及复发的关系。方法:原位杂交、免疫组化方法检测42例BTCC组织Mta-1mRNA与蛋白的表达;CD34标记血管内皮细胞,计数肿瘤组织微血管密度(MVD);结合临床病理资料,分析Mta-1与BTCC的侵袭转移、血管生成及复发间的关系。结果:①Mta-1mRNA与蛋白在BTCC中高度表达,其表达阳性率分别为78.6%、73.8%,与正常组织比较差异有统计学意义(P<0.01),且随BTCC临床分期及病理分级的升高而增加,肿瘤复发组高于无复发组,肿瘤转移组高于无转移组(P<0.05)。②经非参数相关分析发现,Mta-1蛋白与Mta-1mR-NA表达呈高度正相关,Rs为0.945,P=0.000;CD34标染的微血管密度(MVD)与Mta-1mRNA与蛋白表达亦呈正相关,相关系数分别为0.712、0.683,P=0.000。结论:①Mta-1在膀胱移行细胞癌中高度表达,并随着肿瘤临床分期和病理分级的升高而增加,与肿瘤的转移及复发密切相关。②Mta-1参与膀胱移行细胞癌的侵袭、转移,可能与促进血管生成有关。     

膀胱移行细胞癌中FHIT基因启动子甲基化及其表达的研究

目的:检测膀胱移行细胞癌中脆性组氯酸三联基因(FHIT)启动子甲基化状态及其蛋白表达水平,并探讨它们与该肿瘤临床及病理特征的关系.方法:收集50例膀胱移行细胞癌组织和10例正常膀胱黏膜,应用免疫组织化学(S-P)法检测FHIT蛋白的表达,甲基化特异性PCR(MSP)法检测FHIT基因启动子的甲基化状态.结果:FHIT蛋白在膀胱癌组织和正常膀胱组织中表达的阳性率分别是44.0%(22/50)和100.0%(10/10)(P<0.01).且其表达水平在不同病理分级间差异有统计学意义(P<0.05);在膀胱癌组织中FHIT启动子甲基化率为20.0%(10/50),而在止常膀胱组织中未检测到其启动子的甲基化(0/10)(P>0.05);在甲基化阳性和甲基化阴性的膀胱癌组织中,FHIT蛋白表达降低或缺失的发生率分别是90%和47.5%(P<0.05).结论:FHIT基因启动子的甲基化是FHIT蛋白表达缺失的重要原因.FHlT基因启动子甲基化及其蛋白的表达缺失可能在膀胱移行细胞癌的发生及进展过程中起着重要作用,并对该肿瘤的生物学行为产生较大影响.     

错配修复基因hMLH1在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

目的 观察错配修复基因hMLH1在膀胱移行细胞癌中的表达,探讨hMLH1与膀胱移行细胞癌的关系.方法 通过免疫组织化学方法 测定hMLH1在80例膀胱移行细胞癌中及20例正常膀胱组织中的表达.结果 hMLH1在膀胱移行细胞癌中的低表达率(32.5%)明显高于在正常膀胱组织中的低表达率(0%),差异有统计学意义(P＜0.05),且hMLH1在膀胱移行细胞癌中的低表达与肿瘤的分期分级有关(P＜0.05).结论 hMLH1的低表达与膀胱移行细胞癌的发生有关,与肿瘤的高分期和高分级有关,hMLH1的低表达在浸润性及分化差的膀胱移行细胞癌多见.     

H19基因与膀胱移行细胞癌关系的研究进展

H19基因属于人类发育印迹基因。膀胱移行细胞癌中H19基因异常表达与肿瘤分级、分期和疾病进展等生物学行为密切相关。     

膀胱移行细胞癌Id-1表达的实验研究

目的　探讨正常膀胱移行上皮和不同分化程度膀胱移行细胞癌 (BTCC)Id 1的表达 ,分析膀胱癌生物学行为与Id 1的关系。方法　免疫组化ABC法检测 111例BTCC和 12例正常膀胱组织Id 1表达。结果　Id 1正常膀胱组织 3例表达阳性 ,阳性率 2 5 % ;BTCC 97例表达阳性 ,阳性率 87.38% ,膀胱癌G1、G2 、G3 阳性率分别为 88.89%、87.5 %、85 .72 % ,与对照组比较均有显著性差异 (P <0 .0 1) ,病理分级间无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;表浅性膀胱癌与浸润性膀胱癌表达阳性率分别为 82 .76 %、92 .4 5 % ,两者比较具有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论　膀胱移行细胞癌Id 1过表达 ;Id 1与膀胱癌发生和侵袭性有一定关系 ;Id 1可能作为膀胱癌的一种肿瘤标记物为膀胱癌的筛查、早期诊断和术后随访提供帮助。     

几个影响膀胱移行细胞癌复发因素的临床分析

目的:探讨几个临床病理因素在预测膀胱移行细胞癌复发中的价值。方法:回顾性分析252例膀胱移行细胞癌的临床资料,通过统计学评估肿瘤大小、数目、分级及对肿瘤复发的影响。结果:252例患者术后随访11～154个月,平均49.5个月。单个、2个、3个及以上肿瘤的复发率分别为20.9%、22.5%、44.4%,3个及以上肿瘤的复发率明显高于其他两组(P<0.01);肿瘤直径≤1cm、～≤2cm、～<3cm、≥3cm的复发率分别为18.6%、8.3%、15.8%、38.8%,≥3cm的肿瘤复发率明显高于其他三组(P<0.01);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级的复发率分别为14.8%、24.0%、35.7%,随着肿瘤级别升高,肿瘤复发率增加(P<0.05)。结论:膀胱移行细胞癌的多灶性、肿瘤大小和分级与其复发率正相关。了解膀胱移行细胞癌患者的肿瘤多灶性、大小和分级等临床病理特征,可以预测其预后复发情况,从而有针对地采取相应有效的治疗方法及监视随访措施。     

E-钙黏素与肌动蛋白交联蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

目的 探讨肌动蛋白交联蛋白(Fascin)、E-钙黏素(E-cadherin)在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学方法检测Fascin、E-cadherin蛋白在78例BTCC患者中的表达,分析其表达与BTCC临床病理特征之间的关系.结果 BTCC中Fascin和E-cadherin阳性表达率分别是75.6%和48.7%,表达呈负相关(r=-0.397,P＜0.05).两者表达水平均与肿瘤病理分级及临床分期有关.结论 Fascin与E-cadherin蛋白表达可作为判断膀胱移行细胞癌生物学行为的重要指标.

Abstract：

Objective To explore the clinical significance and expression of fascin and E-cadherin in bladder transitional cell carcinoma (BTCC). Methods Immunohistochemistry was used detect the expression of fascin and E-cadherin in 78 cases of BTCC, and the relationship between their expression and clinicopathological features was analyzed. Results There was a negative correlation between the expression of fascin and E-cadherin (r =-0. 397,P ＜0. 05), and their positive expression rate was 75. 6% and 48. 7% respectively. Fascin and E-cadherin were related to tumor pathological grade and clinical stage.Conclusion Fascin and E-cadherin could be used as the biological behavior markers of BTCC.     

抑癌基因在膀胱癌组织中的表达及其与Akt磷酸化的相关性

目的:探讨抑癌基因PTEN在膀胱移行细胞癌(简称膀胱癌)的表达及其与蛋白激酶B(PKB/AKT)磷酸化的相关性。方法:采用免疫组织化学S-P染色法,Western印迹杂交法检测46例膀胱癌组织中PTEN的表达,并与13例腺性膀胱炎、10例正常膀胱组织进行对照;同时分析膀胱癌组织中PTEN表达与AKT磷酸化水平的关系。结果:膀胱癌组织中PTEN蛋白的阳性表达(60.9%)明显低于腺性膀胱炎(95.4%)和正常膀胱组织(100%)(P<0.01);同时低分化、有肿瘤转移的膀胱癌的PTEN表达强度明显低于高分化、无转移的膀胱癌(P<0.05);膀胱癌组织中PTEN蛋白表达和Akt磷酸化水平呈明显负相关(P<0.01)。结论:由于PTEN蛋白表达下调或缺失,导致AKT磷酸化水平的明显增高,在膀胱癌的发生、发展中起着重要的作用。     

乙酰肝素酶在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨乙酰肝素酶(Heparanase,HPA)在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义.方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组织化学方法检测68例膀胱移行细胞癌、24例癌旁组织、15例正常膀胱组织中HPA mRNA的水平及蛋白表达定位,并结合患者临床病理指标及预后进行分析.结果:膀胱移行细胞癌中HPA mRNA检出阳性41例(60.3%),24例癌旁组织中阳性1例(4.2%),1 5例正常膀胱组织中全部阴性,分别与癌组织组比较差异有统计学意义(P<0.01),HPA mRNA的表达在膀胱移行细胞癌不同病理分级、临床分期及淋巴结转移与否分组中显著不同(P<0.01).免疫组织化学结果显示,HPA定位于细胞质及细胞核,阳性率为77.9%(53例),在膀胱移行细胞癌淋巴结转移与否分组中显著不同(P<0.01).结论:HPA在膀胱移行细胞癌的生长浸润、侵袭转移中可能发挥重要作用,可为膀胱移行细胞癌生物学行为和预后的判断提供较客观指标.     

浅表性膀胱移行细胞癌复发与CDH1基因启动子C/A编码区单核苷酸多态性的关系

目的探讨CDH1基因启动子160C/A编码区单核苷酸多态性(cSNP)和浅表性膀胱移行细胞癌(STCCB)的复发之间的关系。方法健康对照组50例,无复发STCCB组33例,复发STCCB组28例,其中复发组按复发后有无临床分期和病理分级的升高分为进展组(10例)和非进展组(18例);PCRRFLP技术检测各组样本CDH1基因启动子160位点基因型。结果复发STCCB组该位点A等位基因频率(0.66)高于无复发STCCB组(0.48),P<0.05,差异有统计学意义;携带A等位基因的STCCB患者治疗后复发的危险性高于C等位基因携带者,OR值3.54,95%CI为1.52～5.73。结论CDH1基因启动子160A等位基因与浅表性膀胱移行细胞癌的复发密切相关。     

膀胱移行细胞癌患者血浆p14基因异常甲基化检测的意义

目的检测膀胱移行细胞癌患者血浆p14基因启动子异常甲基化状态,探讨血浆p14基因甲基化改变作为膀胱移行细胞癌分子生物学标志物的可能。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific PCR,MSP)技术,分别检测62例膀胱移行细胞癌患者血浆和相应肿瘤组织DNA的p14基因甲基化状态。结果血浆和肿瘤组织中,p14基因甲基化的阳性率分别为43.5%(27/62)和46.8%(29/62),血浆和肿瘤组织的总体符合率93.1%(27/29),血浆p14基因的甲基化状况与肿瘤组织中是否出现p14基因甲基化具有显著相关性(P<0.01)。血浆和肿瘤组织中,p14基因甲基化与膀胱移行细胞癌的病理分级和临床分期均呈正相关。结论p14基因的甲基化状态改变在膀胱移行细胞癌的发生起重要的作用。血浆p14基因甲基化的检测是膀胱移行细胞癌诊断和判断预后的一个有效的分子生物学指标。     

膀胱移行细胞癌多肿瘤抑制基因-1纯合子缺失及意义

目的 :了解多肿瘤抑制基因 - 1(MTS1 )在膀胱移行细胞癌中的纯合子缺失情况 ,探讨 MTS1 纯合子缺失在膀胱移行细胞癌发生与发展中的意义。方法 :收集温州医学院手术切除的膀胱移行细胞癌石蜡标本 35例 ,采用比较 PCR法检测其 MTS1 纯合子缺失情况。结果 :剔除 2例不可比标本 ,33例标本中 ,MTS1 纯合子缺失 6例 ,缺失率为 18.2 %。其中 级、 级、 级膀胱移行细胞癌 MTS1 纯合子缺失率分别为 18.2 % (2 / 11)、2 0 .0 % (3/ 15 )和 14.3% (1/ 7) ;Tis～ T1 期肿瘤和 T2 ～ T4期肿瘤 MTS1 纯合子缺失率分别为 2 2 .2 % (4 / 18)和 13.3% (2 / 15 ) ,各级和各期肿瘤的 MTS1 纯合子缺失率无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :MTS1 纯合子对膀胱移行细胞癌的发生起一定作用 ,但与肿瘤的进展无关     

应用基因芯片技术筛查膀胱移行细胞癌差异表达基因的研究

目的:研究膀胱移行细胞癌(BTCC)中差异表达基因,初步探讨这些基因与BTCC发生、发展的关系。方法:提取3例膀胱移行细胞癌(分别为G1Ta、G1T1和G2T2)组织块和1例正常膀胱黏膜组织块RNA,对样品RNA进行荧光标记,用包含21522条70mer长度的OligoDNA表达谱芯片3张进行检测。结果:21522条相关基因中,3例肿瘤标本共同出现的差异表达基因有307条,占总基因条数的1.42%,其中表达上调198条,表达下调109条。这些差异基因按其功能主要可以分为以下几类:原癌基因和抑癌基因、细胞周期调节蛋白、细胞信号和传递蛋白、细胞粘附分子、生长因子、免疫相关基因、细胞受体、离子通道和运输蛋白、细胞骨架和运动相关蛋白、细胞凋亡相关蛋白以及一些未知功能基因。结论:基因芯片技术为研究膀胱癌的分子生物学特性提供了一个比较理想的方法;膀胱癌的发生、发展与多个肿瘤相关基因的异常表达有关,是多基因、多途径作用的结果;BTCC明显表达异常的基因包括GJB2、DKFZP434K0410、NESCA、CKS2、ALB、MYOC、PCOLCE2、AREG、DPT等,其具体机制有待进一步研究。