人参皂甙对人T淋巴细胞白血病细胞株凋亡基因的影响

本研究应用DNA断裂点标记法（TUNEL）、DNA凝胶电泳、光镜及RT-PCR等技术探讨人参皂甙对人T淋巴细胞白血病细胞株（6T-CEM）凋亡基因的影响。结果：放线菌酮、放线菌素D本身可诱导6T-CEM细胞凋亡;人参皂甙 放线菌酮、人参皂甙 放线菌素D两组的凋亡率与放线菌酮、放线菌素D组差异无显著性,人参皂甙可使6T-CEM细胞Bcl-2、bax基因表达显著降低,其中Bcl-2降低尤为明显,提示放线菌酮或放线菌素D通过抑制某些抗凋亡蛋白的合成而诱导6T-CEM细胞凋亡,人参皂甙诱导6T-CEM细胞凋亡的通过抑制bcl-2基因表达、降低bcl-2/bax比率,从而诱导细胞凋亡。     

大蒜素抗癌机制及在妇科肿瘤中的研究进展

大蒜素是以大蒜鳞茎为原料提取的生物活性成分的总称,其有效成分大蒜辣素和大蒜新素,大蒜素可以抑制多种癌细胞的生长并诱导其凋亡.肿瘤的发生和发展与细胞凋亡关系密切,诱导细胞凋亡已成为治疗的重要手段.大蒜素作为一种可诱导细胞凋亡的天然药物,有望为妇科肿瘤治疗开辟一条新途径.本文将对大蒜素抗癌作用及在妇科肿瘤中的应用做简要综述.     

人参皂甙诱导人急性T淋巴细胞白血病细胞株凋亡的实验研究

近年来的研究发现,人参的提取物人参皂甙有提高人体的免疫功能,预防和治疗肿瘤的作用。本研究通过细胞培养的方法,观察人参皂甙诱导人急性白血病 T 淋巴细胞细胞株(6T-CEM)凋亡情况,现报告如下。材料和方法1 细胞培养 6T-CEM 购自中国科学院上海分院细胞所,用含10％的小牛血清的 PRMI-1640(GBICO)培养,培养液中还含0.002mol/L 谷氨酰胺,100u/ml 青霉素,100u/ml 链霉素,37℃,CO_2孵箱内培养,潮湿空气中含有5％CO_2。隔日换液1次。2 人参皂甙对6T-CEM 细胞剂量毒性实验(1)6T-CEM细胞处于对数增殖期时,调整细胞浓度为1×10~6/ml,细胞悬液接种在进口24孔板中。(2)加不同浓度的人参皂甙,对照组为     

大蒜素抗人肝癌HepG-2细胞的实验研究

目的:研究大蒜素对人肝癌细胞HepG-2生长的影响,探讨其抗人肝癌HepG-2细胞作用以及相关机制。方法:选用人肝癌HepG-2细胞为研究对象。通过倒置显微镜及hoechst染色荧光显微镜观察大蒜素作用后细胞形态的变化。MTT法检测不同浓度大蒜素作用后细胞增殖活性改变并计算抑制率(IR)。流式细胞术(FCM)检测大蒜素对细胞周期及凋亡率的影响。免疫细胞化学染色了解大蒜素作用后HepG-2细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的变化。结果:大蒜素作用24 h后人肝癌HepG-2细胞形态发生改变,表现为细胞缩小变圆,突起消失,分部稀疏,细胞核浓缩,边缘化,且随着大蒜素浓度增加,上述改变逐步明显。Hoechst染色荧光倒置显微镜观察对照组细胞核呈均匀一致的荧光,而实验组可观察到细胞凋亡形态变化,表现为细胞核固缩,染色质凝聚,边缘化,部分碎裂,呈致密的颗粒状强荧光。MTT法检测结果显示不同浓度的大蒜素(12.5μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL)在不同时间(24 h、48 h、72 h)作用于HepG-2细胞后细胞增殖活性受到抑制,与阴性对照组及阳性对照组相比大部分组别差异有统计学意义。流式细胞仪检测结果提示与阴性对照组相比大蒜素组G0-G1期比例明显增加,细胞凋亡率明显上升。免疫细胞化学染色表明大蒜素作用后细胞Bax表达水平上升,Bcl-2/Bax比例下降,Caspase-3表达上升。结论:大蒜素对人肝癌HepG-2细胞的增殖有抑制作用,并能诱导HepG-2细胞凋亡。在一定范围内随着大蒜素浓度的增高,时间的延长,细胞增殖活性逐步降低,凋亡率逐步上升,呈时间-剂量依赖性。大蒜素抑制肝癌细胞增值诱导其凋亡与G0-G1期阻滞有关,经大蒜素作用后G0-G1期细胞比例明显高于对照组,其分子机制涉及上调Bax、Caspase-3表达。     

PUMA介导大蒜素诱导人卵巢癌耐顺铂SKOV-3/DDP细胞凋亡

目的探讨p53上调凋亡调控因子(PUMA)在大蒜素诱导人上皮性卵巢癌耐顺铂细胞株(SKOV-3/DDP)细胞凋亡中的作用。方法将SKOV-3/DDP细胞随机分为4组:正常对照组、大蒜素组(于培养基中加入终质量浓度为20μg/mL大蒜素作用细胞48 h)、顺铂组(5μg/mL)、大蒜素+顺铂组。MTT法检测细胞存活率,荧光显微镜和流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR和Western-blot检测PUMA、bax及bcl-2的基因表达。结果与对照组比较,大蒜素组SKOV-3/DDP细胞凋亡率有明显的增加(P<0.05),且作用呈剂量依赖性,PUMA,Bax mRNA和蛋白表达上调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达下调(P<0.05);与大蒜素组比较,顺铂+大蒜素组的细胞生长抑制率及凋亡率均有显著增加(P<0.05),Bax表达上调及Bcl-2表达下调的程度大于单用组(P<0.05);用特异性SiRNA沉默PUMA后,大蒜素组细胞凋亡率呈显著性下降(P<0.05)。结论 PUMA在介导大蒜素诱导SKOV-3/DDP细胞凋亡中发挥了关键性作用。     

大蒜素及联合CPT-11对人结肠癌LoVo细胞的杀伤作用

目的:探讨大蒜素对人结肠癌LoVo细胞增殖的影响及其与CPT-11联合使用时的化疗增敏作用.方法:不同浓度的大蒜素作用于体外培养的LoVo细胞,采用MTT法检测大蒜素对LoVo细胞增殖抑制能力;Annexin V-FITC标记流式细胞术检测大蒜素对LoVo细胞的凋亡抑制率;流式细胞术检测大蒜素对LoVo细胞周期影响;4.0,8.0 mg·L~(-1)大蒜素联合CPT-11使用,观察CPT-11抗肿瘤活性的改变.结果:大蒜素可抑制LoVo细胞增殖,具有明显量效和时间依赖性,24,48,72 h IC_(50)分别为32.23,10.74,6.58 mg·L~(-1),大蒜素能够诱导LoVo细胞凋亡,作用24 h细胞凋亡随着大蒜素浓度增高而增高,作用48h凋亡作用峰值质量浓度为8 mg·L~(-1),大蒜素作用LoVo细胞24 h,质量浓度低于4 mg·L~(-1)时细胞周期被阻滞于G_2/M;而高于4 mg·L~(-1)时细胞周期被阻滞于C_2/M和G_1期,4.0,8.0 mg·L~(-1)大蒜素预处理24 h后,CPT-11作用LoVo细胞24 h IC50分别由单独使用的47.5 mg·L~(-1)下降为7.4,7.2 mg·L~(-1),使CPT-11杀伤肿瘤效率分别提高6.4,6.6倍.结论:大蒜素能够诱导LoVo细胞凋亡,阻滞细胞周期,抑制细胞增殖;低剂量大蒜素与CPT-11联合使用具有协同抗肿瘤作用.     

大蒜生理活性物质对胃癌细胞和黑色素瘤细胞抑制作用的研究

目的:研究大蒜生理活性物质对人胃癌细胞MGC-9和小鼠黑色素瘤细胞B16细胞增殖及细胞周期的影响。方法:用倒置显微镜观察细胞形态,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测B16细胞周期分布的影响。结果:经大蒜素及其前体物质蒜氨酸、蒜氨酸酶和蒜氨酸+蒜氨酸酶处理后,MGC-9和B16细胞不同程度变圆,体积缩小,脱壁细胞增多;除蒜氨酸酶外,蒜氨酸、大蒜素和蒜氨酸+蒜氨酸酶都能诱导MGC-9和B16产生时间和剂量依赖性的增殖抑制作用,其中蒜氨酸+蒜氨酸酶的作用尤为显著。大蒜素和蒜氨酸+蒜氨酸酶阻滞B16细胞于G0/G1期。结论:本文由大蒜提取物处理后结果与已发表的临床研究相一致。     

大蒜素诱导LM-8细胞凋亡及相关基因表达的实验研究

目的:探讨大蒜素对C3H小鼠骨肉瘤细胞株LM-8细胞增殖的影响及与bcl-2、bax凋亡基因表达的关系,以初步探索其诱导凋亡的机制。方法:用水溶性四唑盐WST-8比色法检测大蒜素对LM-8细胞株生长的影响;倒置显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞调亡率的变化;免疫细胞组化技术检测bcl-2和bax基因表达。结果:大蒜素能明显抑制LM-8细胞的生长,与大蒜素的浓度和时间有关,在72h其药物半数抑制率浓度是11.09μg/ml;5μg/ml、10μg/ml和15μg/ml浓度的大蒜素作用72h后可诱导LM-8细胞凋亡(P<0.05);大蒜素可以降低bcl-2表达,增强bax表达,经15μg/ml大蒜素作用72h,bcl-2和bax基因表达阳性率及bcl-2/bax分别为(7.24±1.18)%(、47.56±7.43)%和0.15±0.02,对照组分别为(24.40±9.96)%、(11.28±1.31)%和2.18±0.93,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:大蒜素可以诱导LM-8细胞凋亡,其机制涉及到bcl-2表达上调及bax表达下调。     

大蒜素对KG-1细胞增殖和凋亡的影响及分子机制

大蒜素是大蒜中主要的生物活性物质,具有抗菌、降血脂等多种药理作用。该研究通过凋亡相关指标的检测,来探讨大蒜素对KG-1细胞增殖抑制的分子生物学机制。采用流式细胞术检测大蒜素诱导KG-1细胞的凋亡率;采用RT-q PCR法检测大蒜素对KG-1细胞Bax,Bcl-2,survivin,ERK基因mRNA表达水平的影响;通过Western blot法检测大蒜素对KG-1细胞caspase 3,cleaved caspase 3,ERK1/2,p-ERK1/2,survivin蛋白表达水平的变化。结果表明,与对照组相比,大蒜素能够显著抑制KG-1细胞的增值活性,并且呈显著浓度依赖性和时间依赖性;流式细胞术检测显示大蒜素能够诱导KG-1细胞的凋亡,并且主要是晚期凋亡。RT-q PCR结果显示,大蒜素作用于KG-1细胞后,与凋亡相关的基因Bax的mRNA表达升高,Bcl-2,survivin,ERK基因的mRNA表达降低;Western blot法结果显示,大蒜素作用于KG-1细胞后执行凋亡的蛋白caspase 3及其活性形式cleaved caspase 3升高,促生存的相关蛋白survivin,ERK1/2和其活性形式p-ERK1/2表达下降,其中p-ERK1/2的下调呈剂量依赖性。以上结果提示,大蒜素主要通过诱导KG-1细胞的晚期凋亡来抑制其增殖;凋亡的执行有cleaved caspase 3的参与;凋亡的诱导涉及到蛋白水平,ERK1/2,survivin表达的降低和p-ERK1/2剂量依赖性的减弱;mRNA水平涉及到Bax的升高,survivin,Bcl-2,ERK1/2的下调。     

大蒜素对人喉癌Hep-2细胞周期与细胞凋亡的影响

目的研究大蒜素对人喉癌Hep-2细胞周期与细胞凋亡的影响。方法实验分为空白对照组、大蒜素25μg/m L组、大蒜素50μg/m L组、大蒜素100μg/m L组和顺铂40μg/m L组,取对数生长期人喉癌Hep-2细胞,每组分别给予相应干预24 h后,采用MTT法测定细胞增殖抑制率,通过流式细胞术检测细胞周期、观察细胞凋亡状况并计算凋亡率,RTPCR法检测bcl-2 mRNA和bax mRNA表达并计算bax/bcl-2表达比值,Western blotting法检测Caspase-3蛋白表达情况。结果与空白对照组比较,大蒜素50μg/m L组、大蒜素100μg/m L组和顺铂40μg/m L组人喉癌Hep-2细胞增殖抑制率显著升高,细胞周期G0/G1期显著增长、G2/M期显著缩短,细胞凋亡率显著升高,bcl-2 mRNA表达显著下调而bax mRNA显著上调,bax/bcl-2表达比值显著升高,Caspase-3蛋白表达显著上调,差异均有统计学意义(P均<0.05)。大蒜素100μg/m L组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和Caspase-3蛋白表达量均显著高于顺铂40μg/m L组(P均<0.05)。结论大蒜素具有阻滞人喉癌Hep-2细胞周期进程和促进其凋亡的作用,机制可能与其能够调节凋亡相关基因和蛋白表达有关。     

大蒜新素对人巨细胞病毒感染的人胚肺成纤维细胞凋亡的影响

目的 研究大蒜新素对人巨细胞病毒(HCMV)诱导感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)凋亡的动态变化及凋亡调控基因bcl-2和fas mRNA表达的影响。方法 用流式细胞术测定HELF在高、低感染复数(MOI分别为2．5、0．25)HCMV感染后1、12、24、36、48、72、96h凋亡细胞比率；大、中、小剂量大蒜新素(9、6和3μg／mL)处理正常的和感染的HELF细胞(MOI为2．5)后上述各时间点凋亡细胞比率。用原位杂交法检测大剂量大蒜新素处理感染细胞(MIO为0．25)72h后bcl-2和fas mRNA表达强度变化，并与正常细胞和感染细胞对比分析。结果 正常细胞凋亡比率保持恒定低水平(凋亡率平均2．68％)；低、高感染复数感染细胞随时间延长凋亡细胞逐渐增多，凋亡率峰值分别达8．85％(96h)和25．63％(72h)；各剂量大蒜新素处理的正常细胞凋亡率增加，呈剂量依赖性，峰值分别为4．88％、6．47％和8．35％；但各剂量药物处理感染细胞后却使细胞凋亡比率下降，大剂量药物处理72h时效应最为明显，凋亡细胞比率由25．63％降至16．24％。正常细胞高表达bcl-2，低表达fas基因；感染HCMV后，bcl-2表达显著下调，fas表达明显增强；大蒜新素处理感染细胞后使bcl-2表达强度明显高于感染细胞，fas表达水平明显低于感染细胞，但仍未恢复到正常细胞水平。结论HCMV是HELF凋亡的强诱导剂；病毒可通过下调凋亡抑制基因bcl-2和上调凋亡促进基因fas而发挥致凋亡作用。大蒜新素本身可诱导HELF凋亡，但却能明显抑制HCMV诱导的细胞凋亡，其抑制作用可能与药物干扰HCMV影响凋亡调控基因bcl-2和fas表达有关。     

大蒜素对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究大蒜素对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:以不同浓度大蒜素(12.5、25、50μg/mL)和顺铂(40μg/mL)分别干预对数生长期Ishikawa细胞,采用MTT法检测Ishikawa细胞增值抑制;通过流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡状况,采用Western blotting法检测Ishikawa细胞中caspase-3蛋白表达,RT-PCR法检测Ishikawa细胞中Bax mRNA、bcl-2 mRNA表达并计算Bax/bcl-2表达比值。结果:大蒜素能够显著提高子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖抑制率,阻滞Ishikawa细胞周期于G2/M期,提高细胞凋亡率,上调caspase-3蛋白和Bax mRNA表达,下调bcl-2 mRNA表达,提高Bax/bcl-2表达比值,且上述作用均具有一定的剂量依赖性。结论:大蒜素对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖具有抑制作用以及促其凋亡的作用,机制可能与大蒜素能够改变Ishikawa细胞周期以及调节凋亡相关基因、蛋白表达有关。     

大蒜素联合阿糖胞苷对白血病K562细胞增殖的影响

目的研究大蒜素联合阿糖胞苷对体外培养的人红白血病细胞株(K562)增殖及细胞凋亡的影响。方法处于对数生长期的K562细胞,给予阿糖胞苷、大蒜素及两药联合处理细胞,经瑞氏染色观察细胞形态学变化,并以MTT比色法检测细胞增殖活性及药物相互作用方式。结果单用大蒜素或阿糖胞苷均可抑制K562增殖并促进其凋亡,并呈时-效和量-效依赖性;联合组对K562增殖及凋亡的影响明显增强。大蒜素对Ara-c的增效倍数为2.22,且二者的作用方式为协同作用。结论大蒜素与阿糖胞苷联用具有明显的抗肿瘤作用,大蒜素可提高阿糖胞苷抗白血病的敏感性,从而降低临床上阿糖胞苷用药剂量和细胞毒性,增强疗效;此为白血病的临床治疗提供了新思路。     

大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡及细胞周期的影响

[目的]研究大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡以及细胞周期的影响并初探其机制。[方法]取对数生长期Tca8113细胞设空白对照组、大蒜素(50、25、12.5μg/m L)组和顺铂(40μg/m L)组,给药48 h后流式细胞术分析细胞周期的改变并检测细胞凋亡状况,逆转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)m RNA、Bcl-2相关X蛋白(Bax)m RNA表达,蛋白免疫印迹法检测细胞周期相关调控蛋白周期蛋白(cyclin B1、cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶(CDK1、CDK2)表达。[结果]与空白对照组比较,大蒜素(50、25μg/m L)组细胞周期G2/M期比例显著提高(P0.05),细胞凋亡率显著升高(P0.01),Bcl-2 m RNA表达显著下调且Bax m RNA表达显著上调(P0.05或P0.01),Bax/Bcl-2值显著提高(P0.01),cyclin B1蛋白和CDK1蛋白显著上调、cyclin D1蛋白和CDK2蛋白显著下调(P0.05或P0.01)。[结论]大蒜素具有促进人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡、阻滞细胞有丝分裂的作用,其机制可能与大蒜素影响凋亡相关调控基因及细胞周期相关调控蛋白表达有关。     

野西瓜总皂苷诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡的初步研究

[目的]探讨野西瓜总皂苷(CsS)对人肝癌HepG-2细胞的杀伤作用和诱导凋亡的作用.[方法]四甲基偶氮唑蓝(MTr)法研究CSS对HepG一2细胞的杀伤作用;荧光显微镜观察细胞凋亡形态;碘化吡啶(PI)单染经流式细胞仪检测CSS对HepG-2细胞周期及凋亡的影响.[结果]CSS对HepC-2细胞的生长增殖具有抑制作用;经CSS作用后.HepG-2细胞在出现特征性凋亡形态特征,并出现了G1期阻滞,G2期比例下降,高剂量组出现了G2期消失的现象,50 mg/L剂量作用48 h,凋亡细胞比率高达66.652%.[结论]CSS对人肝癌HepG-2有明显的杀伤和诱导凋亡作用,并出现细胞周期的改变.     

野西瓜总生物碱诱导HepG2细胞凋亡与[Ca2+]i变化的相关性

目的 探讨野西瓜总生物碱(Capparis spinosa alkaloid,CSA)对人肝癌HepG2细胞的杀伤和诱导凋亡的作用机制.方法 MTT法研究CSA对人肝癌HepG2的杀伤作用;荧光显微镜观察HepG2细胞形态;流式细胞仪研究CSA对HepG2细胞的凋亡诱导作用;激光共聚焦显微镜检测CSA对HepG2细胞内[Ca~(2+)]i的影响.结果 CSA对人肝癌HepG2有明显细胞毒性作用,并且有剂量依赖性,IC_(50)为142.82 μg/mL;HepG2细胞在CSA作用后出现特征性凋亡形态特征,凋亡细胞比率明显高于自然凋亡率;且阻断细胞由S期向G_2期的移行,CSA明显升高HepG2细胞[Ca~(2+)]i,并与药物质量浓度呈量效正相关.结论 CSA对人肝癌HepG2有明显的杀伤和促凋亡作用,其机制可能与CSA造成肿瘤细胞内钙离子超载有关.     

姜黄素对Raji细胞体外抗癌作用的实验研究

目的研究姜黄素对Raji细胞体外抗癌作用及其机制,对比研究其对RaIi细胞和人单个核细胞的细胞毒性。方法用MTT法检测姜黄素对Raji细胞及人单个核细胞增殖的影响,Annexin—V／PI双标流式术、缺口末端标记法检测姜黄素对Raji细胞及人单个核细胞凋亡的影响,PI单标流式细胞术测定姜黄素对Raji细胞DNA含量分布的影响。结果(1)姜黄素对Raji细胞具有明显的增殖抑制作用。(2)姜黄素可以时间和剂量依赖性方式诱导Raji细胞凋亡。(3)姜黄素组Raji细胞周期发生变化,细胞周期被阻滞于G0／G1和G2／M期,S期比例减少。(4)姜黄素对人单个核细胞无明显抑制增殖和诱导凋亡作用。结论姜黄素能够调控Raji细胞的细胞周期并诱导其凋亡,从而抑制Raji细胞增殖;姜黄素对人单个核细胞无明显细胞毒作用,而选择性作用于肿瘤细胞。     

大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞顺铂化疗增敏作用及机制研究

目的研究大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞顺铂化疗敏感性的影响并初探其机制。方法体外培养并取对数生长期人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞进行实验。研究设4组,空白对照组正常培养,大蒜素组和顺铂组分别加入25μg/m L大蒜素和40μg/m L顺铂进行培养,联合组加入25μg/m L大蒜素和20μg/m L顺铂进行培养,培养48 h后,MTT比色法测定各组细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,Western blotting法测定Bax、Bcl-2、激活型Caspase-3蛋白表达水平。结果顺铂组、大蒜素组和联合组人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖抑制率、G2/M期细胞比例、细胞凋亡率、激活型Caspase-3蛋白表达水平、Bax蛋白表达水平和Bax/Bcl-2值均显著高于空白对照组(P均0. 05),且联合组均显著高于顺铂组和大蒜素组(P均0. 05);顺铂组、大蒜素组和联合组Bcl-2蛋白表达水平均显著低于空白对照组(P均0. 05),且联合组显著低于顺铂组和大蒜素组(P均0. 05)。结论大蒜素具有提高人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞对顺铂化疗敏感性的作用,可能与大蒜素阻滞细胞有丝分裂以及调节凋亡相关蛋白表达有关。     

大蒜素诱导人T淋巴细胞白血病细胞株凋亡的实验研究

应用ＤＮＡ断裂点标记法（ＴＵＮＥＬ）ＤＮＡ凝胶电泳以及光镜等技术探讨大蒜素诱导人急性白血病Ｔ淋巴细胞株（６Ｔ－ＣＥＭ细胞）凋亡的规律,结果：大蒜素在０．１μｇ／ｍｌ,剂量时即明显诱导６Ｔ－ＣＥＭ细胞凋亡,５０μｇ／ｍｌ达到高峰,凋亡率为３６．４％,１５μｇ／ｍｌ大蒜素作用６Ｔ－ＣＥＭ细胞２小时,出现明显凋亡,２４小时达到高峰,凋亡率为５６．９％,结论：大蒜素可诱导６Ｔ－ＣＥＭ细胞凋亡,且有明显的时     

姜黄素与博来霉素联用对A549细胞增殖抑制及细胞周期和凋亡的影响

目的:研究姜黄素和博来霉素联合应用对人肺泡Ⅱ型样细胞A549细胞增殖和细胞周期及细胞凋亡的影响,探讨姜黄素抗博来霉素诱导的肺纤维化机制。方法:采用MTT法观察姜黄素和博来霉素对A549细胞的增殖抑制作用,并用流式检测细胞周期分布,凋亡试剂盒检测细胞凋亡。结果:姜黄素及博来霉素能抑制A549细胞的增殖,并呈浓度及时间依赖性。姜黄素(Cur)浓度为60μmol/L与博来霉素(BLM)2、4、6、8μg/mL联合24h的抑制率显著高于单用博来霉素组;姜黄素可引起体外培养的A549细胞G0/G1期阻滞;而且对G0/G1期阻滞随作用时间延长而增强。单用博来霉素刺激细胞,培养24h和48h,对细胞周期各个时期的影响没有统计学意义;姜黄素联合博来霉素诱导A549细胞凋亡,细胞核变的不规则皱缩,可见凋亡小体。结论:姜黄素联合博来霉素在体外对A549细胞的增殖有明显的抑制作用,对细胞周期G0/G1期有显著阻滞作用,并可改变细胞凋亡;姜黄素和博来霉素联合应用可能通过改变肺泡上皮细胞细胞周期分布,并通过影响肺泡细胞凋亡从而起到抑制博来霉素治疗过程中肺纤维化的发生发展。