电化学发光分析及其在核酸测定中的应用

电化学发光（ECL）分析是新近发展起来的既不同于传统的标记免疫分析（如酶标记、同位素标记、荧光素标记等）也与普通的化学发光有区别的一种新型检测方法，它将电化学法和化学发光法巧妙结合，具有灵敏、快速、准确、分析适应性广等特点。本文综述了ECL的原理、特点及其在核酸定量检测中的应用。核酸的杂交分析和聚合酶链反应（PCR）等技术已广泛应用于分子生物学的实验研究和临床诊断领域。根据核酸探针或反应体系中所用的示踪剂不同，核酸分析可分为放射性同位素法和非放射性同位素法如免疫荧光法、时间分辨荧光法、化学发光法、生物发光法等。90年代初期问世的将电化学（electrochemistry）和化学发先（chemiluminescence）完美结合的新型免疫分析技术电化学发光技术（electrochemiluminesence，ECL），同时联合新型的免疫固相放大技术──链霉亲和素系统，在免疫学检测中尤其是核酸测定中，发挥了以往的发光技术无可比拟的优势［1］，本文拟就ECL的原理，分析特点及核酸测定中的应用作一简要综述。     

时间分辨免疫荧光技术在检验医学中的发展现状

标记免疫分析法创立于60年代初期,是将多种标记示踪技术的高度敏感性和医学免疫学抗原抗体反应的高度特异性相结合的产物,包括放射免疫(RIA),酶联免疫分析法(EIA)、化学发光免疫分析法(CLIA)、电化学发光免疫分析法(ECLIA)、时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)。TRFIA具有零本底、灵敏度高、重复性好、特异性强、线性范围宽和应用广泛等特点,是继放射免疫分析之后,标记免疫分析法发展的一个新的里程碑,是当代配基分析中最有发展前景的分析手段。本文就时间分辨免疫荧光分析技术作如下综述。     

时间分辨免疫荧光技术在检验医学中的发展现状

标记免疫分析法创立于60年代初期,是将多种标记示踪技术的高度敏感性和医学免疫学抗原抗体反应的高度特异性相结合的产物,包括放射免疫(RIA),酶联免疫分析法(EIA)、化学发光免疫分析法(CLIA)、电化学发光免疫分析法(ECLIA)、时间分辨荧光免疫分析(TRFIA).TRFIA具有零本底、灵敏度高、重复性好、特异性强、线性范围宽和应用广泛等特点,是继放射免疫分析之后,标记免疫分析法发展的一个新的里程碑,是当代配基分析中最有发展前景的分析手段.本文就时间分辨免疫荧光分析技术作如下综述.     

电化学发光免疫法检测甲胎蛋白出现钩状效应一例

电化学发光免疫法(ECLIA)是自上世纪90年代后开始发展的新一代标记免疫分析技术,结合了电化学发光与免疫测定的优势。由于检测全过程在一个全封闭的反应体系中全自动进行,反应时间较短,具备快速、精确、重现性好及试剂安全无毒等特点,一直受到临床应用者的好评。     

Elecsys2010型全自动电化学发光免疫分析仪常见报警原因及分析处理

电化学发光法（Electrochemiluminescence immunoassay，ECLIA）是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫测定以后的新一代标记免疫测定技术，是电化学发光（ECLIA）和免疫测定相结和的产物。采用先进的电化学发光技术（ECL），是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，实际上包括了电化学和化学发光两个过程，由电启动发光反应，     

量子点标记快速免疫检测技术的研究

目的自制发光材料量子点,优化量子点与抗体的偶联方案,并对制备的量子点标记抗体进行免疫检测的可行性研究。方法采用高温热分解法制备得到镉硒(CdSe)量子点,用还原型谷胱甘肽(GSH)对量子点表面改性,使用双功能聚乙二醇(PEG)交联量子点表面的GSH,得到表面PEG化的水溶性量子点,该物质稳定性好。用抗乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抗体与量子点共价交联,采用斑点免疫反应验证HBsAg检测的可行性。结果成功制备量子点及其抗体标记物,检测HbsAg的敏感性可达1.6 ng/mL水平。结论量子点标记免疫检测呈现技术优势,有广阔的发展与应用前景。     

量子点标记间接免疫荧光技术在雌激素受体检测中的应用

目的采用量子点标记间接免疫荧光技术检测子宫内膜石蜡包埋组织切片中雌激素受体α(ERα)水平。方法应用量子点标记间接免疫荧光技术和免疫组织化学法检测112例不同病理类型人子宫内膜中ERα的表达。结果不同病理类型子宫内膜组织中均有ERα阳性表达的标本。阳性信号为桔红色荧光,定位于腺上皮细胞或癌细胞的细胞核。结论量子点标记间接免疫荧光技术可成功地应用于石蜡包埋组织切片中雌激素受体表达水平的检测。     

酶免疫分析技术进展与自动化

酶免疫分析（Enzyme Immunoassay．EIA）是标记免疫分析中的一项重要技术，是以酶标记的抗体（抗原）作为主要试剂，将抗原抗体反应的特异性和酶催化底物反应的高效性和专一性结合起来的一种免疫检测技术。作为经典的三大标记技术之一，酶免疫技术在检验医学中得到广泛应用并不断得到更新，不断和其他先进技术如荧光、发光技术以及仪器自动化相融合，日臻完善，许多自动化仪器实际上是EIA技术和其他现代化技术的复合体，其分析敏感度已达到甚至大大超过放射免疫分析（Radioimmunoassay，RIA）的水平，因试剂稳定无放射性污染且分析形式日趋多样化，简易灵活，临床应用广泛而倍受重视。     

甲状腺肿瘤患者免疫检验中使用电化学发光免疫测定技术的临床效果研究

目的 探讨免疫检验中使用电化学发光免疫测定技术对甲状腺肿瘤患者的临床价值。方法 选取我院收治的甲状腺肿瘤患者和健康体检中相关指标未见异常者各40例,分为对照组和观察组。所有研究对象均抽取静脉血3 mL,分析电化学发光免疫测定技术检查的特异度、灵敏度、符合率。对比两组疾病相关的实验室指标水平。结果 以病理结果为金标准,结果显示：甲状腺肿瘤患者中,电化学发光免疫测定技术检查出35例与病理结果符合,准确率87.50%(35/40),特异度50.00%(1/2)、灵敏度92.11%(35/38),电化学发光免疫测定法特异度、敏感度和阳性准确率明显较高（P<0.05）;观察组各项实验室指标水平均高于对照组（P<0.05）。结论 甲状腺肿瘤患者免疫检验中使用电化学发光免疫测定技术临床效果研究理想。     

量子点及其在生物光子学中的应用

目的:量子点(半导体纳米微晶体)作为一种新型荧光探针应用到生物光子学中已经引起了国内外科学工作者的极大关注。文章主要介绍了量子点发光的基本原理,量子点相对于有机荧光染料的优缺点,量子点的化学合成、官能团修饰以及与生物结合的方法,并列举了量子点的生物光子学应用中的实例。最后展望了量子点今后的研究方向。     

电化学发光免疫分析及在临床检验中的应用

电化学发光免疫分析技术（ECLIA）是近年来发展的一项高新技术，作为一种痕量分析手段在物质分析中越来越得到重视。现已经应用于基础医学研究和临床疾病的诊断中，其应用前景十分可观。本文主要综述了电化学发光免疫分析的基本原理及其在临床检验中的应用。     

固相亲合素在游离甲状腺素免疫检测中的应用

目的：以亲合素－生物素分离技术为基础,尝试通过固化抗原（标记抗体）或固化抗体（标记抗原衍生物）两种免疫分析构型实现具有代表性的游离激素－游离甲状腺素（FT4）的固相免疫分析测定。方法：应用牛血清白蛋白－亲合素联接物制备固相亲合素,以此为基础制备固相生物素化甲状腺素衍生物或固相生物素化抗甲状腺素抗体,并分别用于标记抗体法或标记抗原衍生物法的FT4免疫分析。结果：标准曲线的四参数非线性拟合度良好;标记抗标法测定的灵敏度为0.42pmol/L,批内批间的CV％均小于7％,标记衍生物法的灵敏度为0.36pmol/L,批内批间的CV％均小于7％,两种方法相关性良好（r=0．9734,P＜0．01）。结论：通过应用固相亲合素固化抗原或固化抗体两种方式,进一步肯定了固相亲合素作为通用固相分离技术在免疫分析中的应用价值,为游离甲状腺素测定提供了实验 依据。     

肺炎支原体抗原量子点免疫层析法的建立及初步应用

目的建立肺炎支原体(Mp)抗原量子点免疫层析的检测方法,初步评价其在临床辅助诊断中的应用价值。方法在偶联剂碳二亚胺EDC和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)作用下,使鼠抗人Mp单克隆抗体(针对P1蛋白)与羧基量子点(CdSe/ZnS)偶联,制备量子点标记抗体包被在玻璃纤维膜上,以另一株Mp单抗(针对P1蛋白)作为捕获抗体包被在硝酸纤维素膜(NC膜)上,建立双抗体夹心量子点免疫层析法检测肺炎支原体抗原。该方法检测130份临床咽拭子标本,并与荧光聚合酶链反应方法相比较。结果经过一系列的反应条件优化,确定偶联剂EDC用量为0.4mg/mL,sulfo-NHS用量为0.58mg/mL,标记抗体浓度1∶100稀释,捕获抗体浓度为0.75mg/mL,反应时间为10min。量子点免疫层析法检测临床标本,阴性符合率为96.4%,阳性符合率为90.0%。结论量子点(CdSe/ZnS)标记免疫层析法检测Mp与荧光聚合酶链反应法具有较好的符合性,该方法操作简便、检测快速、灵敏度高,适用于Mp感染的早期诊断。     

量子点技术在生物医学领域的应用进展

生命科学的高速发展对我们提出了大量新的课题 ,目前集中在核酸、多肽、蛋白质等生物大分子的分析中。在生物医学领域里 ,研究和应用高灵敏度的非同位素检测方法一直是各国学者共同努力的方向。生物大分子检测的主要方法之一是标记分析法 ,由于大多数生物大分子自身可分析的特性较弱 ,要获得高灵敏度的检测 ,必须借助于外来标记物获得可分析的信号。常用的非同位素检测方法主要有 :酶联免疫法、化学发光法、电化学发光法及荧光分析法等。其中发光标记是最主要的方法之一 ,其检测灵敏度很大程度上取决于标记物的发光强度和稳定性。生物技术与…     

肺炎支原体快速培养法与抗原量子点免疫层析法快速检测技术在支原体肺炎诊断中的应用

目的探究肺炎支原体抗原量子点免疫层析法快速检测技术对支原体肺炎(MP)的诊断效果。方法研究对象为2015年6月至2016年6月收入的80例支原体肺炎病人,分别采用肺炎支原体抗原量子点免疫层析法快速检测技术与肺炎支原体快速培养法进行检测。比较两种检测方法的阳性率、特异性、敏感度。结果抗原量子点免疫层析法灵敏度(91.25%)、特异度(96.25%)显著高于快速培养法的灵敏度(81.25%)、特异度(72.50%)(χ2=4.206、30.549,P<0.05)。抗原量子点免疫层析法阳性率(97.50%)与快速培养法阳性率(92.50%)比较差异无统计学意义(χ2=2.632,P>0.05)。结论抗原量子点免疫层析法在灵敏度及特异度更具优势,且检测时间短。     

Elecsys2010型全自动电化学发光免疫分析仪的故障处理

Elecsys2010型全自动电化学发光免疫分析仪由瑞士罗氏公司生产,该系统采用先进的电化学发光技术(ECL),具有功能齐全,分析灵活,操作简便,稳定性好,分析速度快,灵敏度高,线性范围宽等优点[1],是继放射免疫、酶联免疫、荧光免疫、化学发光免疫之后的新一代标记免疫分析检验设备,适合于不同医院的临床实验室.     

电化学发光分析及其在核酸测定中的应用

电化学发光（ＥＣＬ０分析是新近发展起来的不同于传统标记免疫分析（如酶标记、同位素作记、荧光素标记等）也与普通的化学发光有区别的一种新型检测方法，它将电化学法和化学发光法巧妙结合，具有灵敏、快速、准确、分析适应性广等特点。本文综述了ＥＣＬ的原理，特点及其在核酸定量检测中的应用。     

双标记时间分辨荧光免疫分析技术

时间分辨荧光免疫分析(TR—FIA)法单标记分析技术的原理、步骤和实际临床应用效果许多作者已先后作了报道.双标记分析同经典RIA法的双标记分析技术一样,是在单标记基础上发展起来的,它不仅解决了人们向往已久的灵敏度高、无放射性、操作简便和样本处理快捷等问题,而且实现了一个样本一次可同时测定两种抗原或抗体之目的.因而无论是基础医学的研究还是临床样品的检测,该法都是一种更为理想而实用的免疫分析技术,值得研究和应用.     

CdTe量子点荧光探针在生物分析中的应用

目的 探讨巯基丙酸包被的CdTe量子点在生物分析中应用价值.方法 水相中合成CdTe量子点并进行巯基丙酸包被,并对其进行了荧光发射光谱及透射电子显微镜成像表征;将量子点与亲和素连接、制备成量子点荧光探针;应用激光扫描共聚焦显微术观察量子点荧光探针标记小鼠腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophage,PMΦ)MHCⅡ抗原的表达;以H22肝癌细胞为靶细胞,MTT法观察量子点的生物相容性.结果 CdTe量子点粒径均匀,具备良好的光学性能;量子点荧光探针标记细胞具有较强的荧光表达;量子点在一定浓度范围内对细胞的毒性小.结论量子点荧光探针能对固定的组织细胞进行标记,同时具有较好的生物相容性,可对活细胞进行直接或动态标记.     

量子点:肿瘤诊断和治疗一体化荧光探针

目的量子点光激发可发射荧光,具有长时间、多目标和灵敏性高等独特的光学性质,在肿瘤细胞标记和生物应用中得到了广泛应用。通过量子点标记定位肿瘤细胞,对寻找癌变部位具有指导作用。量子点作为能量供体,在肿瘤光动力学治疗研究得到关注。本文简要介绍量子点光学特性,综述量子点荧光探针在肿瘤诊断和肿瘤光动力学治疗方面应用研究。