视神经脊髓炎患者血清及脑脊液中B淋巴细胞活化因子的表达水平与临床意义

目的 探讨视神经脊髓炎患者血清及脑脊液中B淋巴细胞活化因子的表达水平及其临床意义。方法 选取2011年1月-2015年1月本院收治的视神经脊髓炎(NMO)患者50例及多发性硬化(MS)患者50例,将其分别作为NMO组与MS组,另选取同期于本院进行体检的非炎性神经系统疾病患者50例作为对照组,对3组血清及脑脊液中的B淋巴细胞活化因子(BAFF)水平进行检测。结果 与对照组比较,NMO组与MS组血清中BAFF水平均无明显变化(P>0.05),而NMO组与MS组脑脊液中BAFF水平均明显升高(P<0.05); 与MS组比较,NMO组脑脊液中BAFF水平明显升高(P<0.05)。NMO组与MS组脑脊液中BAFF水平与EDSS评分呈正相关,即脑脊液中BAFF水平随EDSS评分升高而升高(r=0.887,0.885,P<0.01)。结论 视神经脊髓炎患者脑脊液中的B淋巴细胞活化因子水平较高,可能是诊断视神经脊髓炎的重要标志物,对疾病严重程度的判定具有重要的临床意义。     

B细胞活化因子(BAFF)基因rs9514828多态性与重症肌无力的关系

目的 探讨B细胞活化因子(BAFF)基因rs9514828多态性与重症肌无力(MG)的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对168例MG患者和142例正常对照组进行基因分型,比较基因型和等位基因在MG患者与健康人群中及各MG亚组的分布,并观察与激素短期疗效的关系.结果 rs9514828位点的基因型及等位基因频率在MG患者及健康人群及各MG亚组中分布的差异无统计学意义(P>0.05).rs9514828位点基因型和等位基因频率与发病后1年内临床分型是否由眼肌型进展为全身型无关(P>0.05).不同激素短期疗效的MG患者rs9514828位点的基因型及等位基因频率的差异无统计学意义(P>0.05).结论 BAFF基因rs9514828位点多态性与MG疾病的易感性及激素短期疗效无显著的相关性.     

肾移植术后受者外周血淋巴细胞的早反应基因表达谱变化

背景：同种异体免疫应答过程中有许多基因参与淋巴细胞的活化及其调控。 目的：研究肾移植后受者外周血淋巴细胞差异表达基因,尤其是早反应基因。 设计、时间及地点：基因水平的对照观察实验,于2003-09/2004-02在解放军第二军医大学长征医院泌尿外科及器官移植中心以及上海博星基因芯片公司完成。 对象：选取无明显急性排斥反应的同种异体肾移植受者16例。 方法：应用包含4 096个人cDNA克隆的微矩阵芯片,分析肾移植受者移植后24 h外周血淋巴细胞的基因表达谱。每位受者于移植前当日和术后24 h分别抽取外周血10 mL,分离外周血淋巴细胞。16例受试者同一时间点的淋巴细胞混合。按一步法抽提两个时间点细胞总RNA并纯化mRNA,分别反转录合成、标记cDNA探针,与包含4 096个人cDNA克隆的微矩阵芯片杂交,结果通过生物信息学方法分析。 主要观察指标：差异表达的基因。 结果：肾移植后24 h与移植前相比,肾移植受者外周血淋巴细胞差异表达的基因共有216个,其中下调基因103个,上调基因113个。这些基因主要涉及细胞信号转导、细胞凋亡等多个种类。 结论：肾移植后24 h,基因芯片技术可有效地筛选出受者外周血淋巴细胞早反应基因的差异表达。     

外周血CD4+CD25highTreg细胞的比例变化在肾移植受者术后免疫监测中的临床应用研究

目的 研究外周血CD4+CD25highTreg细胞(regulatory T cell,Treg)比例对肾移植受者免疫力的影响,为CD4+CD25highTreg细胞的比例变化作为评估移植受者免疫状态及作为预测排斥反应和感染的特异性指标提供实验依据。方法 肾移植受者52例按肾移植术后恢复情况分为免疫力正常组26例,发生排斥反应组17例,发生感染组9例,用流式细胞仪检测外周血CD4+CD25highTreg细胞的比例,所得结果进行相关分析。结果 发生急性排斥反应组CD4+CD25highTreg细胞比例较免疫力正常组显著降低（p〈0.05）,发生感染组外周血CD4+CD25highTreg细胞的比例较正常组显著升高（p〈0.01）,均有统计学意义。FK-506和CsA分别对CD4+CD25highTreg细胞比例的影响没有显著性差异。结论 肾移植术后受者外周血CD4+CD25highTreg细胞比例与受者免疫状态密切相关。CD4+CD25highTreg细胞比例的变化可以反应机体的免疫状态的变化,其升高或降低可以作为预测肾移植受者术后发生感染或排斥反应的指标之一。     

中药安胎养血合剂干预肾移植大鼠肾细胞凋亡及Fas/FasL基因的表达

背景：前期实验表明,作者自制的中药复方安胎养血合剂能够抑制肾移植大鼠急性排斥反应,延长受体存活时间。 目的：观察安胎养血合剂对异基因肾移植大鼠移植肾肾小管上皮细胞凋亡及Fas/FasL基因表达的影响,并与同基因肾移植大鼠进行对比。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2005-07/2006-06在辽宁医学院附属第一医院外科实验室完成。 材料：选用雄性SD大鼠24只,雄性Wistar大鼠48只。 方法：按体质量相近配对后,按随机数字表法分为3组,每组12对。对照组大鼠同基因肾移植(Wistar→Wistar大鼠),生理盐水灌胃;生理盐水组大鼠异种基因肾移植(SD→Wistar大鼠),肾移植后不用任何免疫抑制剂,生理盐水灌胃;安胎养血合剂组大鼠异种基因肾移植(SD→Wistar大鼠),肾移植后给安胎养血合剂灌胃,灌胃剂量均为10 mL/(kg•d),移植后1次/d。 主要观察指标：于移植后第5天处死动物取肾脏组织,通过原位末端标记法检测凋亡指数,采用反转录-聚合酶链反应检测Fas/ FasL mRNA表达。 结果：生理盐水组移植肾组织凋亡细胞最多,对照组凋亡细胞极少见。生理盐水组和安胎养血合剂组凋亡指数显著高于对照组(P < 0.05),安胎养血合剂组凋亡指数显著低于生理盐水组(P < 0.05)。各组中均有Fas mRNA的表达,FasL mRNA的表达水平在安胎养血合剂组中明显低于生理盐水组(P < 0.05)。 结论：安胎养血合剂可以通过下调大鼠移植肾肾小管上皮细胞Fas L的mRNA表达,从而减少移植肾的细胞凋亡,起到免疫抑制剂的作用。     

脂多糖诱导的大鼠脑急性炎性损伤及血小板活化因子受体拮抗剂的干预治疗效果

目的研究脂多糖（1ipopolysaccharide,LPS）诱导的脑内炎性损害以及银杏内脂B（BN52021）的干预治疗效果。方法Sprague—Dawley大鼠30只,随机分为对照组,模型组和治疗组（BN52021治疗）,每组10只。第Ⅳ脑室注射LPS造模,Morris水迷宫检测实验动物学习和记忆能力;透射电子显微镜观察海马神经元突触数量及亚细胞结构的变化;免疫组织化学法检测脑内OX-42在小胶质细胞内的表达。结果治疗组大鼠的水迷宫逃避潜伏期比模型组显著缩短,平台象限游泳距离百分比显著增加;治疗组大鼠海马神经元内质网和核糖体数量比模型组明显增加,突触数量则无明显变化;治疗组大鼠脑内的OX-42阳性小胶质细胞数量比模型组明显减少,染色灰度上升。结论LPS可诱导脑内炎性损害,血小板活化因子受体拮抗剂BN52021对LPS诱导的脑内炎性损害具有保护作用,提示血小板活化因子受体拮抗剂对以中枢炎症为病理特征的神经退行性变有治疗作用。     

整合素α3在脑膜瘤中的表达及生物学意义

目的探讨整合素α3在脑膜瘤中的表达及其生物学意义.方法免疫组织化学法检测43例脑膜瘤、5例正常硬脑膜及5例蛛网膜中整合素α3以及Ki-67的表达.结果整合素α3在Ⅰ级及Ⅱ、Ⅲ级脑膜瘤中的表达阳性率分别为80%、37.5%,有显著性差异(P＜0.05);整合素α3的表达与Ki-67标记指数有相关关系.正常硬脑膜及蛛网膜中,整合素α3呈弱、中阳性表达,Ki-67呈阴性表达.结论整合素α3参与脑膜瘤的增殖调控,随着整合素α3表达的减少,肿瘤细胞的增殖活性升高,恶性程度增加;并与脑膜瘤的侵袭性有关.     

去卵巢后大鼠骨组织中核因子κB受体活化因子配体和骨保护素表达的变化

背景：核因子κB受体活化因子配体在破骨细胞分化、活化和存活的生理过程中起十分重要的作用。骨保护素作为核因子κB受体活化因子配体的诱骗受体,对破骨细胞有相反作用。 目的：观察去卵巢后大鼠骨组织内核因子κB受体活化因子配体、骨保护素mRNA、蛋白表达和骨密度的时间变化规律。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2006-05/10在四川大学华西医院移植免疫实验室完成。 材料：6月龄健康雌性SD大鼠50只,体质量300~320 g。随机平均分成去卵巢组和对照组。 方法：建立去卵巢大鼠模型,于术后2,4,6,8,10周取股骨髁。 主要观察指标：测量股骨髁的骨密度,检测骨组织核因子κB受体活化因子配体、骨保护素的mRNA、蛋白表达情况。 结果：去卵巢后大鼠股骨髁的骨密度与对照组相比于第6周开始出现显著降低(P < 0.05);核因子κB受体活化因子配体mRNA水平在第4周达到高峰,蛋白水平在第6周达到高峰,此后均呈持续高表达,与对照组相比,各时间点表达水平差异具有显著性(P < 0.05);骨保护素 mRNA水平在第4周达到高峰,蛋白水平在第2周达到高峰,此后均迅速下降,与对照组相比,各时间点表达水平差异具有显著性(P < 0.05)。 结论：大鼠去卵巢后股骨髁是骨密度变化的敏感部位;核因子κB受体活化因子配体持续高表达,骨保护素表达短期内升高,迅速降低是骨质疏松的直接原因。     

小剂量他克莫司添加治疗难治性全身型重症肌无力的疗效及对外周血CD19~+BAFF-R~+ B细胞的影响

目的探讨小剂量他克莫司添加治疗难治性全身型重症肌无力(MG)的疗效及可能机制。方法纳入临床确诊的18例难治性全身型MG患者(OssermanⅢ型2例,Ⅳ型1例,ⅡB型15例),其中男性5例、女性13例,平均年龄(40.9±9.1)岁,所有病例均给予他克莫司3 mg·d-1治疗6个月。采用美国MG基金会量表(MGFA)、徒手肌力量表(MMT)和日常生活量表(ADL)分别在治疗前和治疗后第1、2、3、4、5、6个月进行疗效评估。其中10例在治疗前和治疗后3和6个月时进行外周血CD19阳性(CD19+)和B细胞活化因子受体阳性(BAFF-R+)B细胞百分比检测。结果 6个月后,所有患者添加小剂量他克莫司治疗MGFA、ADL和MMT量表均较治疗前有明显改善(P0.001);与泼尼松联合治疗的15例患者泼尼松使用剂量明显减少(P0.05);10例患者CD19+BAFF-R+B细胞百分比检测明显下降(P0.001)。结论小剂量他克莫司添加治疗难治性全身型MG,可改善患者日常生活质量、减少泼尼松用量,其机制可能与外周血CD19+BAFFR+B细胞数量下降有关。     

脂多糖诱导的大鼠脑急性炎性损伤及血小板活化因子受体拮抗剂的干预治疗效果(英文)

目的研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的脑内炎性损害以及银杏内脂B(BN52021)的干预治疗效果。方法Sprague-Dawley大鼠30只,随机分为对照组,模型组和治疗组(BN52021治疗),每组10只。第Ⅳ脑室注射LPS造模,Morris水迷宫检测实验动物学习和记忆能力;透射电了显微镜观察海马神经元突触数量及亚细胞结构的变化;免疫组织化学法检测脑内OX-42在小胶质细胞内的表达。结果治疗组大鼠的水迷宫逃避潜伏期比模型组显著缩短,平台象限游泳距离百分比显著增加;治疗组大鼠海马神经元内质网和核糖体数量比模型组明显增加,突触数量则无明显变化;治疗组大鼠脑内的OX-42阳性小胶质细胞数量比模型组明显减少,染色灰度上升。结论LPS可诱导脑内炎性损害,血小板活化因子受体拮抗剂BN52021对LPS诱导的脑内炎性损害具有保护作用,提示血小板活化因子受体拮抗剂对以中枢炎症为病理特征的神经退行性变有治疗作用。     

Abnormal expression of actin in lymphocytes of Alzheimer''s disease and Down''s syndrome patients

Alzheimer's disease (AD) is a degenerative disorder of the central nervous system accompanied by several immunological disturbances and a number of common features exist between AD and Down's syndrome (DS). High resolution two-dimensional electrophoresis of lymphocyte proteins demonstrates an actin abnormality in AD and DS: a double actin spot instead of the single spot observed in controls. This dual form was studied by pulse-chase experiments and seems to be related to extracellular factors which influence the post-translational modification of actin. These results agree with the immunological disturbances observed in AD and DS, and with the well established hypothesis that AD is a systemic as well as cerebral disease.     

阿尔茨海默病患者外周血淋巴细胞周期分布及p27表达的改变及意义

目的研究阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)患者外周血淋巴细胞细胞周期分布及周期素依赖性蛋白激酶抑制剂p27(p27)、细胞周期素E(cyclin E)表达的改变及意义。方法选取40例AD患者和30例正常对照者外周血,立即用密度梯度离心法分离淋巴细胞,用流式细胞分析仪检测淋巴细胞细胞周期分布,分析DNA相对含量(DNA relative contents,DNARC)和细胞增殖指数(cell proliferation index,PI),用免疫印迹法检测淋巴细胞p27、cyclin E的表达水平。结果与正常对照组相比,AD组外周血淋巴细胞分布于G1期的比例(G1%)显著下降而S%显著升高(P0.01);淋巴细胞DNARC和PI显著升高(P0.01);p27在AD组表达显著下降(P0.01)。轻、中重度AD组之间外周血淋巴细胞周期的改变及p27水平无统计学差异(P0.05)。结论 AD早期外周血淋巴细胞即显示了增强的增殖能力和细胞周期调节的紊乱,且与病情进展无关,淋巴细胞p27水平有可能成为AD早期诊断的外周标志物。     

Sensitization of cerebrospinal fluid and peripheral blood lymphocytes to myelin basic protein in multiple sclerosis

Cerebrospinal fluid (CSF) and peripheral blood (PB) lymphocyte sensitization to rabbit myelin basic protein (MBP) in 44 multiple sclerosis (MS) patients, 21 patients with other neurological diseases (OND) and 14 persons with neurosis was studied with the antigen-active rosette forming cells (Ag-ARFC) assay. The frequency of sensitization of CSF lymphocytes to MBP in groups of MS patients in the relapse stage and the chronic progressive stage was higher than in the group of MS patients in the stable stage and the OND patients. None of the healthy subjects showed a positive reaction with MBP. In BP there were no differences in the incidence of sensitization to MBP between patients in various stages of the disease, but it was higher than in the group of patients with OND and neuroses. In the patients who had suffered from MS for less than 4 years, sensitization to MBP was more common in CSF lymphocytes than in BP lymphocytes. The results suggest that primary sensitization to MBP occurs in CSF, and is probably secondary to myelin damage. However at present it is difficult to determine the extent to which sensitization of CSF and PB lymphocytes to MBP play a role in further demyelination processes.     

轻度认知障碍及阿尔茨海默病患者外周血淋巴细胞中蛋白磷酸酯酶-2A的改变

目的 探讨轻度认知功能障碍(MCI)及阿尔茨海默病(AD)患者外周血淋巴细胞蛋白磷酸酯酶-2A(PP-2A)的变化.方法 用放射性配体结合试验检测11名健康对照者、11例MCI患者及11例AD患者外周血淋巴细胞PP-2A的活性,并用Western bolt检测PP-2A蛋白的表达.结果 MCI组外周血淋巴细胞PP-2A活性(0.71±0.12)及蛋白表达(0.80±0.05)与健康对照组[分别为(1.01±0.09)和(0.96±0.07)]相比明显降低(均P＜0.01);AD组PP-2A活性(0.64±0.11)及蛋白表达(0.76±0.06)亦明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(均P＜0.01);AD组PP-2A活性及蛋白表达比MCI组有降低的趋势,但差异无统计学意义.结论 MCI及AD患者外周血淋巴细胞PP-2A的活性及表达降低,在MCI的诊断中可能有参考价值,同时亦可能对AD的诊断有一定的潜在的意义.     

肝移植术后患者家属抑郁状况及原因分析

目的 探讨肝移植术后患者家属的抑郁状况及其影响因素. 方法 用抑郁自评量表(SDS)选取自2005年1月至2008年12月接受肝移植术并随访的患者家属50人,与国内SDS常模进行比较. 结果 50名肝移植术后患者家属SDS评分为39.06±11.20,高于国内SDS常模的评分(33.46±8.55),差异有统计学意义(P＜0.05);其中无抑郁者为41人,轻度抑郁6人,中度抑郁3人,抑郁的发生率为18％. 结论 肝移植术后患者家属的抑郁水平高于一般人群,应受到肝移植医师的关注.     

Alzheimer病患者外周血淋巴细胞Akt及其活化水平的改变及意义

目的 研究Alzheimer病(AD)患者外周血淋巴细胞Akt及其活化水平的改变及意义.方法 对20例AD患者(AD组)进行简易精神状态检查(MMSE)量表评分,用免疫印迹法检测其外周血淋巴细胞的Akt及磷酸化Akt (p-Akt)水平,并与帕金森病(PD)患者(PD组)和正常对照者(正常对照组)进行比较.分析AD患者外周血淋巴细胞的Akt水平与病程和MMSE量表评分的关系.结果 与正常对照组相比,AD组外周血淋巴细胞中Akt及p-Akt水平明显升高(均P＜0.01);PD组p-Akt水平显著增高(P＜0.05).与PD组相比,AD组Akt水平升高明显(P＜0.05).AD患者外周血淋巴细胞中Akt水平与病程呈正相关(r=0.602,P=0.014),与MMSE量表评分呈负相关(r=-0.560,P=0.024).结论 AD患者外周血淋巴细胞的Akt及其活化水平显著增高,并且病程越长、病情越重者增高的越明显.提示Akt有可能成为AD诊断及病情评价的外周标志物.     

Association of factor V Leiden mutation with delayed graft function, acute rejection episodes and long-term graft dysfunction in kidney transplant recipients

We analysed whether the factor V Leiden mutation--the most common hereditary predisposing factor for venous thrombosis--is associated with early and long-term graft dysfunction after kidney transplantation in 394 Caucasian kidney transplant recipients. The presence of factor V Leiden mutation was identified by allele specific PCR. The prevalence of the factor V Leiden mutation was compared to 32216 unselected neonates. The prevalence of the factor V Leiden mutation (GA genotype) was similar in 394 kidney transplant recipients and 32216 neonates. The frequency of known factors predicting long-term graft function were similar in patients with the GA genotype and with the normal factor V gene (GG genotype). The GA genotype was associated with the occurrence of no primary graft function (risk: 2.87: 95% confidence interval: 1.01-8.26; p < 0.05), the number of dialysis after transplantation in patients with no primary graft function until graft function (7.5 +/- 2.06 dialysis in GA patients; 4.2 +/- 0.36 dialyses in GG patients; p < 0.05), and the risk for at least one acute rejection episode (risk: 3.83; 95% confidence interval: 1.38-10.59; p < 0.02). The slope of l/creatinine per year was significantly lower in patients with the GA genotype (GA patients: -0.0204 +/- 0.008 dl/mg per year; GG patients: 0.0104 +/- 0.004 dl/mg per year; p < 0.02). The annual enhancement of the daily protein excretion rate was elevated in patients with the GA genotype (GA patients: 38.5 +/- 16.6 mg/24 h per year; GG patients: 4.9 +/- 4.4 mg/24 h per year; p < 0.02). Our study showed that the factor V Leiden mutation is associated with the occurrence of delayed graft function, acute rejection episodes and chronic graft dysfunction after kidney transplantation.     

Abnormal expression of brain-derived neurotrophic factor and its receptor in the corticolimbic system of schizophrenic patients

Previous neuropathological studies have revealed that the corticolimbic system of schizophrenic patients expresses abnormal levels of various synaptic molecules, which are known to be influenced by the neuronal differentiation factors, neurotrophins. Therefore, we determined levels of neurotrophins and their receptors in the postmortem brains of schizophrenic patients and control subjects in relation to molecular impairments in schizophrenia. Among the neurotrophins examined, levels of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) were elevated specifically in the anterior cingulate cortex and hippocampus of schizophrenic patients, but levels of nerve growth factors and neurotrophin-3 showed no change in any of the regions examined. In parallel, the expressions of TrkB receptor and calbindin-D, which are both influenced by BDNF, were reduced significantly in the hippocampus or the prefrontal cortex. However, neuroleptic treatment did not appear to mimic the neurotrophic change. Neither withdrawal of drug treatment in patients nor chronic administration of haloperidol to rats altered levels of BDNF. These findings suggest that neurotrophic abnormality is associated with the corticolimbic structures of schizophrenic patients and might provide the molecular substrate for pathological manifestations of the illness.     

大鼠局灶性脑缺血预处理后激活转录因子4mRNA及其蛋白表达的变化

目的 观察缺血预处理对大鼠脑缺血再灌注后激活转录因子4 (ATF4) mRNA及其蛋白表达的影响.方法 SD大鼠120只,随机分为假手术组(SO)、脑缺血再灌注组(MCAO)、脑缺血预处理组(BIP)3组,每组按照再缺血后12h、ld、2d、3d4个时间点分为4个亚组.采用二次线栓法制备大鼠局灶性脑缺血预处理模型,用原位杂交法和Western blot法观察再缺血后各个时间点ATF4 mRNA及其蛋白表达的变化.结果 MCAO组12hATF4mRNA及其蛋白表达均达高峰(P＜0.01),随再灌注时间延长其表达逐渐下降;BIP组较MCAO组ATF4 mRNA及其蛋白表达均明显降低(P＜0.05,P＜0.01).结论脑缺血预处理可能通过抑制ATF4表达发挥其神经保护作用.