子宫颈癌中Gli蛋白过表达的临床病理学意义

目的 研究Gli蛋白检测在子宫颈癌及其癌前病变中的临床病理学意义,并分析Gli蛋白表达与HPV16型感染的关系.方法 32例正常子宫颈上皮、71例子宫颈上皮内瘤变(CIN);其中CIN1 28例、CIN2 18例、CIN3 25例和80例子宫颈鳞状上皮癌(SCC)共183例存档蜡块选自延边大学医院、延边妇幼保健院和延边肿瘤医院病理科.应用PCR技术检测上述组织中HPV16型的感染,并用免疫组化方法在子宫颈病变组织芯片中检测Gli-1、Gli-2、Gli-3蛋白的表达情况.结果 Gli-1和Gli-2蛋白呈胞质和胞核染色,Gli-3蛋白多数呈胞质染色.在子宫颈癌和癌前病变(CIN2/3)中,Gli-1~3呈强阳性,其阳性表达率均显著高于正常子宫颈黏膜上皮.80例子宫颈癌标本中HPV16阳性率是77.5%.在子宫颈癌组织中HPV16阳性组的Gli-1蛋白的胞质阳性率(85.5%,53/62)与强阳性率(85.5%,53/62)以及Gli-2蛋白的胞质阳性率(100%)与胞核强阳性率(100%)均高于HPV16阴性组(Gli-1胞质阳性率与强阳性率均为0,Gli-2胞质阳性率和胞核强阳性率分别为0和50%),差异具有统计学意义(P均<0.05);而3种蛋白表达率与患者的年龄、淋巴结转移、肿瘤学分期和临床分期均无关.结论 Gli-1、Gli-2、Gli-3蛋白过表达可以作为子宫颈癌及其癌前病变的早期辅助诊断指标,Gli蛋白的表达水平与HPV16感染密切相关,且有望成为子宫颈癌靶向治疗的新靶点.     

宫颈癌组织APOBEC3A蛋白的表达与高危型HPV感染的相关性研究

 目的： 探讨宫颈癌组织中载脂蛋白 B mRNA 编辑酶催化多肽样蛋白3A（APOBEC3A）表达与高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染的关系。方法： 采用免疫组化法检测26例宫颈癌、27例宫颈上皮内瘤变（CIN）I～III和22例正常宫颈组织APOBEC3A蛋白的表达,同时使用凯普分型检测试剂盒对3组样品分别进行高危HPV16/HPV18分型检测。以脂质体法转染APOBEC3A质粒进入HeLa细胞,RT-qPCR与Western blotting验证APOBEC3A对高危型HPV18 E6 mRNA以及蛋白表达的影响。结果：宫颈癌组织、CIN组织以及正常宫颈组织中APOBEC3A蛋白表达的阳性率分别为46.2%、92.6%和86.4%,宫颈癌组织中APOBEC3A蛋白表达较正常宫颈组织明显下降（P<0.01）。宫颈癌组织、CIN及正常宫颈组织中HPV16感染阳性率分别为92.3%、77.8%和54.5%; HPV18感染阳性率分别为80.8%、51.8%和68.2%;APOBEC3A蛋白表达与HPV18感染阳性率呈负相关(P<0.05)。增加HeLa细胞中APOBEC3A的表达明显降低了HPV18 E6 mRNA以及蛋白的表达。结论：在宫颈癌组织中APOBEC3A高表达可以对抗HPV18感染,并抑制HPV18 E6的转录和表达。     

宫颈癌组织中MCM4、TFF2的表达及其与HPV_(16/18)感染的相关性研究

研究MCM4、TFF2在宫颈癌组织中的表达及其与HPV16/18感染的相关性,以探讨宫颈癌的发生机制,进一步寻找有利于宫颈癌诊断的新的分子标志物,以指导其诊断与预后。采用免疫组织化学方法对50例宫颈癌石蜡标本、宫颈上皮内瘤变CINⅠ20例、CINⅡ-Ⅲ20例、正常宫颈组织20例进行MCM4、TFF2的检测,同时采用PCR技术检测HPV16/18感染情况。结果:(1)在宫颈癌组织中MCM4的阳性率高于CIN和正常宫颈组织,差异有统计学意义(P<0.05),且MCM4阳性表达率与病理分级、淋巴结转移有关,差异有统计学意义(均P<0.05)。在宫颈癌组织中MCM4的阳性表达率与年龄分组、临床分期无关(均P>0.05)。在宫颈癌组织中TFF2的阳性率低于CIN和正常宫颈组织,差异有统计学意义(P<0.05),且TFF2阳性表达率与年龄分组有关,差异有统计学意义(P<0.05),其阳性表达率均与临床分期、病理分级、淋巴转移无关(均P>0.05);(2)HPV16/18在正常宫颈组织、CIN和宫颈癌中的阳性率逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05),但与年龄、临床分期、病理分级、淋巴转移无关(均P>0.05);(3)在宫颈癌组织中,MCM4与HPV16/18感染呈正相关(rs=0.634,P<0.01),TFF2与MCM4、HPV16/18感染呈负相关(rs=-0.375,P<0.01;rs=-0.500,P<0.01)。宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中MCM4、TFF2表达的改变可能与HPV16/18感染有关,且互相作用,共同影响CIN的发展及宫颈癌的发生。这些指标综合分析可能为阐明HPV16/18的恶性转化机制以及为提高宫颈癌及其癌前病变诊断率提供参考依据。MCM4的异常表达与宫颈癌的恶变程度有关,可作为宫颈癌筛查、预后判断的有利指标。     

人乳头状瘤病毒阴性的宫颈癌及其癌前病变中p16INK4A蛋白表达和DNA倍体分析

目的探讨人乳头状瘤病毒（HPV）感染阴性的宫颈癌及其癌前病变中p16^INK4A蛋白表达和DNA倍体分析的临床病理学意义。方法应用PCR方法筛查出HPV感染阴性的20例慢性宫颈炎、20例宫颈上皮内瘤变（CIN）、3例宫颈腺上皮内瘤变（CGIN）、38例浸润性鳞状细胞癌（鳞癌）和15例浸润性腺癌作为研究对象。应用免疫组织化学（LSAB）染色方法检测p16^INK4A蛋白在这些病变组织中的表达,并结合流式细胞仪DNA倍体分析探讨HPV阴性的宫颈癌的早期诊断和预后判定。结果p16^INK4A蛋白特异性地表达在CIN和CGIN病变、鳞癌以及腺癌细胞的胞核和胞质中,而在正常鳞状上皮和腺上皮中没有任何阳性表达信号。另外,DNA异倍体在浸润性鳞癌和腺癌中的表达率明显高于CIN病变组（P〈0．01）。在有淋巴结转移的浸润癌中DNA异倍体存在的百分率高于无淋巴结转移组,但尚未发现差异有统计学意义。在8例p16^INK4A表达阴性的浸润性鳞癌中有2例表现为DNA异倍体。结论p16^INK4A蛋白检测可以作为HPV感染阴性的宫颈鳞癌及腺癌的早期诊断指标,结合DNA倍体分析将对宫颈恶性肿瘤的诊断有重要的辅助意义。     

γH2AX在HPV16阳性宫颈鳞癌组织中的表达及意义

目的 探讨γH2AX在HPV16阳性宫颈鳞癌组织中的表达及意义.方法 对74例宫颈鳞癌组织通过DNA提取,PCR检测,分析HPV的感染情况并筛选HPV16阳性宫颈癌组织;进而对HPV16阳性的宫颈癌石蜡组织连续切片HE染色明确组织型别,进行HPV16 DNA原位杂交检测HPV定位、免疫组化检测γH2 AX和p16蛋白的表达;最后选取30例典型的包括从正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变到宫颈原位癌渐变的组织切片,对比HPV DNA定位与γH2 AX和p16蛋白的表达,分析γH2 AX作为HPV感染导致宫颈癌发生过程中生物标记物的可行性.结果 经PCR扩增证明HPV感染率为98.65％,HPV16是最常见的型别占74.32％;原位杂交结果显示正常宫颈组织和CIN Ⅰ检测不到HPV16 DNA的存在,CINⅡ中HPV主要为游离型存在,随着宫颈病变的加重,HPV16 DNA逐渐出现整合形式;p16和γH2AX的表达均随着宫颈上皮病变级别的增加其阳性表达率增高,HPVDNA和γH2AX的表达均以颗粒细胞层和棘细胞层为主,定位具有一致性,HPV DNA和p16的表达定位不具有一致性.结论 γH2AX作为DNA损伤激活的重要蛋白,可作为HPV16感染致宫颈癌发生过程中的生物标记物.     

宫颈病变程度与人类乳头瘤病毒(16、18型)负荷的关系

目的探讨宫颈病变程度与人类乳头状瘤病毒(HPV)16、18型负荷的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法,检测宫颈不同病变活检组织及石蜡包埋标本中HPV16、18型感染状况。结果正常宫颈上皮感染HPV16、18型阳性率为3%,CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级和宫颈癌感染HPV16、18阳性率分别为45.7%,69.5%,72.2%和74.6%。正常宫颈与CIN,宫颈癌HPV16、18阳性率差异有极显著性(P<0.0001)。宫颈糜烂(Ⅰ°、Ⅱ°、Ⅲ°),CIN(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级)及鳞癌HPV16、18阳性标本平均拷贝数分别为:3.58×103、1.80×105、1.19×107,随着病变程度加重而逐渐增加,差异有极显著性(P<0.0001)。结论宫颈病变程度与HPV16、18型负荷呈正相关。对宫颈病变组织标本行HPV16、18型检测,对判断宫颈病变发展趋势,积极处理癌前病变,阻断病程、预防宫颈癌的发生将起到重要作用。     

宫颈癌及其前期病变HPV感染与基因型分布

目的了解宫颈癌及宫颈上皮内瘤变CIN患者的HPV的感染和其基因分型及主要感染型别情况。方法应用型特异PCR检测宫颈癌及其前病变的患者的HPV感染及其主要基因分型情况的分析。结果在本研究宫颈癌及宫颈上皮内瘤变患者中,宫颈癌的HPV感染率为91．0％,CINⅠ／Ⅱ／Ⅲ的HPV感染率为73．3％,主要高危型HPV基因型别依次为HPV16、HPV18、HPV58、HPV33。结论在宫颈上皮内瘤变患者中感染主要高危型HPV基因型别依次为HPV16、HPV18、HPV58、HPV33、HPV16在宫颈癌和CIN中的构成比随着宫颈病变的增加而明显增加。     

鼻咽癌中Shh和Ptch1基因的表达及其临床意义

目的探讨鼻咽癌中Hedgehog信号通路成员Shh和Ptch1基因表达的关系及其意义。方法采用免疫组化En Vision两步法检测69例鼻咽癌及15例正常鼻咽黏膜中Shh、Ptch1蛋白表达,分析Shh、Ptch1蛋白表达水平与鼻咽癌临床病理特征的关系。结果鼻咽癌中Shh及Ptch1蛋白呈高表达分别为53.6%、37.68%,高于正常鼻咽黏膜组织(二者均为6.7%)(P均0.05)。Shh表达与肿瘤淋巴结转移、临床分期有关(P0.05);与肿瘤侵袭、远处转移、患者年龄及性别等均无关(P0.05);Ptch1蛋白表达水平与鼻咽癌临床病理特征的比较无统计学意义(P0.05);Shh与Ptch1蛋白表达呈正相关(r=0.456,P0.01)。结论 Shh和Ptch1蛋白高表达,可能参与鼻咽癌的发生、发展。     

宫颈上皮内肿瘤及宫颈鳞状细胞癌组织中HPV16感染与hTERT、p21waf1和Ki67表达的关系及意义

目的探讨宫颈鳞状细胞癌(SCC)及宫颈上皮内肿瘤(CIN)组织中人乳头瘤病毒(HPV)16感染与端粒酶反转录蛋白(hTERT)、抑癌基因p21waf1和增生抗原Ki67表达的关系及其意义。方法在130例宫颈组织中利用组织芯片技术结合原位杂交技术检测HPV16感染及结合免疫组织化学技术检测hTERT、Ki67、p21waf1的表达。结果(1)HPV16杂交信号阳性率及hTERT、Ki67表达在CINⅡ～Ⅲ级、原位癌、浸润性鳞癌组织中都显著高于正常宫颈组织(P均<0.05),浸润癌也显著高于CIN(P均<0.05),CIN三级之间差异也具统计学意义(P均<0.05)。(2)p21waf1仅在浸润性鳞癌组织中的阳性率显著低于正常宫颈组织(P<0.05),其他组别之间差异无统计学意义(P均>0.05)。(3)HPV16感染及Ki67表达与hTERT表达均呈正相关(P<0.05,r=0.339;P<0.05,r=0.398);HPV16感染、hTERT及Ki67表达与p21waf1表达均呈负相关(P<0.05,r=0.337;P<0.05,r=0.248;P<0.05,r=0.446);HPV16感染与Ki67表达无相关性(P>0.05)。结论宫颈上皮内肿瘤及宫颈鳞状细胞癌组织中hTERT、p21waf1、Ki67表达的改变可能与HPV16感染有关,且互相作用,共同影响CIN的发展及宫颈鳞癌的发生。这些指标综合分析可能为阐明HPV16的恶性转化机制以及为提高宫颈鳞癌及其癌前病变诊断率提供参考依据。组织芯片技术是高效的研究基因及其表达产物的技术平台。     

子宫颈癌及癌前病变HPV16、Ki-67的表达及其相关性

目的对子宫颈癌及癌前病变中HPV感染和增殖细胞核抗原Ki-67表达情况进行研究。方法对45例子宫颈浸润性鳞状细胞癌、5例子宫颈腺癌、35例子宫颈上皮内瘤变（CIN）和5例正常宫颈组织采用免疫组化EnVision法进行HPV16和Ki-67表达的检测。结果HPV16阳性率为78．9％（71／90）,其中HPV16阳性率在子宫颈癌组织中为76．0％（38／50）,在CIN病变中为94．3％（33／35）,在正常子宫颈黏膜上皮组织中为阴性（0／5）。Ki-67阳性细胞在正常子宫颈、CIN和子宫颈癌组织中表达逐级增加,显示Ki-67表达程度与组织学类型有关。HPV和Ki-67在CIN和癌组织中的表达呈显著相关（P〈0．005）。结论瑞安地区子宫颈癌及癌前病变组织中存在HPV感染,HPV感染可能在子宫颈癌的发生、发展中起着重要作用。联合应用Ki-67与HPV可作为筛选子宫颈癌高危个体有价值的生物学标记。     

细胞周期素D1和抗原Ki-67在宫颈上皮内瘤样病变和宫颈鳞癌的表达及与人乳头瘤病毒感染转归的关系

目的 研究细胞周期素D1(cyclin D1)、抗原Ki-67在宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈鳞癌发生发展中作用及其与人乳头瘤病毒(HPV)感染转归的关系.方法 2002年1月至2006年12月广州医学院第一附属医院HPV阳性患者104例,分2组:(1)研究组:82例,即病理确诊CIN Ⅰ组17例、CINⅡ组19例、CINⅢ组23例、宫颈鳞癌组23例.(2)对照组:柱状上皮异位22例.应用EnVision法检测宫颈病变组织中cyclin D1、Ki-67蛋白的表达,杂交捕获试验检测宫颈分泌物或阴道残端中HPV感染情况,随访各组患者术后1年内的HPV变化.结果 (1)cyclin D1在各组宫颈组织细胞核内均有表达.其阳性率CINⅢ组[82.61%(19/23)]、宫颈鳞癌组[86.96%(20/23)]与对照组[27.27%(6/22)]、CINⅠ组[58.82%(10/17)]比较,差异有统计学意义(P<0.05),在宫颈鳞癌组与CINⅡ组[68.42%(13/19)]阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05).(2)Ki-67在各组宫颈组织细胞核内均有表达,其对照组阳性率[31.82%(7/22)]与CINⅢ组[86.96%(20/23)]、宫颈鳞癌组[91.30%(21/23)]比较差异有统计学意义(P<0.05),而在宫颈鳞癌组与CINⅠ组[58.82%(10/17)]、CIN Ⅱ组[63.16%(12/19)]比较差异有统计学意义(P<0.05).(3)术后1年内各组HPV的转阴率分别与cyclin D1、Ki-67的表达强度呈负相关(rs=-0.299,rs=-0.367,P<0.05).结论 cyclinD1和Ki-67在CIN和宫颈鳞癌的细胞增殖活动中起作用,且两者可能与HPV感染转阴率有关.     

Enhanced expression of hedgehog signaling molecules in squamous cell carcinoma of uterine cervix and its precursor lesions.

The hedgehog (Hh)-signaling pathway plays an essential role in normal development. Deregulation of this pathway is responsible for several types of cancers. The aim of this study was to determine the expression pattern and the extent of Hh-signaling molecules in squamous cell carcinoma of uterine cervix and its precursor lesions. A total of 106 uterine cervical cancers and related lesions (37 squamous cell carcinomas, 23 cervical intraepithelial neoplasia (CIN) III, 10 CIN II, four CIN I, 32 normal cervical epithelia) were immunohistochemically analyzed with anti-Shh, Indian Hh (Ihh), Patched (PTCH), Smoothened (Smo), Gli-1, Gli-2, Gli-3 antibodies on paraffin blocks. The results showed that the expression of all the Hh-signaling molecules was greatly enhanced in uterine cervical tumors, including carcinoma and its precursor lesions. The staining pattern was mainly cytoplasmic except for Gli-1/2, whose expression was observed in both cytoplasm and nucleus. In case of Ihh, PTCH, Smo and Gli-1, their expression in normal epithelium was completely absent or rare. The expression of all the seven Hh-signaling molecules mentioned above was significantly increased in CIN II/III and carcinoma, compared with that in normal epithelium (P < 0.05). The expression of Shh was increased by double; the first increase occurred in normal epithelium-CIN transition, and the second, during the progression of CIN to carcinoma. These results strongly suggest that the Hh-signaling pathways were extensively activated in carcinoma and CIN of uterine cervix. In conclusion, the Hh-signaling pathways may be involved in carcinogenesis of squamous cell carcinoma of uterine cervix and can be considered as a potential therapeutic target.     

Distribution of HPV genotypes in uterine cervical lesions in Yanbian, northern China

The aim of the present study was to investigate the distribution of HPV genotypes in uterine cervical lesions in Yanbian, northern China. HPV-DNA chip (oligonucleotide microarray) and cervical biopsy were used for 322 women in 1998-2005. All the normal cervical epithelia were negative for HPV. The positive rate of high-risk HPV was 33.9% in cervical intra-epithelial neoplasia (CIN)-1, 51.6% in CIN-2, 57.7% in CIN-3, 66.7% in cervical glandular intra-epithelial neoplasia (CGIN), 91.7% in squamous cell carcinoma (SCC), and 78.6% in adenocarcinoma. HPV-16 was the major type in all CIN and SCC cervical lesions, but in cervical adenocarcinoma HPV-18 was the most common type, and HPV-16 was the second most common type. Several cases of CIN-3, SCC and adenocarcinoma had multiple types of HPV, but there was none in CIN-1/2. In summary, HPV-16 is the type most frequently involved in the development of SCC of the cervix, and this may be helpful for the prediction of the development and progress of CIN-2/3, whereas both HPV-18 and -16 play a prominent role in the development of adenocarcinoma and CGIN of the cervix in Yanbian, northern China.     

子宫颈病变中HPV L1蛋白和p16的表达

目的 研究HPV L1蛋白和p16在子宫颈各种病变中的表达情况,探讨它们在子宫颈病变进展中的预测价值.方法 应用免疫组化方法检测41例各种子宫颈病变(CIN1级18例、CIN2级9例、CIN3级8例和浸润性鳞状细胞癌6例)中HPV L1蛋白和p16的表达.结果 HPV L1蛋白在各种子宫颈病变中的阳性率为26.8%.其中HPV L1在CIN1中的阳性表达率为38.9%,CIN2为44.4%,CIN3和浸润性鳞状细胞癌均无表达.p16在各种子宫颈病变中的阳性率为68.3%,其在CIN1中的阳性表达率为38.9%,CIN2为77.8%,CIN3和浸润性鳞状细胞癌均表达阳性.100%CIN3和浸润性鳞状细胞癌为p16+/HPV L1-,而61.1% CIN1中为p16-/HPV L1+或p16-/HPV L1-.结论 随着子宫颈病变的进展,HPV L1阳性表达率降低而p16阳性表达率增高.p16+/HPV L1-提示子宫颈鳞状上皮内瘤变有进展的可能,而p16-/HPV L1+和p16-/HPV L1-可能为无进展的或潜在消退的子宫颈病变.     

Human papillomavirus genotyping by oligonucleotide microarray and p16 expression in uterine cervical intraepithelial neoplasm and in invasive carcinoma in Korean women

For evaluating the diagnostic significance of p16(INK4A) over-expression in the uterine cervical intraepithelial neoplasm and in invasive carcinoma, human papillomavirus (HPV) was detected and genotyped by oligonucleotide microarray in archival tissues of 117 cervical specimens, including 47 invasive squamous cell carcinomas (SCC), 30 cases of cervical intraepithelial neoplasia (CIN), 20 adenocarcinomas, and 20 cases of non-neoplastic cervix. The expression of p16(INK4A) protein was immunohistochemically studied in these cases and in five HPV-positive and one HPV-negative cervical cancer cell lines. HPV was detected in 50% of CIN, 61.7% of SCC, and 45.5% of adenocarcinomas. p16(INK4A) expression was seen in all 20 cases of adenocarcinoma, 78.7% (37/47) of SCC, and 96.7% (29/30) of CIN, but not in any cases of the non-neoplastic cervix. There was no difference in p16(INK4A) expression between the HPV-positive and HPV-negative cervical lesions. All HPV-positive and -negative cervical cancer cell lines expressed p16(INK4A) protein. In conclusion, the presence of p16(INK4A) expression in cervical squamous and glandular epithelium indicates the existence of dysplasia or malignancy in the uterine cervix, regardless of HPV infection.     

子宫颈病变组织中低分子量蛋白酶体表达与HPV16感染的关系

目的观察低分子量蛋白酶体(low molecular-weight protein,LMP)在子宫颈病变组织中的mRNA和蛋白表达,探讨其与HPV16感染的关系。方法以152例新疆维吾尔族妇女正常子宫颈上皮、子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和子宫颈鳞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)患者为研究对象,采用RT-PCR和免疫组化法鉴定LMP2和LMP7mRNA及蛋白表达水平;采用PCR技术检测相应标本HPV16感染情况。结果 (1)LMP2、LMP7随着子宫颈病变的加重其蛋白表达逐渐降低,且mRNA表达水平与蛋白表达趋势相一致。在CIN中LMP2、LMP7蛋白表达下调和缺失率分别为25.0%/15.6%、29.7%/23.4%;在子宫颈癌中LMP2、LMP7蛋白的表达下调和缺失率分别为17.5%/34.9%、23.8%/41.3%。临床病理参数进行分析发现LMP2、LMP7与子宫颈癌分化程度及淋巴结转移密切相关(P<0.05)。(2)PCR结果显示,HPV16的检出率随着子宫颈病变的进展而增加,在慢性子宫颈炎、CIN和子宫颈癌组织中阳性率分别为8%(2/25)、67.2%(43/64)和77.8%(49/63),且随着肿瘤恶性程度的增加其阳性表达率增加,各组间阳性表达差异有统计学意义(P<0.05)。在CIN中LMP7表达下调与HPV16感染有关(P<0.05),子宫颈癌中LMP2和LMP7表达下调与HPV16感染有关(P<0.05)。结论 LMP基因的转录表达下调或蛋白质表达缺失与维吾尔族妇女子宫颈癌病变进程密切相关,其中HPV16感染可能是重要原因之一。     

实时荧光定量PCR法检测人乳头状瘤病毒的实验研究

目的 通过研究病变宫颈中人乳头状瘤病毒(HPV)16/18型的表达,探讨HPV16/18型病毒感染与宫颈病变发生发展之间的关系.方法 结合病理切片诊断,以免疫组化作对照.运用实时荧光定量PCR技术检测病变宫颈中HPV16/18型DNA拷贝数,以及HPV16/18型E7基因mRNA表达量.结果 慢性宫颈炎患者中HPV16/18型感染率低(7.4%).宫颈管上皮内瘤样变(CIN)组HPV16型感染率较高为69.6%,宫颈癌患者巾为72.7%.HPV16型DNA的拷贝数在宫颈上皮内瘤样变患者中与病理分级没有明显的相关性.但在宫颈癌患者中,病毒DNA的拷贝数明显升高,二者差异明显.CIN轻度(I)、中度(Ⅱ)、高度(Ⅲ)组和宫颈癌患者中,HPV16 E7基冈的表达率分别为0、37.5%、42.9%、63.6%.统计学分析表明,HPV16 E7 mRNA的拷贝数与病情呈明显的正相关性.结论 感染者中主要以HPV16型为主,HPV18型较少.宫颈癌患者中HPV16 DNA拷贝数明显高于CIN Ⅱ、Ⅲ组,HPV16型E7 mRNA在宫颈癌中表达率及表达量明显增加并与宫颈癌变呈正相关.实时荧光定量PCR适合临床宫颈病变病毒的筛查与检测.     

Aberrant expression of VEGF-C is related to grade of cervical intraepithelial neoplasia (CIN) and high risk HPV, but does not predict virus clearance after treatment of CIN or prognosis of cervical cancer

AIMS: Increased angiogenesis leads to invasion in cervical cancer. Vascular endothelial growth factors (VEGFs) are involved in angiogenesis, but molecular links to the most important aetiological agent, human papillomavirus (HPV), need clarifying. MATERIAL/METHODS: Archival samples-150 squamous cell carcinomas (SCCs) and 152 cervical intraepithelial neoplasia (CIN) lesions-were examined immunohistochemically for anti-VEGF-C antibody and for HPV by polymerase chain reaction (PCR). Follow up data were available for all SCC cases, and 67 CIN lesions were monitored with serial PCR to assess HPV clearance/persistence after treatment. RESULTS: High risk (HR) HPV types were closely associated with CIN (odds ratio, 19.12; 95% confidence interval, 2.31 to 157.81) and SCC (27.25; 3.28 to 226.09). There was a linear increase of VEGF-C expression-weak in CIN1 and intense in CIN3 and SCC (20.49; 8.69 to 48.26). VEGF-C upregulation was a sensitive (93.5%; 95% CI, 90.1% to 96.9%) marker of HR-HPV type (4.70; 2.17 to 10.21), but lost its significance in multivariate regression-p16(INK4a) and survivin were equally strong independent predictors of HR-HPV. Aberrant expression of VEGF-C did not predict clearance/persistence of HR-HPV after treatment of CIN. In cervical cancer, VEGF-C had no prognostic value in univariate or multivariate survival analysis. After adjustment for HR-HPV, FIGO stage, age, and tumour grade, only FIGO stage and age remained independent prognostic predictors. CONCLUSIONS: VEGF-C is an early marker of cervical carcinogenesis, with linearly increasing expression starting from low grade CIN. VEGF-C expression is closely related to HR-HPV in cervical lesions, probably because of its p53 independent upregulation by the E6 oncoprotein of HR-HPV.