狼毒浸出液抗肝癌作用的实验研究

1目的　探讨狼毒浸出液 (YF- 1)对腹水型肝癌 (H2 2 )及淋巴道转移型肝癌 (H2 2 / F2 3 )的抗癌作用及作用机制。 2方法　用 H2 2 ,H2 2 / F2 3 细胞攻击 CFW小鼠 ,并进行 YF- 1治疗 ,观察生存时间、瘤体质量及淋巴结转移程度 ;用狼毒浸出液与 H2 2 ,H2 2 / F2 3 细胞混和培养 ,观察抑瘤率 ;用混合细胞培养液接种至小鼠腹腔 ,观察动物存活情况。 3结果　用 H2 2 ,H2 2 / F2 3攻击后 ,治疗组小鼠平均生存时间长于对照组 (t=3.16 ,3.0 4,P<0 .0 5 )。YF- 1的抑瘤率分别为 6 7.9% ,6 4.6 % .治疗组荷瘤鼠的淋巴结转移率明显低于对照组 (t=3.182 ,P<0 .0 5 )。中和实验中 ,治疗组和对照组的平均存活时间分别为 38.0 ,14.8d,两组比较差异有显著性 (t=3.16 3,P<0 .0 5 )。 4结论　狼毒浸出液对肝癌生长和淋巴结转移有明显的抑制作用     

亲溶酶体剂——十二烷基吗啡啉对白血病骨髓净化的实验研究

亲溶酶体剂——十二烷基吗啡啉(N-dodecyl morpholine,NDM)体外对小鼠白血病L_(7811)细胞系细胞有明显的杀灭作用,其100％杀死10~6个/mlL_(7811)细胞浓度为15mg/ml。用此浓度NDM处理含5％L_(7811)细胞的615小鼠骨髓细胞后回输给615小鼠,对照组存活天数为16.3±1.78d,溶剂组为15.8士2.32d,而NDM处理组可长期存活(>40d)。615小鼠在接受致死剂量(800rad)照射后输注经NDM处理的含5％L_(7811)细胞的615小鼠骨髓细胞,小鼠不死于白血病而死于放射病,当输注细胞数加倍时,小鼠存活期从8.75土1.13d延长到10.68±0.99d(P<0.01)。     

GITR抗体对L615白血病抑制作用的实验研究

目的 探讨糖皮质激素诱发型TNF受体(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor,GITR)的抗体对抗小鼠L615白血病(T淋巴细胞来源白血病)的效果和作用机制.方法 以L615小鼠建立白血病模型,分3组实验组以及阴性对照组,观察实验小鼠生存状态及时间、外周血白细胞计数及分类、外周血和骨髓中白血病细胞形态变化、肝脾指数、肝脾组织病理改变.结果 GITR抗体可以延长L615白血病小鼠的生存时间,可引起骨髓中白血病细胞发生凋亡、坏死、肝脾指数降低、肝脾组织被白血病细胞浸润,提示GITR抗体能够降低和缓解白血病细胞所致的小鼠外周血白细胞的升高和浸润,以及肝脾的肿大.结论 通过免疫调节机制GITR抗体能够有效地抑制L615白血病细胞的增殖,进而抑制白血病的发展.     

痘苗病毒增强人类白血病细胞免疫原性的实验研究

作者应用痘苗病毒处理人白血病细胞制备瘤苗,免疫正常615系小鼠。结果发现,实验组小鼠的NK细胞活性、白细胞介素-2(IL-2)诱生水平显著提高,T辅助细胞数及T_(11)/Ts比值显著提高(与对照组相比,P<0.01或P<0.05),未经痘苗病毒处理的人白血病细胞则无此作用。     

克拉霉素治疗小鼠Lewis肺癌的实验研究

目的　研究克拉霉素对小鼠 L ewis肺癌的治疗效果和作用机制 ,为临床应用提供实验依据 .方法　 C5 7BL/ 6小鼠右肋处皮下接种 L ewis肺癌 ,6 h后随机分为 2组 ,每组 15只 ,分别接受克拉霉素 5 0 mg· kg- 1· d- 1 (实验组 )或等体积 5 %葡萄糖 (对照组 )腹腔内注射 ,每日 1次 ,连用 2 1d.观察比较实验组与对照组小鼠存活时间、移植瘤体积、肿瘤组织内微血管密度和肺脏转移瘤数目 .结果　实验组小鼠平均存活时间为 (2 7.0± 2 .6 ) d,肿瘤组织内微血管密度为 18.7± 11.4,肺脏表面的转移瘤数目为12 .0± 2 .9,对照组小鼠的上述参数分别为 (19.1± 2 .0 ) d,2 4.5± 13.7和 18.6± 5 .4,两组差异非常显著 (P<0 .0 5 ) .结论　克拉霉素具有抗肿瘤血管生成和抗肿瘤转移的作用 ,在肿瘤的综合治疗中具有一定的应用价值 .     

FTY720与ICAM-1单抗对小鼠-大鼠异种心脏移植抗排斥的作用

目的:研究FTY720与ICAM-1单抗(mAb)对小鼠-大鼠异种心脏移植的抗排斥作用.方法:采用小鼠-大鼠腹部心脏移植,观察移植心存活时间、病理检查、CD4和CD8细胞的浸润程度及检测血中IL-2,IFN-γ,IL-4以及IgM抗体水平.结果:对照组移植心平均存活时间为(2.75±0.43)d.单用ICAM-1 mAb组移植心存活时间无明显延长,单用FTY720大剂量组移植心平均存活(4.25±0.71)d(P＜0.01):FTY720与ICAM-1 mAb大剂量联合用药组移植心存活时间平均(10.25±2.1 2)d(P＜0.01).联合用药组的病理反应、T细胞浸润及IL-2,IFN-γ,IgM水平明显减轻或降低;IgM水平与移植物存活时间呈负相关(R=-0.754,P＜0.01).结论:FTY720与ICAM-1 mAb单一用药对异种移植的抗排斥作用不明显,联合用药可有效延长异种心脏移植的存活时间并能抑制异种抗体的产生.     

GITR抗体对L615白血病抑制作用的实验研究

目的探讨糖皮质激素诱导型TNF受体（glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor．GITR）抗体对L615白血病（T淋巴细胞来源白血病）的抑制效应及其作用机制。方法以L615小鼠建立白血病模型．分3个实验组和1个阴性对照组,观察实验小鼠生存状态及时间,检测外周血白细胞计数及分类,外周血和骨髓中白血病细胞形态变化．肝脾指数．肝脾组织病理改变。结果GITR抗体使用组能延长L615白血病小鼠的生存时间．可引起骨髓中白血病细胞发生凋亡、坏死．肝脾指数降低。结论通过免疫调节机制GITR抗体能够有效地抑制L615白血病细胞的增殖．进而抑制白血病的发展。     

负载肿瘤抗原的DC疫苗对小鼠体内膀胱肿瘤的抑制作用

目的 研究负载肿瘤抗原的DC疫苗对T739小鼠体内膀胱肿瘤的免疫学效应.方法 建立BTT 739荷瘤小鼠动物模型,随机分为实验组和实验对照组和空白对照组,于肿瘤细胞接种后第7、14天给予相应DC疫苗治疗,每组分2亚组,分别用于测量瘤质量、体积及用于观察荷瘤小鼠存活情况.结果 负载肿瘤抗原的DC疫苗实验组荷瘤鼠肿瘤平均体积和平均瘤质量均显著低于对照组(P＜0.01),生存期长于对照组,并且有2只小鼠无瘤长期存活.经DC疫苗实验组治愈的2只小鼠30 d后无肿瘤生长,再次皮下接种BTT739细胞观察30 d仍无肿瘤发生.结沦负载肿瘤抗原的DC疫苗对膀胱肿瘤荷瘤小鼠具有抑瘤效应和生存期延长作用.     

转输小鼠脾细胞对小鼠白血病(L615)的防治作用

本文报告了转输正常小鼠脾细胞对615系小鼠白血病(L615)攻击的保护效应。如果在攻击前7天转输,五种具有不同遗传学背景的正常小鼠脾细胞都有明显的保护效应;但若在攻击前28天转输,其保护效应则因供者品系而异;随着E/T(效应细胞数/肿瘤细胞数)比值降低其保护效应也有降低的趋势。如果将相同数量的正常小鼠脾细胞装入扩散盒,然后将其植入小鼠腹腔,则不能诱导保护效应。转输正常肾细胞或注射正常脾细胞匀浆对L615白血病细胞攻击也无任何保护效应。实验组大多数存活小鼠都能耐受剂量递增(10~4—10~6)的L615白血病细胞的反复攻击。在继承性化学免疫治疗实验中这些存活小鼠的免疫脾细胞能延长晚期L615病鼠的中位存活时间,甚至能使50%(5/10)的小鼠获得治愈。     

小鼠白血病 L_(7712)某些生物学特性的再观察

L_(7712)是国内近年来新建立的一株可移植性腹水型小鼠白血病模型,为了考察该瘤株的特点和稳定性,以便更好地推广应用这一新瘤株,我们对L_(7712)的某些生物学特性进行了再观察。结果表明:L_(7712)是615近交系小鼠的一株同基因型瘤株。在615小鼠及其杂交第一代小鼠中均能100%接种成功(后者的平均存活时间略长,P<0.01),无自发缓解,生长稳定,不受小鼠年令和性别的影响;该瘤株接种简便,可以用腹水原液作1:10—1:100的稀释后进行常规传代;通过皮下,肌肉内(腹腔)、静脉(眶窦)等不同途径接种均能100%发病,甚至口服也能使部铲(40—90%)动物发病;随着接种细胞数的减少,平均存活时间相应延长,在10~6—10~3瘤细胞的剂量范围内,两者基本上成一直线关系(r 在0.80—0.93之内,P<0.01)。     

异基因性NK细胞在小鼠体内抗白血病作用

目的：观察异基因性NK细胞在小鼠体内抗白血病作用。方法：建立荷EL9611（H-2d）红白血病细胞的CB6F₁H-2b/d小鼠动物模型,30只红白血病小鼠随机分为5组,每组6只。实验1组：每只小鼠输注NK细胞2×10⁵;实验2组：每只小鼠输注NK细胞5×10⁵;对照1组：未治疗组;对照2组：阿糖胞苷治疗组;对照3组：同基因NK细胞治疗组。以血象、体重、生存时间和病理组织学变化为观察指标并作组间比较。结果:①生存时间两实验组之间比较差异无显著性（P>0.05）。对照2组、实验组生存时间高于对照1组（P<0.01）;对照2组高于实验组（P<0.01）;实验组高于对照3组（P<0.01）。②注入EL9611后第10天,原始细胞占有核细胞的百分比两个实验组比较差异无显著性（P>0.05）;对照2组、实验1、2组低于对照1组（P<0.01）;对照2组低于实验组（P<0.01）;实验组低于对照3组（P<0.01）。③小鼠发病时脾脏明显肿大,肿大脾脏可达正常5～7倍,HE染色后,镜下可见脾脏正常组织结构破坏,有弥漫白血病细胞侵润。 结论：在荷EL9611（H-2d）红白血病CB6F₁H-2b/d动物模型上证实来源于H-2b的NK细胞能延长荷EL9611（H-2d）红白血病细胞CB6F₁ H-2b/d小鼠的生存时间。     

WYE-354调控小鼠同种异体皮肤移植抗排斥反应中的mTOR信号传导通路

目的探讨mTOR激酶ATP竞争抑制剂WYE-354对小鼠同种异体皮肤移植抗排斥反应的作用及机制。方法以C57BL/6为受者,BALB/c为供者建立同种异体皮肤移植模型,C57BL/6小鼠行同种同体皮肤移植为自体移植组。移植-2d给药,共21d,阳性对照组为同种异体皮肤移植,雷帕霉素组口服给药0.2ml、剂量1mg/(kg.d),WYE-354药物组腹腔注射0.2ml:低剂量1mg/(kg.d)、中剂量1.5mg/(kg.d)、高剂量50mg/(kg.d)。术后3、7、11、21d时,应用免疫印记法留样检测每组脾细胞4E-BP1磷酸化水平,11d行皮肤移植物组织病理染色。结果阳性对照组皮肤移植物存活时间明显少于雷帕霉素组、WYE-354低、中、高剂量组,差异有统计学意义(P<0.01);雷帕霉素组皮肤移植物存活时间明显少于WYE-354中、高剂量组,差异有统计学意义(P<0.01)。雷帕霉素组及WYE-354低剂量组皮肤移植物局部淋巴细胞浸润较阳性对照组减少,WYE-354中、高剂量组皮肤移植物局部淋巴细胞浸润较阳性对照组、雷帕霉素组、WYE-354低剂量组均减少。雷帕霉素组、WYE-354低、中、高剂量组均可下调脾细胞中4E-BP1蛋白的磷酸化水平,以WYE-354中、高剂量组作用最为明显。结论 WYE-354可以抑制mTOR信号转导通路相关蛋白磷酸化水平的调控,并阻滞其细胞周期,减少淋巴细胞向皮肤移植物浸润、显著延长小鼠皮肤移植物存活时间。     

缝裂层孔菌对荷瘤小鼠放、化疗的减毒增效作用

目的：通过缝裂层孔菌（PL）与放、化疗联合应用于荷瘤小鼠,探讨PL对放、化疗的减毒增效作用。方法：小鼠右前肢腋下荷瘤细胞胃癌（MFC细胞株）,随机分13组,即空白对照组,及单纯CTX高、中和低3个剂量组（20、10和5 mg•kg^-1）,以及PL高、中和低3个剂量（2.0、1.0和0.5 g•kg^-1）分别与CTX 3个剂量联合给药组。空白对照组每日灌胃给予蒸馏水0.01 mL•g^-1;CTX为隔日腹腔注射给药;PL为每日灌胃给药,连续给药10 d。停药日处死小鼠,应用重量法观察各组荷瘤（胃癌）小鼠体重和瘤重的变化。小鼠右后肢胫骨外侧皮下荷瘤细胞肝癌（HepA细胞株）,随机分5组,即空白对照组、单纯X线放疗组、PL 3个剂量分别与放疗联合治疗组。空白对照组每日灌胃给予蒸馏水0.01 mL•g^-1;PL为每日灌胃给药,连续14 d;X线照射于PL给药第5天开始,每次照射0.5 Gy,每日1次,共5次。PL停药后次日处死小鼠,应用重量法观察各组荷瘤（肝癌）小鼠体重和瘤重的变化。结果：单纯CTX 3个剂量和分别与PL 3个剂量联合给药各组荷瘤（胃癌）小鼠瘤重较空白对照组均明显降低（P<0.01）; CTX和PL联合给药各组荷瘤（胃癌）小鼠瘤重较单纯同剂量CTX组均明显降低（P<0.05或P<0.01)。与空白对照组比较,单纯应用CTX 3个剂量组荷瘤（胃癌）小鼠体重均明显降低（P<0.05或P<0.01),CTX和PL联合给药各组荷瘤（胃癌）小鼠体重均无明显变化。单纯X线放疗和分别与PL高、中和低3个剂量联合应用各组荷瘤（肝癌）小鼠瘤重较空白对照组均明显降低（P<0.01）,不同剂量PL和X线联合应用各组荷瘤（肝癌）小鼠瘤重较单纯X线放疗组均显著降低（P<0.05或P<0.01)。与空白对照组比较,单纯X线放疗组荷瘤（肝癌）小鼠体重明显降低（P<0.05）,不同剂量PL和X线联合应用各组荷瘤（肝癌）小鼠体重均无明显变化。结论：PL与放疗（CTX）、化疗（X线）联合应用,在治疗荷瘤（胃癌、肝癌）小鼠中有协同作用,并且PL对放、化疗有减毒增效作用。     

Bcl-2参与SCID小鼠体内齐墩果酸诱导HL-60细胞凋亡的调控作用

目的:观察齐墩果酸(OA)对白细胞移植模型小鼠脾脏浸润白血病细胞凋亡数量和Bcl-2蛋白表达的影响,探讨OA对白血病模型鼠的治疗作用机制.方法:取浓度为2×107mL-1体外培养的人早幼粒系白血病HL-60细胞0.5 mL,腹腔注射重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠,构建SCID小鼠的HL-60细胞移植瘤模型;模型成功后...     

白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶活性与其毒力的关系

目的： 探讨临床白色念珠菌感染者不同标本中分离的白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶活性与其毒力的关系。方法： 分别采用牛奶平板和卵黄培养基法检测白色念珠菌感染者不同标本（痰、血液、鹅口疮、伤口、阴道分泌物）中分离的190株白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶的活力，分别将产酶株的菌丝相和孢子相菌悬液（5×10⁶ CFU•mL^-1）注射小鼠尾静脉，1个月内观察小鼠死亡率及平均存活时间，以平均存活时间评价菌株毒力。结果：190株白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶阳性检出率分别为83.68%和85.26%。动物实验结果表明，菌丝相白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶的活力均显著高于孢子相(P<0.01，P＜0.05)；注射菌丝相白色念珠菌的小鼠死亡率高于注射孢子相的小鼠(P<0.05)，且平均存活期短于注射孢子相的小鼠(P<0.01)。结论：分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶是白色念珠菌重要毒力因子，酶活力可直接地反映其毒力和致病性。     

对社区消化性溃疡患者实施健康管理跟踪的效果研究

目的:探讨健康管理跟踪对社区消化性溃疡患者预防复发的效果。方法:60例治愈出院的消化性溃疡患者按抛硬币分组法分为研究组(30例)和对照组(30例)。对照组实施自我管理模式,研究组则实施健康管理跟踪干预。观察时间为6个月。干预前后采用遵医行为、健康问卷(SF-36)以及复发率等指标评价两组效果。结果:干预后,研究组遵医行为明显好于对照组,SF-36评分明显高于对照组,复发率明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:健康管理跟踪能够提高社区消化性溃疡患者遵医行为,降低疾病复发,提高生活质量。     

重组鼠白细胞介素18在肝癌小鼠体内的抗肿瘤作用

目的：探讨不同剂量和输注方式的重组鼠白细胞介素18（rmIL-18）对肝癌小鼠生存时间和肿瘤生长的影响,阐明rmIL-18在体内抗肿瘤的合理应用方式。方法：60只Babl/C小鼠皮下接种小鼠肝癌H22细胞（1×10⁶个）,随机分为5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组、0.5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组、0.5μg rmIL-18肿瘤内注射治疗组、细胞毒性T淋巴细胞（CTL）腹腔内注射治疗组、CTL肿瘤内注射治疗组和生理盐水腹腔注射对照组,每组10只。从接种肿瘤细胞的第10天起,各rmIL-18组小鼠每隔1d进行对应剂量和方式的注射治疗,CTL组小鼠分别腹腔和肿瘤内注射肿瘤特异性CTL（1×10⁶/只）,生理盐水腹腔注射对照组小鼠腹腔内注射注射等体积（100μL）生理盐水,共计10次。每周测量小鼠肿瘤直径,并记录生存时间。结果：与0.5μg、5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组和生理盐水腹腔注射对照组比较,0.5μg rmIL-18肿瘤内注射治疗组小鼠肿瘤生长速度减慢（P<0.01）,小鼠生存时间延长（P<0.01）;与0.5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组比较,CTL腹腔内注射治疗组小鼠肿瘤生长速度降低（P<0.01）,小鼠存活率升高（P<0.01）;与0.5μg rmIL-18肿瘤内注射治疗组比较,CTL肿瘤内注射治疗组小鼠肿瘤生长速度降低（P <0.01）,小鼠存活率升高（P <0.01）。结论：rmIL-18抗肿瘤作用的最好途径为瘤内注射,并存在剂量依赖性。     

IL-15改善铜绿假单胞杆菌脓毒症小鼠的免疫抑制

目的探讨IL-15是否能够有效纠正脓毒症小鼠的免疫抑制,改善脓毒症小鼠的生存率。方法将铜绿假单胞杆菌经尾静脉注射至C57雄性小鼠构建脓毒症小鼠模型,模型小鼠分为3组:对照组和0.5、1μg IL-15组,分别腹腔注射生理盐水,0.5、1μg IL-15。观察脓毒症小鼠的生存时间,计算脏器细菌定植数量,检测小鼠T细胞和NK细胞的含量,并测定小鼠外周血细胞因子IFN-γ的表达水平。结果 0.5、1μg IL-15组小鼠生存时间为(3.8±3.9)和(5.0±4.9)d,明显长于对照组[(1.9±0.9)d]。腹腔注射IL-15后,小鼠脾脏细菌的定植量[0.5μg组:(15.4±2.9)×103CFU/μg,1μg组:(9.7±1.5)×103CFU/μg]显著低于对照组[(29.8±3.2)×103CFU/μg,P<0.01]。腹腔注射1μg IL-15有效的增加了小鼠T细胞[(69.84±13.28)%vs(58.63±6.25)%,P<0.01]、NK细胞的数量[(20.96±5.78)%vs(9.83±1.36)%,P<0.01]和IFN-γ的表达水平[(526.1±23.8)pg/ml vs(289.4±16.2)pg/ml,P<0.01]。结论 IL-15能够有效的纠正脓毒症小鼠的免疫抑制,充分活化天然免疫系统和获得性免疫系统,从而改善脓毒症小鼠的生存状况。     

端粒酶反义寡核苷酸基因对裸鼠体内膀胱癌生长的抑制作用

目的:探讨端粒酶反义寡核苷酸(ASON)基因对裸鼠体内膀胱癌生长的抑制作用,阐明反义端粒酶基因对膀胱癌的治疗作用。方法:膀胱癌EJ细胞株分别采用换液培养和用硫代磷酸修饰的反义寡核苷酸(PS-ASON)处理,将换液培养及PS-ASON处理的EJ细胞分别接种BALB/c裸鼠(对照组24只和PS-ASON处理组12只),观察致瘤率;肿瘤形成至20mm后将对照组裸鼠随机分为3组(n=8),隔日注射生理盐水(空白对照组)、PS-ASON(PS-ASON注射组)及化疗药物表阿霉素(表阿霉素组)。观察各组裸鼠致瘤时间、裸鼠体质量及肿瘤体积的变化,计算各组裸鼠生存率;光镜下观察肿瘤组织形态学变化。结果:PS-ASON处理组裸鼠致瘤率低于对照组(P<0.01),致瘤时间长于对照组(P<0.01),裸鼠平均体质量高于对照组(P<0.01)。按照不同分组,裸鼠注射不同药物治疗12d后,PS-ASON注射组和表阿霉素组裸鼠肿瘤体积均小于空白对照组(P<0.01);PS-ASON注射组与表阿霉素组裸鼠肿瘤体积比较差异无统计学意义(P>0.05)。空白对照组裸鼠体质量持续下降;接种16d后,PS-ASON注射组裸鼠体质量明显高于空白对照组(P<0.01);接种肿瘤8d后,表阿霉素组裸鼠体质量低于PS-ASON注射组(P<0.01);空白对照组裸鼠体质量与表阿霉素组比较差异无统计学意义(P>0.05)。光镜下观察,PS-ASON注射组和表阿霉素组肿瘤细胞出现大量凋亡和坏死。PS-ASON注射组裸鼠生存率明显高于空白对照组(P<0.001)和表阿霉素组(P<0.01)。结论:反义端粒酶基因对体内膀胱癌形成及生长有明显的抑制作用,抑制程度与化疗药表阿霉素相当,可以用于膀胱癌治疗的进一步研究。