抗-HCV免疫测定室内质控图连续性的应用

目的探讨不同ELISA检测试剂室内质控图连续性使用的方法。方法不同批试剂同时测定系列质控血清，得系列质控血清的S／CO值，根据系列质控血清的浓度及其S／CO值之间的关系，分别得不同批号试剂的直线回归方程（y=a＋bX），从而得不同批号试剂之间的换算关系，即可将新批号试剂测定同一批号、同一浓度质控血清的S／CO值换算回原批号试刺所测的S／CO值，可在原质控图上连续描点。结果针对同一质控血清不同批号试剂的检测结果，应用统计学的直线回归与相关分析，可使室内质控图连续性使用。结论室内质控图的连续性使用，可解决由于试剂的更换而更换质控图的问题，避免“即刻法”质控本身固有的缺陷，为室内质控工作带来方便。     

抗肺炎支原体IgG定性测定的室内质控物浓度的选择和批间连续质控延续方法的建立

目的建立抗肺炎支原体IgG定性测定的室内质控物浓度的选择方法和批间连续质控的延续方法。方法选择系列质控血清中S/CO值减去精密度测定中得到的3倍批间CV与该S/CO值的乘积仍大于1.0者用来监测试验重复性,选择S/CO处于1.5左右的质控血清以判断试剂盒测定下限的有效性。使用新旧两个批号试剂盒同时检测系列质控血清得到线性回归的直线方程,计算得到换算因子,用以将新批号试剂测定值换算至原批号试剂测定值,继续使用原质控图。结果通过实验能够选择合适浓度的质控物用以判断检测重复性和试剂盒测定下限的有效性。能够得到不同批号间质控测定的换算因子用以有效延续质控图。结论通过上述方法能够有效选择抗肺炎支原体IgG定性测定的室内质控物浓度,并建立批间连续质控的延续方法。     

核酸转录介导的扩增中室内质控方法的探讨

目的 比较箱体图法和Levey-Jennings质控图法在转录介导的扩增中对室内质控的监测情况.方法 每天使用同一台机器检测同一批号的HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA室内质控品的待测物信号/临界值(S/CO值).使用SPSS17.0软件绘制箱体图并判断离群值,并用K-S检验判断室内质控品S/CO值是否服从正态分布;使用Excel软件连续测定前20次室内质控品的S/CO值为参数绘制Levey-Jennings质控图.结果 共收集86组HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA室内质控品S/CO值,箱体图法分别出现2次、0次、1次离群值;Levey-Jennings质控图法分别出现4次、4次、6次失控值;室内质控品S/CO值经过K-S检验服从正态分布(P>0.05),适用于Levey-Jennings质控图的绘制.结论 应用外部质控品S/CO值绘制的Levey-Jen-nings质控图法相对于箱体图法,更有助于检验核酸检测体系的稳定性.     

ELISA检测乙型肝炎HBsAg室内质控血清的试制和使用

为了提高HBsAg的检测质量,鉴别和控制诊断试剂的质量和操作误差,我们试制了乙型肝炎HBsAg室内质控血清.采用不同品牌,同一批号和不同批号的诊断试剂盒,随标本同时检测试制的HBsAg室内质控品.将质控品置不同的温度下保存,观察其稳定性,精密性. 实验证明:试制的HBsAg室内质控品放-20℃保存,第一次打开使用后放4℃保存,直至用完 ,以这种方式保存的HBsAg质控品在三个月内其稳定性良好,可适应于上海地区开展HBsAg室内质控使用.用质量较好的进口HBsAg诊断试剂,全自动机器操作,重复性较好,CV值为5% 左右,用国产HBsAg诊断试剂,手工操作,CV值为25%左右,为医院检验科开展HBsAg室内质控提供了较好的质控品和参照方法.     

ELISA检测室内质控方法的建立

ELISA室内质控方法一般沿用Levery-Jen-nings质控图(以下简称L-J图)进行;利用WeSt-gard规则判定失控。但由于ELISA试剂盒效期短,更换频繁,同一批号试剂盒和质控血清长期使用难度较大;同时在建立L-J框架图的检测过程中失控的情况不易被发现。针对这种情况,笔建立了L-J质控图与“即刻法”质控相结合的一套室内质控方法,收到良好效果,以HBsAg检测为例介绍如下。     

酶联免疫实验质控物的选择

目的 探讨通过酶联免疫(下称酶免)检测实验质控物浓度的选择,监测实验的精确性和重复性,及时发现随机误差,减少系统误差对实验的影响,确保酶免检测实验的有效性和检测结果的精确性及重复性.方法 选用人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)试剂对高、中、低值不同浓度的质控血清进行检测,结果用统计学方法处理.结果 不同浓度的质控血清对实验室室内质控的检测结果差异有统计学意义,选择使用S/CO比值1～3的临界值质控血清就可以将实验室的酶免实验结果的变异系数控制在15%的范围内.结论 选择合适浓度的质控血清进行实验稳定性和有效性的监控,才能确保实验室酶免检测实验的有效性和检测结果的精确性及重复性.     

自制人类免疫缺陷病毒抗体等质控血清及室内质控方法建立研究

目的用人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体阴性血清梯度稀释HIV抗体酶联免疫试剂盒中阳性对照,制备室内质控血清。建立艾滋病酶联免疫检测的室内质控方法。进行方法可靠性和质控血清稳定性的评价,同时比较两个厂家生产的HIV抗体试剂盒进行自制质控血清室内质控结果以及自制丙型肝炎抗体、乙型肝炎表面抗原血清的室内质控结果的评价。方法将自制的HIV质控品与卫生部HIV质控品按照HIV抗体检测的SOP文件用HIV抗体试剂随患者进行检测,每天测定吸光度,计算S/CO値。连续检测20次计算S/CO值和s,以x±2s为控制限,以x±3s为失控限绘制质量控制框架图。每天随患者标本各加入1份自制质控品和1份卫生部购质控品进行质控将其各自的S/CO描在质控图上,应用多规则质量控制原则分析以发现当天测定批的误差以及误差原因。控制每批次检测的重复性,观察试剂盒间的差异进行两种质控血清质控结果的比对研究。结果自制HIV抗体质控血清方法科学可靠,减少了基质效应,能确保结果的准确性和可靠性。结论稀释阳性对照制备质控品,建立酶联免疫室内质控方法也适用于乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎抗体等其他免疫项目的酶联免疫室内质控。不同厂家试剂用自制质控品进行质控结果无差异。     

乙肝表面抗原室内弱阳性质控物的制备及其应用评价

目的制备长期使用且稳定性好的HBsAg室内弱阳性质控血清。方法以小牛血清磷酸盐缓冲液按不同稀释倍数1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32等比例梯度稀释HBsAg阳性血清;以2种厂家提供不同批号的检测试剂,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法对HBsAg阳性质控血清进行连续6个月检测,以此对HBsAg阳性质控血清稳定性进行评价。结果以吸光度值/临界值(S/CO)1.0~3.0为参考标准,确定该实验室HBsAg阳性质控血清的最佳稀释度为1∶8[其S/CO值为2.42,变异系数(CV)为4.72];且该质控血清在不同试剂使用稳定性较好(其S/CO范围为2.41~2.82,CV范围为4.24%~8.68%);HBsAg阳性质控血清连续6个月检测结果CV范围为8.71%~9.86%(CV10%)。结论自制HBsAg质控血清具有很好的稳定性和精密度,可作为临床常规HBsAg检测中的室内质控血清。     

探讨改变酶联免疫吸附试验条件对HBsAg室内质控的影响

目的探讨不同温度平衡和作用时间对室内质控品的影响。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)试剂盒,在设定的温度和不同作用时间下,观察室内质控品吸光度(OD)值。结果与常规实验条件下相比,部分实验条件改变时其吸光度值差异有统计学意义(P0.05)。结论室内质控品在复温时间短、显色时间过长或使用前未充分混匀,均易造成失控;而室内质控品复温时间适度延长对S/CO值影响不大。     

酶联免疫吸附试验中HBsAg室内质控参考品的制备和应用

目的建立室内质控参考品以鉴别诊断试剂的质量和控制操作误差,提高乙型肝炎病毒表面抗原的检测准确度.方法以国家标准品为标准制备灵敏度系列参考品、特异性参考品及精密性参考品.检测其稳定性,并进行同厂家、不同批号试剂的比较及不同厂家、三批试剂的比较.结果制备的室内质控参考品在-20℃与4℃保存3～4周检测结果无统计学差异.采用同一厂家、不同批号的HBsAg诊断试剂检测室内质控参考品,结果无统计学差异.采用不同厂家、同一批号的HBsAg诊断试剂检测结果有统计学差异.结论我们建立的室内质控参考品适宜作HBsAg室内质控,提醒我们在更换试剂厂家时应特别注意室内质控参考品的变化.     

HBsAg定性测定室内质控物浓度的选择

目的探讨定性ELISA测定的室内质控血清浓度的选择方法。方法根据系列HBsAg质控血清的浓度与其测定S／CO值的关系,得到线性回归直线方程Y=a＋bX及其相关系数r。选择计算得到的S／CO值减去3倍批间CV与该S／CO值的乘积仍大于1的质控物作为判断实验室测定重复性室内质控用。结果质控血清0～2ng／ml与其检测的S／CO值之间呈高度相关。1ng／ml质控血清可作为测定重复性使用,0．5ng／ml质控血清作为监测试剂下限使用。结论定性ELISA试剂本身的阴性、阳性对照只能检测其实验的有效性,无法监测灵敏性及测定下限的变化,必须使用弱阳性质控血清进行室内质控,并依据统计学直线回归与相关分析,科学地选用质控物浓度,保证实验的准确性。     

HBsAg室内质控物的制备及其应用

目的 以制备HBsAg酶联免疫吸附试验(ELISA)室内质控物,对其应用效果进行评价.方法 以复检HBsAg阳性的报废全血作为原料,制备0.5、4、8 U/mL室内质控血清,使用上海科华和意大利DiaSorin公司HBsAg诊断试剂盒对其进行检测,并比较其结果 .结果 科华和DiaSorin HBsAg诊断试剂检测室内质控血清比较,t值分别为0.058、0.049,差异无统计学意义(P>0.05),使用两种不同的试剂连续检测不同浓度的质控物20次,检测的CV范围分别为6.75%～11.65%、4.82%～10.30%;使用两种不同的试剂检测不同浓度的质控物30 d,检测的CV范围分别为7.37%～12.50%、4.84%～13.92%.结论 ELISA法进行HBsAg检测的质控物制备简单,稳定性良好,质控图操作方便,适合临床实验室应用和推广.     

HBsAg冻干质控品复溶剂的探讨

为了提高HBsAg的检测质量，建立乙肝表面抗原（HB-sAg）定量检测的室内质控。用牛清蛋白代替蒸溜水作为溶剂复溶乙型肝炎表面抗原冻干室内质控品，采用同一批号的诊断试剂盒，随标本检测用牛清蛋白和蒸溜水复溶HBsAg冻干室内质控品，同时将质控品放置于不同的温度下保存，观察其稳定性，精密度。以牛清蛋白复溶保存的HBsAg质控品，     

HBsAg冻干质控品复溶剂的探讨

为了提高HBsAg的检测质量，建立乙肝表面抗原（HB-sAg）定量检测的室内质控。用牛清蛋白代替蒸溜水作为溶剂复溶乙型肝炎表面抗原冻干室内质控品，采用同一批号的诊断试剂盒，随标本检测用牛清蛋白和蒸溜水复溶HBsAg冻干室内质控品，同时将质控品放置于不同的温度下保存，观察其稳定性，精密度。以牛清蛋白复溶保存的HBsAg质控品，     

以临界值进行即刻法室内质控的探讨

ELISA竞争一步法检测抗-HBc的室内质控通常是用室内质控品来进行的.由于室内质控品的浓度较高,使得检测的吸光度A值较低,求得的吸光度值/临界值(S/CO)难以绘制Levey-Jennings质控图,对临界值样本不能起有效的质控作用.此外在基层医院由于标本量较少,检测的频次较低,加之使用室内质控品也存在着一定的困难,因而许多单位事实上不能按照要求进行室内质控.使用"即刻法"进行ELISA检测的室内质控虽有较多报道,然而以何种数据进行尚不一致.本文以抗-HBc检测为例探讨了直接以临界值(cut-off,CO)进行 "即刻法" 室内质控的方法,现报道如下.     

酶联免疫吸附试验中HBsAg室内质控参考品的制备和应用

目的建立室内质控参考品以鉴别诊断试剂的质量和控制操作误差,提高乙型肝炎病毒表面抗原的检测准确度。方法以国家标准品为标准制备灵敏度系列参考品、特异性参考品及精密性参考品。检测其稳定性,并进行同厂家、不同批号试剂的比较及不同厂家、三批试剂的比较。结果制备的室内质控参考品在-20℃与4℃保存3～4周检测结果无统计学差异。采用同一厂家、不同批号的HBsAg诊断试剂检测室内质控参考品,结果无统计学差异。采用不同厂家、同一批号的HBsAg诊断试剂检测结果有统计学差异。结论我们建立的室内质控参考品适宜作HBsAg室内质控,提醒我们在更换试剂厂家时应特别注意室内质控参考品的变化。     

ELISA法检测HBsAg室内质控方法及结果分析

目的 探讨ELISA法测定HBsAg的室内质控方法 .方法 选择一个阳性(0.5mg/ml)质控品和一个阴性质控品,采用L-J的室内质控方法 和对阳性、阴性质控品进行检测,采用12S、13S质控规则和Icutoff(+)、Icutoff(-)质控规则对ELlSA法测定HbsAg进行室内质控.结果 检测0.5ng/ml质控血清20天,得20个s/co值,经统计得20个s/co值的X为1.984,SD为0.551,CV为27.8%.2月份74个阳性(0.5ng/ml)质控结果中,最大的s/co值为3.01,最小值为0.952,按12S、13S质控规则无失控和警告结果,而按Icutoff(+)有一次失控,2月份74个阴性质控品测定结果中最大值为0.653,均小于1,按Icutoff(-)质控规则本月阴性质控品无失控,即无假阳性结果 .3月份96个s/co结果 的时段均值(x)为1.746,时段标准差(SD)为0.5385,时段CV为30.8%,按12S、13S质控规则仅有一次警告,按Icutoff(+)规则也无失控.3月份96个阴性质控品测定结果 中有一次阴性质控品检测的s/co结果 大于1.按Icutoff(-)规则判断本批次为失控.结论 ELISA检测试剂盒生产厂商应标明试剂的灵敏度或检测低限,ELISA法的室内质控品应选择一个灵敏度(或检测低限)浓度处的室内质控品,采用于Icutoff(+)规则用于监控检测结果 中的假阴性;同时选择一个阴性质控品,采用Icutoff(-)用于监控检测结果 的假阳性,不能按统计学方法 来选择什么样浓度的质控品或按经验选择s/co值在2～4相当浓度的质控品,而用L-J室内质控方法 进行ELISA法检测过程的室内质控,本作者认为意义不大,但其可用于评估和监测ELISA法检验过程中的精密度.     

Shewhart—cusum质控图在酶联法检测HBsAg室内质控中的应用

目的 探讨ELISA法检测HBsAg的室内质控方法 .方法 用ELISA法检测0.5 ng/ml的HBsAg质控血清,采用Shewhart-cusum联合质控图制作质控图,结果 检测浓度为0.5 ng/ml的HBsAg质控品的s/co均值为1.879,s为0.205,告警限k为均值士1s,分剐是1.674和2.084,失控限h为均值±2.7s,分别是2.433和1.325.结论 Shewhartcusum联合质控图对于容易出现随机误差和系统误差的定性ELISA方法 较为适用,并且准确区分随机误差和系统误差有助于临床实验室采取相应的措施有针对性的进行改正.     

Levery-Jennings 室内质控图的建立

室内质控 ( IQC)是血液学实验室内部进行的最基本的质量监督、检测、评价和改进 ,是全面质量管理体系中的一个重要环节 ,目的是对质控品的各项测得数据进行统计学处理 ,从而保证实验室结果的可重复性和精密度 ,判断检验报告是否可发出。目前 ,血站采用 ELISA法检测 ,其室内质控仍沿用 Levery-Jennings质控图 (简称 L-J质控图 ) ,此法科学性强、规范、实用。现以 HBs Ag为例 ,报告如下。材料与方法1　材料1 .1　试剂 :上海科华试剂盒 ,批号 :2 0 0 2 0 5 2 6。1 .2　质控血清 :上海血液中心生产 ,低值含量 ( 2 .0± 0 .5 )ng/ ml,批号 …     

ISO 15189血细胞分析仪室内质控管理体系的建立

目的为提高实验室全血细胞分析结果的准确性和可靠性,根据ISO 15189:2012的相关规定,建立一套适宜的血细胞分析仪室内质控体系。方法使用仪器配套的高、中和低3种水平质控品对全血细胞常规分析22个项目进行检测,绘制Levey-Jennings控制图,每月或每批次对质控数据进行分析与评估。结果建立了一套适宜的室内质控管理体系,包括质量目标的设立、新质控靶值和标准差的设定和质控规则的选择等。新批号质控设定靶值时,MCV、HCT和MCHC应采用至少20个值的均值,而其余项目可以采用10个值的均值;同一项目不同水平和不同品牌以及相同品牌不同仪器之间,某些项目CV值也存在差异,因此应根据不同水平、不同仪器设立相应的质量目标以及新批号的SD值。MCV、HCT和MCHC根据质控品特点,质控图存在漂移现象,因此采用1_(3s)和2_(2s)规则,其余项目则采用1_(3s)、2_(2s)和10x规则。结论在符合ISO15189相关规定的基础上,结合本实验室的实际情况,建立了一套适宜的室内质控管理体系。