基因芯片技术与卵巢肿瘤

由人类基因组计划实施带动分子生物学进步而发展起来的基因芯片技术是一种具有划时代意义的新的基因分析方法.肿瘤是一种进行性的多基因紊乱疾病,基因芯片技术在肿瘤细胞基因表达模式及肿瘤相关基因的发掘中具有极其重要的作用,该技术可为卵巢肿瘤的研究提供强大的技术支持.     

基因芯片在妇科肿瘤中的应用进展

基因芯片是近几年才发展起来的一项新型的生物技术，具有大规模、高通量、高速度、高自动化的优点，为科研和临床提供了强有力的研究工具。目前国内基因芯片的开发、研制和应用还处于刚刚起步阶段。现就基因芯片在妇科肿瘤基因突变检测、基因表达谱的研究、肿瘤的基因分型及妇科肿瘤的早期诊断、防治和疗效预测等方面的应用进展作一简要综述。     

应用基因芯片筛查差异表达基因在卵巢癌早期诊断研究中的作用

目前已有许多研究发现卵巢癌的发生、发展与许多已知和未知的基因有关。如果能明确卵巢癌基因表达谱变化，从分子水平上查明卵巢癌的发病机制，不仅有利于揭开其病因，也为早期诊断研究提供了基础。基因芯片技术是集分子生物学、细胞遗传学、生物化学、生物信息学等多种高新技术为一体的研究手段。它是一种对基因序列及功能进行大规模、高通量的研究方法。能够并行分析大量基因，全面了解各个基因的表达变化，从而迅速获得丰富、全面的肿瘤生物学信息。应用基因芯片技术研究卵巢癌基因表达谱变化，筛查差异表达基因，为进一步扩大样本，应用其他研究方法研究这些基因在卵巢癌早期诊断中的作用提供了基础研究。本课题2006年5月至2006年9月应用4097点表达谱基因芯片对5例卵巢浆液性腺癌及5例正常卵巢组织进行基因表达分析。筛查差异表达基因，初步分析部分基因的功能，为进一步研究卵巢癌的肿瘤标志物，提高卵巢癌早期诊断率作出贡献。     

基因芯片在妇科肿瘤中的应用进展

基因芯片是近几年才发展起来的一项新型的生物技术,具有大规模、高通量、高速度、高自动化的优点,为科研和临床提供了强有力的研究工具.目前国内基因芯片的开发、研制和应用还处于刚刚起步阶段.现就基因芯片在妇科肿瘤基因突变检测、基因表达谱的研究、肿瘤的基因分型及妇科肿瘤的早期诊断、防治和疗效预测等方面的应用进展作一简要综述.     

基因芯片在卵巢癌相关基因研究中的应用

人类基因组计划已进入功能基因组时代，随着致癌基因的破译和肿瘤敏感药物的开发应用，人类对肿瘤的研究已取得了日新月异的进展。拥有大规模、高通量特点的基因芯片技术在卵巢癌的研究方面发挥着举足轻重的作用：     

基因芯片在宫颈癌基因检测中的应用进展

基因芯片为20世纪90年代以后发展起来的一种高通量筛选技术，基因芯片的诞生使得大规模、高通量的筛检不同组织中差异表达的基因成为可能。就基因芯片在宫颈癌基因表达潜绘制、流行病学研究、发生发展机制、病理分型以及治疗药物筛选等方面的应用进展作一综述。     

反义治疗在宫颈癌中的研究进展

利用基因芯片、蛋白质芯片筛选肿瘤转化和发展过程中的靶基因取得成果，反义治疗是在基因水平针对这些靶基因而设计，从而干扰致病蛋白的产生，由于其高特异性及低毒副作用，为抗癌药的发展带来新的希望。着重介绍反义治疗在宫颈癌方面的进展。     

应用功能分类基因芯片筛选卵巢癌淋巴结定向高转移细胞系中差异性表达基因

目的:在裸鼠体内建立以人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞系SKOV3具有淋巴结定向高转移亚克隆第二代SKOV3-pm2、第三代SKOV3-pm3细胞系,应用基因芯片技术比较这3种具有不同淋巴结定向转移能力的细胞亚系中基因表达谱的差异,寻找卵巢癌侵袭转移相关基因.方法:采用Trizol一步法抽提SKOV3、SKOV3-pm2、SKOV3-pm3 3种细胞总RNA;取等量RNA逆转录合成cDNA用Ampolabeling-LPR(linear polymerase reaction,线性聚合酶反应)法标记的cDNA链做探针,混合后与功能分类基因芯片[Oligo Tumor Metastasis Microarray Catalog No.OHS-028(人)]杂交,计算机分析后比较3种细胞中差异性表达基因,并应用RT-PCR技术对其中3个表达差异明显的基因进行验证.结果:共筛选出表达差异性基因60个,其中表达上调基因47个(ratio＞3),有21个基因在SKOV3-pm2、SKOV3-pin3中共同表达上调;表达下调基因13个(ratio＜0.5),有1个基因在SKOV3-pm2、SKOV3-pm3细胞中共同表达下调.结论:基因表达芯片检测与肿瘤淋巴体外转移模型相结合,为肿瘤转移研究提供了新方法、新思路.     

基因芯片在宫颈癌基因检测中的应用进展

基因芯片为20世纪90年代以后发展起来的一种高通量筛选技术,基因芯片的诞生使得大规模、高通量的筛检不同组织中差异表达的基因成为可能.就基因芯片在宫颈癌基因表达谱绘制、流行病学研究、发生发展机制、病理分型以及治疗药物筛选等方面的应用进展作一综述.     

雌孕激素受体基因及其相关基因在卵巢癌组织中的表达

目的应用基因芯片技术筛查卵巢癌雌孕激素受体基因及其相关基因表达。方法制备含有雌孕激素受体及其相关基因表达谱芯片，分别提取人正常卵巢组织及卵巢癌组织的mRNA，通过逆转录PCR方法，将^33P—dATP分别标记两种组织的cDNA纯化后与表达谱芯片进行杂交及扫描，用ImaGene3．0软件分析信号的强度和比值，筛选雌孕激素受体相关基因。对雌孕激素受体基因信号绝对值按早、晚期求均值及标准差筛选受体基因。结果筛选出4条雌孕激素受体基因、受体相关基因12条。结论通过基因芯片技术方法，初步筛出了卵巢癌雌孕激素受体基因及其相关基因。     

基因芯片在卵巢癌相关研究中的应用

基因芯片是新兴的分子生物学检测技术，可对标记的生物样品进行快速、高效检测及医学诊断。就基因芯片的技术工作原理和近年在卵巢癌新基因筛选、功能基因学研究及化疗药物筛选等相关研究方面的应用情况和进展综述。     

上皮性卵巢肿瘤maspin基因的表达

ｍａｓｐｉｎ基因是１９９４年发现的一种肿瘤抑制基因，是丝氨酸蛋白酶抑制剂的一种［１］。ｍａｓｐｉｎ基因在乳腺癌发生过程中起重要作用。本研究应用免疫组化技术，检测了正常卵巢、腺瘤、交界性肿瘤和卵巢癌等组织ｍａｓｐｉｎ蛋白表达，探讨其在上皮性卵巢肿瘤癌变...     

基因芯片在宫颈癌研究中的应用进展

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一。世界范围内每年大约有50万新发病例,在导致女性死亡的肿瘤中,宫颈癌居第二位,我国宫颈癌的发病率有逐年上升的趋势,且呈年轻化。DNA芯片为研究肿瘤发生发展中的基因开关及表达程度提供了强有力的工具,利用它可随时获取肿瘤细胞生长各期与肿瘤生长相关基因的表达模式,因此基因芯片技术已大量用于宫颈癌基因表达的研究。     

应用RNA干扰技术研究survivin基因对子宫内膜癌细胞增殖和细胞周期的调节作用

survivin基因是近年来发现的在大多数肿瘤组织中高表达的基因，具有调控细胞周期和细胞凋亡的双重作用，与肿瘤的发生密切相关，抑制其功能将有助于肿瘤的治疗。RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术是利用双链RNA在转录后水平特异性地抑制基因表达的一项技术，是研究基因功能和基因治疗的有力工具。本研究应用RNAi技术，将自行设计和构建包含有针对survivin基因的特异性小分子干扰RNA（siRNA）的重组质粒转染入子宫内膜癌细胞，以观察阻断survivin基因表达对细胞增殖和细胞周期的影响。     

不同期别子宫内膜癌组织中差异表达基因的层次聚类分析

目的探讨对不同期别子宫内膜癌组织中的差异表达基因进行层次聚类分析的意义。方法利用基因芯片技术分析32例不同期别子宫内膜癌组织中的差异表达基因,并对其基因表达谱进行层次聚类分析。结果根据国际妇产科联盟（FIGO）手术病理分期的不同对所有样本进行分组,分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期组4组,筛选出与肿瘤转移相关的差异表达基因12个。根据这12个差异表达基因对32例内膜癌进行层次聚类分析,其结果与手术病理分期的符合率为66％。结论基因芯片技术可以发现与子宫内膜癌转移相关的差异表达基因,基因表达谱层次聚类分析可以在术前帮助判断高危型子宫内膜癌。     

CD105促进卵巢癌细胞转移的机制研究

目的:探讨CD105促进卵巢癌上皮细胞转移的机制。方法:通过RNAi技术沉默CD105基因,通过基因芯片对比敲除CD105基因后卵巢癌耐药细胞株中下游靶基因表达变化,利用KEGG数据库对差异基因进行Pathway分析。结果:通过基因芯片对比发现CD105下游调控的靶基因中有意义的是转移抑制因子NDRG1、EMT标记物E-cadherin等基因表达上调,与肿瘤侵袭相关的LncRNA SNHG7显著下调。涉及信号通路有264个,其中有显著性差异(P≤0.05)的信号通路共计27条,与肿瘤代谢、转移、黏附、凋亡的信号通路有:Drug metabolism、Cell adhesion molecules(CAMs)、ECM-receptor interaction、MAPK signaling pathway等,并与TGF-β、PI3K-Akt及Jak-STAT通路相关。结论:CD105可能通过抑制NDRG1或促进SNHG7导致卵巢癌的EMT和转移。TGF-β/CD105可能与MAPK/JAK-STAT通路相互作用,导致肿瘤转移。     

反义治疗在宫颈癌中的研究进展

利用基因芯片、蛋白质芯片筛选肿瘤转化和发展过程中的靶基因取得成果,反义治疗是在基因水平针对这些靶基因而设计,从而干扰致病蛋白的产生,由于其高特异性及低毒副作用,为抗癌药的发展带来新的希望.着重介绍反义治疗在宫颈癌方面的进展.     

nm23-H2基因抑制卵巢癌细胞侵袭转移及调节网络初探

目的研究上皮性卵巢癌转移相关nm23-H2基因功能及其调控网络,为最终揭示卵巢癌侵袭转移分子机制和晚期卵巢癌基因治疗提供理论依据。方法将nm23-H2重组质粒pCDNA3/nm23-H2转染人卵巢癌细胞系SKOV3.ip1,经G418抗性筛选及RT-PCR鉴定得到稳定转染阳性克隆H2-18,设计体外黏附实验及人工基底膜侵袭实验比较转染前后细胞黏附侵袭特性的改变。应用2 747点人类肿瘤相关Oligo芯片检测转染前后细胞基因表达的改变,寻找与nm23-H2相关下游调控肿瘤相关基因,并探讨其调节网络。结果用重组质粒pCDNA3/nm23-H2转染SKOV3.ip1细胞。转染前后细胞在体外的增殖能力没有显著变化,转染后细胞的黏附与侵袭基底膜能力明显降低。经人类肿瘤相关Oligo芯片检测转染前后细胞发现55个二倍差异表达基因,在上调基因中以转录调节、信号转导、分化发育及细胞凋亡类基因为多;下调基因中以信号传导及黏附运动功能类基因为主。结论nm23-H2基因具有抑制卵巢癌侵袭转移的作用,并且这一作用的实现是通过对一系列下游肿瘤相关基因的调控来完成的。基因芯片技术结合普通分子生物学技术是后基因组时代肿瘤相关基因功能研究及探索基因调控网络的有效手段。     

人乳头瘤病毒基因芯片研究现状

人乳头瘤病毒(HPV)感染与宫颈癌的发生发展密切相关，不同型别HPV的致病性不同，因此HPV的检测及分型对宫颈癌的筛查、早期诊断、防治、判断预后等具有重要临床价值。随着基因芯片技术的日臻完善，基因芯片技术在人乳头瘤病毒检测及分型中的应用得到较大发展，通过各种不同制作方法制备的HPV基因芯片相继问世，经过临床应用验证，HPV基因芯片显示出了快速、敏感、高效、并行等优点，具有其他HPV检测方法无可比拟的优越性。HPV基因芯片有望大规模用于临床。     

PCR—SSCP分析技术及其在妇科肿瘤研究中的应用

ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析技术，是一种基因分析的新方法，其为癌基因，抑癌基因的变异，突变的检测和筛查，提供了可靠而简捷的手段，该方法在妇科肿瘤研究中有重要的应用。