血管平滑肌细胞增殖与迁移的机制研究

目的 :血管平滑肌细胞 (ＶＳＭＣｓ)增殖与迁移在动脉粥样硬化 (ＡＳ)的早期、中期或ＡＳ进展期或血管事件的发病机制中起着关键性作用。方法 :采用改良的Ｂｏｙｄｅｎ小室法检测ＶＳＭＣｓ的迁移效应 ;以ＭＴＴ法、[3Ｈ]-Ｔｄｒ掺入法、[3Ｈ]-脯氨酸标记法和ＶＳＭＣｓ计数评价ＶＳＭＣｓ的增殖效应 ;将培养的ＶＳＭＣｓ分为 5组 ;2 %胎牛血清 ( 2 %ＦＣＳ)组、ＡｎｇⅡ组 (其浓度为 1 0 - 1 0 ～ 1 0 - 6ｍｏｌ/Ｌ)、Ｌｏｓａｒｔａｎ组 (其浓度为 1 0 - 7～ 1 0 - 5ｍｏｌ/Ｌ)、ＭＣＰ - 1ｍｃＡｂ组 (终浓度为 1 0 μｇ/ｍＬ)和阳性对照…     

MCP-1 mcAb和Losartan拮抗Ang Ⅱ介导的VSMCs的增殖与迁移效应的实验研究

目的探讨单核细胞趋化蛋白－１单克隆抗体（ＭＣＰ－１－ｍｅＡｂ）或Ｌｏｓａｒｔａｎ 拮抗血管紧张素Ⅱ（ＡｕｇⅡ）介导的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）增殖与迁移效应的可能性，为防治动脉硬化提供一定的理论依据。方法采用改良的Ｂｏｙｄｅｎ小室法检测 ＶＳＭＣｓ的迁移效应；以 ＭＴＴ法、~３Ｈ－ＴａＲ掺入法、~３Ｈ－脯氨酸标记法和ＶＳＭＣｓ计数评价ＶＳＭＣｓ的增殖效应。将培养ＶＳＭＣｓ分为 ５组； ２％胎牛血清（ ２％ＦＣＳ）组、 ＡｕｇⅡ组（其浓度为 １０－１０～１０－６ｍｏｌ／Ｌ）、Ｌｏｓａｒｔａｎ组（其浓度为 １０－７～１０－５ｍｏｌ／Ｌ）、ＭＣＰ－ｌｍｃＡｂ组（终浓度为 １０μｇ／ｍｌ）和阳性对照组（含５％的酵母多糖活化血清）。结果（１） ＡｕｇⅡ具有剂量依赖性的促进 ＶＳＭＣｓ的增殖与迁移效应；（２） ＭＣＰ－１ｍｃＡｂ或 Ｌｏｓａｒ－ｔａｎ能有效地拮抗ＡｕｇⅡ介导的ＶＳＭＣｓ增殖与迁移效应。结论 ＭＣＰ－１ｍｃＡｂ或Ｌｏｓａｒｔａｎ对动脉硬化性疾病可能具有较大的应用前景。     

Ox-LDL对内皮细胞粘附分子表达及粘附功能影响的研究

目的 :大量的研究已证明高脂血症是动脉粥样硬化的重要危险因素 ,血脂异常可引起血管内皮细胞和血细胞的功能改变。近年来的研究发现 ,其中氧化低密度脂蛋白(Ｏｘ ＬＤＬ)起主要作用。故尔观测Ｏｘ ＬＤＬ对血管内皮细胞粘附分子ＩＣＡＭ 1、ＶＣＡＭ 1、Ｐ ｓｅｌｅｃｔｉｎ表达和粘附作用的影响。方法 :本研究采用人脐静脉内皮细胞 (ＨＵＶＥＣ)作研究载体 ,采用单核细胞系Ｕ937细胞观测Ｏｘ ＬＤＬ对内皮细胞 (ＥＣ)粘附功能的影响 ,采用免疫组化ＡＢＣ法和ＥＬＩＳＡ二种方法观测Ｏｘ ＬＤＬ(10 0 μｇ/ｍｌ和 2 0 0 μｇ/ｍｌ二种浓度 …     

血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 :血管平滑肌细胞 (ＶＳＭＣ)异常增殖 ,血管壁细胞外间质组成改变导致的血管重构 ,在高血压、动脉粥样硬化、血管再狭窄等许多心血管疾病的发病中起重要作用 ,血管紧张素Ⅱ (ＡｎｇⅡ )是肾素 -血管紧张素系统的主要因子 ,显著增加ＶＳＭＣ的增殖和肥大 ,但确切分子机制尚未完全明确 ,有报导提示与丝裂素活化蛋白激酶 (ＭＡＰＫ)有关 ,本研究对此作进一步研究。方法 :用贴壁法培养大鼠胸主动脉ＶＳＭＣ ,实验选用第 4～ 1 0代。 [3Ｈ]-胸腺嘧啶掺入法测定ＶＳＭＣＤＮＡ合成 ,逆转录 -ＰＣＲ法测定ｃ-ｆｏｓ表达 ,ｐ42和ｐ44磷酸化抗体…     

反义Gαq／11亚基ODNs对平滑肌细胞DNA合成和PC蛋白表达的 …

目的：探讨Ｇｑ蛋白介导血管活性多肽对ＶＳＭＣＤＮＡ合成及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）蛋白表达的影响。方法：用硫代的Ｇαｑ／１１亚基反义寡聚脱氧核苷酸，以６μｍｏｌ／Ｌ的浓度加入含１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ刺激无血清ＤＭＥＭ培养基中体外培养ＶＳＭＣ。用＾５Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定ＶＳＭＣＤＮＡ合成，免疫细胞化学技术检测ＶＳＭＣＰＣＮＡ蛋白表达。结果：Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ可明显抑制ＶＳＭＣＤＮＡＲ的合成，在     

AngⅡ介导的血管平滑肌细胞增殖与迁移效应的实验研究

目的 :探讨单核细胞趋化蛋白 1单克隆抗体 (MCP 1mcAB)或Losartan拮抗血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )介导的血管平滑肌细胞 (VSMCs)增殖与迁移效应的可能性 ,为防治动脉硬化 (AS)提供一定的理论依据。方法 :采用改良的Boyden小室法检测VSMCs的迁移效应 ;以MTT法、3H TdR掺入法、3H 脯氨酸标记法和VSMCs计数评价VSMCs的增殖效应 ;将培养的VSMCs分为 5组 :2 %胎牛血清 ( 2 %FCS)组、AngⅡ组 (其浓度为 10 - 1 0 ～ 10 - 6 Mol/L)、Losartan组 (其浓度为 10 - 7～ 10 - 5Mol/L)、MCP 1mcAb组 (终浓度为 10 μg/ml)和阳性对照组 (含 5 %的酵母多糖活化血清 )。结果 :( 1)AngⅡ具有剂量依赖性地促进VSMCs的增殖与迁移效应 ;( 2 )MCP 1mcAb、Losartan能有效地拮抗AngⅡ介导的VSMCs增殖与迁移效应。结论 :MCP 1mcAb、Losartan拮抗VSMCs的增殖与迁移效应为其防治AS提供一定的理论依据。     

巨噬细胞集落刺激因子对DEL细胞增殖作用的研究

目的 :在动脉粥样硬化等血管性疾病中 ,作为一种突出的特征 ,动脉管壁血管平滑肌细胞 (ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌ,ＶＳＭＣ)的异常积聚常伴随巨噬细胞的存在。ＶＳＭＣ增殖是动脉粥样硬化、高血压和血管再狭窄等常见血管病变的共同病理表现 ,对于ＶＳＭＣ过度增殖的机制研究已引起广泛重视。有实验证明 ,ＶＳＭＣ和巨噬细胞均合成且表达、分泌巨噬细胞集落刺激因子 (ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｃｏｌｏｎｙ -ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＭＣＳＦ) ,并表达ＭＣＳＦ的受体 ,现已肯定 ,在血管动脉粥样硬化损害的进…     

氧化低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞凋亡的泡沫化

目的 :动脉粥样硬化 (ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ,Ａｓ)发生的细胞学基础是内皮细胞的受损以及血液单核 -巨噬细胞、血管平滑肌细胞 (ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌｓ,ＶＳＭＣ)的迁移和增殖。增生的ＶＳＭＣ和巨噬细胞 ,表面受体的表达发生改变 ,清道夫受体吞噬化学修饰的低密度脂蛋白 (例如 ,氧化低密度脂蛋白 ) ,因其缺乏下行调节机制 ,致使胆固醇酯在细胞内大量积聚 ,从而转化为泡沫细胞 ,是Ａｓ斑块的主要成分。细胞凋亡的异常是许多疾病的原因之一 ,Ａｓ的发生直接与凋亡有关 ,Ｈａｎ等观查了 35例直接取自…     

STUDY OF NOVEL MEMBRANOUS MATERIAL FOR CHARCOAL KIDNEY

ＳＴＵＤＹＯＦＮＯＶＥＬＭＥＭＢＲＡＮＯＵＳＭＡＴＥＲＩＡＬＦＯＲＣＨＡＲＣＯＡＬＫＩＤＮＥＹＳＴＵＤＹＯＦＮＯＶＥＬＭＥＭＢＲＡＮＯＵＳＭＡＴＥＲＩＡＬＦＯＲＣＨＡＲＣＯＡＬＫＩＤＮＥＹＧｕＨａｎｑｉｎｇ；ＬｕＭｏｚｕ（Ｔｉａｎｊｉｎｉｎｓｔｉｔｕ...     

CLIA与IRMA测定血清TSH的对比分析

ＴＳＨ是调节甲状腺功能的主要激素 ,由腺垂体促甲状腺素细胞分泌 ,并受下丘脑 -垂体 -甲状腺轴的负反馈调控。血清ＴＳＨ浓度是判断甲状腺功能的重要指标。目前实验室测定血清ＴＳＨ浓度的方法有放射免疫法 (ＲＩＡ) ,免疫放射法(ＩＲＭＡ) ,酶联免疫分析法 (ＥＩＡ)和化学发光免疫分析法 (ＣＬＩ Ａ)。本文对 12 5例标本同时应用ＣＬＩＡ和ＩＲＭＡ测定血清ＴＳＨ浓度 ,并进行对比分析 ,现将结果报告如下。材料和方法一、仪器 :(一 )ＩＭＭＵＬＩＴＥ全自动化学发光免疫分析仪 ,由美国ＤＰＣ公司生产。(二 )ＳＮ - 682γ计数仪 ,由上海原…     

THE RELATIONSHIP BETWEEN THE VOLUMINA CHANGES OF LINK ATRIUM

ＴＨＥＲＥＬＡＴＩＯＮＳＨＩＰＢＥＴＷＥＥＮＴＨＥＶＯＬＵＭＩＮＡＣＨＡＮＧＥＳＯＦＬＩＮＫＡＴＲＩＵＭＰｅｎｇＢａｏ；ＬｉｎＺｈｏｎｇＷｅｎ（ＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｈｅｎｇｚｈｅｎＣｉｔｙ，Ｓｈｅｎｇｚｈｅｎ，５１８０００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａ...     

3种疱疹科病毒DNA提取方法的建立

采用ＨＳＶ1、ＨＳＶ2和ＨＣＭＶ 3种疱疹科病毒的病毒细胞培养液 ,用冻融法、煮沸法、蛋白酶Ｋ法、ＮＰ40 (乙基苯基聚乙二醇 )法、综合法及改良通用法提取病毒ＤＮＡ。综合法是将 3种病毒细胞培养混合物各 2ｍｌ,2 5 0 0ｒ/ｍｉｎ离心 10ｍｉｎ ,用2ｍｌ冷ＰＢＳ缓冲液溶解沉淀 ,12 0 0ｒ/ｍｉｎ离心 5ｍｉｎ ,用 1ｍｌ胰酶 (0 2 5 % )溶解沉淀 ,5 0℃保温 18ｈ ,加入等体积的酚 /氯仿 /异戊醇 (2 5 2 4 1) ,30 0 0ｒ/ｍｉｎ离心10ｍｉｎ ,取水相加入 1/ 2体积 7 5ｍｏｌ/Ｌ的ＮＨ4 (ＡＣ) ,2倍无水乙醇 , 2 0℃放置 30ｍｉｎ ,10 0 0 0…     

血小板源生长因子对培养内皮细胞移行的影响及其与血管内皮细 …

一、材料与方法1 材料与试剂 :人脐静脉内皮细胞 (ＨＵＶＥＣ)株(ＥＣＶ30 4)由武汉大学菌种保存中心提供。ＰＤＧＦ ＢＢ、ＤＭＥＭ/Ｆ12 、胎牛血清 (ＦＢＳ)及青霉素 链霉素均为美国Ｇｉｂｃｏ公司产品。血管内皮细胞生长因子 (ＶＥＧＦ)抗血清为ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司产品。ＰＤＧＦ ＢＢ、ＳＡＢＣ试剂盒抗血清及二氨基联苯胺(ＤＡＢ)由博士德公司提供。2 血小板源生长因子 (ＰＤＧＦ)对培养ＨＵＶＥＣ移行的影响 :参照Ｇａｊｄｕｓｅｋ等[1] 介绍的方法 ,并加以改进。选用生长良好的ＨＵＶＥＣ悬液 ,调整细胞密度为 2× 10 4 个 /…     

树突状细胞在榄香烯复合瘤苗主动免疫保护效应中的作用

目的 :树突状细胞 (ＤＣ)是体内抗原提呈功能最强的抗原提呈细胞 (ＡＰＣ) ,是唯一能提呈抗原给初始型Ｔ细胞使之活化扩增为效应细胞的专职ＡＰＣ。ＤＣ在榄香烯复合瘤苗主动免疫保护效应中的作用如何 ,怎样提高其作用水平值得探讨。方法 :以ＨＣａ -Ｆ或Ｌ61 5榄香烯复合瘤苗 (Ｈ -ＴＣＶ或Ｌ -ＴＣＶ)、Ｈ -ＴＣＶ可溶性上清 (ＴＨ)、ＣＰ免疫小鼠 ,分离制备其脾脏ＤＣ ,在体外分别用相应瘤细胞上清 (Ｈ或Ｌ)和瘤苗上清 (ＴＨ或ＴＬ)冲激后 ,以ＭＴＴ法检测其诱导同系小鼠脾不粘附细胞增殖的能力。结果 :1 正常小鼠ＤＣ在体外可诱导同系…     

血管细胞粘附分子在急性缺血冠脉综合征中的变化及其意义

目的 :探讨急性心肌梗塞 (ＡＭＩ)和不稳定性心绞痛 (ＵＡＰ)发病过程中血清可溶性血管细胞粘附分子(ｓＶＣＡＭ - 1 )浓度的变化及其意义。方法 :选择急性心肌梗塞患者 1 2例 ,不稳定心绞痛患者 1 6例 ,健康对照者 1 0例 ,用ＥＬＩＳＡ法测定其发病 2 4ｈ内及发病后 1周血清中可溶性血管细胞粘附分子的含量。结果 :急性心肌梗塞和不稳定性心绞痛患者发病 2 4ｈ内血清ｓＶＣＡＭ - 1显著高于健康对照组 (Ｐ <0 0 1 ) ,发病后 1周ｓＶＣＡＭ - 1含量虽较前下降 ,但仍高于对照组 (Ｐ <0 0 5) ;而急性心肌梗塞与不稳定性心绞痛患者之间无显著…     

LINED CAVAL-ILIAC VENOUS PROSTHESES WITH CULTURED AUTOLOGOUS ENDOTHELIAL CELLS IN NON-HUMAN PRIMATE

ＬＩＮＥＤＣＡＶＡＬ－ＩＬＩＡＣＶＥＮＯＵＳＰＲＯＳＴＨＥＳＥＳＷＩＴＨＣＵＬＴＵＲＥＤＡＵＴＯＬＯＧＯＵＳＥＮＤＯＴＨＥＬＩＡＬＣＥＬＬＳＩＮＮＯＮ－ＨＵＭＡＮＰＲＩＭＡＴＥＬＩＮＥＤＣＡＶＡＬ－ＩＬＩＡＣＶＥＮＯＵＳＰＲＯＳＴＨＥＳＥＳＷＩＴＨＣ...     

生长抑素抑制内皮素刺激的家兔血管平滑肌细胞增殖

为探讨生长抑素（ＳＳＴ）对内皮素（ＥＴ）刺激细胞增殖的作用其机理，本工作在培养的兔主动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）上发现，１０＾－８ｍｏｌ／ＬＥＴ刺激细胞增殖（＾３Ｈ＝ＴｄＲ参入增多）和丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）激活，１０＾－８ｍｏｌ／ＬＳＳＴ单独作用可抑制细胞增玩具增殖但不曩ＭＡＰＫ活性。ＳＳＴ不仅呈浓度依赖性地抑制ＥＴ刺激的ＶＳＭＣ增殖（Ｐ〈０．０１），而且亦抑制ＥＴ刺激的细胞ＭＡＰＫ激     

慢性低氧对大鼠肺血管左旋精氨酸/一氧化氮途径的影响

目的 :探讨慢性低氧对大鼠肺血管左旋精氨酸 /一氧化氮 (Ｌ -Ａｒｇ/ＮＯ)途径的影响。方法 :健康雄性ＳＤ大鼠 40只 ,体重 2 0 0～ 2 50ｇ,随机分为对照 (Ｃ)组与低氧 (Ｈ)组 ,每组 2 0只。将低氧组大鼠置于常压低氧舱内 ,舱内充入氮气使氧浓度维持在 1 0 %± 0 5% ,ＣＯ2 浓度低于 3% ,每天 8ｈ ,每周 6ｄ ,连续 4周。对照组大鼠除吸入空气外 ,其它饲养条件与低氧组相同。实验 4周后 ,给大鼠戊巴比妥钠 ( 35ｍＬ/ｋｇ)腹腔麻醉后 ,采用右心导管法测量大鼠肺动脉压力 ,分别称取右室 (ＲＶ)和左室加室间隔 (ＬＶ Ｓ)的重量 ,以ＲＶ/ＬＶ …     

rTNF_(-α)、IFN_(γ)对人脐静脉内皮细胞表达粘附分子的影响

为了研究细胞因子ｒＴＮＦ α、ＩＦＮγ对内皮细胞表达粘附分子的影响,及ｒＩＦＮγ对ＴＮＦ α的协同效应。采用ｒＴＮＦ α、ＩＦＮγ诱导培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）,以Ｃｅｌ ＥＬＩＳＡ法检测粘附分子ＩＣＡＭ １、ＥＬＡＭ １和ＶＣＡＭ １的表达。结果表明,ｒＴＮＦ α以浓度和时间依赖的方式诱导ＨＵＶＥＣ表达ＩＣＡＭ １、ＥＬＡＭ １和ＶＣＡＭ １,ＩＦＮγ促进ｒＴＮＦ α诱导的ＶＣＡＭ １表达。ＩＦＮ α对ｒＴＮＦ α诱导效应无影响。提示ｒＴＮＦ α可诱导ＨＵＶＥＣ表达粘附分子,而ＩＦＮγ可促进ｒＴＮＦ α诱导的ＨＵＶＥＣ表达ＶＣＡＭ １。     

淋巴因子激活的骨髓细胞对混合淋巴细胞培养的抑制作用

采用单向混合淋巴细胞培养（ＭＬＣ）方法，从不同主要组织相容性抗原（Ｈ－２）单型小鼠的多种组合中，验证淋巴因子激话的骨髓细胞（ＬＡＢＭＣ）的Ｖｅｔｏ效应。结果表明：ＬＡＢＭＣ于培养当天加入单向ＭＬＣ，在与反应细胞低比例时可特异住抑制与其带有相同Ｈ－２单型的刺激细胞参与组合的增殖应谷和杀伤效应的诱导；在与反应细胞高比例时其抑制不具特异住，但对与其带有相同Ｈ－２单型的刺激细胞参与组合的抑制较强，提示ＬＡＢＭＣ在低比例时具Ｖｅｔｏ活性，在高比例时同时具Ｖｅｔｏ和自然抑制（ＮＳ）活性。ＬＡＢＭｃ于培养第二天加入单向ＭＬＣ则不显示抑制效应，提示ＬＡＢＭＣ对ＭＬＣ的抑制具有时相效应，流式细胞术（ＦＣＭ）显示ＬＡＢＭＣ中ｌｙｔ－２（＋）细胞成分明显增加．