大鼠下丘脑室旁核和视上核内神经激肽B受体和加压素的共存研究

目的研究神经激肽Ｂ受体（ＮＫ３受体）免疫反应产物在大鼠下丘脑室旁核和视上核的分布及其与加压素的共存。方法免疫组织化学染色,标本在光镜和电镜下观察。共存研究采用相邻切片染色法。结果致密的ＮＫ３受体阳性产物分布于室旁核的后大细胞部和视上核的主部。免疫电镜观察发现ＮＫ３受体阳性反应产物出现于室旁核和视上核的胞体和树突内。在相邻切片上观察到室旁核和视上核内有相当数量的ＮＫ３受体阳性神经元,同时含有加压素,它们主要分布于室旁核的后大细胞部和视上核的主部。结论根据本研究和以往的机能学的研究结果,推测下丘脑室旁核和视上核内的ＮＫ３受体阳性神经元可能参与调控机体内环境改变时下丘脑加压素的释放。     

一氧化氮合酶在自发性高血压大鼠视上核及室旁核的分布

目的：探讨自发性高血压大鼠视上核及室旁核内一氧化氮合酶阳性神经元的改变。方法：用ＮＡＤＰＨ－ｄｉ－ａｐｈｏｒａｅ组织化学方法,观察和比较了一氧化氮合酶在自发性高血压大鼠和正常对照大鼠视上核和室旁核的分布间下观察下捕脑视上核及室旁核的一氧化氮合酶阳性细胞形态、分布并进行计数。用图像分析仪测其灰度显差异。视上核及室旁核内的一氧化氮合酶阳性细胞灰度值在高血压组均明显高于对照组。提示这两上核内一氧化氮合酶     

N-氨基-D-门冬氨酸诱导大鼠下丘脑视上核、室旁核和弓状核内c-fos基因表达

实验用foS蛋白免疫组织化学方法,研究了中枢神经系统兴奋性介质N-氨基-D-门冬氨酸诱导大鼠下丘脑内c-fos的表达.N-氨基-D-门冬氨酸注射大鼠皮下后,观察了fos阳性细胞在下丘脑内开始出现与消失的时程相关以及在下丘脑内的分布.结果表明:给N-氨基-D-门冬氨酸后30分开始出现fos阳性细胞,1～2小时达高峰,4～8小时消失.fos阳性细胞主要分布于视上核、室旁核和弓状核,视上核和室旁核中fos阳性细胞分别占细胞总数的57.8%和63.6%,在弓状核中占细胞总数的60.6%.     

N—氨基—D—门冬氨酸诱导大鼠下丘脑视上核,室旁核和弓状核内c—fo…

实验用ｆｏｓ蛋白免疫组织化学方法，研究了中枢神经系统兴奋性介质Ｎ－氨基－Ｄ－门冬氨酸诱导大鼠下丘脑内ｃ－ｆｏｓ的表达。Ｎ－氨基－Ｄ－门冬氨酸注射大鼠皮下后，观察了ｆｏｓ阳性细胞在下丘脑内开始出现与消失的时程相关以及在下丘脑内的分布，结果表明：给Ｎ－氨基－Ｄ－门冬氨酸后３０发开始出现ｆｏｓ阳性细胞，１￣２小时达高峰，４￣８小时消失，ｆｏｓ阳性细胞主要分布于视上核、室旁核和弓状核，视上核和室旁核中ｆｏ     

胃肠道伤害性刺激诱导大鼠孤束核,视上核,室旁核内FOS蛋白的表达

用抗ＦＯＳ免疫组化技术，观察胃肠道伤害性刺激诱导大鼠孤束核、视上核、室旁核内ｃ－ｆｏｓ的表达，并结合抗ＴＨ免疫双重染色技术，探讨孤束核内儿茶酚胺能神经元与ＦＯＳ蛋白的关系，结果表明：ＦＯＳ阳性细胞主要分布于孤束核的连合亚核、内业核以及背侧周边区，说明孤束核是内脏伤害性信息初级传和冲动的直接反应区。在下丘脑内主要２于视上核和室旁核，提示视上核和室旁核在内脏伤害性刺激的传递中起中毒作用。在双标切片中，     

高渗刺激诱导大鼠下丘脑室旁核和视上核神经激肽B受体阳性神经元表达Fos

目的研究神经激肽Ｂ受体（ＮＫ３受体）与机体渗透压调节之间的可能关系。方法用双重免疫组织化学染色技术,高渗刺激采用静脉内注射１．５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ的方法,观察了下丘脑室旁核和视上核内ＮＫ３受体阳性神经元在高渗刺激下的Ｆｏｓ表达情况。结果高渗盐水可诱导下丘脑室旁核和视上核内大量神经元表达Ｆｏｓ。在室旁核,双标细胞约占ＮＫ３受体阳性神经元的８８％,约占Ｆｏｓ阳性细胞的７１％;在视上核的主部,双标细胞约占ＮＫ３受体阳性神经元的７４％,约占Ｆｏｓ阳性细胞的４３％。结论室旁核和视上核内ＮＫ３受体阳性神经元可能参与大鼠渗透压调节过程。     

大鼠室旁核和视上核NMDAR_1及NADPH-d阳性神经元分布的性别差异

为了研究ＮＭＤＡＲ１ 及ＮＡＤＰＨ－ｄ 阳性神经元在室旁核及视上核分布的性别差异,本研究采用雌雄Ｗ ｉｓｔａｒ 大鼠,恒冷箱切片,分别进行ＮＭＤＡＲ１ 免疫细胞化学和ＮＡＤＰＨ－ｄ 组织化学反应,并进行ＮＭ ＤＡＲ１ 免疫细胞化学和ＮＡＤＰＨ－ｄ 组织化学双重反应,光镜下观察室旁核及视上核的阳性细胞分布状况。观察结果发现,雄性组室旁核中的ＮＭＤＡＲ１ 和ＮＡＤＰＨ－ｄ 双重反应阳性细胞明显多于雌性组。ＮＭ ＤＡＲ１ 免疫反应组可见免疫阳性神经元,但雌雄两组之间未见明显差异。ＮＡＤＰＨ－ｄ 组化反应组可见高尔基样的阳性细胞,雌雄两组之间也未见明显差异。ＮＭ ＤＡＲ１、ＮＡＤＰＨ－ｄ 及ＮＭＤＡＲ１ 和ＮＡＤＰＨ－ｄ 双重反应各组在视上核未见性别差异。室旁核ＮＭＤＡＲ１ 和ＮＡＤＰＨ－ｄ 双重反应的分布有明显性别差异的研究结果表明,雄性大鼠室旁核可能通过ＮＭ ＤＡＲ－ＮＯ 途径介导雄性大鼠的某些性行为。     

高渗刺激诱导大鼠下丘脑室核和视上核神经激肽B受体阳性神经？…

目的 研究神经激肽Ｂ受体与机体渗透压调节之间的可能关系。方法 用双重免疫组织化学染色技术，高渗刺激采用静脉内注射１．５ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ的方法，观察下丘脑室旁核和视上核ＮＫ３受体阳性神经元在高渗刺激下的Ｆｏｓ表达情况。结果 高渗盐水可诱导下丘脑室旁核和视上核内大量神经元表达Ｆｏｓ。     

含后叶加压素的视上核神经元及含P物质的中缝背核神经元至下丘脑…

用ＨＲＰ逆行追踪与免疫细胞化学结合的方法，对某些投射到大鼠下丘脑室旁核的神经元的化学性质进行了研究。结果提示，视上核有后叶加压素能神经元、中缝背核有Ｐ物质能神经元投射到室旁核。     

外周免疫刺激诱导小鼠下丘脑室旁核和视上核中Ⅰ型IL-1受体表达的变化

目的　通过研究外周免疫刺激后免疫性细胞因子受体在下丘脑神经内分泌核团中的表达变化 ,揭示这些核团与神经免疫调节的关系。　方法　小鼠腹腔内给予细菌内毒素脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)或葡萄球菌肠毒素B(staphylococcalenterotoxinB ,SEB) ,用免疫组织化学方法观察脾脏核增殖抗体 (PCNA)及下丘脑室旁核和视上核中Ⅰ型IL 1受体的表达 ,并采用双标记技术观察Ⅰ型IL 1受体阳性神经元和加压素及催产素表达的关系。　结果　 1 与对照组比较 ,LPS或SEB引起脾脏核增殖抗体的表达明显增强。 2 Ⅰ型IL 1受体在正常小鼠脑内的表达很广泛。与对照组比较 ,LPS或SEB引起Ⅰ型IL 1受体在小鼠下丘脑室旁核和视上核中表达显著增强。 3 在正常下丘脑室旁核和视上核中Ⅰ型IL 1受体阳性的神经元既有加压素能的 ,又有催产素能的。　结论　下丘脑室旁核和视上核参与了免疫反应的调节 ,这两个核团中的部分加压素能神经元和催产素能神经元在神经免疫调节中可能具有重要作用     

外周免疫刺激诱导小鼠下丘脑室旁核和视上核中I型IL—1受体表达的变化

目的：通过研究外周免疫刺激后免疫性细胞因子受体在下丘脑神经内分泌核团中的表达变化，揭示这些核团与神经免疫调节的关系。方法：小鼠腹腔内给予细菌内毒素脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）或葡萄球菌肠毒素B（staphylococcal enterotoxin B,SEB)，用免疫组织化学方法观察脾脏核增殖抗体（PCNA）及下丘脑室旁核和视上核中I型IL－1受体的表达，并采用双标记技术观察I型IL－1受体阳性神经元和加压素及催产素表达的关系。结果：1．与对照组比较，LPS或SEB引起脾脏核增殖抗体的表达明显增强。2．I型IL－1受体在正常小鼠脑内的表达很广泛。与对照组比较，LPS或SEB引起I型IL－1受体在小鼠下丘脑室旁核和视上核中表达显著增强。3．在正常下丘脑室旁核和视上核中I型IL－1受体阳性的神经元既有加压素能的，又有催产素能的。结论：下丘脑室旁核和视上核参与了免疫反应的调节，这两个核团中的部分加压素能神经元和催产素能神经元在神经免疫调节中可能具有重要作用。     

含后叶加压素的视上核神经元及含P物质的中缝背核神经元至下丘脑室旁核投射的研究

用HRP逆行追踪与免疫细胞化学结合的方法,对某些投射至大鼠下丘脑室旁核的神经元的化学性质进行了研究.结果显示在视上核内存在三种标记细胞:HRP单标细胞、后叶加压素免疫反应阳性单标细胞和HRP后叶加压素双标细胞.双标细胞为大、中型椭圆形或圆形细胞,约占HRP标记细胞总数的22%.在中缝背核投射至室旁核的神经元中,部分为P物质免疫反应阳性,双标细胞为中小型梭形细胞,约占HRP标记细胞总数的20%.上述结果提示:视上核有后叶加压素能神经元、中缝背核有P物质能神经元投射到室旁核.     

不同高渗刺激对下丘脑视上核和室旁核神经元功能状态的影响

视上核和室旁核是下丘脑中两个与渗透压感受、加压素分泌以及水平衡调节密切相关的核团。为了搞清楚这两个核团在不同刺激条件下的激活状态和反应特性,本文采用慢性和急性渴觉刺激模型,免疫组化和ELISA检测相结合的方法对视上核和室旁核内的Fos表达以及血清加压素水平进行了测定。慢性刺激组动物给予2% NaCl盐水持续2d,而急性刺激组动物皮下直接注射2mol/L的NaCl盐水2.5ml,两组动物的进食保持正常。结果表明,这两种不同的刺激方式引发的Fos表达模式基本相似,视上核、室旁核、下丘脑外侧区以及正中视前区、穹窿下器和终板血管下器等区都检测到大量的Fos阳性胞核。但Fos染色的深浅程度和Fos胞核的数量却在两组之间有明显的差异:急性组胞核浓染,数量多;慢性组胞核淡染,数量少。ELISA检测的结果与此相反,急性组动物血清中加压素的水平很低,与对照组没有明显差异;而慢性组动物血清中的加压素水平很高,几乎是对照组的2倍。以上结果提示,下丘脑神经元的激活和分泌功能与刺激方式密切相关,选择单一刺激模式、单一指标来揭示和衡量其功能状态是缺乏说服力的。     

切除两侧肾上腺对大鼠下丘脑加压素、催产素神经元的影响

为了进一步确定加压素(VP)在应激反应中的作用,我们应用免疫组化和免疫电镜观察了切除两侧肾上腺对大鼠下丘脑室旁核和视上核的神经内分泌细胞的影响,发现下丘脑室旁核VP神经元处于功能亢进状态,其合成、储存和分泌VP的功能均亢进,而视上核的加压素(VP)神经元以及室旁核和视上核的催产素(OT)神经元的功能状态均无明显改变,提示室旁核的VP神经元可能是参与下丘脑—垂体—肾上腺这一应激反应轴调节的重要因素。     

大鼠下丘脑内的一氧化氮合酶与雌激素受体双标神经元

目的:探讨一氧化氮合酶(NOS)和雌激素受体(ER)在下丘脑诸核团的分布及共存,为揭示雌激素与一氧化氮之间的内在联系提供形态学依据。方法:采用NADPH-d组织化学法并结合免疫组织化学技术,观察雌性大鼠下丘脑内NOS阳性神经元、ER阳性神经元以及NOS/ER双染神经元的形态及分布。结果:NOS阳性神经元主要分布在下丘脑室旁核、视上核、下丘脑外侧区和室周核;ER阳性神经元在下丘脑诸核团的表达不及NOS阳性神经元广泛;NOS与ER双染神经元主要分布在下丘脑的室旁核、视上核、下丘脑外侧区及室周核;其他区域可见散在分布的双染神经元。结论:NOS与ER双染神经元主要集中分布在视上核的背内侧和背外侧部及室旁核小细胞部腹内侧区,在下丘脑外侧区分布较广但比较分散,室周核呈散在分布。     

大鼠视上核、室旁核肠三叶因子表达与实验性胃溃疡的关系

目的探讨大鼠实验性胃溃疡自愈期间肠三叶因子(ITF)在下丘脑视上核(SON)、室旁核(PVN)的表达及其与实验性胃溃疡愈合的关系。方法以免疫组织化学染色、酶联免疫吸附实验分别检测溃疡组(42只)和正常组(6只)大鼠下丘脑和血清及ITF的表达及含量变化,RT-PCR检测ITFmRNA的转录情况。结果 ITF免疫反应阳性物质主要位于视上核和室旁核大细胞部。溃疡1d视上核和室旁核ITF积分吸光度略增高,2d、4d和6d逐渐升高,6d达高峰(P0.01),10～23d均维持在较高水平(P0.05)。血清ITF的变化与免疫组织化学法结果相似;溃疡组ITF/3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)吸光度比值在溃疡2～23d均高于正常组(P0.01,或P0.05)。结论胃溃疡自愈期间可能通过下丘脑和血清ITF的高表达参与溃疡愈合的调节。     

热应激时下丘脑视上核和室旁核Fos蛋白的表达

为了探讨不同温度下,大鼠的行为表现及大鼠下丘脑视上核和室旁核内神经元Fos蛋白的表达情况,本研究将成年SD大鼠置于不同温度(24℃、34℃、38.5℃、42℃),相对湿度为60%的实验仓内60min,观察大鼠的行为表现;同时应用免疫组化染色技术,观察大鼠下丘脑视上核和室旁核内Fos阳性神经元的形态、分布和数量的变化。行为学结果显示:24℃时,大鼠无异常表现,直肠温度为36℃左右;34℃仅引起大鼠直肠温度升高至38℃左右,动物行为无明显变化;38.5℃和42℃时,大鼠直肠温度升高至39℃以上,最初大鼠精神萎靡,活动减少,但随后转为兴奋状态,出现惊跳、逃窜行为。免疫组化染色结果显示:24℃时,下丘脑视上核、室旁核内Fos阳性细胞较少;34℃时,Fos阳性细胞的表达量增加;38.5℃时,Fos阳性细胞数达到峰值;42℃时又降低,并出现三种Fos阳性细胞:即胞核为Fos阳性、胞浆为Fos阳性以及胞浆、胞核均为Fos阳性。以上结果表明下丘脑视上核、室旁核内Fos蛋白的表达随温度的升高而发生明显的变化,提示这两个核团参与了热应激过程。     

大鼠室旁核内一氧化氮合酶阳性神经元的构筑

利用黄递酶组织化学染色 ,观察鼠脑室旁核各亚核内 NOS阳性神经元的构筑。结果显示室旁核内 NOS阳性神经元主要分为两种类型 :大型 NOS阳性神经元 ,占大部分 ,相对密集、成群分布于室旁核四个大细胞亚核即 :前连合核、内侧室旁核、外侧室旁核、室旁核后亚核 ;小型 NOS阳性神经元 ,占小部分 ,散在分布于大细胞亚核内或小细胞部 ,如室旁核前小细胞部、背外侧帽。结果提示 ,室旁核各亚核内 NOS阳性神经元的形态与分布存在着差别 ,意味着具有多种相应的生理功能     

强啡肽B免疫反应阳性神经元在大鼠下丘脑的分布及与精氨酸加压素的共存

实验应用免疫细胞化学 PAP法显示了强啡肽 B免疫活性阳性神经元在大鼠下丘脑形态特征和分布特点。结果表明 :强啡肽 B正常条件下免疫活性阳性神经元仅在下丘脑的视上核、室旁核、环核、附属神经分泌核和室管膜。正中隆起处有强啡肽 B免疫活性阳性纤维分布。侧脑室注射秋水仙素后在下丘脑视前区、前区、室周核、前连合核、交叉上核、交叉后核、弓状核、背侧区、背内侧核、穹隆周核、下丘脑外侧区、腹内侧核、室周大细胞区等核区显示了强啡肽 B免疫活性阳性神经元。双标记免疫组织化学方法还显示强啡肽 B与精氨酸加压素主要共存于下丘脑室旁核 ,次为视上核 ,附属神经分泌核和下丘脑外侧区     

雌性大鼠下丘脑5-羟色胺1A和2A受体亚型的定位分布

本研究应用免疫细胞化学技术观察了雌性成年SD大鼠下丘脑内5-HT1A受体亚型(5-HT1AR)和5-HT2AR免疫阳性结构的分布。结果显示:5-HT1AR免疫阳性神经元在视前区大细胞核、视前室周核、视上核和下丘脑外侧前核等核团内密集分布。在内侧视前核、外侧视前区、下丘脑室周核、下丘脑外侧区、背内侧核、腹内侧核、结节核、结节乳头体核、乳头体内侧核和乳头体外侧核等结构内也有较多的分布;而在正中视前核、视交叉上核、下丘脑室旁核、下丘脑背侧核、弓状核、乳头体上核和乳头体前核等部位有散在的分布。与5-HT1AR不同,5-HT2AR免疫阳性反应产物主要见于纤维和终末,阳性胞体少且染色淡。5-HT2AR阳性胞体见于下丘脑室旁核、视上核、腹内侧核、结节核、视前内侧区、外侧区、外侧前核、下丘脑背内侧核等处。另外,在视前区前内侧视前核、视交叉上核背侧和外侧可见围绕血管分布、密集成团簇状、带有大小不同膨体的阳性神经纤维缠结。本文结果提示5-HT1AR阳性结构广泛地分布于大鼠下丘脑,而5-HT2AR在下丘脑分布较为局限。二者不同的分布特点,提示它们可能介导5-HT在下丘脑的不同生理功能。