慢性乙肝肝硬变中肝细胞微体的细胞化学及其定量

用过氧化氢酶电镜细胞化学和立体定量方法，观察分析慢性乙型肝炎及肝硬变时肝细胞微体的改变。结果表明，慢性迁延性肝炎和非活动性肝硬变时微体体密度无改变，而轻、重度慢性活动性肝炎及活动性肝硬变的微体数密度、体密度均有不同程度地增加，这是慢性肝病活动性的表现。微体增多可作为慢性活动性肝炎与慢性迁延性肝炎之间的区分和判定肝硬变活动性的指标。提出病毒性肝炎时微体增多，是肝细胞针对毒氧素进行解毒的慢性代偿性反应     

超微结构酶细胞化学在医学原虫研究中的意义

超微结构酶细胞化学在医学原虫研究中的意义陈文列，陈金富，钟秀容，陈莲云关键词：医学原虫；超微结构；酶细胞化学；电镜医学原虫虽为单细胞原生动物，却具有生物整体性的生理功能，在医学与生物学方面有较大的研究价值，如可作为药物作用机制与代谢活动研究的较为理想...     

实验性糖尿病心肌细胞超微结构观察和酶细胞化学研究

用定量酶细胞化学方法结合超微结构,观察了小鼠实验性糠尿病心肌细胞琥珀酸脱氨酸（ＳＤＨ）和超微结构改变。结果表明：糖尿病时凡肌细胞ＳＤＨ活性明显下降;图像分析显示ＳＤＨ的减少主要表现为有ＳＤＨ反应产物的线料体数目减少。超微结构的改变为心肌细胞肌民膜蜷曲、破裂、肌原纤维肿胀、裂解、胞浆内代谢产物及钙离了累积。该实验结果为临床防治糖尿病并发症提供超微病理及酶细胞化学依据。     

标志酶的电镜细胞化学技术探讨

目的 探讨电镜标志酶细胞化学的技术关键及标准化操作.方法 用相同的操作步骤和方法,对新西兰兔肝组织及血液样品进行12种标志酶的超微细胞化学实验,于透射电镜下观察酶的活性定位和变化.结果 建立了一套统一和实用的酶细胞化学操作程序和方法,12种标志酶的活性反应产物准确定位于相应的细胞超微结构.结论 固定和孵育是关键性步骤,其中固定剂的浓度和固定时间以及孵育液的配制质量尤为重要.操作标准化有利于提高多种酶检测的成功率和实验结果的可重复性.     

人腹腔淋巴结淋巴细胞酶超微结构定位

应用电镜酶细胞化学方法研究了人腹腔淋巴结淋巴细胞ＡＴＰ酶、Ｇ－６－Ｐ酶、５′－ＮＤ酶的定位与活性。结果，在淋巴细胞内各种酶定位准确、颗粒清晰、酶反应特异性强。提示应用此法可以检测以上酶活性，判定机体免疫状态，对临床诊断与治疗具有一定意义。     

硕士研究生开设电镜酶细胞化学技术课初探

电镜酶细胞化学技术是研究细胞内各种酶在超微结构水平上的分布情况,以及这些酶在细胞活动过程中变化情况的一种科研手段。本院解剖组胚教研室率先在中医院校为硕士研究生开设电镜酶细胞化学技术课程。对课程的教学动因、保证、方法及目标进行了归纳总结     

大鼠肝细胞内吞体膜H+-TPA酶和和Mg2+-ATP酶的细胞化学定位

目的研究细胞内吞体膜H+-TAP酶和Mg2+-ATP酶的活性.方法在中性环境中,以铈为捕捉剂,用检测对硝基苯磷酸酶(p-NPP)方法对H+-TAP酶进行了细胞化学定位,用Ogawa-Mayahara法对Mg2+-ATP酶进行细胞化学定位.结果肝细胞内吞体膜的囊泡侧均有酶活性反应颗粒.结论提示肝细胞内吞体膜上有多种酶存在,以完成其生理功能.     

显示电镜酶细胞化学技术的几点体会

电镜酶细胞化学是正在发展中的技术,至今只有近30年的历史。由于酶细胞化学的技术比较复杂,影响因素较多,方法也不够稳定,所以迄今在全国电镜室均未普遍开展。近几年来随着科学技术的发展,特别在生物医学中人们正注意把传统的形态描述与功能相结合起来的要求越来越引起人们的关注,并且有一些方法已开始在临床诊断和研究中使用。作者自1984年则开始探索超微结构细胞化学实验工作,并付之应用。如我们对AKP(碱性磷酸酶)、5′-Nase(5′-核苷酸酶)、MPO(髓过氧化物酶)、ATPase     

绝经前子宫切除对血脂的影响及澈素替代治疗

绝经前子宫切除对血脂的影响及澈素替代治疗朱葫芝，胡绥苏，赵卫红我们研究绝经前子官切除者的更年期症状及血脂的变化以及使用妇复春的情况，探讨子官切除后激素替代治疗的必要性。资料与方法一、研究对象选择１９９２～１９９５年因妇科良性病变在我院行子官切除的绝经...     

人胎儿和新生儿小脑皮质分子层和颗粒层细胞发育的体视学分析

目的：探讨人胎儿和新生儿小脑皮质发育的变化规律。方法：应用体视学方法对30例6～10月龄胎儿及6例新生儿小脑皮质分子层细胞、内颗粒层细胞密度、尺寸和分布参数进行观测。结果：小脑皮质分子层细胞的平均体积、平均自由程均逐龄增大,体密度、数密度、表面积密度、核体密度则逐龄减小,但足月胎儿和新生儿期相对恒定;内颗粒层细胞的体密度、数密度、表面积密度、平均体积逐龄增大,核体密度和平均自由程均逐龄减小,7～8月期间变化较明显。结论：胎儿小脑皮质分子层细胞的迁移、增值和分化在出生前、后基本完成,颗粒层细胞出生后仍持续,小脑皮质的发育在7～8月期间是重要时期。     

人胎肝刺激因子对大鼠实验性肝纤维化影响的研究

本工作从健康孕妇水囊引产４～６个月龄的胎儿取肝，采用ＬａＢｒｅｃｑｕｅ方法提取肝刺激因子，称人肝刺激因子（ｈｕｍａｎＨｅｐａｔｉｃＳｔｉｍｕｌａｔｏｒＳｕｂｓｔａｎｃｅ，ｈＨＳＳ）。将ｈＨＳＳ注入肝部分切除之大白鼠体内，用３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入肝ＤＮＡ法测定其生物活性。结果表明，我们提取的ｈＨＳＳ刺激肝细胞ＤＮＡ合成较对照组增加６倍。采用皮下注射６０％ＣＣｌ４豆油溶液和饮用低浓度的乙醇制备慢性肝损伤动物模型，以观察ｋＨＳＳ对大鼠实验性慢性肝纤维化的影响。实验结果表明，（１）ｈＨＳＳ可以明显降低ＣＣｌ４－乙醇所致慢性肝损伤时肝组织羟脯氨酸含量的升高，在实验第２８、４２天差异具显著性（Ｐ＜０．０５，０．０１）。（２）病理组织学观察表明，ｈＨＳＳ可以明显降低ＣＣｌ４－乙致慢性肝损伤时肝组织纤维化的程度。在实验的第４２天差异具显著性（Ｐ＜０．０１）。本工作结果提示，肝再生刺激因子可能是一种有希望应用于临床治疗慢性肝病的生物制剂。     

《难经》的人体观及解剖发现

《难经》对中医人体观及解剖发现的贡献,主要在厘清脏腑的定义、功能、解剖实质,特别是在行气系统的标明方面,清楚地解说了三焦是“气府”的概念.有些后代医家却因为不清楚古医书中视人体为形神二元一体的思想体系,只依据《难经》里三焦是“有名无形”的说法,就断章取意地评断《难经》的脏腑理论是没有解剖实质基础的.但详观第四十二难的内容,便会发觉此说不攻自破,因为这一难中,不只承接了《灵枢》里《肠胃》和《平人决榖》有关胃、小肠、回肠、广肠等腑的内容,还于稍后的篇幅里,将其改称为胃、小肠、大肠、肛门等部位,并增录了胆、膀胱二腑及所有五脏的大体解剖形态和测量记录.所以,《难经》可说是古代阐述人体结构的著作,其内容类似现今生理学和解剖学的综合体,为中医学的基础理论奠定了扎实的根基.     

人造血干细胞在山羊体内的移植和扩增及分化研究

目的　建立人 /山羊异种造血干细胞 (hematopoieticstemcell,HSC)移植模型 ,在活体水平研究人HSC移植后的扩增和分化。方法　分离人脐血HSC ,然后将其 (1× 10 5)经母羊子宫注射入胎龄为 5 5～ 6 5d的胎山羊体内 ,出生后在不同阶段应用FACS、PCR和PCR southern杂交技术 ,分析人HSC在山羊体内的扩增和分化情况。结果　在 5 0头受试胎羊中 ,39头足月分娩 ,其中 35头山羊呈现人血细胞嵌合 ,人造血细胞在山羊血液中的比率平均达到 1%～ 3% ,并稳定地保持到 10个月以上 ,山羊体内的人造血细胞表达CD34、CD14、CD2 0和血型糖蛋白A(GPA) ,但CD3、CD4、CD7、CD8和CD5 6未见表达或表达很低。结论　人HSC在山羊体内能有效地扩增至 10 0 0～ 10 0 0 0倍 ,并呈现出有限的分化。人 /山羊HSC异种模型为在活体探讨HSC移植、扩增和分化提供了科学资料     

异丙酚预处理对脂多糖（LPS）诱导的人肺微血管内皮细胞（HPMVCs）血管紧张素转化酶（ACE）的表达与活性的影响

 目的 在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人肺微血管内皮细胞(human pulmonary microvascular endothelial cells,HPMVCs)损伤模型中,观察异丙酚预处理对血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)的影响,探讨异丙酚肺保护作用的可能机制。方法 以体外培养的HPMVCs 3~5代作为实验对象,将细胞随机分为4组(n=8)：对照组(C组)、异丙酚组(P组)、LPS组(L组)和异丙酚预处理组(P+L组)。药物终浓度：LPS 5 μg/mL,异丙酚50 μmol/L。按上述分组,加入LPS前1 h加入异丙酚。于37℃、5％CO₂培养箱中进行培养。分别培养12、24、48、72 h后采用CCK-8 (Cell Counting Kit-8)法测细胞活力。细胞孵育12 h后,采用改良分光光度法检测各组培养液和细胞中的ACE活性,real-time PCR检测ACE、TNF-α、IL-1β和MCP-1 mRNA表达水平,同时ELISA测定细胞培养液中TNF-α、IL-1β和MCP-1的蛋白含量。结果 (1)各组细胞在72 h内的细胞活力无显著差异(P>0.05);(2)与C组相比,P组各检测指标均无显著差异(P>0.05);(3)与C组相比,L组TNF-α、IL-1β和MCP-1的蛋白含量及其基因表达水平均显著升高,分泌型ACE活性增加,细胞ACE活性降低,ACE mRNA表达下调(P<0.05);(4)与L组相比,P+L组分泌的TNF-α、IL-1β和MCP-1及其mRNA表达显著降低,细胞ACE活性增加,ACE mRNA表达上调(P<0.05),分泌型ACE活性不变(P>0.05)。结论 异丙酚在转录水平调节HPMVCs中ACE的表达,可能是异丙酚保护HPMVCs的作用机制之一。     

重症H1N1流感病毒感染小儿器官功能评估

目的研究重症H1N1流感病毒感染小儿器官系统功能衰竭情况。方法 PCR检测H1N1流感病毒RNA阳性重症患者32例,按小儿多器官功能衰竭诊断标准对各器官系统进行评估。结果 (1)重症H1N1流感病毒感染小儿呼吸系统与中枢神经系统功能衰竭发生机率最高,分别为46.88%与12.5%;(2)其他器官系统功能衰竭未见单独出现,多与呼吸与神经系统异常伴发;(3)急性坏死性脑病是重症H1N1流感病毒感染小儿死亡的重要原因。结论重症H1N1流感病毒感染小儿呼吸系统与神经系统功能衰竭发生机率高,值得临床医生注意。     

Midkine (MDK)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义

 目的 探讨Midkine(MDK)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达以及检测血清MDK对于肝癌诊断的初步临床意义。方法 通过免疫组织化学染色和Western blot法检测50例临床样本(包含肝癌,肝硬化及正常肝组织)及7种不同肝癌细胞系中MDK表达情况;进一步通过酶联免疫吸附反应定量检测120例不同受试人群的血清样本,分析血清MDK在诊断肝癌中的初步临床意义。结果 肝癌组织中MDK表达阳性率显著高于肝硬化(77% vs. 30%,P＜0.01)及正常肝组织(77% vs. 0%,P＜0.001);Western blot 检测结果显示,MDK在多株肝癌细胞系中表达上调;此外,HCC患者血清MDK的中位数水平(1.195 ng/mL,0.84~1.71)较正常人(0.102 ng/mL,0.02~0.53;P＜0.01)、 HBV相关肝硬化(0.57 ng/mL,0.26~0.67;P＜0.05)和HCV相关肝硬化(0.34 ng/mL,0.09~0.56;P＜0.01)患者显著升高。 结论 MDK在HCC患者中的表达显著上调,血清检测MDK可作为临床诊断肝癌的重要方法。     

重组人促红细胞生成素(rhEPO)在老年慢性病贫血（AcD）中治疗效果的评价及疗效的预测

 目的 在32例年龄在60岁以上的慢性病贫血(anemia of chronic disease,AcD)患者中,应用重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)治疗8周后测观察贫血改善情况,并筛选出具有较高临床意义的预测参数。方法 32名AcD老年患者应用rhEPO治疗8周,8周内血红蛋白(hemoglobin,Hb)上升20 g/L设为治疗有效。选用血清EPO水平、Hb、网状红细胞计数(reticulocyte count,Ret)、总铁结合力(total iron binding capacity,TIBC)、血清铁(serum iron,SI)、血清铁蛋白(serum ferritin serum,SF)、可溶性转铁蛋白受体(serum transferrin receptor,sTfR)作为观测指标,观察患者8周时血红球蛋白的改变并进一步统计分析其与各观测指标变化之间的关系。结果 32例老年AcD患者应用rhEPO治疗8周后Hb升高,SI、LgSF下降,sTfR升高(P<0.05)。20例患者8周时获得预期疗效,多元回归分析提示rhEPO治疗8周后Hb改变与LgEPO及基线sTfR水平呈负相关(P<0.05)。根据设定的评价方法将32例患者分为rhEPO治疗有效组及治疗无效组,绘制sTfR及LgEPO的受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)并计算曲线下面积(area under the curve,AUC),后者具有统计学意义并且AUC更大(AUC为0.81,P<0.05,95%CI：0.627~0.993),并通过最大Youden指数寻找到最佳诊断点为EPO≤58 mIU/mL。如患者EPO≤58 mIU/mL,可预测其能获得较好的治疗效果。结论 rhEPO在老年慢性病贫血中可取得较好的治疗效果,患者的EPO水平是具有较高临床意义的预测参数。     

兔脂肪干细胞(ADSCs)与聚羟基乙酸/壳聚糖(PLGA/CS)支架材料生物相容性研究

 目的  探讨兔脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)作为种子细胞复合新型聚羟基乙酸(polylactic-co-glycolic acid,PLGA)/壳聚糖(chitosan,CS)支架材料的生物相容性,为进一步构建组织工程化脂肪组织提供实验依据。方法  取雄性新西兰大白兔腹股沟脂肪组织,Ⅰ型胶原酶消化分离出ADSCs进行培养,贴壁细胞至3~5代,评价其多向分化能力。将干细胞收集重悬后,以l×107/mL的密度接种于多孔PLGA/CS支架,形成细胞 支架材料复合物。培养7天后,扫描电子显微镜观察细胞在支架材料上的黏附生长和基质分泌情况,评价细胞与支架材料的生物相容性;Dil荧光标记检测细胞在支架材料上的分布;Hochest 33258检测细胞在支架上的生长情况。接种1和7天后,分别对细胞 材料复合物行Annexin V/PI双染色法检测材料对细胞的毒性作用。用成脂诱导条件培养基诱导分化ADSCs及ADSCs支架材料复合物,7天后,尼罗红荧光染色液检测ADSCs在不同环境下的成脂分化能力。结果  原代培养的ADSCs呈成纤维细胞样外观,在相应诱导条件下能够分化为脂肪细胞和骨细胞。细胞接种于PLGA/CS支架材料上第8天分裂增殖达到高峰,扫描电子显微镜下提示ADSCs在支架表面贴附生长良好,并向孔隙内壁充分延伸,细胞周围形成丰富的基质成分。活死双染结合共聚焦显微镜显示材料对细胞活性无影响,尼罗红染色可见成脂诱导后的ADSCs细胞质内有红色脂滴颗粒形成。结论  多孔PLGA/CS支架与兔ADSCs具有良好的生物相容性,可作为构建组织工程脂肪组织的支架材料。