肝硬变内HBV DNA及其五种抗原的表达及意义

取２２５例人肝硬变活检组织石蜡切片，检测了ＨＢＶＤＮＡ及其５种抗原。分别用免疫组化ＡＢＣ法检测ＨＢｘＡｇ、ｐｒｅ－Ｓ＿１和ｐｒｅ－Ｓ＿２抗原；用ＰＡＰ法检测ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ；用原位杂交方法检测ＨＢＶＤＮＡ；用免疫组化、原位杂交双标记方法检测ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｘＡｇ或ＨＢｃＡｇ。结果显示，阳性检出率ＨＢｓＡｇ为７０．０％（１２８／１８３例），ｐｒｅ－Ｓ＿１抗原为６４．４％（８５／１３２例）、ｐｒｅ－Ｓ＿２抗原为６１．４％（８１／１３２例），ＨＢｘＡｇ为７５．３％（１１３／１５０例），ＨＢｃＡｇ为２２．４％（３９／１７４例），ＨＢＶＤＮＡ为６２．４％（５８／９３例）。双标阳性检出率ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｓＡｇ为３７．３％（１９／５１例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｘ－Ａｇ为８６．３％（４４／５１例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｃＡｇ为３９．２％（２０／５１例）。ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢＶ５种抗原阳性病例中８０％以上均伴有肝细胞不典型增生。这一结果表明，在我国肝硬变的发生发展与ＨＢＶ慢性感染有密切的关系。     

HBV感染与IgA肾病肾小管间质病变的关系

目的探讨ＩｇＡ肾病ＨＢＶ感染与肾小管间质病变的关系。方法利用原位分子杂交（ＨＢＶＤＮＡ）、免疫组化（ＨＢＡｇ、ＣＤ３、ＣＤ８）以及ＨＢＶＤＮＡＨＢＡｇ和ＨＢＡｇＣＤ４３双标记技术，对９１例ＩｇＡ肾病肾穿刺标本进行研究。结果肾组织内ＨＢＡｇ阳性率为６９．２％。ＨＢＶＤＮＡ原位杂交阳性率为４２９％。ＨＢＶＤＮＡ阳性的病例，双重标记染色发现ＨＢＶＤＮＡ阳性的肾小管上皮细胞可表达ＨＢｃＡｇ或／和ＨＢｓＡｇ。ＨＢＶ感染标记（ＨＢＶＤＮＡ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｓＡｇ）阳性组ＣＤ３阳性细胞和ＣＤ８阳性细胞数明显高于阴性组（Ｐ＜００１），并可见数量不等的Ｔ淋巴细胞入侵ＨＢｃＡｇ及ＨＢｓＡｇ阳性肾小管管壁或围绕其周围。结论感染ＨＢＶ的肾组织细胞能够表达ＨＢＡｇ，并诱导ＣＤ３阳性细胞和ＣＤ８阳性细胞浸润，从而加重肾小管、间质损害。ＨＢＶ感染对ＩｇＡ肾病的发生发展可能起着重要作用     

慢性肝炎和肝癌病人血清中乙型肝炎病毒DNA的检测

为了了解慢性肝炎和肝癌病人患者体内乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）复制与ＨＢＶ血清标志之间的关系，用酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）、聚合酶链反应（ＰＣＲ）及斑点杂交方法对６１例慢性肝炎和４７例肝癌患者的ＨＢＶ表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、相关ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）、表面抗体（抗－ＨＢｓ）、核心抗体（抗－ＨＢｃ）、相关ｅ抗体（抗－ＨＢｅ）进行了检测。结果表明：ＨＢＶＤＮＡ在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、／抗－ＨＢｃ阳性的慢性肝炎和肝癌患者血清中的检出率分别为９０．５０％和５０．００％；在ＨＢｓＡｇ／抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性者的检出率分别为４５．４０％和７．１４％；在ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阴性／抗－ＨＢｅ阴性者中的检出率分别为６０．００％和４０．００％；ＨＢｓＡｇ阴性、／抗－ＨＢｃ阳性或／抗－ＨＢｅ阳性或／抗－ＨＢｓ阳性者中的检出率分别为２０．００％和２２．２２％；在血清学指标全阴性时，慢性肝炎和肝癌患者血清中ＨＢＶＤＮＡ的检出率均为０。实验提示：无论是肝炎或肝癌，在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ同时阳性时，ＨＢＶ复制最为活跃；在单独ＨＢｓＡｇ阳性时，ＨＢＶ有一定程度的复制；ＨＢＶ复制在肝癌细胞中受到一定程度的抑制。     

乙型肝炎疫苗免疫持久性及预防效果的队列定人研究

报告了新生儿乙型肝炎疫苗免疫后１－９年乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阳转率的定人随访结果。母亲ＨＢｓＡｇ阳性和阴性免疫后的ＨＢｓＡｇ阴性者，基ＨＢｓＡｇ的年阳转率分别为０．３６％和０．０３６％，前者是后者的１０倍。母亲ＨＢｓＡｇ阳性儿中１４例ＨＢｓＡｇ阳转，其中１０／１４（７１％）发生在免疫后２－３岁；１２／１４（８６％）变成慢性ＨＢｓＡｇ携带者。母亲ＨＢｓＡｇ阴性儿共发现３例ＨＢｓＡｇ阳转，     

新生儿乙型肝炎疫苗免疫后首次检测为乙型肝炎病…

报告了新生儿乙型肝炎（乙肝）疫苗免疫后１－９年的ＨＢｓＡｇ阳性者年阴转率的定人随访结果。母亲ＨＢｓＡｇ阳性儿，乙肝疫苗免疫后首次检出的８４例ＨＢｓＡｇ阳性者，动态观察了１－９年，ＨＢｓＡｇ年抗ＨＢｓ，２／１０无抗－ＨＢｓ应答。结论：母婴阻断失败者的ＨＢｓＡｇ阳性儿，其ＨＢｓＡｇ年阴转率很低，和人群观察结果（１．１１％）相似；阴转者８０％能够产生抗－ＨＢｓＡｇ阳性儿，其ＨＢｓＡｇ年阴转率很低，和人群     

肝细胞内HBcAg和HBsAg分布的演变特点

本文报道用免疫组化（ＡＢＣ）法检测２９例慢性乙型肝炎患者肝活检组织中ＨＢｃＡｇ和ＨＢｓＡｇ分布的动态演变，结合血清ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶ ＤＮＡ的演变探讨其病毒学意义。ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶ ＤＮＡ全阳性反映ＨＢＶ高复制相，全阴性为非复制相，不一致为两相之间的过渡型（低复制相）。肝细胞内ＨＢｃＡｇ由核浆型为主演变为核型或浆型为主乃至阴性意味着ＨＢＶ从高复制相转入低复制相乃至非复制相，同时伴有血     

青岛地区乙型肝炎病毒母婴垂直传播观察

为研究青岛地区乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）母婴垂直传播情况，对１２１例母亲是ＨＢＶ无症状携带者的高危新生儿生后２４小时之内采周围静脉血监测ＨＢＶ标志物与母亲ＨＢＶ标志物进行对照分析，结果表明，新生儿ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｃＡｂ有一项阳性者８８例，ＨＢＶ感染率为７２７％（８８／１２１）。母亲ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ三项均阳性者２４例，所生新生儿ＨＢＶ一项阳性者２２例，感染率为９１６％（２２／２４）。提示母婴垂直传播是新生儿ＨＢＶ感染的重要途径，特别是ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｃＡｂ均阳性的母亲，其新生儿ＨＢＶ感染率最高，阻断ＨＢＶ母婴传播意义重大。     

婴幼儿乙型肝炎病毒表面抗原阳性者的动态转归

对５４例婴幼儿时期斩乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性者进行了动态研究。结果表明，婴幼儿ＨＢｓＡｇ阳性者的年阴转率很低，为１．０４％，ＨＢｓＡｇ阳性者年阴转率高低与母亲ＨＢｓＡｇ阳性者年阴转率高低与母亲ＨＢｓＡｇ是否阳性关系密切，与是否免疫关系为期母亲ＨＢｓＡｇ阳性者阴转率稍高。     

HbsAg ELISAg一步法评价

ＨｂｓＡｇＥＬＩＳＡｇ一步法评价刘奉亭，鲍新萍，贾钢锐，田吉美酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）一步法已广泛用于检测ＨＢｓＡｇ，抗ＨＢｓ，ＨＢｅＡｇ，抗ＨＢｅ，抗ＨＢｃ以及其它抗原和抗体［１～９］。为了评价ＥＬＩＳＡ一步法的可靠性，我们以ＨＢｓＡｇ为例，...     

广西不同人群庚型肝炎病毒感染状况的调查

目的 了解庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染在广西柳州地区不同人群中的感染状况，并比较静脉毒瘾者与健康体检者ＨＧＶ，乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）与ＨＧＶ共同感染的特点，方法 应用酶联免疫法（ＥＬＡ）检测抗－ＨＧＶ，抗－ＨＣＶ，ＨＢＶＭ（ＨＢｓＡｇ，ＨＢｓＡｂ，ＨＢｅＡｇ，ＨＢｅＡｂ，ＨＢｃＡｂ），并对抗－ＨＧＶ阳性者随机抽取２０例（１９％）进一步用逆转录套式ＰＣＲ（ＰＴ－ｎＰＣＲ）法检测     

抗HBs-HBsAg复合物诱生体液免疫应答的研究

目的研究抗ＨＢｓ－ＨＢｓＡｇ复合物在ＢＡＬＢ／ｃ小鼠诱生体液免疫应答的特点。方法分别用鼠抗ＨＢｓ－ＨＢｓＡｇ免疫原性复合物（ＩＣ）或单独ＨＢｓＡｇ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠（加或不加氢氧化铝），分析其诱生的抗ＨＢｓＩｇＧ效价及ＩｇＧ亚类。结果用ＩＣ加氢氧化铝为佐剂免疫小鼠诱生的抗ＨＢｓ中以ＩｇＧ１亚类为主，而用ＨＢｓＡｇ免疫鼠则以ＩｇＧ２ｂ亚类较高。ＩＣ不加氢氧化铝佐剂诱生的抗ＨＢｓ中ＩｇＧ１及ＩｇＧ２ａ均高于单独ＨＢｓＡｇ免疫鼠。研究还显示，抗ＨＢｓＩｇＧＦｃ段是巨噬细胞（ＭΦ）等抗原提呈细胞摄取ＩＣ的主要途径。结论抗ＨＢｓ－ＨＢｓＡｇ复合物免疫诱生的体液免疫应答较单独ＨＢｓＡｇ免疫强。抗ＨＢｓ主要通过Ｆｃ段的介导作用，改变了机体抗原提呈细胞对ＨＢｓＡｇ的摄取、加工及抗原提呈，并可增强ＨＢｓＡｇ的免疫原性。     

针对包装信号起始区的硫代反义核苷酸抗HBV的研究

目的筛选高效特异的抗ＨＢＶ反义核酸药物。方法针对ＨＢＶ包装信号ε起始区设计并合成硫代反义寡聚核苷酸（ｓ－ａｓＯＤＮ）片段，通过ＥＬＩＳＡ检测法、ＭＴＴ法、电子显微镜等观察，研究此ｓ－ａｓＯＤＮ对ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｇ表达，以及对细胞毒性，细胞形态的影响。结果针对ε起始区的ｓ－ａｓＯＤＮ显著抑制ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｇ的表达，其中，对ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｇ的抑制率分别为３８．１％和５８．７％高于Ｓ基因起始区（３２．１％和３７．２％，Ｐ＜０．０１），对ＨＢｓＡｇ抑制率为８２％，低于Ｓ基因起始区（９３．４１％），在实验浓度下ｓ－ａｓＯＤＮ对细胞无毒性，对细胞形态无影响。结论ＨＢＶ包装信号区是反义核酸抗ＨＢＶ复制研究的重要的靶序列选择区域。     

国产与进口重组酵母乙肝疫苗阻断母婴传播乙肝的研究

为评价不同重组酵母乙肝疫苗阻断乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）母婴传播的效果，将ＨＢｓＡｇ，ＡＢｅＡｇ双阳性母亲所生的１０５名婴儿分为５组，分别采用美国Ａｍｇｅｎ（１０μｇ／支），北京（５μｇ／支），美国Ｍｅｒｃｋ（５μｇ／支），日本熊本（１０μｇ／支）及康泰...     

用热启动聚合酶链反应检测血清中乙型肝炎病毒DNA技术的建立和应用

建立了热启动聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）的技术。ＰＣＲ所有反应成分被２次加样。先加Ａ液（含ｄＮＴＰｓ、一对引物和ＭｇＣｌ＿２）与一粒石蜡珠。７０℃加热后冷却至室温，使蜡珠先融化后凝固形成蜡盖封住Ａ液，然后在向其上加入Ｂ液（含耐热性ＤＮＡ聚合酶、ＨＢＶＤＮＡ模板和ＫＣｌ）并开始循环扩增。当反应管内第一次变性温度升至６０℃以上时，中隔蜡层融化，蜡上浮形成防蒸发屏障，Ａ、Ｂ两液则由于热分子运动而混匀，从而保证引物与靶基因在较高温度下严格退火以减少错导非特异性扩增和引物聚体形成。提高了ＰＣＲ的特异性和灵敏性，应用这种技术对７６例肝炎血清进行了检测，结果ＨＢＶＤＮＡ检出率为６８％，其中ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）、抗－ＨＢｃ（＋）血清检出率为１００％；ＨＢｓＡｇ（＋）、抗－ＨＢｅ（＋）、抗－ＨＢｃ（＋）血清检出率为７０％；ＨＢｓＡｇ（＋）、抗－ＨＢＣ（＋）血清检出率为８９％；抗ＨＢＣ（＋）血清检出率为对％；标记全阴性血清检出率为３３％。     

乙型肝炎病毒表面抗原定量检测临床意义的探讨

为探讨乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）定量检测作为反映乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）复制情况的临床意义,本文对２００例ＨＢｓＡｇ阳性标本分别做ＨＢｓＡｇ定量检测和ＨＮＢ－ＤＮＡ检测,血清学标志物检测,并对１０例患者地行随访检测以上项目。根据测得的ＨＢｓＡｇ含量将２００例标本分为五组,计算出各组ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率,发现随ＨＢｓＡｇ含量增高,ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率也显著增高（Ｐ〈０．０１）。根据ＨＢＶｅ系统不同模式分组显示,随ＨＢＶ感染好转,ＨＢｓＡｇ含量也随之降低（Ｐ〈０．０５）。对６例ＨＢＶ－ＤＮＡ转阴患者ＨＢＶ－ＤＮＡ转阴前后的ＨＢｓＡｇ含量比较,发现随ＨＢＶ－ＤＮＡ转阴,ＨＢｓＡｇ量也显著降低（Ｐ〈０．０１）。综合以上结果,可以说明血清中ＨＢｓＡｇ含量,可以间接反映体内ＨＢＶ的情况,ＨＢｓＡｇ定量检测可作为间接反     

黄曲霉毒素高污染区肝细胞癌p（53）蛋白与乙肝病毒感染的相关性研究

应用免疫组化ＳＰ法，检查桂西南黄曲霉毒素（ＡＦＢ１）高污染区１０９例肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中突变型ｐ５３蛋白的表达，并与相应病例中乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）的表达进行相关性研究。结果发现：ＨＣＣ中ｐ５３蛋白阳性率高达６８．８％（７５／１０９），ｐ５３蛋白表达与病人性别、肿瘤大小及有无乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染无关（Ｐ＞０．０５）。说明在ＡＦＢ１高污染区，ｐ５３基因突变是ＨＣＣ中非常普遍的现象。在ＨＣＣ病例中，ＨＢｓＡｇ阳性率为８４．２％（８５／１０１），其中同一病例ｐ５３蛋白及ＨＢｓＡｇ均为阳性者占５７．０％（５８／１０１），而ＨＢｓＡｇ阳性、突变型ｐ５３蛋白阴性者为２６．０％（２７／１０１）。表明ＨＢＶ仍然是肝细胞癌发生的主要原因，但ＨＢＶ的致癌机制具有多样性，并非均引起ｐ５３基因的改变。     

154例HBV血清学标志物阳性PCR检测结果分析

１５４例ＨＢＶ血清学标志物阳性ＰＣＲ检测结果分析黄华健邵阳市中心医院检验科为了解ＨＢＶ—ＤＮＡ与乙型肝炎５种血清学标志物——即乙肝二对半（ＨＢｓＡｇ、Ａｎｔｉ—ＨＢｓ，ＨＢｅＡｇ，Ａｎｔｉ—ＨＢｅ，Ａｎｔｉ—ＨＢｃ）之间关系，本文对１５４例乙肝二对半...     

应用重组质粒pAM－HBsAg在果蝇细胞中表达乙型肝炎病毒表面抗原及基因免疫的初步研究

应用果蝇（ＤＳ２）表达系统，构建了含有乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、摄金蛋白启动子（ＭＴｎ－ｐｒｏｍｏｔｅｒ）的共表达质粒ｐＡＭ－ＨＢｓＡｇ，转染细胞，经克隆，存活细胞株的培养上清液经硫酸铵沉淀、氯化铯（ＣＳＣｌ）密度梯度离心沉淀，获得的抗原用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、放射免疫分析（ＲＩＡ）法检测抗体，免疫吸印法（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）和电泳凝胶银染显色证实分子量为２３０００和２７０００，免疫电镜观察显示表达产物为２２ｕｍ球型颗粒，通过重金属离子（ＣｕＳＯ４、ＺｎＳＯ４）的诱导可增加抗原的表达量。用共表达质粒ｐＡＭ－ＨＢｓＡｇ的ＤＮＡ，注射Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠的股四头肌。经ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ检测抗体产生情况，结果免疫后的小鼠经硫酸锌喂养抗体高于普通喂养的小鼠。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实鼠肌肉细胞存在ＨＢｓＡｇ基因。小鼠免疫接种实验表明，ＤＳ２细胞表达的抗原与直接用ＤＮＡ含有ＨＢｓＡｇ的重组质粒）免疫小鼠均获抗ＨＢｓＡｇ的抗体。     

抗HBsAg和抗红细胞双特异Diabody的构建及表达

目的构建及表达抗乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和抗红细胞（ＲＢＣ）双特异Ｄｉａｂｏｄｙ，用于血清中ＨＢｓＡｇ的快速检测。方法将抗ＨＢｓＡｇ的人抗体轻重链可变区基因与抗红细胞的鼠抗体重轻链可变区基因交叉配对构建成两个杂合Ｄｉａｂｏｄｙ基因，并将两个配对基因组建在一个表达载体中，成为双特异Ｄｉａｂｏｄｙ表达载体，并在大肠杆菌中分泌表达。结果经ＥＬＩＳＡ检测和红细胞凝集实验测定，证明所表达的双特异性Ｄｉａｂｏｄｙ具有抗ＨＢｓＡｇ和抗ＲＢＣ双重功能，并可使含有ＨＢｓＡｇ的ＲＢＣ悬液产生血球凝集。结论所表达的双特异性Ｄｉａｂｏｄｙ具有双重抗体活性，可用于血清中ＨＢｓＡｇ的快速检测     

联合应用乙肝疫苗和HBIG阻断母婴传播效果观察

母亲ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ均阳性者所生婴儿为观察对象。分１０μｇ×３、２０μｇ×３和３０μｇ×３三组，每组又分联合组（乙肝疫苗加ＨＢＩＧ）和单苗组（单用乙肝疫苗），按０、１、６月程序肌内注射。２０μｇ和３０μｇ两组１２月龄时联合组和单苗组ＨＢｓＡｇ阳性率差别无显著性，但联合组抗－ＨＢｓ阳性率和ＧＭＴ均较单苗组为高。１０μｇ×３联合组１２月龄时ＨＢｓＡｓ感染率和３０μｇ×３单苗组相仿，用此法免疫，价格低廉，建议采用。