再生障碍性贫血患者Fas、bcl－2表达和凋亡的临床意义

再生障碍性贫血 (ＡＡ)为造血干细胞功能衰竭 ,骨髓增生低下 ,外周血全血细胞减少 ,临床表现为贫血、出血和发热的疾病。已证实ＡＡ有造血干 /祖细胞的过度凋亡[1～ 3 ] 。但ＡＡ过度凋亡机制研究不多[3～ 6] ,多涉及Ｆａｓ[2～ 5] 。ｂｃ1- 2家族中包括多种抑制凋亡基因 (以ｂｃｌ- 2为代表 )和促进凋亡基因 (以ｂａｘ为代表 )已为周知。为此 ,为进一步研究ＡＡ细胞过度凋亡的机制 ,本文分析 30例ＡＡ患者骨髓单个核细胞的Ｆａｓ、ｂｃｌ- 2表达 ,凋亡率 ,并探讨其临床意义。1　对象与方法1.1对象　收集 1999年 4月— 2 0 0 0年 3月住院初…     

细胞凋亡与再生障碍性贫血

细胞凋亡(apoptosis)或程序性细胞死亡(programmed cell death，PCD)和细胞增殖、分化一起维持着多细胞机体的平衡。造血干细胞缺乏导致造血功能衰竭一直被认为是再生障碍性贫血(aplastic anemia，AA)的主要发病机制。最近发现AA患者骨髓中CD34^ 细胞凋亡增强是其数量缺乏原因之一，并证实Fas／FasL系统参与了诱导AA患者骨髓中CD34^ 细胞凋亡。     

再生障碍性贫血造血细胞Fas抗原表达与T淋巴细胞功能的研究

目的 研究造血细胞凋亡与T淋巴细胞免疫在再生障碍性贫血(再障，Aplastic anemia，AA)发病机制中的作用及两者相关性。方法 采用流式细胞仪测定40例AA患者和15例非血液、免疫系统疾病对照者骨髓单个核细胞(BMMNC)的总CD34^ 、CD34^ Fas^ 、CD34^ Fas^-、CD3^ 、CD8^ 、CD3^ 、CD3^ CD25^ 标记值。结果 (1)与对照组比较，AA组总CD34^ 细胞％明显减少而其Fas表达率(以占总CD34^ 细胞％为计)明显增高。(2)AA组CD34^ 细胞％数与其Fas抗原表达率无明显负相关。(3)AA组T细胞％明显增多，且以CD8^ 细胞和CD3^ CD25^ 细胞增多为主。(4)AA组CD34^ 细胞％数与其T细胞活化状态无显著负相关。(5)AA组CD34^ 细胞Fas表达率与其T细胞活化状态无显著正相关。结论 AA骨髓存在着造血细胞数量减少和T淋巴细胞亚群数量、功能的异常，造血细胞数量减少还可能与Fas以外途径诱导的凋亡过度有关。骨髓造血细胞凋亡过度可能有活化T淋巴细胞免疫以外的途径诱导Fas途径或活化T淋巴细胞可以通过Fas之外的途径诱导造血细胞凋亡。     

再生障碍性贫血相关自身抗原的研究进展

再生障碍性贫血(AA)是一种典型的以骨髓衰竭综合征为特征的少见的血液系统疾病,其血象检查以全血细胞减少,网织红细胞绝对值减少为特征.免疫介导的发病机理主要是T淋巴细胞功能亢进,活化的Th1细胞释放干扰素(IFN)和肿瘤坏死因子(TNF),然后激活Fas抗原介导CD34+造血干细胞的凋亡,引起造血功能抑制[1,2].流行病学研究发现,AA的发生与药物、环境和病毒等因素有关,在肝炎流行区较为常见,既往患甲型肝炎和被病毒感染的人群更容易患病,原因可能是病毒感染后,改变自身抗原的性质,从而触发机体过度的细胞免疫反应[3].     

再生障碍性贫血动物模型研究进展

再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA),是一组造血组织功能衰竭综合征,其发病机制与造血干细胞损伤、造血微环境受损、免疫功能异常特别是 T 细胞功能亢进和细胞毒性 T 淋巴细胞直接杀伤骨髓造血干细胞以及淋巴因子介导的造血干细胞过度凋亡引起的骨髓造血细胞减少和功能衰竭有关.从病因方面AA可分为先天性和后天性...     

急性白血病Bcl-2, P-糖蛋白的表达及意义

0 引言 多药耐药基因(MDR1)及其编码产物P-糖蛋白(P-gp)是产生MDR主要机制，其过度表达与急性白血病(AL)预后密切相关[1]．抗凋亡基因bcl-2的高表达与mdr1基因一样可导致白血病细胞MDR[2,3]．     

再生障碍性贫血患者骨髓CD34~+和Fas~+细胞Fas抗原的表达

采用流式细胞术检测再生障碍性贫血 (AA ,以下简称再障 )患者骨髓CD34 + 细胞表面Fas抗原的表达 ,采用体外短期液体培养的方法研究干扰素γ(IFN γ)对AA患者骨髓CD34 + 细胞表面Fas抗原表达的影响 ,以探讨Fas介导的凋亡在AA发病中的作用。正常对照骨髓CD34 + 细胞表面Fas抗原的表达率为 ( 1 0 .0 2± 2 .33) % ,重型再障组(SAA)和慢性再障组 (CAA)分别为 ( 38.2 8± 9.0 1 ) %和 ( 2 6 .6 6± 4 .2 7) % ,SAA组和CAA组与对照组比较均有显著性差异 (P <0 .0 1 ,P <0 .0 5 ) ;SAA组与CAA组比较也有显著性差异 (P <0 .0 5 )。正常骨髓单个核细胞在含SCF、IL 3、GM SCF和EPO细胞因子组合的液体培养体系中培养 ,加入IFN γ时 ,CD34 + 细胞表面Fas抗原表达稍增高 ,AA患者骨髓在上述相同的条件下 ,CD34 + 细胞表面Fas抗原表达与正常对照骨髓比较显著增高 (P <0 .0 5 ) ,且SAA组明显高于CAA组 (P <0 .0 5 )。实验结果表明 ,AA患者骨髓CD34 + 细胞表面Fas的表达明显高于正常对照 ;AA患者骨髓单个核细胞体外培养时 ,IFN γ促使骨髓CD34 + 细胞表面Fas的表达作用较正常对照明显增强。结果提示 ,AA患者骨髓CD34 + 细胞表面Fas的异常表达可能与AA的发病有关。     

Fas/FasL系统与多发性硬化

Fas FasL是一个细胞凋亡的信号传导系统[1 ] 。Fas是细胞的一种跨膜蛋白 ,与其配体FasL结合后活化靶细胞固有的死亡程序 ,引发细胞凋亡[2 ] 。研究认为 ,Fas FasL相互作用所引发的免疫细胞凋亡在自身免疫性疾病发病中起着重要作用[3] 。多发性硬化 (multiplesclerosis ,MS)是以中枢神经系统白质脱髓鞘病变为特征的自身免疫性疾病。细胞凋亡在MS的发病机制中的作用已成为研究热点 ,而Fas FasL系统作为最重要的细胞凋亡途径备受关注。对Fas FasL系统进行研究有助于阐明MS的发病机制 ,为临床治疗提供新思路1　Fas FasL系统的分子生物…     

氧化砷诱导人肝癌细胞凋亡相关基因的实验研究

目的：探讨氧化砷（As2O3)对人肝癌细胞诱导凋亡作用的分子机制。方法：以As2O3作用于体外培养的人肝癌细胞株HepG2，通过免疫组化技术对bcl-2,bax,p53,Fas及c-myc五种基因编码蛋白的表达进行检测。结果：经As2O3作用的人肝癌细胞bcl-2基因编码蛋白表达减少，bax,Fas基因编码蛋白表达增加，p53,c-myc基因编码蛋白表达改变不明显，结论：As2O3诱导肝癌细胞凋亡分子机制可能是下调bcl-2基因编码蛋白表达，增强box,Fax基因编码蛋白表达。     

人细小病毒B19致骨髓衰竭机制的研究

目的 :探讨人细小病毒B19(HPVB19)感染致骨髓衰竭的机制。方法 :应用ELISA法检测 38例再生障碍性贫血 (AA)患儿血清中造血负调控细胞因子IL - 8,IL - 6 ,TNF -α及IFN -α水平 ,并应用原位末端标记法和免疫组化SABC法检测其中 13例患儿骨髓细胞涂片中凋亡发生情况及HPVB19感染对细胞凋亡调控基因bax ,fas和bcl- 2表达的影响。结果 :从患儿上述 4种细胞因子水平均显著高于正常对照组 (P <0 .0 1或P<0 .0 5 )。其中HPVB19阳性AA组IL - 8水平亦高于HPVB19阴性组 ,而IL - 6 ,TNF -α及IFN -α两组间无差异。对HPVB19AA组作直线相关分析显示 ,IL - 8与TNF -α和IFN -α呈正相关 ,TNF -α与IL -6呈正相关 (r分别为 0 .5 6 5 ,0 .6 0 3及 0 .86 0 ,P <0 .0 1)。 8例HPVB19阳性AA患儿骨髓涂片中均明显见到散在分布的凋亡细胞 ,高倍镜下可见到核边聚、核固缩和核碎裂等特征性凋亡改变 ;5例HPVB19阴性AA患儿骨髓涂片中 3例未见、2例偶见凋亡细胞。除 2例细胞脱片外 ,11例AA患儿骨髓涂片中均未见到bcl- 2表达 ;HPVB19阳性 6例中 3例 (5 0 % )bax和fas同时表达阳性 ,bax主要位于细胞浆中 ,为散在性分布 ,fas主要位于细胞膜上 ,亦位于细胞浆中 ;HPVB19阴性 5例中仅 1例fas表达阳性。结论 :HPVB19所致AA患儿存在明显的     

H_2O_2致Hep-G2细胞凋亡及其分子机制初探

目的本研究旨在探索H2O2 诱导Hep-G2发生凋亡及其致凋亡发生的分子机制。方法采用免疫细胞化学技术与特异性抗体初步探索了经H2O2 处理的Hep-G2细胞Fas、bcl-2、P53、P21、Caspase3等与细胞凋亡和生长抑制基因的表达情况。结果检测结果表明H2O2 处理的Hep-G2细胞的Fas和Caspase3基因表达增加, bcl-2基因表达减少,而P53、P21基因的表达未见明显改变,提示Fas、Caspase3和bcl-2基因在H2O2 诱导的细胞凋亡中起重要作用;bcl-2通过抑制诱导凋亡所致的细胞永生化,可能在肿瘤的发生、发展中起重要作用。P53、P21、保持不变,可能反映了H2O2 诱导的细胞凋亡不依赖P53途径。     

姜黄素诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的:探讨姜黄素诱导HepG2细胞凋亡的作用机制。方法:应用形态学方法、AnnexinV荧光染色和流式细胞仪(FCM)检测HepG2细胞凋亡的发生,应用RT-PCR检测凋亡相关基因P53、bcl-2和Fas的变化。结果:姜黄素对HepG2细胞的生长有明显的抑制作用,并诱导肿瘤细胞发生凋亡。凋亡细胞表现为细胞固缩,核染色质碎裂;流式细胞仪检测凋亡率为11.7%,细胞停在G1和G2期。AnnexinV标记的方法检测凋亡时发现,坏死与凋亡共存。在姜黄素诱导HepG2细胞凋亡过程中,凋亡相关基因Fas转录水平比用药前增强。结论:凋亡为姜黄素抑癌的机制之一,姜黄素诱导HepG2细胞凋亡可能与P53、bcl-2和Fas基因表达有关。     

骨髓间充质干细胞与再生障碍性贫血的研究进展

再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)是一种由造血干细胞缺陷、造血微环境损伤及免疫异常引起的骨髓造血功能衰竭以及外周全血细胞减少的综合征[1]。AA的发病机制尚未完全明确,其发病机制可能和造血干细胞的内在缺陷、造血微环境的异常以及机体免疫功能紊乱有关,而AA患者的骨髓间充质     

青藤碱诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的:探讨青藤碱诱导HepG2细胞凋亡的作用及其分子机制.方法:应用形态学方法、AnnexinV荧光染色和流式细胞仪(FCM)检测HepG2细胞凋亡的发生,定量检测Apo2.7及凋亡相关基因bcl-2和Fas的表达.结果:青藤碱对HepG2细胞的生长有明显的抑制作用,并诱导肿瘤细胞发生凋亡.凋亡细胞表现为细胞固缩,核染色质碎裂;细胞停在G1和G2期.AnnexinV标记的方法检测凋亡时发现,坏死与凋亡共存.与未用药细胞相比,用药后肝癌细胞的Apo2.7表达升高,凋亡相关基因Fas、bcl-2转录水平比用药前增强.结论:凋亡为青藤碱抑癌的机制之一,青藤碱诱导HepG2细胞凋亡可能与bcl-2和Fas基因表达,改善线粒体功能有关.     

再生障碍性贫血的免疫机制和免疫抑制治疗

近年来，有关再生障碍性贫血免疫发病机制的研究已获突破性进展，其骨髓造血功能衰竭主要与细胞毒性淋巴细胞在骨髓中增殖和活化有关，可分泌多种造血负调控因子，主要是γ干扰素和肿瘤坏死因子α等，诱导CD34^ 细胞上调Fas抗原，通过Fas/FasL启动凋亡。强烈的免疫抑制治疗已取得和异基因骨髓移植相当的疗效，使严重型再障长期生存率显著提高，获得令人鼓舞的成就。     

基于造血微环境障碍的再生障碍性贫血发病机制研究进展

再生障碍性贫血(AA)是由多种原因引起的骨髓造血功能衰竭,主要表现为骨髓造血功能低下、全血细胞减少和贫血、出血、感染综合征,其发病机制十分复杂。近年来越来越多的研究证明,其发病与造血微环境障碍密切相关。对骨髓造血微环境的研究,不仅为AA的诊断提供了更可靠的依据,也为AA的治疗开辟了新的方向。     

金葡菌及其L型诱导脐静脉内皮细胞凋亡及相关基因的研究

目的:探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌)及其L型诱导细胞凋亡的作用及可能的分子机制.方法:用流式细胞术检测金葡菌及其L型感染人脐静脉内皮细胞(HUVECs) 后2 h、4 h、6 h、8 h和10 h的细胞凋亡率,并同时用免疫组化方法检测各时间点bcl-2及Fas基因的表达情况. 结果:金葡菌及其L型均能诱导HUVECs发生凋亡,与对照组比较差异有显著性(P<0.05～P<0.01).金葡菌L型诱导细胞的凋亡率均低于金葡菌(P<0.01);bcl-2及Fas基因表达率在感染后6 h与对照组比较差异均有显著性(P<0.01),在诱导的时间内bcl-2基因表达率逐渐降低,而Fas基因表达率逐渐增加(P<0.01).结论:金葡菌及其L型均能诱导HUVEC发生凋亡,其机制可能与下调bcl-2蛋白及上调Fas蛋白有关.     

辅助性T细胞与再生障碍性贫血的关系及研究展望

[目的]综述了Th细胞各亚群与再生障碍性贫血（aplastic anemia,AA）相关的发病机制,并针对其近来的研究进行展望。[方法]查阅近10年国内相关文献资料并总结Th1/Th2失衡机制、滤泡辅助性T细胞（Tfh）,Thl7,Th9和Th22与AA的关系。[结果]Th1/Th2细胞比例失衡,可引起骨髓造血功能衰竭。免疫抑制治疗可抑制Th1细胞,恢复Th1/Th2比例平衡,从而使造血功能恢复。Tfh、Thl7、Th9和Th22与AA的发病机制密切相关。[结论]AA的免疫发病机制复杂,CD4＋的细胞亚群及其多种相关的细胞因子与AA发生发展相关,全面检测AA患者血清中各种免疫细胞的比例变化和相关免疫功能分子的水平变化有利于AA的诊治。     

愈障汤对慢性再生障碍性贫血患者骨髓CD34^＋细胞bcl—2表达的影响

目的探讨愈障汤治疗慢性再生障碍性盆血(CAA)的作用机制.方法对愈障汤治疗的39例CAA患者分别于治疗前后采用磁式细胞分选器(MACS)分离纯化骨髓CD34+细胞;采用SABC亲和细胞法和CMIAS系列多功能真彩图像分析仪检测骨髓CD34+细胞bcl-2的表达,并与26例健康对照组比较.结果CAA患者骨髓CD34+细胞bcl-2蛋白表达的阳性率和OD值治疗前均较健康组减低(P＜0.01),治疗后显著升高(P＜0.01),bcl-2蛋白表达与临床疗效呈正相关.结论愈障汤治疗CAA的作用机制可能是通过上调凋亡抑制基因bcl-2的表达,从而阻抑了骨髓CD34+细胞的过度凋亡.     

再生障碍性贫血治疗进展

再生障碍性贫血 (aplasticanemia,AA)是一组由多种原因 ,通过不同机制引起的异质性疾病 ,最终均存在骨髓造血干 /祖细胞细胞缺乏。造成造血细胞减少的机制比较复杂 ,近年来不少研究表明 ,凋亡增加是AA患者造血细胞减少的一个重要原因 ,凋亡增加不仅累及了骨髓中的造血干 /祖细胞 ,而且还累及了外周血中分化成熟的血细胞 ,它是导致AA骨髓造血干 /祖细胞池耗竭和外周血三系细胞减少的重要原因。本文就这方面治疗及进展作一简述。1 一般及对症治疗尽早寻找和去除病因 ,并中断其接触以利造血功能的恢复。血红蛋白小于 60g/L可以输血或成分输…