自体骨骼肌成肌细胞移植对心肌梗死兔心室重构和血管新生的影响

目的观察经冠状动脉途径移植自体骨骼肌成肌细胞(SMs)对急性心肌梗死兔心室重构和血管新生的影响。方法取日本大耳白兔45只,随机分为3组:经冠状动脉注射SMs移植组(移植组)、对照组和假手术组,每组15只。术后4周,检测各组免左心室质量及左心室质量指数,并以免疫组织化学法和ELISA法分别检测各组兔新生血管数目和血管内皮生长因子(VEGF)浓度。结果术后4周,与假手术组比较,移植组和对照组左心室质量及左心室质量指数明显增加(P0.01);与对照组比较,移植组左心室质量及左心室质量指数明显降低(P0.01)。与假手术组比较,对照组和移植组新生血管数目、梗死心肌组织中VEGF浓度明显增多,而移植组较对照组增多更明显(P0.05,P0.01)。结论经冠状动脉途径自体SMs移植可增加VEGF表达,诱导血管新生,改善心肌梗死后心室重构。     

冠脉内移植自体骨髓单个核细胞对猪急性心肌梗死后心功能的影响

目的探讨冠脉内移植自体骨髓单个核细胞（BM—MNCs）对猪急性心肌梗死后心功能的影响。方法实验动物分为冠脉内移植BM—MNCs组（n=6）及冠脉对照组（n=5）,移植细胞数2×10^8。移植后4周观察心功能变化及冠脉侧支循环形成情况。结果冠脉内BM—MNCs移植后4周移植组左室射血分数[LVEF：（65．84±4．94）％]及短轴缩短率[FS：（43．21±5．49）％]明显高于对照组[LVEF：（47．21±6．32）％,FS：（27．31±4．07）％]（P〈0．01）,而左室舒张末压[LVDEP：（7．94±4．57）mmHg]明显低于对照组[（22．56±5．97）mmHg]（P〈0．01）,左室舒张末期内径[LVEDd：（27．27±2．38）mm]低于对照组[（37．82±6．96）mm]（P〈0．05）;移植组冠脉侧支循环形成较对照组明显;移植后1周血清bFGF及VEGF浓度明显高于对照组及术前水平（P〈0．01）。结论经冠脉移植BM—MNCs有助于改善左室收缩功能及舒张功能,有助于减轻心室重构。     

经冠脉注射法移植成年犬自体骨骼肌成肌细胞治疗急性心肌梗死的疗效研究

目的观察经冠状动脉内注射法移植自体骨骼肌成肌细胞治疗急性心肌梗死的疗效。方法以改良成年犬骨骼肌成肌细胞培养方法进行细胞分离及扩增；结扎冠状动脉前降支中段，建立急性心肌梗死模型；分为冠脉内注射对照及冠脉内成肌细胞注射组，每组8只；冠状动脉结扎前、后及4周时测定左室功能指标、4周时行超声心动图检查。结果自体骨骼肌成肌细胞经冠脉注射移植组术后4周CO比对照组显著增加（P〈0．05）且比冠脉结扎后显著升高（P〈0．05）；术后4周时LVEF和SV比对照组上升21．1％～31．4％（P均〉0．05）。结论经冠脉内注射移植自体骨骼肌成肌细胞可能提高急性心肌梗死后收缩功能。     

经冠状动脉移植自体BM-MNCs治疗猪急性心肌梗死的作用

目的探讨冠状动脉内移植自体骨髓单个核细胞（BM—MNCs）治疗猪急性心肌梗死的有效性。方法实验动物分为冠脉内移植MNCs组（n=6）及冠脉对照组（n=5）。冠脉内移植BM—MNCs后4周观察移植细胞归巢情况、小血管密度、心功能变化。结果冠脉内MNCs移植后4周,心肌细胞间可见发蓝色荧光的移植细胞,散在分布,心肌细胞间有较多新生毛细血管并可见新生的心肌样细胞。移植组小血管密度、左室射血分数（LVEF）及短轴缩短率（FS）明显高于对照组（P〈0．01）,左室舒张末期内径（LVEDd）低于对照组（P〈0．05）。结论经冠脉移植的BM—MNCs可归巢到宿主心肌,有促进缺血心肌血管新生、改善左室收缩功能、减轻心室重构的作用。     

间充质干细胞移植对兔粥样硬化颈动脉损伤后再狭窄的影响

目的探讨间充质干细胞（mesenchymals temcells,MSCs）对球囊损伤的粥样硬化颈动脉再狭窄的影响及可能的作用机制。方法制作颈动脉粥样硬化狭窄大白兔模型38只。分为MSCs移植组（n=28）和对照组（n=10）。MSCs移植组于球囊损伤前经外周血采集MSCs并体外培养扩增,于球囊损伤后即刻、1周和2周经静脉移植MSCs,而对照组给予等量生理盐水。于球囊损伤后4周收集血管标本,经免疫化学染色后观察血管病理形态学特点、计算新生内膜和中膜面积并检测增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）。结果①MSCs移植组外周血分离MSCs经荧光激活细胞分类术（FCAS）鉴定,其表面抗原CD44阳性而CD34和CD45阴性,纯度达95％以上;②MSCs移植组颈动脉内皮细胞少量缺失,管壁部分区域轻度增厚,管腔轻度狭窄,增厚处中膜可见少量泡沫细胞沉积,部分区域伴少量纤维组织增生,呈动脉粥样硬化早中期（脂质条纹-纤维斑块期）改变,而对照组颈动脉见内皮细胞片状缺失,动脉管壁全周明显增厚,管腔狭窄较明显,内膜管腔面可见纤维组织增生形成纤维帽,纤维帽下中膜内可见较多的泡沫细胞沉积,并伴有淡红染无定形物质形成,呈动脉粥样硬化中晚期（纤维斑块-粥样斑块期）改变;⑧与对照组相比较,MSCs移植组新生内膜面积和中膜面积均明显减少,差异有统计学意义[（0．336±0．018）mm^2比（0．845±0．046）mm^2,P〈0．01;（0．245±0．017）mm^2比（0．951±0．024）mm^2,P〈0．01];而两组间新生内膜面积／中膜面积,差异无统计学意义[（1．371±0．158）比（1．534±0．014）,P〉0．05]。同时,血管壁PCNA测定显示：MSCs移植组PCNA阳性细胞率显著低于对照组（0．236％±0．014％比0．881％±0．017％,P〈0．05）。结论MSCs静脉移植可明显降低兔球囊损伤动脉粥样硬化颈动脉的新生内膜增生,促进损伤内皮再生。     

心肌梗死后骨髓间充质干细胞移植对心室肌细胞复极活动的影响

目的调查心肌梗死后植入骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）对心室肌细胞复极活动的影响。方法10只健康幼猪作为正常对照组，23只幼猪通过球囊导管堵闭左冠状动脉前降支法建立心肌梗死模型并分别移植MSCs悬液（干细胞组，n=13）或等量生理盐水（梗死组，n=10），6周后行心肌组织免疫组化双染色、左心室血流动力学及左心室肌细胞复极活动的检查。结果（1）心肌组织免疫组化双染色示，MSCs源性细胞集中分布于梗死区，胞浆中出现了肌钙蛋白T（troponinT）；（2）干细胞组左心室射血分数、左心室收缩压和舒张末压虽未恢复正常（与对照组相比，P均〈0．01），但较梗死组均改善（P均〈0．05）；（3）梗死组和干细胞组动作电位复极90％的时间（APD90）、复极时间（RT）、APD和RT离散度值较对照组均延长（P均〈0．01），但干细胞组较梗死组显著缩短（P〈0．05—0．01）；（4）对照组APD重建曲线斜率〈1（正常），而干细胞组和梗死组APD重建曲线斜率均〉1（异常），但前者斜率明显小于后者；（5）干细胞组诱发APD交替的阈值周长虽高于对照组（P〈0．01），却低于梗死组（P〈0．05）。结论MSCs移植可减轻梗死心室复极紊乱，其机制可能与MSCs参与心肌组织修复、改善血流动力学水平有关。     

骨髓间充质干细胞移植对心力衰竭大鼠心功能的影响

目的探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）对心衰大鼠心功能的影响及其机制。方法腹腔注射阿霉素（2mg／kg,每周1次,连续6周）至近交系F344大鼠体内,建立心衰大鼠模型。存活大鼠（32只）随机分为2组：心衰组（16只）和细胞移植组（16只）。分离纯化大鼠MSCs进行体外培养,予4,6-联脒-2-苯基吲哚（DAPI）进行标记;经股静脉注射MSCs或DMEM至心衰大鼠体内。细胞移植后4周,应用多导生理记录仪测量大鼠心功能;通过免疫组织荧光及化学染色,观察移植细胞存活情况,并计算血管数量;通过天狼猩红染色计算心肌胶原容积分数（CVF）和血管周围胶原面积（PVCA）。结果移植后4周,细胞移植组大鼠心肌组织见到DAPI标记的移植细胞存活,并表达心肌特异性抗原心肌肌球蛋白重链（β—MHC）。与心衰组相比,细胞移植组最大左室收缩末压（LVSP）、左室内压最大（最小）变化速率（LV＋dp／dtmax）均明显升高（P〈0．05）,而左室舒张末压（LVDP）明显下降（P〈0．05）;细胞移植组左室血管数量明显高于心衰组[（11．83±1．40）个比（7．78±1．39）个,P〈O．05],细胞移植组左心室内膜CVF及PVCA明显低于心衰组（4．53±1．98比7．79±1．99,10．91±2．31比14．17±2．49,P〈0．05）。结论MSCs移植可改善心衰大鼠心功能,其机制可能与MSCs归巢至心脏,分化为心肌样细胞,并且促进血管新生、抑制心肌纤维化有关。     

经静脉移植骨髓间质干细胞对急性心肌梗死大鼠心功能的影响

目的观察经静脉移植骨髓间质干细胞对急性心肌梗死大鼠心功能的影响。方法将30只SD大鼠随机分为移植组和对照组各15只,结扎冠状动脉左前降支建立大鼠急性心肌梗死模型;体外分离纯化、扩增同种异体大鼠骨髓间质干细胞（MSCs）,4,6二脒基-2-苯吲哚（DAPI）标记。移植组于造模后24h经尾静脉移植MSCs,对照组注射等量培养基。造模后4周测定心功能并行免疫组织化学检测。结果与对照组相比,移植组左心室舒张末压下降,左心室收缩压、左心室压力最大上升和下降速率显著升高（P均〈0．05）;心肌梗死区毛细血管密度明显增高（P〈0．05）。移植组大鼠梗死心肌中可见DAPI标记阳性细胞。结论经静脉移植MSCs能够提高急性心肌梗死大鼠的心功能。     

缺血预处理间充质干细胞移植治疗心肌梗死实验研究

目的探讨静脉移植缺血预处理的间充质干细胞（MSCs）对梗死心肌的修复作用。方法选择纯种大白兔46只制作心肌梗死模型,分为缺氧预处理MSCs移植组（A组）、非缺氧预处理MSCs移植组（B组）和对照组,于心肌梗死后30d分别检测心功能、梗死心肌的形态学变化以及新生毛细血管密度。结果与对照组比较,A、B组左心室收缩末期内径、舒张末期内径降低,心功能提高,室壁厚度增加,心肌梗死面积缩小,梗死区和梗死边缘区新生毛细血管密度增加（P〈0．05）。结论MSCs移植治疗兔心肌梗死可改善心功能、缩小梗死面积、增加梗死心肌新生毛细血管密度,经缺氧预处理的MSCs移植治疗更有优势。     

自体成肌细胞和骨髓间充质干细胞移植对缺血坏死心肌的修复作用

目的 观察自体骨骼肌成肌细胞(SMs)和骨髓间充质干细胞(BMSCs)经冠脉移植至缺血坏死心肌后的分化情况及对缺血坏死心肌的修复作用.方法 取日本大耳白兔45只,随机分为SMs、BMSCs移植组和对照组,每组15只.移植组分别取臀肌和骨髓体外培养SMs和BMSCs.各组均结扎左前降支建立缺血坏死心肌模型.分别于再灌注后1 h经左前降支注射5-溴脱氧尿核苷(BrdU)标记的SMs、BMSCs悬液1 ml(5×1012个/L)或等量DMEM培养液.移植后24 h和4周用超声心动仪检查心脏功能变化.移植后4周以病理组织学检查HE染色及BrdU抗体、结蛋白(Desmin)抗体和骨骼肌特异性慢肌球蛋白重链(Slow-MHC)单克隆抗体,免疫组化染色评价移植细胞的分化情况.结果 移植后4周,SMs和BMSCs组在左室射血分数[(61.9±3.6)%、(62.4±2.6)%]和左室短轴收缩率[(31.6±2.3)%、(30.8±1.9)%]较对照组[(53.2 ±2.3)%、(23.8±0.9)%]均有明显改善(P＜0.05);SMs与BMSCs组比较差异无统计学意义(P＞0.05);HE染色显示移植组心肌纤维排列有序,其中SMs组可见新生的多核肌样细胞.移植SMs和BMSCs BrdU抗体免疫组化染色阳性.SMs组SMsDesmin抗体和Slow-MHC单克隆抗体免疫组化染色阳性.结论 经冠脉自体移植的SMs和BMSCs可在缺血坏死心肌内存活.对心肌损伤具有修复作用,并同等程度地提高了心脏功能.     

Bone marrow mesenchymal stromal cells (BM-MSCs) from healthy donors and auto-immune disease patients reduce the proliferation of autologous- and allogeneic-stimulated lymphocytes in vitro

OBJECTIVES: To investigate the ability of bone marrow (BM)-derived mesenchymal stromal cells (BM-MSCs) in suppressing the proliferation of stimulated lymphocytes across a range of conditions including autologous BM-MSCs derived from autoimmune disease (AD) patients. METHODS: In vitro cultures of BM-MSCs from healthy donors and AD patients were established and characterized by their differentiation potential into adipocytes and osteoblasts, and their fibroblast-colony-forming unit (CFU-F) ability and phenotype by flow cytometry. BM-MSCs (irradiated and non-irradiated) from healthy and AD patients were tested for their ability to suppress the in vitro proliferation of autologous and allogeneic peripheral blood mononuclear cells (PBMC) (from healthy donors and patients suffering from various ADs) stimulated with anti-CD3epsilon antibody alone or in combination with anti-CD28 antibody. The anti-proliferative effect of the BM-MSCs from healthy donors was tested also on transformed B-cell lines as a model of non-antigen-stimulated lymphocytes. RESULTS: BM-MSCs from healthy donors and AD patients reduced the proliferation of autologous and allogeneic PBMCs by up to 90% in a cell dose-dependent fashion. The immunosuppression was independent of the proliferation of the BM-MSCs and was also effective on already proliferating cells. It was independent also of the clinical activity of AD. An MSC dose-dependent pattern of suppression of proliferation was observed also with transformed B-cell lines, similar to that observed with proliferating PBMC. CONCLUSIONS: The BM-MSCs exhibit extensive anti-proliferative properties against lymphocytes under different conditions. This property might offer a form of immunomodulatory cellular therapy for AD patients if further confirmed in animal models.     

兔冠状动脉结扎后心肌间质变化及黄芪的影响

以开胸冠状动脉结扎法制备兔急性心肌梗死（AMI）模型，并设假手术对照组，各25只。AMI组中12只（随机分组）肌注黄茂注射液，另13只同期注射等量生理盐水，各2周。模型制备成功后6周再次开胸取出心脏，取左室壁心肌组织测定羟脯氨酸含量。结果：AMI组梗死区心肌羟脯氨酸含量明显高于周边区心肌及对照组（均P＜0．01），黄芪注射组与生理盐水注射组心肌羟脯氨酸含量无明显差异（P＞0．05）。结论；①胶原基质在AMI后左室重构中起一定作用；②该模型确实可靠，心肌羟脯氨酸测定可用来评价AMI模型制作方法成功与否；③黄芪无明显作用。     

慢性充血性心力衰竭心脏干细胞移植后心肌电生理学特性的变化

研究慢性充血性心力衰竭(简称心衰)时,干细胞移植对心肌电生理学特性的影响。日本大耳白兔分为健康对照(8只)和心衰两大组,后者包括骨髓间充质细胞移植组(8只)、骨骼肌成肌细胞移植组(6只)和假手术组(8只)。慢性心衰模型由阿霉素制成。干细胞移植采用经双球囊封堵主动脉窦上部灌注自体骨髓间充质细胞或骨骼肌成肌细胞。比较干细胞移植前后心功能有无变化。测定多部位的有效不应期(ERP)及离散度(ERPd);右室流出道、左室心尖部或室间隔连续刺激(S1S1)或早搏刺激时,其它各部位的兴奋传导时间(AT)和兴奋传导时间离散度(ATd),比较各组间有无差异。结果:骨髓间充质细胞移植4周后,左室射血分数有改善的趋势。各组间ERP及ERPd无差异。与健康对照组和假手术组相比,骨骼肌成肌细胞移植组和骨髓间充质细胞移植组的AT和ATd有增加,在骨骼肌成肌细胞移植组更加明显。AT和ATd的变化在左室心尖部刺激时最为显著。在骨髓间充质细胞移植组,出现1例自发性室性心动过速,并猝死。结论:慢性充血性心衰时,干细胞自体心脏移植后,心肌组织的电传导能力下降,离散度增大。     

阿托伐他汀对血脂正常兔急性心肌梗死再灌注后梗死范围的影响

目的 探讨阿托伐他汀预处理对急性心肌梗死后再灌注损伤的保护作用及作用机制.方法 采用结扎冠状动脉左前降支3 h后再开放60 min的方法,建立兔急性心肌梗死再灌注模型.20只兔随机分为4组:A组,急性心肌梗死再灌注组;B组,阿托伐他汀 急性心肌梗死再灌注组;C组,格列苯脲 急性心肌梗死再灌注组;D组,格列苯脲 阿托伐他汀 急性心肌梗死再灌注组.再灌注后测定各组血清CK-MB活性,应用20%伊文氏蓝及1%氯化三苯四唑啉染色后计算心肌梗死面积.结果 B组心肌梗死面积及CK-MB活性较A组和C组显著减少(P<0.01),C组与A组相似(P>0.05),D组较A组显著减小(P<0.05),但仍明显高于B组(P<0.05).结论 阿托伐他汀可明显减小心肌梗死面积,对急性心肌梗死再灌注损伤具有保护作用,这可能与阿托伐他汀激活ATP敏感性钾通道有关.     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的时机选择

目的:评价不同时机骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗急性心肌梗死(AMI)的疗效.方法:44例首次急性ST段抬高型AMI患者,在急诊成功开通梗死相关冠状动脉后随机分为AMI后第1周移植组(A组,10例)、AMI后第2、第3周移植组(B组,10例)、AMI后第4至6周移植组(C组,11例)和对照组(仅行PCI术,不进行骨髓穿刺或冠状动脉内输注,13例).各组于AMI后3 d、6个月行经胸超声心动图,采用99MTc-MIBI核素的单光子放射计算机断层显像术进行心肌灌注显像.结果:与对照组相比,A组和B组左室射血分数显著提高,心肌灌注缺损指数明显下降.A组与B组间未见明显差异,而C组与对照组相比亦未见明显差异.A组、B组、C组均未出现恶性心律失常和其他严重并发症.结论:AMI急诊介入术后行BMSCs移植是安全的.AMI后前3周行BMSCs移植比较理想.     

肾脏短暂缺血对急性心肌梗死后QT离散度的影响

目的 :明确肾脏短暂缺血预处理对急性心肌梗死 （AMI）后 QT间期离散度 （QTd）变化的影响。方法 :观察单纯 AMI组 （A组 ）和肾脏缺血预处理 （RIP）组 （B组 ）新西兰兔在 AMI前后的 QTd和室性早搏发生率 ,并行心内电生理诱发室性心动过速 （VT） ,对两组的指标进行比较 ,同时设置假手术组 （C组 ）作对照。结果 :3组在手术前 QTd比较无显著性差异 （P>0 .0 5 ） ;C组手术前后 QTd比较无显著差异 （P>0 .0 5 ） ;在 AMI后 ,B组 QTd显著短于 A组 （P<0 .0 1）。结论 ::RIP可缩短 AMI后 QTd,并减少室性心律失常的发生。     

交感神经对急性心肌梗塞后QT间期离散度的影响

目的本研究采用动物实验方法,旨在探讨交感神经对急性心肌梗塞(AMI)后QT间期离散度(QTd)变化的影响.方法观察去心交感神经组(A组)与保留心交感神经组(B组)新西兰兔在AMI前后的QTd,并行心内电生理检查诱发室性心动过速,对两组各指标进行比较,同时设置假手术组(C组)作为对照.结果C组在手术前后QTd比较无显著性差异(P＞0.05);A组去心交感神经前QTd与B组比较无显著性差异(P＞0.05);A组去心交感神经后QTd较前明显减小有显著性差异(P＜0.05).在AMI后B组QTd大于A组有非常显著性差异(P＜0.01);A组AMI前后QTd虽有变化,但无显著性差异(P＞0.05);而B组AMI后QTd大于AMI前有非常显著性差异(P＜0.001);B组室性心动过速诱发率高于A组有显著性差异(P＜0.05).结论在AMI的新西兰兔模型中,B组QTd显著大于A组,且更易诱发室性心动过速.提示交感神经活性增强在AMI后QTd变化及室性心律失常发生中起重要作用.     

心脏缺血预处理对急性心肌梗死后QT间期离散度的影响

目的　采用动物实验方法 ,探讨心肌缺血预处理 (MIP)对急性心肌梗死 (AMI)后QT间期离散度 (QTd)变化的影响。方法　观察AMI组 (A组 )与MIP组 (B组 )新西兰兔在AMI后的QTd ,并行心内电生理检查诱发室性心动过速 (VT) ,对两组的指标进行比较 ,同时设置假手术组 (C组 )作对照。结果　 3组手术前QTd比较著差异无显著性 (P 0 0 5 ) ;C组手术前后比较差异亦无显著性 (P 0 0 5 ) ;B组MIP前QTd与A组比较差异无显著性(P >0 0 5 ) ,在AMI后 ,B组QTd明显小于A组 (P <0 0 0 1)。结论　在AMI的家兔模型 ,B组QTd及诱发VT的发生率显著低于A组 ,提示MIP可以少AMI的QTd变化及室性心律失常发生。     

自体外周血干细胞移植治疗急性心肌梗死对左心室功能的影响研究

目的探讨自体外周血干细胞(PBSCs)移植治疗急性心肌梗死(AMI)对左心室功能的影响。方法选择2003年11月至2005年9月辽宁省人民医院收治的69例AMI患者,分成干细胞移植组35例和对照组34例,两组均接受药物和冠状动脉内介入治疗,干细胞移植组在此基础上动员自体骨髓干细胞,进行外周血干细胞移植。两组均于治疗前、治疗后6个月进行超声心动图检查。结果6个月时干细胞移植组心脏收缩末容积(ESV)明显减小(P<0·05);舒张末容积(EDV)无显著性变化(P>0·05);左室射血分数(LVEF)显著增高(P<0·05);左室壁节段性运动积分指数(WMSI)明显减低(P<0·001);对照组于介入术前及术后6个月随访ESV、EDV、LVEF及WMSI差异均无显著性意义;术后6个月随访移植组与对照组比较ESV下降,LVEF升高,WMSI降低(P<0·05)。结论自体外周血干细胞治疗AMI可以在近期有效地缩小缺血梗死面积,减轻左室重构,改善心功能。