胚胎移植与囊胚移植的临床结局分析*

背景：国内关于卵裂期胚胎移植与囊胚移植的临床比较与分析大样本报道较少见。 目的：比较第2,3天卵裂期胚胎移植与第5天囊胚移植的临床结局。 方法：选择2008-01/2009-12北京大学深圳医院生殖医学科行体外受精/卵胞浆内单精子显微注射共1612周期,比较第2,3天卵裂期胚胎移植与第5天囊胚移植的临床妊娠率、胚胎种植率、流产率、多胎率、出生婴儿性别比例等差异。 结果与结论：第2,3,5天移植组分别195,1 162,255周期,临床妊娠率分别为33.33%,38.04%,44.71%,种植率分别为21.37%,24.70%,31.96%;第5天移植组临床妊娠率和种植率均高于第2,3天移植组(P < 0.05);第2天移植组宫外孕发生率高于第3天移植组(P < 0.05)。3组流产、单卵双胎、多胎、早产及出生婴儿性别比例无差异。说明囊胚移植提高了临床妊娠率和种植率的同时,未增加流产、多胎、早产等风险,对男女性别比例的平衡无负面影响。     

雪旺氏细胞脑内移植前的体外培养

目的 介绍新生鼠Schwann细胞培养方法，为今后临床Schwann细胞移植提供实验基础。方法 采用坐骨神经组织块反复种植同时加刺激因子forskolin和BTI培养Schwann细胞。相差显微镜形态学连续观察及间接免疫荧光染色显示Schwann细胞胶质特异性标志蛋白S100表达和BrdU掺入。结果 形态学连续观察和S100间接免疫荧光染色都显示，Schwann细胞纯度可达98％-99％；BrdU掺入显示Schwann细胞增殖活性很强。结论 坐骨神经组织块反复种植同时加刺激因子forskolin和BTI不失为Schwann细胞培养好方法。此方法简便、快速，可在短时间内获得大量高纯度、有活性的Schwann细胞。     

囊胚玻璃化冻存前激光打孔对冻融后移植效果的影响

背景：一系列研究均表明人工皱缩囊胚腔能明显提高囊胚的玻璃化冻融效果,但在皱缩过程中采用的物理方法和使用材料的不同可能会造成囊胚细胞的机械性损伤。 目的：探讨囊胚玻璃化冻存前激光打孔对冻融后移植效果的影响。 方法：3例不孕患者,平均年龄30岁,于囊胚玻璃化冻存前行激光打孔使囊胚皱缩,平均冻存时间为1年,确定移植前给予解冻。 结果与结论：3例患者中有2例取得了满意的妊娠结局,1例未妊娠。说明采用激光辅助打孔的方法使囊胚皱缩,结合玻璃化冻融后行囊胚移植安全有效。     

牛软骨样细胞原代培养及异种移植组织相容性观察

目的：探索牛椎间盘髓核软骨样细胞原代、传代培养方法,观察其植入兔椎间盘中组织相容性。方法：提取新鲜的牛尾椎间盘中的髓核组织,经过连续的链酶蛋白酶及II型胶原酶消化,台盼蓝染色估计原代细胞的活性。在DMEM/F12培养基中加入10%FBS培养并观察其变化。经腹后外侧途径采用微量加样针将扩增过的牛软骨样细胞注入兔子的椎间盘中。分别在移植术后的2w,4w,6w及8w收集接受牛髓核细胞移植的兔子椎间盘,以冰冻免疫组化检测局部有无B,T淋巴细胞的浸润,判断是否发生免疫排异反应。结果：（1）成功分离出活性在95%以上牛的软骨样细胞,并在体外进行了传代扩增培养培养（2）在特定时间点对处理组椎间盘行抗兔CD4、CD5染色未发现阳性结果。结论：高活性牛椎间盘内软骨样细胞的提取和传代培养具有可行性,移植入兔子的椎间盘8周内经冰冻免疫组化检测未发现有免疫排异反应。     

肌细胞培养及移植在DMD疾病中的研究

本文综述近年来肌细胞培养及移植在DMD疾病中的研究进展,对正常和DMD肌细胞体外培养技术,生物学特征,生化、免疫研究及细胞移植等问题作了阐述。     

大鼠胚胎大脑皮层脑片培养及移植的实验研究

目的：研究经体外培养的胚胎大脑皮片能否提高在脑移植术后的生存率及生存质量,及大脑皮层损伤后立即行脑移植与伤后第７～９天行脑移植对移植物的生存情况有否影响。方法：取ＳＤ胚胎大鼠大脑皮层制成脑片,对Ａ组大鼠在大脑皮层造腔后立即进行移植,对Ｂ组大鼠在大脑皮层造腔后第９天用未经培养的胚胎脑片进行移植。Ｃ组为对胚胎脑片进行原代培养７天后对已行损伤脑皮质造腔后第９天的ＳＤ大鼠进行脑移植。Ｄ组为空白对照组。结果：Ｃ组移植神经之存活率明显高于Ａ、Ｂ组,宿主对移植物的排异反应Ａ、Ｂ组比Ｃ组明显,Ｃ组移植物与宿主脑产生了良好的整合,有较为丰富的纤维联系。结论：对胚胎大脑脑片进行原代培养,在受体鼠大脑造腔处术后第９天进行脑移植能明显提高移植神经元的成活率及与宿主脑形成更好的整合关系。     

骨髓基质细胞移植治疗脑损伤研究进展

实验研究已证明骨髓基质细胞(MSCs)可以分化成多种神经细胞，脑实质内直接注射、脑脊液内注射或血管内注射移植后能促进脑损伤修复。血脑屏障的通透性可影响移植细胞进入脑内。MSCs移植的作用机制主要为替代受损细胞和产生内源性因子两种途径。对移植治疗效果的评估可能受到一些因素的影响。虽然仍存在一些尚待解决的问题．但MSCs移植治疗脑损伤是一种很有前途的治疗方法。     

《嗅鞘细胞移植》出版

由黄红云教授主编的《嗅鞘细胞移植》一书，于2007年7月由北京科学出版社出版。该书是第一部关于嗅鞘细胞基础与临床应用研究的学术专著，涵盖了当今关于嗅鞘细胞基础研究领域的主要内容，基于1000余例嗅鞘细胞移植治疗神经系统难治性疾病患者的实践经验，提出了临床治疗新理念和原创性干预策略，反映了当前国际中枢神经修复、功能重建和治疗的前沿水平。[第一段]     

骨髓基质细胞成年大鼠脑内移植

目的 研究骨髓基质细胞脑内移植后的分布和移行，为细胞移植治疗疾病奠定基础。方法 常规培养大鼠骨髓基质细胞，应用免疫组织学方法对细胞进行鉴定，Hoechst33258标记细胞，立体定向移植到大鼠的纹状体，经过一段时间后处死大鼠，脑组织切片，直接在荧光显微镜下检查存活的细胞。结果 细胞移植到大鼠脑内能够长时间存活，移植细胞与宿主细胞有很好的相容性，宿主脑组织的结构无破坏，移植细胞能够移行一段距离，说明脑内存在的信号诱导细胞向一定的方向迁徙。结论 骨髓基质细胞脑内移植后，能够与宿主脑组织整合在一起，无细胞过度增生和胶质瘢痕形成，这种细胞可能成为中枢神经系统自体移植的细胞来源。     

影响玻璃化冻融胚胎移植结局的相关因素分析

【摘要】目的 探讨辅助生殖技术中影响玻璃化冻融胚胎移植结局的相关因素。方法 对142例共154个周期的相关资料进行回顾性统计学分析,根据患者年龄、胚胎发育时期、受精方式、子宫内膜准备方案、移植日子宫内膜厚度、移植过程是否顺利和胚胎解冻复苏后成活细胞比例进行分组，比较各类分组的胚胎种植率和临床妊娠率。结果 不同年龄、受精方式、子宫内膜准备方案、子宫内膜厚度和移植过程是否顺利组间胚胎种植率及临床妊娠率无显著性差异(P>O.05)；受精第二天的胚胎冻融（D2）组和受精第三天的胚胎冻融（D3）组的临床妊娠率没有显著性差异，但胚胎种植率D3组明显高于D2组。胚胎复苏后成活细胞比例对胚胎种植率和临床妊娠率有显著影响(P<0.05)。结论 在冻融胚胎移植周期, 解冻后胚胎质量对妊娠的成功率起主要作用,准备适宜的子宫内膜厚度能提高临床妊娠率。     

Interhemispheric transfer of information and schizophrenia

Summary The interhemispheric transfer of stereognostic information was investigated in four groups of subjects: paranoid schizophrenics, non-paranoid schizophrenics, non-schizophrenic psychiatric patients, and normals. Previous work has raised the possibility that schizophrenia is characterised by a dysfunction of the corpus callosum, but there are several methodological problems associated with this research. A comparison of inter-manual and same-hand conditions on the experimental task revealed no evidence for impaired transfer of information in the schizophrenic groups. However, the performance of the non-paranoid schizophrenic group was markedly inferior to all other groups on the right hand/right hand no transfer condition, consistent with a left hemisphere dysfunction. Possible reasons for the failure to replicate previous findings are discussed.     

小胶质细胞和少突胶质细胞前体的培养和鉴定

目的 探讨新生大鼠脑组织小胶质细胞(MG)和少突胶质细胞(OL)前体的分离和体外培养方法 . 方法 取新生2 d SD大鼠脑组织,体外原代培养混合胶质细胞7 d后,分别采用"改良振荡伴差速贴壁"法和"营养缺失伴振荡"法纯化培养MG和OL前体,并分别应用免疫荧光染色异凝集素-B4(IB4)和OL前体标记物(O4)进行鉴定.结果 混合胶质细胞培养7 d后呈明显三层增长,其中MG位于上层,星型胶质细胞位于底层,两者之间为2型少突星型(O2A)祖细胞.纯化培养后OL前体胞体呈小圆形,有双极或三极突起,MG则以阿米巴形、圆形居多,或边缘呈毛刺状.免疫荧光染色IB4显示绿色荧光,MG纯度达到90%以上.免疫荧光染色O4显示棕黄色荧光,OL前体纯度达到95%以上. 结论 采用"改良振荡伴差速贴壁"法以及"营养缺失伴振荡"法分别成功获取大量纯度高、活力好的MG和OL前体.     

昆明小鼠3.5 d和4 d囊胚不同分离方法的比较*

背景：远交系的昆明小鼠作为中国自然科学研究主要实验动物,其胚胎干细胞建系的成功率一直很低。 目的：探讨昆明小鼠胚胎干细胞体外分离培养的最佳方法和最适合的采胚时间。 方法：采集孕3.5 d和4 d的囊胚分别以免疫外科法和全胚培养法在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上分离和克隆昆明小鼠胚胎干细胞集落。 结果与结论：免疫外科法和全胚法培养3.5 d囊胚的内细胞团贴壁率和原代克隆形成率差异均不显著(P > 0.05);全胚法培养4 d囊胚的内细胞团贴壁率显著高于免疫外科法(P < 0.05),但原代克隆形成率显著低于免疫外科法(P < 0.05);全胚法培养4 d囊胚的原代克隆形成率显著高于3.5 d囊胚(P < 0.05);免疫外科法分离4 d囊胚内细胞团的贴壁率和原代克隆形成率显著高于以同样方法分离培养的3.5 d囊胚(P < 0.05)。结果显示用免疫外科法分离4 d囊胚更适合于昆明小鼠胚胎干细胞的体外分离培养。     

Culture shock and social support

Background Culture shock is a form of psychological distress associated with migration. Social support has been identified as significantly related to the onset, course and outcome of many psychological disorders. Aim The aim of this study was to examine the relationship between culture shock and social support, in terms of size, diversity of the social network and quality of support received, in Greek students, in the UK. Method A total of 133 students completed 3 self-administered questionnaires: Culture Shock Questionnaire, Social Support Questionnaire and General Health Questionnaire (GHQ-12). Results Gender and the quality of support received were found to be strongly associated with culture shock. Furthermore, culture shock was significantly positively related to the level of current dysphoria and diminished with time. Conclusion Social support is an important factor associated with the degree of culture shock and should be taken into consideration in order to protect against or help to overcome this kind of psychological distress experienced by migrants.     

Bidirectional transfer of electrical and carbachol kindling

In two experiments rats were kindled by electrical stimulation or the infusion of carbachol, and subsequently rekindled by carbachol or electrical stimulation, respectively, in the amygdala. The rats that previously had been kindled using one agent kindled significantly faster and displayed significantly stronger seizures when rekindled using the other agent. These results are consistent with the idea that cholinoceptive neurons may normally participate in electrical kindling of the amygdala although such participation does not appear to be crucial.     

Resting EEG and behavioural correlates of interhemispheric transfer times

Correlations between the relative speeds of left-to-right and right-to-left interhemispheric transfer times and resting quantitative electroencephalography activity were examined in order to determine if variability in interhemispheric transfer was related to individual variability in resting neural firing patterns. Resting electroencephalograph frequencies for 32 participants were regressed for 4 frequency bands at 8 different locations calculated for asymmetrical activation through subtracting the left from right average spectral power of each. Participants also completed a series of behavioural tasks that are typically localized to the right hemisphere (RH). Results indicate that the frontal medial average spectral power of the beta band is correlated with the speed of transfer such that larger resting beta values in the right as compared to left location are associated with faster right-to-left interhemispheric transfer times and that larger resting beta values in the left as compared to right location are associated with faster left-to-right interhemispheric transfer times. Furthermore, enhanced performance on tasks typically localized to the RH is correlated with slower right-to-left interhemispheric transfer times, suggesting that the dominance of one hemisphere may come at a cost to interhemispheric communication.     

新生SD大鼠少突胶质细胞前体细胞的培养与分化

目的 体外培养高纯度的少突胶质前体细胞（oligodendrocyte progenitor cells,OPCs）以及分化成熟的少突胶质细胞（Oligodendrocytes,OLs）.方法新生1 -2 d Sprague-Dawley（SD）大鼠的大脑皮层胶质细胞混合培养9d后采用恒温摇床振荡分离与差异贴壁方法并结合条件培养基纯化培养细胞.光学显微镜观察细胞形态;纯化培养3 d后免疫荧光染色鉴定细胞类型.结果 获得高纯度的少突胶质前体细胞以及成熟的少突胶质细胞,少突胶质前体细胞免疫荧光NG2＋A2B5双标阳性,成熟少突胶质细胞免疫荧光MBP染色阳性.结论 采用恒温摇床振荡分离与差异贴壁法并结合条件培养基可以得到高纯度的少突胶质前体细胞以及成熟少突胶质细胞.     

小鼠骨髓源性树突状细胞培养与冻存

树突状细胞因其良好的抗原提呈功能及促T细胞增殖功能,成为肿瘤抗原的良好载体。获得大量的树突状细胞,对于肿瘤疫苗的研制具有重要作用。 目的：对小鼠骨髓树突状细胞进行诱导、培养、扩增及冻存,并对比冻存后复苏细胞与未冻存细胞的细胞特性,寻找一种能够大量获得树突状细胞及有效储存的方法。 方法：取小鼠骨髓细胞,在含重组小鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子(10 μg/L)和重组小鼠白细胞介素4(5 μg/L)的完全培养基中对其进行诱导、培养及扩增。培养第6天,对培养获得的树突状细胞在加有冷冻保护剂DMSO的完全培养液中冻存。复苏后,在培养基中加入脂多糖、对细胞诱导,获得大量的成熟树突状细胞,最终获得的树突状细胞与未进行冻存的细胞在细胞活力、形态学、细胞表型、混合淋巴细胞反应等方面对比。 结果与结论：复苏后,(82.2±4.73)%细胞存活,存活的细胞经脂多糖诱导后发育为成熟树突状细胞,在形态学、细胞表型及混合淋巴细胞反应等方面与未经冻存的树突状细胞差异无显著性意义。提示小鼠骨髓源性树突状细胞冻存复苏后,细胞生物学特性与未冻存的细胞无明显差别,用冻存的方法储存树突状细胞,能够避免在不同时期应用细胞时反复进行培养,可以获得大量的同质细胞。