间充质干细胞可能通过调控免疫细胞促进再生障碍性贫血小鼠骨髓的造血功能

目的:探讨间充质干细胞(MSCs)影响再生障碍性贫血小鼠造血功能的可能免疫机制。方法:30只小鼠分3组,分别为单纯照射组、再障模型组、MSCs治疗组,建立再生障碍性贫血小鼠模型。单纯照射组仅经5Gy[60Co]γ射线照射,再障模型组经5Gy[60Co]γ射线照射后输注DBA/2小鼠胸腺淋巴结细胞1×106cell/只,MSCs治疗组经5Gy[60Co]γ射线照射后输注DBA/2小鼠胸腺淋巴结细胞1×106cell/只,3d后输注人骨髓MSCs1×106cell/只。观察各组小鼠外周血象、骨髓及外周血CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+、NK细胞变化及与造血的关系。结果:经5Gy[60Co]γ射线照射后,单纯照射组、MSCs治疗组外周血象第7d开始下降,21d血象恢复正常。再障模型组外周血象第7d开始持续性下降,至21d血象仍未恢复。照射后7d,各组小鼠间外周血CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+无明显差异,但MSCs治疗组NK细胞低于单纯照射组和再障模型组(P0.05)。照射后14d3组CD4+细胞比例均明显下降,CD8+细胞则表现不同,再障模型组与MSCs治疗组CD8+细胞比例明显高于单纯照射组,至照射后21d,MSCs治疗组CD8+、NK细胞与单纯照射组相近、而模型组则明显高于单纯照射组和MSCs治疗组;MSCs治疗组小鼠股骨病理切片中脂肪细胞比例明显低于再障模型组,与单纯照射组结果一致。结论:MSCs输注可能通过调控免疫细胞影响再生障碍性贫血小鼠骨髓造血功能。     

635 nm波长激光降低干细胞电离辐射敏感性作用的研究

目的 研究低能激光照射作为提高干细胞抗电离辐射的作用效果.方法 取脐带间充质干细胞(UC-MSCs),分为对照组和实验组(单纯激光照射,单纯γ射线照射,激光照射后γ射线照射组);经635 nm(10 mW/cm2,12 J/cm2)每天2次的剂量照射处理3d,于第3天γ射线照射处理(剂量2Gy)后进行碱性单细胞凝胶电泳检测DNA损伤程度、测定γ射线照射前后细胞内活性和脂质氧化物丙二醛的水平,检测氧化应激相关酶(超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT))的活性.结果 低能激光联合射线组DNA损伤程度较单纯γ射线照射组明显降低,氧化应激酶活性有一定提高,活性氧水平得到抑制,2组丙二醛产量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 635 nm激光照射处理的UC-MSCs抗电离辐射水平有一定的提高,可降低移植细胞的辐射敏感性.     

干扰HTERT降低人乳腺癌MCF-7细胞对γ射线引起的DNA损伤反应

 目的 研究HTERT RNA干扰对人乳腺癌MCF-7细胞γ射线照射引起的DNA损伤反应的影响。方法 通过逆转录病毒为载体的HTERT-siRNA,抑制人乳腺癌MCF-7细胞中端粒酶催化亚单位HTERT表达,实时定量RT-PCR及Western blot确认HTERT表达水平、用137Cs放射源以3 Gy剂量γ射线照射细胞,于照射前以及照射后1、2、4、8和12h收集细胞,采用磷酸化53BP1 抗体进行免疫荧光染色,并于照射前、照射后1、4和12h收集细胞,Western blot检测53BP1蛋白磷酸化水平。结果 HTERT-siRNA处理的细胞HTERT表达水平比对照细胞降低3.20 (2-△△Ct)倍, HTERT蛋白水平降低2.56倍。HTERT-siRNA处理的细胞对γ射线引起的DNA损伤反应显著降低。结论 RNA干扰HTERT表达水平,可以降低人乳腺癌MCF-7细胞对γ射线照射引起的DNA损伤反应。     

低剂量γ射线照射提高外周血单个核细胞IL-12分泌并降低IL-10的分泌

目的探讨低剂量γ射线照射对外周血单个核细胞(PBMC)分泌IL-10及IL-12的影响。方法分离人PBMC,经17 Gy/minγ射线照射后进行体外培养。采用吖啶橙染色鉴定细胞存活情况,ELISA检测培养0、20、40、60、80 h的PBMC上清中IL-10和IL-12的水平。结果与未照射PBMC相比,低剂量γ射线照射的PBMC在体外培养24 h后,吖啶橙染色显示照射后的PBMC存活细胞略有减少;ELISA检测结果表明培养上清中IL-10含量显著降低,而IL-12含量明显增加。结论低剂量γ射线照射PBMC可引起IL-12水平升高、IL-10水平降低。     

粗江蓠多糖对辐射损伤小鼠NK细胞的影响

目的：研究粗江蓠多糖（Gracilaria Gigas Harvey Polysaccharides,GHPS）对辐射损伤小鼠NK细胞的影响。方法：采用60Coγ射线5Gy全身照射小鼠制造辐射损伤模型,通过乳酸脱氢酶释放法检测不同剂量（10mg/kg,20mg/kg,40mg/kg）的GHPS对辐射损伤小鼠NK细胞杀伤靶细胞能力的影响。结果：辐射对照组小鼠接受60Coγ射线5Gy照射后,NK细胞的活性显著低于正常对照组（P〈0.01）。经腹腔注射（10、20、40）mg/kg GHPS,再接受γ射线5Gy照射后,小鼠NK细胞活性明显高于辐射对照组（P〈0.01）,并有剂量依赖性。结论：5Gyγ射线可以抑制小鼠NK细胞杀伤靶细胞的活性,而GHPS对辐射损伤小鼠的NK细胞有保护作用。     

γ射线辐照对血液中肝癌肿瘤细胞的影响

目的:通过体外模拟肝癌患者血液,观察经不同剂量γ射线辐照后血液中肿瘤细胞的数量是否发生改变。方法:用吸收剂量分别为0Gy～40Gy的γ射线对混有肿瘤细胞的悬浮红细胞进行照射,计数存活肿瘤细胞。结果:照射后细胞存活数明显减少,不同照射剂量对细胞数量影响存在显著差异。结论:γ射线辐照能有效去除血液中的肿瘤细胞。     

大白鼠淋巴细胞与生精细胞微核率关系的研究

不少研究已经证实,淋巴细胞是对辐射敏感的细胞,在一定剂量范围内,淋巴细胞微核率与照射剂量之间呈直线正比关系。也有学者研究报道,人和动物未成熟的生精细胞在射线诱变下,也会出现较高的微核率,并指出,对人类未成熟生精细胞微核率的测定,在男性学研究中将有十分重要的意义。为了进一步探讨生精细胞微核率测定在临床上应用的前景,本实验用不同剂量的钴60γ射线照射雄性大     

低剂量辐射刺激小鼠抗体形成机制的研究

本研究检测了单次Ｘ射线和连续γ射线全身照射后小鼠脾脏抗体形成反应，胸腺细胞氚标胸腺嘧啶（３Ｈ－ＴｄＲ）自发掺入率，脾细胞白介素－２（ＩＬ－２）形成和脾脏抑制性Ｔ细胞（Ｔｓ）功能的变化。结果表明，单次Ｘ射线照射７５ｍＧｙ后，免疫小鼠抗体形成反应增强，胸腺细胞自发增殖能力增高，脾细胞ＩＬ－２形成增多，而脾脏和胸腺中抑制性Ｔ细胞功能未见改变。连续γ射线照射累积６５ｍＧｙ所得结果与单次Ｘ射线照射相似。说明     

丝裂霉素C对辐射损伤小鼠胸腺细胞的影响

目的：在选择辐射损伤小鼠胸腺细胞适宜剂量的基础上，观察丝裂霉素C（MMC）对辐射损伤小鼠胸腺细胞自发掺入的影响。 方法： 流式细胞仪检测小鼠胸腺细胞周期，选择辐射剂量；用［³H］-TdR掺入法研究MMC对辐射损伤小鼠胸腺细胞的作用。 结果： 选择用γ-射线1.5 Gy全身照射小鼠，建立辐射损伤模型。 0.04 μg/kg MMC对辐射损伤有拮抗作用，表现为0.04 μg/kg MMC+1.5 Gy照射组胸腺细胞自发掺入率明显高于生理盐水+1.5 Gy照射组。 结论： 一定剂量MMC可拮抗辐射损伤小鼠胸腺细胞。     

单向MLC中刺激细胞的照射剂量

本文讨论了混合淋巴培养中刺激细胞的＾６０Ｃｏγ射线照射剂量，６个人的淋巴细胞分成６份，分别用０、６、１０、１５、２０、２５Ｇｙ的＾６０Ｃｏγ射线照射，然后进行混合淋巴细胞培养。结果显示在混合淋巴细胞培养中，刺激细胞的＾６０Ｃｏγ射线照射量以２０Ｇｙ左右为宜。     

60Coγ射线全身照射后大鼠脑NOS表达变化及其与神经再生的关系

目的 研究大鼠经^60Coγ全身照射致中枢神经系统损伤后，神经再生过程中NOS表达变化规律，初步探讨NOS表达变化对神经损伤后再生的影响及意义。方法 旋转式^60Coγ射线一次性全身低剂量照射，NDP组化染色。结果 大鼠经8Gy^60Coγ射线全身照射1周后，大脑皮质、基底核、丘脑和下丘脑的大部分核团NOS呈中等强度阳性表达，照射后第4周，以上脑区NOS水平明显升高，照射后第7周NOS的阳性表达逐渐减弱，但仍高于正常水平。正常对照组大鼠除海马锥体细胞层有较强的阳性标记外，其它脑区仅有弥散的NOS弱阳性标记。结论 ^60Coγ射线全身照射致大鼠脑损伤后NOS表达增强，提示NOS可能在对应的损伤神经元结构再生和突触重建过程中发挥重要作用。     

低剂量γ射线辐照对人红细胞免疫功能和血清抗氧化酶活性的影响

目的：观察低剂量γ射线对人红细胞免疫功能和血清抗氧化酶活性的影响。方法：10份人全血，采用γ射线照射，照射剂量为1Gy，并分别于照射前及照射后1h，2h检测红细胞C3b受体花环（RBC—C30bRR）、红细胞免疫复合花环（RBC—ICR）及肿瘤红细胞花环率（RTRR）的变化情况及血清中超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px），谷胱甘肽还原酶（GR）及过氧化氢酶（CAT）的活性。结果：人红细胞经γ射线照射后，RBC—C3R及RTRR较照射前明显升高（P〈0．05），而RBC—ICR无明显变化（P〉0．05）。经γ射线照射1h后，SOD，GSH—Px，GR及CAT活性与照射前比较明显升高（P〈0.1），照射后2h，除SOD外，所有指标与照射后1h比较进一步升高（P〈0．05）。结论：人红细胞在体外经低剂量γ射线照射后，可明显增强红细胞的免疫功能和明显提高血清抗氧化酶活性，即可诱导红细胞免疫和抗氧化酶的兴奋效应。     

rhIL-1β对γ射线急性照射小鼠淋巴细胞增殖的影响

<正>一定剂量范围的γ射线可使机体在一定时间内免疫功能低下,并出现感染等一系列的并发症。白细胞介素-1（IL-1）主要是由单核巨噬细胞产生,研究发现它对多种免疫活性细胞有重要调节作用,并诱导这些细胞产生对肿瘤细胞的细胞毒活性。本研究采用MTT比色法,观察了重组人IL-1β（rhIL-1β）对γ射线照射小鼠淋巴细胞增殖的影响。     

人参皂苷Rg1在造血干/祖细胞连续移植中对延缓细胞衰老的作用与去乙酰化酶6/核因子-κB信号轴的关系

目的探讨人参皂苷Rg1在造血干/祖细胞(HSC/HPC)连续移植中对抗细胞衰老的作用与去乙酰化酶6/核因子-κB(SIRT6/NF-κB)信号轴的关系。方法免疫磁性分选法分离纯化雄性供体小鼠干细胞抗原阳性(Sca-1+)HSC/HPC,连续移植3代构建HSC/HPC衰老体内模型。60Coγ射线致死剂量辐射雌性受体鼠后分4组,照射对照组;衰老模型组;Rg1治疗衰老组;Rg1预防衰老组。造血祖细胞混合集落(CFU-Mix)培养,细胞周期分析和衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色分析Rg1体内调控Sca-1+HSC/HPC衰老的作用。实时定量PCR及Western blotting检测衰老调控分子SIRT6、NF-κB mRNA及蛋白的表达。结果连续移植后受体鼠Sca-1+HSC/HPC出现细胞衰老特征,随移植代数的增加,Sca-1+HSC/HPC G0/G1期细胞比例及SA-β-Gal染色阳性率增高,CFU-Mix数量下降。与同代衰老模型组相比,Rg1治疗衰老组及Rg1预防衰老组受体鼠Sca-1+HSC/HPC G0/G1期细胞比例、SA-β-Gal染色阳性率下降,CFU-Mix数量升高;SIRT6 mRNA及蛋白表达上调,NF-κB mRNA及蛋白表达下调;Rg1预防衰老组各指标变化均较Rg1治疗衰老组明显。结论 Rg1可能通过调控SIRT6/NF-κB信号轴发挥其对抗连续移植过程中Sca-1+HSC/HPC衰老的作用。     

IL-2对辐射损伤后小肠上皮细胞生长影响的实验研究

目的: 观察电离辐射对体外培养的IEC -6细胞株生长的影响及IL- 2对其损伤后增殖和恢复的作用, 并进一步探讨肠黏膜免疫与肠上皮辐射损伤及修复的关系。方法: 用 4、8、12Gy的γ射线照射IEC- 6细胞株, 并于照后 3、6、9、12h及 1、2、3d, 用MTT比色法、光镜、电镜、DNA凝胶电泳和流式细胞术等, 检测受照射后IEC- 6细胞的增殖活力、形态和死亡方式的改变; 用不同浓度IL 2 ( 25×103、5×104、1×105U/L)处理 8Gyγ射线照射的IEC 6细胞, 并于照射后 3、6、9、12、24h, 采用MTT比色法检测其增殖活力的变化。结果: 在 0~12Gy的范围内, IEC 6细胞的增殖活力随γ射线照射剂量的增加而降低。8. 0γ射线照后 24h, 凋亡的IEC- 6细胞明显增多, DNA凝胶电泳显示有梯状带形成。IL- 2可促进照射后的IEC- 6细胞增殖且呈一定的剂量 效应关系, 尤以1×105U/L组的作用更明显。结论: 在一定剂量范围内, γ射线照射可降低IEC 6细胞增殖活力, 且存在剂量 效应关系;可导致IEC 6细胞发生凋亡。IL- 2可促进受照射的IEC- 6细胞增殖, 增强其抗辐射的作用。     

低剂量γ射线辐照对血清一氧化氮及一氧化氮合酶水平的影响

目的：观察低剂量γ射线照射人离体外周血对血清中一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）水平的影响。方法：采集10份健康献血员全血，肝素抗凝，然后采用γ射线照射，照射剂量率为17Gy／min，总吸收剂量为1Gy，分别于照射前及照射后1h，2h采用分光光度法检测血清中NO含量和NOS活性。结果：经γ射线照射1h后，血清中NO及NOS水平与照射前比较明显升高（P〈0.01）；照射后2h，血清中NOS水平与照射后1h比较无统计学差异（P〉0、05），但是还明显高于照射前的水平（P〈0．01）；在照射后2h，血清中NO含量与照射后1h比较明显降低（P〈0.01），但仍明显高于照射前水平（P〈0．01）。结论：采用剂量为1Gy的γ射线照射外周血，可引起血清中NO水平及NOS活性的显著升高．从而为低剂量辐照自体血回输对肿瘤的辅助治疗提供了理论支持。     

Slug对照射鼠肠上皮细胞的保护作用及机制

 目的：研究Slug过表达对照射鼠肠上皮细胞的保护作用及机制 方法：以体外培养的小肠隐窝上皮细胞IEC6和转染了Slug cDNA的IEC6为研究对象,对细胞进行6Gy剂量γ射线照射,在照射48h后观察细胞凋亡指数,免疫组化和Western blot法检测PUMA蛋白表达。结果：6Gy射线照射IEC6细胞48h后的细胞凋亡指数为15.6+1.54,明显高于照射联合pcDNA3-Slug cDNA转染组的5.1+1.7（P<0.01）和单独pcDNA3-Slug cDNA转染组的2.21+0.36（P<0.01）。Weatern blot法检测发现,6Gy射线照射IEC6细胞48h后的PUMA相对表达为0.79+0.12,明显高于照射联合pcDNA3-Slug cDNA转染组的0.16+0.01（P<0.01）,免疫组化和Weatern blot法检测结果一致。结论：上调Slug抑制射线诱导的细胞PUMA表达上调,抑制IEC6细胞凋亡。     

20 Gy γ射线不同分割模式头部照射对小鼠学习记忆的影响

目的:探讨20 Gyγ射线不同分割模式头部照射对小鼠学习记忆的影响.方法:48只成年雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(control)、20 Gy单次照射组(20 Gy)、大分割照射组(5 Gy×4 d)和常规分割照射组(2 Gy×10 d),各照射组小鼠均头部接受γ射线照射,总剂量为20 Gy.照后4周采用Mor...     

去乙酰化酶1在人参皂苷Rg1体内正向调控造血干/祖细胞衰老中的作用

目的:探讨去乙酰化酶1(SIRT1)在人参皂苷Rg1体内正向调控造血干/祖细胞(HSC/HPC)衰老中的作用。方法:免疫磁性分选法分离纯化雄性供体小鼠Sca-1~+HSC/HPC连续移植3代构建HSC/HPC衰老体内模型。~(60)Coγ射线致死剂量辐射雌性受体鼠后分4组,照射对照组、衰老模型组、Rg1治疗衰老组和Rg1预防衰老组。衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色、造血祖细胞混合集落(CFU-Mix)培养和细胞周期分析检测Rg1体内调控Sca-1~+HSC/HPC衰老的作用。荧光定量PCR及免疫印迹检测衰老调控分子SIRT1、核因子-κB(NF-κB)mRNA及蛋白的表达。结果:连续移植后受体鼠Sca-1~+HSC/HPC出现细胞衰老特征,随移植代数的增加,Sca-1~+HSC/HPC G_0/G_1期细胞比例及SA-β-Gal染色阳性率增高,CFU-Mix数量下降。与同代衰老模型组相比,Rg1治疗衰老组及Rg1预防衰老组受体鼠Sca-1~+HSC/HPC G_0/G_1期细胞比例、SA-β-Gal染色阳性率下降,CFU-Mix数量升高;SIRT6 mRNA及蛋白表达上调,NF-κB mRNA及蛋白表达下调;Rg1预防衰老组各指标变化均较Rg1治疗衰老组明显。结论:Rg1可能通过调控SIRT1/NF-κB信号轴发挥其在连续移植过程中抗Sca-1~+HSC/HPC衰老的作用。     

γ射线照射凋亡淋巴细胞核的图像特征提取

γ射线照射凋亡淋巴细胞核的图像特征提取董武朴英杰＊乔东访＊（第一军医大学生物医学工程系图像教研室中心实验室电镜室）本文通过对γ射线照射凋亡淋巴细胞及正常淋巴细胞超微结构的形态特征的分析，提出了以细胞核灰度分布作为两者在核特征差异上的一个指标。从而使得...