一氧化氮合酶抑制对戊四氮诱导大鼠点燃模型及该酶阳性神经元的影响

目的：探讨一氧化氮（ＮＯ）在癫痫发病中的作用。方法：ｉｐ４０ｍｇ．ｋｇ＾－１戊四氮３０ｍｉｎ前注射２５ｍｇ．ｋｇ＾－１的Ｎ＾Ｇ－硝基－左旋－精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）,连续２２ｄ,观察两组的行为改变及点燃率,同时对３组动物海马,大脑皮质一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性神经元的变化输入图像扫描仪,对其胞体平均灰度值进行比较。结果：Ｌ－ＮＮＡ可明显抑制戊四氮点燃模型;戊四氮点燃大鼠模型海马,大脑皮质神经元的ＮＯＳ活性显著增高。结论：ＮＯ参与了戊四氮点燃模型的形成。     

帕金森病大鼠模型神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的实验研究

目的 观察研究帕金森病(PD)大鼠模型纹状体神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元，探讨一氧化氮(NO)在PD发病机制中所起作用。方法 应用立体定向技术建立6-OHDA毁损的大鼠PD模型，通过多巴胺受体激动剂阿扑吗啡(APO)测试大鼠旋转行为，免疫组化方法观察黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元和纹状体nNOS阳性神经元的变化。结果 大鼠6-OHDA损毁侧黑质TH阳性神经元数目较对侧明显减少，双侧纹状体nNOS阳性神经元数目无显著差异。结论 6-OHDA对TH阳性神经元有损伤作用，而NOS阳性神经元对其具有抵抗作用。NO可能参与了PD发病机制。     

尼莫地平对脑缺血早期神经元型一氧化氮合酶的影响

目的观察局灶性脑缺血大鼠早期缺血部位神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)的变化,以及钙拮抗剂尼莫地平对其的影响。方法以线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型为基础,选取雄性SD大鼠共75只,随机分成假手术组(n=25)、模型对照组(n=25)和尼莫地平处理组(n=25)。以NDAPH-d组织化学方法观测各组大鼠脑缺血后30min、2h和6h纹状体中nNOS阳性细胞的变化;利用生物化学法和Hoechst凋亡染色分别检测各组大鼠脑缺血30min纹状体nNOS活性和6h半暗区细胞凋亡。结果脑缺血30min,与假手术组相比,模型对照组大鼠缺血侧纹状体中nNOS活性和nNOS阳性细胞数均升高(P<0.01),而尼莫地平组无明显变化(P>0.05);随脑缺血时间延长,模型对照组和尼莫地平组nNOS阳性细胞数都下降(P<0.05);脑缺血6h,尼莫地平组半暗区的凋亡细胞少于模型对照组(P<0.01)。结论钙拮抗剂尼莫地平可抑制脑缺血早期的nNOS上升,并减轻随后的脑组织损伤。     

依达拉奉对慢性脑缺血大鼠一氧化氮及一氧化氮合酶阳性神经元数量的影响

目的观察依达拉奉对脑缺血大鼠脑组织NO含量及NOS阳性神经元数量的影响,为临床上防治慢性脑缺血引发的疾病提供指导。方法 54只Wistar大鼠,分为NO含量组和NOS阳性神经元组,每组再分为模型组、治疗组、假手术组,利用结扎大鼠两侧颈总动脉制作大鼠慢性脑缺血模型,硝酸还原酶法测NO含量,NADPH-d组织化学方法染色NOS阳性神经元,光镜下观察。结果治疗组各时间点NO含量和NOS阳性神经元数量较模型组减少。结论依达拉奉对慢性脑缺血大鼠脑组织具有保护作用。     

慢性间断性缺氧诱导一氧化氮合酶表达的研究

目的:建立大鼠缺氧模型,检测神经元型一氧化氮合酶(nNOS)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达情况。方法:1.建立缺氧模型:将SD大鼠置于常压低氧舱中,充入氮气调节氧浓度至所需氧浓度。2.动物分组:(1)急性缺氧组:在低氧舱中缺氧1.5小时。(2)慢性间断性缺氧组:每日在低氧舱中6小时。每周缺氧6天,共缺氧28天。3.采用免疫组化法检测nNOS和iNOS的表达。4.统计学分析检验。结果:急性缺氧后,iNOS、nNOS阳性神经元增加;慢性缺氧后,iNOS、nNOS阳性神经元仍持续增多,慢性缺氧时增加iNOS-IR细胞远远多于nNOS-IR细胞。结论:我们的研究表明缺氧可引起iNOS、nNOS阳性神经元增加,NOS亚型表达时间的不同说明其脑损伤具有阶段性。     

神经元型一氧化氮合酶在血管性痴呆大鼠海马中的表达

目的 探讨神经元型一氧化氮合酶(nNOS)在血管性痴呆(VD)大鼠海马中的表达。方法 将60只大鼠随机分为：对照组、VD12h组、VD1d组、VD3d组、VD7d组。采用反复夹闭双侧颈总动脉方法建立VD大鼠模型，用HE染色观察各组大鼠海马CA1区神经元的数目；应用免疫组化染色和Western印迹方法检测nNOS在大鼠海马中的表达。结果 VD12h组、VD1d组、VD3d组、VD7d组大鼠海马CA1区神经元数均明显下降。nNOS在对照组大鼠海马CA1区中弱表达．在VD12h组表达增强．VD1d组进一步增强，VD3d和7d组表达逐渐减弱。结论 nNOS可能参与缺血早期海马神经元的损害，是VD的发病机制之一。     

脑室内注射乙酰胆碱受体抗体IgG对大鼠神经元凋亡及一氧化氮合酶表达的影响

目的研究乙酰胆碱受体抗体(AchRab)对大鼠脑内神经元的损害及一氧化氮合酶(NOS)在损害中所起的作用，探讨重症肌无力(MG)中枢神经系统损害的机制。方法将AchRab IgG或健康人的IgG注入大鼠侧脑室。HE染色、TUNEL法检测细胞凋亡；免疫组化方法观察大鼠皮质、海马及杏仁核神经元型一氧化氮合酶(nNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达变化。结果2周后实验组皮质、海马及杏仁核凋亡细胞明显增多，对照组仅见少量凋亡。实验组皮质、海马及杏仁核nNOS神经元数目明显减少。实验组及对照组脑内细胞均来见iNOS表达。结论AchRab脑内注射可诱导神经元凋亡；损伤皮质。海马及杏仁核nNOS神经元；但未能诱导脑内细胞iNOS表达。神经元凋亡损害参与了AchRab对中枢神经损害的机制；nNOS神经元的减少，可能与MG认知功能障碍有密切关系；而神经元的损伤可能与NO的毒性作用无关。     

一氧化氮合酶及其抑制剂与脑缺血

一氧化氮合酶(NOS)在脑缺血中具有双重作用,nNOS介导缺血早期神经元损伤,iNOS介导缺血晚期神经元损伤,eNOS则介导神经保护作用。对NOS抑制剂,尤其是选择性nNOS和iNOS抑制剂的研究,无疑将为缺血性脑损伤的治疗提供新途径。     

一氧化氮和一氧化氮合酶在大鼠局灶性脑缺血中的表达特点

目的建立脑缺血SD大鼠模型,探讨一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)在脑缺血模型中的表达特点。方法应用线栓法制作大脑中动脉阻塞(MCAO)局灶性脑缺血模型,根据缺血不同时间分为8组,设立假手术组和正常对照组,每组各有6只大鼠。应用硝酸还原酶法测定脑组织NO的含量,流式细胞术(FCM)定量检测硝基酪氨酸(NT)表达,化学比色法测定脑组织NOS的活性,免疫组织化学方法定位检测eNOS、nNOS和iNOS表达位置,逆转录反应系统(RT-PCR)半定量分析eNOS、nNOS和iNOS的 mRNA在脑缺血区域的表达。结果神经功能缺失评分发现缺血时间越长,神经功能缺失越明显;脑组织中NO含量与缺血时间正相关;缺血1h后NT阳性细胞百分比开始明显升高(9.50%);缺血0.5h时NOS的活性开始升高,缺血3d达到高峰[0.94nmol/(g.min)];免疫组织化学提示eNOS在神经细胞和血管内皮细胞胞浆均有表达,nNOS和iNOS抗体主要在神经细胞胞浆中表达;RT-PCR半定量分析在缺血早期(0.5h~6h),随着缺血时间延长,eNOS和nNOS表达增加,iNOS未见表达或低表达;缺血中晚期(6h~5d),iNOS高表达,并与缺血时间呈正相关,eNOS和nNOS表达明显减少。结论脑缺血时间延长,NOS的活性升高,NO在体内特异性代谢产物NT量增加,神经功能缺失越明显;NOS在缺血早期以eNOS和nNOS为主,在缺血晚期以iNOS为主。     

人工合成E-选择素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨人工合成E-选择素对大鼠局灶性脑缺血/再灌注（I/R）损伤后脑组织一氧化氮合酶（NOS）及血清一氧化氮（NO）含量的影响.方法 采用改良的Zea Longa法建立脑I/R损伤模型.66只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和人工合成E-选择素治疗组（治疗组）.治疗组大鼠采用股静脉注射人工合成E-选择素10 mg·kg-1.应用硝酸盐还原法测定血清中NO含量和免疫组化法检测缺血区脑组织神经型一氧化氮合酶（nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）阳性细胞数.结果 ①NO：以对照组NO含量为正常生理数据,模型组脑缺血2h/再灌注2～24h NO含量呈上升趋势,24 h时达高峰,72 h有所降低但仍高于对照组,各时间点与对照组比较明显增高（P＜0.01）;治疗组NO变化趋势同模型组,NO含量较模型组减少（P＜0.05）,较对照组增多（P＜0.01）.②NOS：以对照组nNOS、iNOS阳性细胞数为正常生理数据,模型组nNOS阳性细胞在脑缺血2h/再灌注2h后开始表达,12h达高峰,至24h开始降低,各时间点与对照组比较明显增高（P＜0.01）;模型组iNOS阳性细胞在脑缺血2h/再灌注2h开始出现,并持续增多,随时间延长呈上升趋势,24h达高峰,至72 h出现下降,各时间点与对照组比较明显增多（P＜0.01）;治疗组各时间点nNOS、iNOS阳性细胞变化趋势同模型组,但较模型组减少（P＜0.05）,较对照组增多（P＜0.01）.结论 大鼠脑I/R损伤后脑组织NOS活性表达增多,NO浓度升高导致脑组织损伤;人工合成E-选择素通过降低NOS表达,减少NO释放、减轻炎症反应和脑I/R损伤,起脑保护作用.     

诱导型一氧化氮合酶在脑胶质瘤中的表达及意义

目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(ｉＮＯＳ)在脑胶质瘤的中表达及意义。方法:检测４Ｏ例脑胶质瘤中ｉＮＯＳ蛋白,分析ｉＮＯＳ与胶质瘤恶性程度的相关关系。结果:①对照组无ｉＮＯＳ表达,胶质瘤组ｉＮＯＳ阳性表达率为６２．５%;②低恶性与高恶性度肿瘤ｉＮＯＳ表达不同;③胶质瘤恶性程度与ｉＮＯＳ染色深浅及阳性细胞数百分比之间呈正相关关系。结论:ｉＮＯＳ产生的ＮＯ参与了胶质瘤从低恶性度向高恶性转化的发展过程,对实体脑肿瘤的生长及侵袭有重要作用,是高级别肿瘤区别于低级别肿瘤的一个重要的病理学特点。     

电刺激三叉神经节对蝶腭神经节内一氧化碳合酶和血管活性肠肽阳性神经元的影响

目的：观察实验性偏头痛大鼠副交感神经蝶腭神经节内一氧化氮合酶（NOS）和血管活性肠肽（VIP）阳性神经元的变化。方法：12只雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组（均n=6）。实验组为电刺激三叉神经节建立的偏头痛大鼠模型。对照组仅作手术而不刺激三叉神经节。用组织化学的方法观察蝶腭神经节内NOS阳性神经元的变化,用免疫荧光法观察蝶腭神经节内V1P阳性神经元的变化。结果：实验组和对照组大鼠的蝶腭神经节内均有NOS和VIP阳性神经元,但实验组NOS和VIP阳性神经元均较对照组显著增加（P〈0．01）。结论：电刺激三叉神经节可以通过三叉-副交感神经反射系统,显著升高蝶腭神经节中NOS和VIP神经元的数目。偏头痛发病过程中脑膜及颅内大血管的剧烈扩张很可能与蝶腭神经节中NOS和VIP神经元增加有关。     

一氧化氮合酶在脑缺血再灌注中的双重作用

目的 探讨短暂脑缺血再灌注后大鼠脑内3型一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)的表达及作用，为脑缺血治疗提供理论依据。方法 采用免疫组织化学方法，用3型NOS的多克隆抗体检测大鼠局灶性脑缺血2h再灌注15min及22h NOS在脑内的表达情况。结果 大鼠脑缺血2h再灌注15min，在脑缺血边缘区的血管壁及神经细胞出现内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)上调表达；脑缺血2h再灌注22h，在脑梗死区内表达神经元型一氧化氮合酶(neuronal mitric oxide synthase，nNOS)的神经细胞减少，并出现表达诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)的胶质细胞，同时梗死边缘区血管及神经细胞出现eNOS及iNOS的上调表达。结论 在短暂脑缺血再灌注早期，缺血区周围可能有eNOS相关的保护机制；亚急性期eNOS及iNOS的保护及损伤机制并存；因此，在短暂脑缺血早期恢复灌注后予选择性iNOS抑制剂及促进eNOS活性有可能减少迟发性神经损伤。     

Relationship of Neuronal Nitric Oxide Synthase Immunoreactivity to GnRH Neurons in the Ovariectomized and Intact Female Rat

The present study has used a rat neuronal nitric oxide synthase (nNOS) antibody to examine the relationship of nNOS immunoreactivity to GnRH neurons in the ovariectomized and intact diestrous and proestrous rat. A striking band of nNOS-immunoreactive cells was identified in the rostral preoptic area which began in the median preoptic nucleus and organum vasculosum of the lamina terminalis and formed an inverted Y-type distribution above the rostral third ventricle at the level of the anteroventral periventricular nucleus. Another band of nNOS-immunoreactivity was found extending through the internal zone of the median eminence into the arcuate nucleus. Although nNOS immunoreactivity was not detected within GnRH neuronal cell bodies in any of the experimental groups, GnRH perikarya located in the rostral preoptic area, but not elsewhere, were found to be surrounded by nNOS-containing cells. In the median eminence, nNOS and GnRH immunoreactivities were distributed separately in the internal and external zones, respectively.
These results provide evidence that, regardless of their pattern of activity, GnRH neurons in the female rat do not express nNOS. Instead, a close anatomical relationship between nNOS-immunoreactive cells and GnRH perikarya and fibers has been identified within specific sub-regions of the rostral preoptic area and in the median eminence. Such findings are compatible with a role for NO at both sites in regulating the release of GnRH throughout the estrous cycle.     

大剂量NOS抑制剂对DND病理改变影响的研究

目的 研究大剂量一氧化氮合酶(NOS)抑制剂对迟发性神经元坏死的影响。方法 利用Wistar大鼠制成4VO前陷缺血再灌模型,并在术前、术后分别给予N-硝基-L-精氨酸(NNLA)进行干预性实验,分别于缺血即刻、再灌后1、3、7d取脑,通过光、电镜观察其病理改变。结果 在光、电镜下观察,无论术前、术后给予NNLA干预后,其海马区神经细胞的缺血性改变均明显比手术对照组出现早、程度重。结论 NO的基础释放量一旦形成受阻或分解过多,将导致神经细胞的损伤或增加神经细胞对缺血缺氧的敏感性     

Anticonvulsant Activity of New and Potent Inhibitors of Nitric Oxide Synthase

The effects of new and potent NOS inhibitors, S-methyl-

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-thiocitrulline (S-Me-TC), 3-bromo 7-nitro indazole (3-Br-7-NI), and 1-(2-trifluoromethylphenyl)imidazole (TRIM), were examined on the pilocarpine-induced seizures in mice. 3-Br-7-NI and TRIM decreased the frequency of status epilepticus and mortality, while TRIM, in addition, significantly reduced the incidence of seizures. The latencies to onsets of seizures, status epilepticus, and mortality were significantly prolonged by all three NOS inhibitors, while duration of seizures was reduced by 3-Br-7-NI and TRIM. These data suggest an excitatory effect of NO in the neuronal structure involved in the pilocarpine-induced seizures.     

NADPH-Diaphorase (Nitric Oxide Synthase) Staining in the Rat Supraoptic Nucleus is Activity-Dependent: Possible Functional Implications

NADPH-diaphorase has recently been shown to be the enzyme nitric oxide (NO) synthase, and to be present in the rat supraoptic nucleus (SON) and posterior pituitary. Investigations were carried out to assess whether there is any difference in the extent to which this enzyme is present, as assessed by light-microscopic histochemistry, in SON of normal and dehydrated male Wistar rats. In normal rats there was clear cellular heterogeneity; cells located in the ventral and caudal areas of the SON stained only weakly or not at all, while cells in the rostro-dorsal areas of the nucleus stained strongly. Dehydration of rats for 12 h caused a large and rapid increase in staining intensity of the nucleus, particularly of cells in its ventral and caudal parts. On the basis of its known biological actions, and the kinetics of its induction, it is suggested that NO would be a strong candidate as a modulator of SON and posterior pituitary morphology and function, with the potential to rapidly modulate blood flow, neuronal activity, and possibly astrocyte morphology, in response to changes in neuronal activity.